三种大枣低聚糖的分离纯化

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离子交换层析法分离纯化低聚糖研究

离子交换层析法分离纯化低聚糖研究

中图分 类号 : S 0 . T 2 23
文献 标识 码 : A
文章 编号 : 0 8 9 7 2 l ) —0 4 — 0 1 0 — 5 8( 0 1 1 1 08 3
非均相交换反应 。 1 . 2离子 交换层析 法主要分 离介质 离子 交换树脂 由惰性骨 架( 母体 ) 固定 基团和 活 、 动 离子 ( 称交换 离子 或反 离子 ) 部分组 成 。其 中 又 三 骨架 常用原料 为苯 乙烯或丙 烯酸 ( , 过聚合反 应 酯)通 而 生成 , 具有 一定 三维空 问立体 网络 结构。在骨架 上 引入不 同类型 酸性 或碱 性 固定基 团就可 制得 相应 阳 离子 或阴离子树脂 , 用于低 聚糖分 离纯 化树脂主要 为 带 有磺酸 固定 基团 阳离子 树脂 。根据骨 架结构不 同, 离子交换树脂又可分为凝胶型和大孔型两大类 。前者 在 干燥状态下 内部不存在 孔隙结构 , 吸水润胀 时大分 子链 节 间形 成微 孔, 微孔 大小 受交联 度影响;而大 孔 型树 脂在合成过程 中加入致 孔剂, 内部存 在大量永 久 性微 孔, 且微 孑 数量和体积 均大于凝 胶型树脂 。凝 胶 L 型树 脂 因其 孔径较 小 , 于分子量较小 且分子量差 别 适 不 大低 聚糖间分离 ; 而大孔型树脂更适 于分 离聚合度
Ab t a t Ba e n e s p r t n,f s n fe t e o x h n e c r mao r p y i a t c n q e sr c  ̄ s d o a y o e ai o a ta d e f c i ,i n e c a g h o t g a h s e h i u v c mmo l mp o e e a ai n a d p rf a i n I a ea p i d i eio a i n 0 l 0 a c a i e o n y e l y d i s p r t n u i c t . t n b p l t lt f i s c h r s n o i o c e nh s o o g d s n h t e y e z m e n h e o e y o u c i n l o i o a c a i e r m t e i u d o y t ei d b n y z s a d t e r c v r f f n to a lg s c h rd s f o mo h r l i f q c y t l n u a s I h sp p r t e b sc s p r to c a im fi n e c a g h o t g a h r sa l e s g r . n t i a e , h a i e a a i n me h n s o x h n e c r ma o r p y, i o a d p i r a t r h t fe t h u i c t n r s l wa u ma i e n rma f co st a f c ep rf ai e u t ss m y a t i o r d,a l a t s r s a c i t e z swe l s l e t e e r h Ol h a s p r t n p o e s M o e v r mo e r s a c fo t s b u n t e ma u a t r f i n e c a g e aai r c s. o r o e , r e e r h e f rsmu t e p to n fc u e o x h n e h o r sn s e il e if r n l o a c a i e u i c t n e i p c ai d i d fe e t i s c h r s r a i . z n o g d p f i o Ke r s c l mn c r mao r p y;i ne c a g ; l o a c a i e y wo d : ou h o t g a h o x h n e o i s c h rd s g

食品中低聚糖的提取与分离工艺研究

食品中低聚糖的提取与分离工艺研究

食品中低聚糖的提取与分离工艺研究随着人们对健康饮食的关注度不断提升,低聚糖作为一种具有多种益处的食品成分,受到了广泛的关注和研究。

低聚糖不仅可以作为功能性食品添加剂,还可以在医药领域发挥重要的作用。

然而,食品中低聚糖的提取和分离工艺一直是一个具有挑战性的问题,在此我将介绍一些目前常用的提取与分离工艺。

首先,酸解法是一种常见的低聚糖提取工艺。

通过加入适量酸性溶液,可以实现对食品中的低聚糖进行提取。

酸解法的一个主要优势在于操作简单且成本较低。

以果胶为例,果胶是一种常见的低聚糖,在果皮中含量较高。

采用酸解法,可以将果胶从果皮中提取出来。

然而,酸解法提取出的低聚糖可能含有一定程度的杂质,需要进一步的净化和精制。

其次,膜分离技术是一种常用的低聚糖分离工艺。

膜分离技术基于溶质在不同膜中的渗透性差异,通过膜的选择性分离达到对低聚糖的提取和分离。

常见的膜分离技术包括超滤、微滤和逆渗透等。

以逆渗透技术为例,逆渗透膜具有非常小的孔径,可以将低聚糖分离出来,而保留其他大分子物质和溶剂。

膜分离技术在提取和分离低聚糖中具有高效、环保和易于操作的特点,但也存在膜污染和膜通量降低等问题,需要进一步的改进和优化。

此外,酶法是一种新兴的低聚糖分离工艺。

酶法通过添加适量的酶将多糖分解成低聚糖,再通过酵素的亲和性进行分离。

酶法相比传统的化学方法更加温和,对食品中的活性物质和营养成分保持较好的保护作用。

以淀粉为例,淀粉是一种常见的多糖,在食品中含有较高的含量。

酶法可将淀粉酶解为低聚糖,然后通过吸附树脂等静态或动态方式进行进一步分离。

酶法的主要优势在于分离效果好、产物纯度高且对食品中其他成分的伤害较小,但也存在催化时间长和酶成本较高等问题,需要进一步的改进和降低成本。

综上所述,食品中低聚糖的提取与分离工艺是一个复杂而有挑战性的问题。

酸解法、膜分离技术和酶法是目前常见的三种工艺,各有优势和不足。

未来的研究方向包括改进现有工艺、寻找新的提取和分离工艺,以提高低聚糖的产量和纯度,为人们的健康饮食提供更多选择和更好的质量保证。

大枣多糖提取分离过程研究

大枣多糖提取分离过程研究
1.2大枣的化学成分㈨,6】
1.2.1有机酸类 含有桦木酸(betulinic acid),桦木酮酸(betulonic acid),齐墩果酸
(oleanolic acid),齐墩果酮酸(oleanolic acid),山楂酸(maslinic acid), 苹果酸(malic acid),酒石酸(tartaric acid),儿茶酸(catechin),油酸 (oleic acid),硬脂酸(stearic acid)和肉豆蔻酸(myristric acid)。 1.2.2三萜甙类
achieved.A practical Path to reduce production co st was advanced.Effo rts we re made to devel0P new drug S which treat tUmo r
Key word:
ultrasonic
ziziphus JUjube
0ut,as well as the mechani sm Of exchange was di SCUS sed.The
operation parameters on absorption and elution were establi shed.
The Purity 0f the refining product can be attained to 39.4%.It iS
学位论文作者签名:、句红午 签字日期:≯q年 5月27日
第一章前言
1.1大枣资源的开发现状‘1,2,3】
大枣(Jujuba)是鼠李科(Rhamnanceae)植物枣(Ziziphus JujubaMill) 的成熟果实。枣树原产于我国,主要分布在黄河流域,栽培历史悠久。 《诗经》中有“八月剥枣”的诗句,《齐民要术》详细记载了36个枣树 品种,并对枣树的栽培、管理,枣果的采收、加工进行了描述。

功能性低聚糖分离纯化方法

功能性低聚糖分离纯化方法

功能性低聚糖分离纯化方法点击次数: 307 发布时间: 2007-2-1功能性低聚糖是指对人、动物、植物等具有特殊生理作用的单糖数在2~10之间的一类寡糖.它的甜度一般只有蔗糖的30%~50%,具有低热量、抗龋齿、防治糖尿病、改善肠道菌落结构等生理作用,在功能性食品的配料中十分重要,正日益受到消费者的青睐.功能性低聚糖的生产一般是以淀粉或蔗糖为原料利用糖苷酶的糖基转移作用进行的.由于糖苷酶对底物专一性要求不高的催化特性,功能性低聚糖的转化率一般在50%左右,产品中除含有目标产品功能性低聚糖外,随产品种类不同还含有大量的葡萄糖、蔗糖、麦芽低聚糖等副产物.这些副产物的存在,在很大程度上降低了功能性低聚糖的生理功能.因此,功能性低聚糖的分离纯化已成为生产厂家亟待解决的研究课题.然而,由于功能性低聚糖产品成分复杂且往往性质较为接近,其分离纯化就变得比较困难,常规分离法如结晶法难以适用.目前虽已有数种功能性低聚糖产品的纯度达到90%以上,但由于生产成本高而产销量极低.开发功能性低聚糖的新型低成本分离方法将大有前途. 1、常见功能性低聚糖的组成酶法生产的功能性低聚糖除含有功能性低聚糖外,往往还含有大量非功能性低聚糖成分,如葡萄糖、蔗糖、乳糖等,这些成分在很大程度上削弱了功能性低聚糖的生理功能和保健作用.例如,葡萄糖和麦芽低聚糖的存在,不仅降低了低聚异麦芽糖难发酵、低热量的特性,而且削弱了其抗龋齿作用和对双歧杆菌的增殖功能。

2、功能性低聚糖的分离纯化方法⑴色谱柱分离法色谱柱分离法是基于混合物中各组分与色谱柱的填料间结合力强弱的差异,即各组分在固定相(填料)与流动相间分配系数不同的性质而使混合物中难吸附与易吸附组分分离的技术.适用于分离糖类的色谱柱填料有铝矾土、碱式铝矾土、硅胶、石英砂、海砂、沸石、活性炭、离子交换树脂等色谱柱分离法的主要优点在于通过数百次连续循环操作、重复使用吸附剂,可以充分利用材料、能量和时间.但迄今为止,只有以离子交换树脂为填料的色谱柱成功用于糖类的工业化分离纯化。

红枣多糖提取、分离与纯化研究进展

红枣多糖提取、分离与纯化研究进展

食品研究与开发F ood Research And Development圆园19年9月第40卷第18期DOI :10.12161/j.issn.1005-6521.2019.18.036基金项目:山东省重点研发计划项目(2016GNC113015);山东省2017年度农业重大应用技术创新项目;2018年烟台市科技计划项目(2018ZDCX014)作者简介:杨燕敏(1995—),女(汉),在读硕士,研究方向:农产品加工与贮藏。

*通信作者:张仁堂(1978—),男(汉),副教授,研究方向:果蔬加工与功能食品。

红枣多糖提取、分离与纯化研究进展杨燕敏,高琳,张仁堂*,张东旭,郑振佳(山东农业大学食品科学与工程学院,山东省高校食品加工技术与质量控制重点实验室,山东泰安271018)摘要:红枣营养丰富,具有多种保健功能。

多糖为红枣的重要功能成分,在多糖纯化检测过程中易受蛋白质、色素等杂质的干扰并影响测定结果,提高多糖的纯度和降低多糖损失率是多糖研究中的重要关键步骤。

该文总结红枣多糖的提取及分离纯化方法,并分析目前存在的问题,为今后红枣多糖的制备、检测与功能性评价及相关食品的开发提供参考。

关键词:红枣;多糖;提取;分离;纯化Advances in Extraction ,Separation and Purification of Jujube PolysaccharidesYANG Yan-min ,GAO Lin ,ZHANG Ren-tang *,ZHANG Dong-xu ,ZHENG Zhen-jia(College of Food Science and Engineering ,Shandong Agricultural University ,Key Laboratory of Food Processing Technology and Quality Control in Shandong Province ,Taian 271018,Shandong ,China )Abstract :Jujube is rich in nutrition and has many health functions.Polysaccharide is an important functionalcomponent of jujube.It is easy to be interfered by protein ,pigment and other impurities in the process of polysaccharide purification and detection.Improving the purity of polysaccharide and reducing the loss rate of polysaccharide are the key steps in polysaccharide research.The paper summarized the extraction ,isolation and purification methods of jujube polysaccharides ,and analyzed the existing problems ,in order to provide reference for the preparation ,detection and functional evaluation of jujube polysaccharides and related food development.Key words :jujube ;polysaccharide ;extraction ;isolation ;purification引文格式:杨燕敏,高琳,张仁堂,等.红枣多糖提取、分离与纯化研究进展[J].食品研究与开发,2019,40(18):204-208YANG Yanmin ,GAO Lin ,ZHANG Rentang ,et al.Advances in Extraction ,Separation and Purification of Jujube Polysaccha 原rides[J].Food Research and Development ,2019,40(18):204-208红枣(Ziziphus jujuba Mill.),又名中华大枣,是鼠李科枣属植物枣树的果实[1]。

大枣多糖的纯化工艺研究

大枣多糖的纯化工艺研究

引言:大枣是我国传统的重要食品和中药材之一,具有丰富的营养价值和药用价值。

其中,大枣多糖是一种重要的生物活性物质,具有多种生物学活性,如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等作用。

因此,大枣多糖的纯化工艺研究具有重要的理论和应用价值。

一、大枣多糖的提取大枣多糖的提取是大枣多糖纯化的第一步,其主要方法有水提法、酸提法、碱提法、酶解法等。

其中,水提法是最常用的方法,其操作简单、成本低、提取效果好。

但是,水提法提取的大枣多糖含有较多的杂质和蛋白质,需要进一步纯化。

二、大枣多糖的纯化1. 超滤法超滤法是一种常用的大枣多糖纯化方法,其原理是利用超滤膜的分子筛选作用,将大枣多糖和小分子物质分离。

超滤法操作简单、效果好,但是需要使用昂贵的超滤膜,成本较高。

2. 离子交换法离子交换法是一种利用离子交换树脂对大枣多糖进行分离纯化的方法。

其原理是利用树脂上的离子交换基团与大枣多糖中的离子交换作用,将大枣多糖与杂质分离。

离子交换法操作简单、效果好,但是需要使用昂贵的离子交换树脂,成本较高。

3. 凝胶过滤法凝胶过滤法是一种利用凝胶颗粒对大枣多糖进行分离纯化的方法。

其原理是利用凝胶颗粒的孔径大小对大枣多糖和杂质进行筛选分离。

凝胶过滤法操作简单、成本低、效果好,但是需要选择合适的凝胶颗粒,否则会影响纯化效果。

三、大枣多糖的检测大枣多糖的检测是大枣多糖纯化的最后一步,其主要方法有紫外分光光度法、酚硫酸法、酚磺酸法等。

其中,紫外分光光度法是最常用的方法,其原理是利用大枣多糖在紫外光下的吸收特性进行检测。

紫外分光光度法操作简单、成本低、检测灵敏度高。

结论:大枣多糖的纯化工艺研究是大枣多糖应用研究的重要组成部分。

目前,超滤法、离子交换法、凝胶过滤法等方法已经被广泛应用于大枣多糖的纯化。

在检测方面,紫外分光光度法是最常用的方法。

未来,随着科技的不断进步,大枣多糖的纯化工艺将会更加完善,为大枣多糖的应用研究提供更好的支持。

红枣多糖的分离纯化、结构表征及活性功能研究

红枣多糖的分离纯化、结构表征及活性功能研究

红枣多糖的分离纯化、结构表征及活性功能研究红枣作为一种常见的食材和药材,因其营养丰富和药用价值受到广泛关注。

红枣中含有丰富的营养成分和活性成分,其中红枣多糖是其主要活性组分之一。

红枣多糖具有多种功能,包括抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等。

因此,红枣多糖的分离纯化、结构表征及活性功能研究具有重要的理论和应用价值。

红枣多糖的分离纯化是研究其结构和活性的基础。

目前,常用的纯化方法包括水提取、醇沉淀、膜分离、离子交换和凝胶过滤等。

这些方法能够有效地分离红枣多糖,并提供较高纯度的样品用于后续的研究。

分离纯化后的红枣多糖样品可以通过质谱、红外光谱、核磁共振等技术进行结构表征。

红枣多糖的结构表征是研究其活性功能的重要手段。

红枣多糖主要由单糖组成,其中主要成分是葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖等。

此外,红枣多糖还含有少量的灰氮和酸,这些成分对红枣多糖的活性和稳定性具有影响。

利用质谱和红外光谱等技术可以确定红枣多糖的分子量、化学结构和功能基团等信息。

红枣多糖的活性功能是研究者关注的焦点。

多糖作为一类天然产物,具有多种活性功能。

红枣多糖的抗氧化活性是其一大特点,可以清除自由基,提高机体的抗氧化能力。

红枣多糖还具有抗肿瘤活性,可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散。

此外,红枣多糖还具有免疫调节作用,可以增强机体的免疫功能。

这些功能是红枣多糖应用于食品、保健品和药物的基础。

红枣多糖的应用潜力广阔。

红枣多糖作为一种天然产物,具有良好的生物相容性和安全性,因此在食品、保健品和药物等领域具有较大的应用潜力。

红枣多糖可以作为食品添加剂,用于提高食品的营养价值和功能性;可以作为保健品的活性成分,用于改善机体的免疫功能和抗老化能力;还可以作为药物的辅助治疗药物,用于改善肿瘤患者的治疗效果。

综上所述,红枣多糖的分离纯化、结构表征及活性功能研究对于充分发挥其营养和药用价值具有重要意义。

未来的研究可以进一步探索红枣多糖的结构与功能之间的关系,并开展红枣多糖的制备工艺和应用研究,以促进其在食品、保健品和药物等领域的应用综上所述,红枣多糖作为一种天然产物具有广泛的应用潜力。

红枣中有效物质的分离提取技术研究

红枣中有效物质的分离提取技术研究

红枣中有效物质的分离提取技术研究红枣是一种非常常见的中药材,其具有调节血糖、保肝、抗氧化等多种功能。

近年来,红枣中有效物质的分离提取技术也越来越成为研究的热点。

本文就来介绍一下红枣中有效物质的分离提取技术研究的进展。

一、红枣中主要有效物质红枣中含有丰富的营养成分,如蛋白质、糖类、维生素和矿物质等,同时也含有多种生物活性成分。

红枣中主要的活性成分有:1.多糖类物质:红枣中的多糖类物质具有免疫调节、保护肝脏、消炎抗菌等多种功能。

2.三萜类物质:红枣中的三萜类物质具有降低胆固醇、祛痰止咳等功效。

3.苯丙烯酸类物质:红枣中的苯丙烯酸类物质具有抗氧化、抗菌、抗炎等多种功能。

二、红枣中有效物质的分离提取技术红枣中有效物质的提取有很多方法,按照分离方式可以分为物理法、化学法和生物法。

下面我们就一一来介绍。

1.物理法提取:物理法提取是指在不破坏红枣结构的情况下,利用物理手段进行有效物质的提取。

常用的物理法提取有水提取法、超声波提取法等。

(1)水提取法:将红枣用适量的水浸泡一段时间后,将水中的有效物质挥发掉,得到红枣中的有效物质。

由于这种方法操作简单、成本低,所以被广泛运用于红枣中有效物质的提取。

(2)超声波提取法:利用超声波的物理效应促进溶剂进入红枣中,从而使有效成分更加容易被提取。

2.化学法提取:化学法提取是指利用化学反应的方法将有效物质从红枣中分离出来。

常用的化学法提取方法有醇提取法、酸提取法等。

(1)醇提取法:将红枣用酒精、乙醇等醇类溶剂浸泡,利用溶解性差异将红枣中的有效物质分离出来。

这种方法适用于在水中不溶的有效物质提取。

(2)酸提取法:利用酸化反应将红枣中的有效物质转化为酸性物质,从而通过pH调节将有效物质与红枣分离出来。

三、总结红枣中有效物质的分离提取技术长期以来受到广泛的关注,在不断研究中,发现了越来越多的分离提取新方法。

目前,常用的分离提取方法有物理法和化学法两种。

物理法提取简单易操作,适用于提取水溶性和易挥发有效物质,但提取效率较低;化学法提取虽然提取效率高,但需要用到一些腐蚀性化学物品,对环境造成一定污染。

大枣多糖酸水解制备低聚糖影响因素研究

大枣多糖酸水解制备低聚糖影响因素研究

第46卷第14期2018年7月广 州 化 工Guangzhou Chemical IndustryVol.46No.14Jul.2018大枣多糖酸水解制备低聚糖影响因素研究*伍 毅,张 强(西北农林科技大学林学院,陕西 杨凌 712100)摘 要:我国大枣(Ziziphus zizyphus )资源丰富,为了高值化利用大枣资源,高效制备大枣低聚糖,本实验通过酸解将大枣多糖降解为低聚糖,超滤法分离低聚糖,研究温度㊁时间㊁酸浓度㊁多糖浓度对低聚糖得率的影响㊂结果表明制备大枣低聚糖的最佳工艺为:温度50℃;水解时间1h;盐酸浓度0.022mol /L;糖浓度20mg /mL㊂此条件下大枣低聚糖的得率达45.30%㊂超滤法分级表明,酸解后,大枣多糖主要组分从分子量3000以上的多糖降解为分子量3000以下的低聚糖和分子量500以下的单糖㊁双糖㊂关键词:大枣多糖;酸解;低聚糖;超滤 中图分类号:S789  文献标志码:A 文章编号:1001-9677(2018)14-0049-03*基金项目:陕西省农业攻关项目(2015NY052)㊂第一作者:伍毅,男,硕士研究生,主要从事植物资源加工利用研究㊂Study on Factors Influencing the Preparation of Oligosaccharidefrom Jujube Polysaccharide by Acidic Hydrolysis *WU Yi ,ZHANG Qiang(College of Forestry,Northwest A &F University,Shaanxi Yangling 712100,China)Abstract :Jujube (Zizyphus jujube )resource is abundant in China.In order to utilize jujube resources and efficiently prepare oligosaccharide from jujube polysaccharides,the oligosaccharide was prepared by acidic hydrolysis and separated by ultrafiltration method.The important factors such as temperature,time,concentrations of acid and polysaccharides were studied.The results showed that at the chosen conditions of temperature of 50℃,time of 1h,and acid concentration of 0.022mol /L,polysaccharides concentration of 20mg /mL,the yield rate of jujube oligosaccharides could reach 45.30%(m /m).After acidic hydrolysis,the molecule mass of the Jujube polysaccharide was changed from above 3000to less than 3000.Key words :jujube polysaccharide;acidic hydrolysis;oligosaccharide;ultrafiltration低聚糖又称为寡糖,是由2~10个单糖结合而成的一类小分子糖㊂低聚糖分为功能性和普通低聚糖两类㊂普通低聚糖如蔗糖㊁果糖等为机体提供能量,没有其他生理功能㊂功能性低聚糖具有调节肠道菌群㊁降低胆固醇㊁降血糖㊁促进矿物质吸收㊁增强人体免疫力等生理功能㊂作为一种安全健康的生物功能性成分,低聚糖已经广泛应用于食品和医疗领域㊂低聚糖的制备方法有酶解㊁酸解㊁物理降解㊁酶缩合及糖基转移法等[1]㊂我国大枣(Ziziphus zizyphus )资源丰富,近年来西北地区大枣产业发展迅速,新疆[2]㊁陕西[3]㊁甘肃[4]等地都将发展大枣产业作为农业产业转型㊁精准扶贫的重要措施㊂随着大枣产量迅速提高,延伸大枣产品链,高值化利用大枣资源成为大枣产业发展的必然选择㊂大枣多糖具有抗氧化㊁抗疲劳㊁抗肿瘤等多种药理活性[5],是大枣中重要的活性成分,然而大枣多糖制备低聚糖的研究未见报道㊂本文以大枣多糖为原料,利用简单高效的酸解法制备大枣低聚糖,使用超滤法分离低聚糖,旨在延长大枣的加工产业链,提高大枣的综合利用价值,为进一步开发大枣保健品提供实验基础㊂1 实 验1.1 材料与试剂大枣多糖(实验室自制,含量915.5mg /g),无水乙醇㊁盐酸㊁硫酸㊁苯酚等均为分析纯㊂超滤膜(分子量500/3000/10000/50000Da),上海摩速科学器材有限公司㊂1.2 仪 器UV-1800紫外分光光度计,上海美普达仪器有限公司;MSC300超滤杯,上海模速科学器材有限公司㊂1.3 实验方法1.3.1 酸水解工艺研究方法酸浓度的影响:锥形瓶中加入25mL 浓度10mg /mL 多糖溶液,再加入50mL 蒸馏水或一定浓度盐酸溶液,充分摇匀后置入60℃的水浴锅中加热1h,待冷却后,混合液用0.1mol /L 的NaOH 溶液中和至pH =7.0㊂再依次经分子量3000Da 和500Da 的超滤膜膜过滤,得分子量500~3000Da 的低聚糖溶50 广 州 化 工2018年7月液,蒸馏水定容溶液体积至50mL,以硫酸 苯酚法测定溶液中总糖含量[6]即为低聚糖含量,回归方程为:y =14.743x -0.011,R 2=0.996,其中,y 为吸光度,X 为葡萄糖质量浓度(mg /mL),线性范围0.01~0.07mg /mL㊂低聚糖得率按照式(1)计算㊂低聚糖得率=低聚糖含量(mg/mL)´低聚糖溶液体积(mL)多糖质量(mg)´100%(1)温度的影响:锥形瓶中加入25mL 浓度10mg /mL 的多糖溶液,再加入0.022mol /L HCl 溶液50mL,充分摇匀后置入不同温度的水浴中加热1h㊂后续处理同上㊂酸解时间的影响:锥形瓶中加入25mL 浓度10mg /mL 的多糖溶液,再加入0.022mol /L HCl 溶液50mL 混合均匀,锥形瓶放入50℃的水浴锅中加热不同时间,后续处理同上㊂多糖浓度的影响:锥形瓶中加入25mL 不同浓度的多糖溶液,再加入0.022mol /L HCl 溶液50mL,在50℃的水浴锅中加热1h,后续处理同上㊂所有实验均做三次以上平行试验,结果用Excel 软件处理,以平均值±标准偏差表示㊂1.3.2 超滤方法室温下,以钢瓶氮气为加压气体,控制压力为(0.15±0.02)MPa,超滤至10min 内无过滤液滴下为终点㊂溶液过滤完后,每次以20mL 去离子水洗涤两次㊂1.3.3 多糖分级方法将浓度20mg /mL 的200mL 大枣多糖溶液按照1.3.2所述超滤方法依次通过500㊁3000㊁10000㊁50000分子量的超滤膜,每次超滤均收集截留物和滤过液㊂过滤液测定计算总糖含量,截留液继续用较大分子量的超滤膜超滤,将200mL 的2mg /mL 的大枣多糖溶液按照分子量分为5级:500以下㊁500~3000㊁3000~10000㊁10000~50000㊁50000以上㊂过滤液均由硫酸 苯酚法测定总糖含量㊂2 结果与讨论2.1 大枣多糖酸解影响因素图1 酸浓度对低聚糖得率的影响Fig.1 Effect of the acid concentration on the oligosaccharide yield盐酸价廉㊁具挥发性㊁易去除,常用于酸解制备低聚糖[7-9]㊂盐酸浓度对大枣低聚糖得率影响见图1㊂由图1可知,当盐酸浓度为0.022mol /L 时,低聚糖得率最高,超过30%㊂当盐酸浓度高于或低于此浓度时,得率均明显下降㊂盐酸浓度大于0.1mol /L 后,低聚糖得率趋于稳定在5%左右㊂酸解制备低聚糖通常使用较小酸浓度,如利用玉米麸皮酸解制备低聚糖阿魏酸酯时,盐酸浓度为0.05mol /L [7];由魔芋精粉制备低聚葡甘聚糖时,盐酸浓度为0.07mol /L [8]㊂在本研究中,盐酸浓度较低,表明大枣可溶性多糖为原料,水解容易,因此盐酸浓度低于前两者,较低的盐酸浓度也降低生产中后续废水的处理难度㊂图2 温度对低聚糖得率的影响Fig.2 Effect of the temperature on the oligosaccharide yield水解温度对高聚糖酸水解有显著影响㊂由图2可知,当酸解温度50℃时低聚糖得率最高,低于50℃㊁或者高于50℃后,得率均明显下降㊂当温度升高80℃后,低聚糖得率低于15%,低于30℃时的低聚糖得率㊂温度是反应的重要参数,有些化学反应的反应温度升高10℃,反应速度会加快1倍以上㊂较高的反应温度利于反应的进行,但是生成低聚糖是多糖水解的中间阶段,水解反应的最终结果是生成单糖㊂因此,在多糖结构解析中分析单糖组成时,因为需要快速将多糖完全水解,一般使用浓酸㊁温度高于100℃的条件下水解[10]㊂制备低聚糖一般需要降低温度,使水解反应温和进行,尽量减少单糖的产生[7-9]㊂图3 酸解时间对低聚糖得率的影响Fig.3 Effect of the hydrolysis time on the oligosaccharide yield酸解时间对低聚糖得率影响较大㊂从图3可知,1h 是酸解低聚糖的较佳时间㊂时间短于1h,反应不充分,得率较低;时间长于1h 后,低聚糖在酸催化下又继续酸解为单糖[11],导致得率降低㊂当酸解时间超过3h 后,低聚糖得率基本保持在10%不再发生明显变化㊂图4 多糖浓度对低聚糖得率的影响Fig.4 Effect of the polysaccharide concentration on theoligosaccharide yield如图4所示,多糖溶液浓度对低聚糖得率影响显著㊂在实验设定的多糖浓度2~50mg /mL 范围内,低聚糖得率范围在5.5%~45.3%㊂当多糖浓度为20mg /mL 时,低聚糖得率最第46卷第14期伍毅,等:大枣多糖酸水解制备低聚糖影响因素研究51 高㊂通过单因素试验可知,大枣多糖酸解制备低聚糖的较优工艺为:加热温度为50℃,加热时间1h,酸浓度为0.022mol /L,多糖溶液浓度为20mg /mL㊂2.2 大枣多糖酸解前后组成比较利用超滤杯和不同分子量超滤膜将酸解前后的大枣多糖按照分子量分级,结果见图5㊂从图5可知,酸解前大枣多糖主要组分是分子量大于3000的高分子量多糖,含量最高的级份,是分子量10000~50000的多糖,含量高达38.16%,低聚糖含量仅6.54%㊂此外,多糖提取物中仍含有5.92%的双糖和单糖㊂酸解后分子量500~3000范围内的低聚糖显著增加,从6.54%增加为42.49%㊂同时,分子量低于500的双糖和单糖含量也显著增加,从5.92%增加到30.51%㊂3个分子量大于3000的多糖级份的含量显著减小㊂酸解主要降解分子量高于3000的多糖,生成了低聚糖和双糖㊁单糖,表明酸解有效促进了多糖的降解,并且可控制在低聚糖含量较高的阶段㊂图5 大枣多糖分级组成Fig.5 Molecule mass grades in the jujube polysaccharide3 结 论大枣中低聚糖含量较低,稀盐酸酸水解大枣多糖可以高效制备大枣低聚糖㊂盐酸易挥发,废酸液的酸性弱,易处理㊂酸浓度,酸水解温度㊁时间,多糖浓度显著影响低聚糖得率㊂在适当的条件下酸水解大枣多糖,可得到45%的低聚糖㊂利用超滤技术可以去除高分子量多糖和双糖㊁单糖,快速制备固体低聚糖,省去浓缩阶段㊂参考文献[1] 刘花兰,姜竹茂,刘云国,等.功能性低聚糖的制备㊁功能及应用研究进展[J].中国食品添加剂,2015(12):158-166.[2] 蒋建科,杨远远. 七月鲜”让新疆枣业更红火[J].西北园艺(果树),2017(2):45-46.[3] 王长柱,高京草.陕西枣产业发展面临的困境与思考[J].北方园艺,2013(12):181-184.[4] 任道义,曹学民,赵军营.综合利用红枣资源做强做大枣业经济[J].甘肃林业,2016(3):7-8.[5] 罗莉,玉崧成,王金水,等.大枣多糖结构及药理活性的研究进展[J].安徽农业科学,2010,38(30):16860-16861.[6] 李启艳,胡德福,张雪梅,等.党参多糖提取纯化工艺优化及其组成研究[J].中草药,2016,47(15):2663-2667.[7] 林奇龄,温其标,欧仕益,等.酸解制备低聚糖阿魏酸酯的优化工艺研究[J].食品研究与开发,2012,33(6):81-85.[8] 许牡丹,汤木红.酸酶结合法制备葡甘露低聚糖的工艺研究[J].现代食品科技,2008,24(1):32-34.[9] 姚兴存,商勇,刘芳.紫菜低聚糖的制备技术研究[J].水产科学,2005,24(5):38-40.[10]Peng F,Ren J L,Xu F,et parative Study of HemicellulosesObtained by Graded Ethanol Precipitation from Sugarcane Bagasse[J].J.Agric.Food Chem.,2010,57(14):5743-5750.[11]杨淑惠.植物纤维化学.3版[M].北京:中国轻工业出版社,2006:194-195.(上接第34页)[4] Al -Mashat L,Shin K,Kalantar -Zadeh K,et al.Graphene /Polyaniline Nanocomposite for Hydrogen Sensing [J].The Journal of Physical Chemistry C,2010,114(39):16168-16173.[5] Feng Q,Li X,Wang J.Percolation effect of reduced graphene oxide(rGO)on ammonia sensing of rGO-SnO 2composite based sensor[J].Sensors and Actuators B:Chemical,2017,24(3):1115-1126.[6] Song H,Zhang L,He C,et al.Graphene sheets decorated with SnO 2nanoparticles:in situ synthesis and highly efficient materials for cataluminescence gas sensors [J ].Journal of Materials Chemistry,2011,21(16):5972-5977.[7] Tang G,Jiang Z-G,Li X,et al.Three dimensional graphene aerogelsand their electrically conductive composites[J].Carbon,2014,7(7):592-599.[8] Ferrari A C,Basko D M.Raman spectroscopy as a versatile tool forstudying the properties of graphene[J].Nature Nanotechnology,2013,8:235.[9] Yang S,Zhang L,Yang Q,et al.Graphene aerogel prepared bythermal evaporation of graphene oxide suspension containing sodium bicarbonate[J].Journal of Materials Chemistry A,2015,3(15):7950-7958.[10]Si W,Wu X,Zhou J,et al.Reduced graphene oxide aerogel with high-rate supercapacitive performance in aqueous electrolytes[J].Nanoscale Research Letters,2013,8(1):247.。

从红枣中分级提取有效成分的方法

从红枣中分级提取有效成分的方法

技术与市场第16卷第4期2009年为了克服天然石材表面存在的色差、杂色、斑点等缺陷,为增强石材的装饰性和美感,提高廉价石材的商业价值,经常采用染色的方法对天然石材表面进行加工处理。

目前的天然石材染色方法是将天然石材的表面染成纯色,这样不能应用石材天然的纹理以达到特殊的效果,染色后石材表面光泽度降低。

针对现状我们提供一种通过染色提高表面观感和商业价值的天然石材制品。

该天然石材染色方法,包括以下步骤:1、将天然石材在温度150℃~250℃下烘烤60至120分钟;2、取出并立即放入染色液中浸泡60至120分钟;3、在温度60℃~200℃下烘烤30至90分钟,取出后立即放入固色液中浸泡30至60分钟进行固色。

染色液含有水溶性染料和助染剂,其组份为每50Kg染色液含染料8至15Kg、助染剂0.3至2.5Kg。

固色液含有固色剂、硫酸铜和醋酸,其组份为每50Kg固色液含固色剂10至35Kg、硫酸铜0.2至1.5Kg、醋酸0.2至3.0Kg。

与现有的天然石材染色方法相比,该方法具有以下有益效果:1、石材烘烤后不经过冷却立即放入染色液、固色液,可提高着色、固色效果和牢固度,并缩短上染和固色时间,提高效率,节约成本。

2、染色液和固色液中不含硝酸铁,而是采用水溶性染料、水溶性化学物,以水为溶剂配制而成,不存在有机溶剂对环境污染的问题,符合环保要求。

3、染色、固色工艺过程简单,易于掌握、操作。

4、颜色鲜亮、着色均匀、牢固、深透,并且光洁度达80度以上,耐酸碱、耐紫外线、耐侯性好、耐高温。

联系人:曾志坚地址:福建省南安市水头镇后房村二组邮编:362300天然石材染色方法及其制品专利号:20071008775.3该专利提供的是从红枣中分级提取有效成分的方法,此方法不使用有机溶剂,以避免在红枣加工过程中有机溶剂残留出现,同时能得到大分子量的蛋白、果胶、多糖、低聚糖、蔗糖、葡萄糖和果糖等多种红枣有效成分。

从红枣中分级提取有效成分的方法,包括以下步骤:1、取清洗后的红枣,按重量以水料比3~10∶1于50℃~100℃热水中浸提6至12小时,过滤得提取液和残渣,残渣重复提取2次,合并提取液;2、将得到的提取液用滤布过滤,截留部分为大分子量蛋白和果胶为主的成分;3、将滤液用截留分子量为5至9万的分离膜进行超滤,超滤条件:压力0.2至0.5MPa,搅拌速度0~300转/分钟,滤液浓度5%~15%,截留部分为多糖为主的有效成分;4、滤液用截留分子量为500~1000的分离膜进行纳滤,纳滤条件:压力0.4至1M Pa,搅拌速度0~300转/分钟,滤液浓度5%~15%,截留部分为低聚糖有效成分,滤液部分为蔗糖、葡萄糖和果糖为主的有效成分;5、将有效成分分别进行干燥,即得产品。

大枣多糖的纯化工艺研究

大枣多糖的纯化工艺研究

大枣多糖的纯化工艺研究
大枣多糖是一种特殊的天然多糖,主要成分为枣多糖、枣多元糖、葡萄糖,乙醇和乙酸等,具有多种营养价值和药用价值。

纯化工艺研究可以有效改善大枣多糖的品质,使其具有更高的应用价值。

大枣多糖的纯化技术主要包括离子交换法、改性沸石法和除聚合物和抑制剂法等。

离子交换法是利用离子交换剂换去大枣多糖中不需要的杂质,改善产品的纯度和品质,并可以有效保护大枣多糖中活性成分的活性;改性沸石法是通过改性沸石表面上的孔隙结构,使大枣多糖中聚合物成分和糖类抑制剂等物质被捕获,从而提高大枣多糖的纯度和品质;除聚合物和抑制剂法则是利用酸、碱、硫酸钠、硫酸钾等抑制剂,去除大枣多糖的聚合物和抑制剂,以提高其纯度。

综上所述,纯化大枣多糖的重要技术包括离子交换法、改性沸石法和除聚合物和抑制剂法,这些技术可以有效降低大枣多糖中杂质和有害物质的含量,提高纯度和品质,提升大枣多糖的营养价值和药用价值,增强在保健食品和药物中的应用价值。

为了提高大枣多糖的纯度,还可以采用分离过滤法、抽滤法、超滤法、激光色谱分析法、紫外-可见分光光度法等技术,它们可以更好地精细化处理,以保证大枣多糖的纯度和品质。

此外,还可以利用精细化技术,如质谱分析、流动注射色谱、红外光谱和核磁共振等技术,来进一步检测和确认大枣多糖中营养成分和药用成分的含量和组成,以提高大枣多糖的质量和品质。

总之,大枣多糖纯化工艺研究具有重要的现实意义,它可以多种
技术手段获得高纯度大枣多糖,提升其营养价值和药用价值,增强在保健食品和药物中的应用价值。

未来,研究者将继续开展深入研究,把大枣多糖的应用价值发挥到极致。

大枣不同加工部位含糖量测定及脱糖大枣的研究思路

大枣不同加工部位含糖量测定及脱糖大枣的研究思路

大枣不同加工部位含糖量测定及脱糖大枣的研究思路∗马宝珠1,2,3,刘世军1,2,3△,李慧1,2,3,刘永1,2,31陕西中医药大学/陕西省中药资源产业化协同创新中心,陕西咸阳712083;2陕西省中药基础与新药研究重点实验室;3陕西省风湿与肿瘤类中药制剂工程技术研究中心[摘要]目的:对大枣不同加工部位中总糖和还原糖的含量进行测定,并推算出低聚糖和多糖含量。

方法:通过苯酚-硫酸法及3,5-二硝基水扬酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法对大枣浸膏、枣渣和粗多糖中总糖和还原糖含量进行测定。

结果:大枣的总糖含量为52.14%,还原糖含量为36.90%,低聚糖和多糖含量为15.24%。

还原糖占总糖含量的70.78%,低聚糖和多糖占总糖含量的29.22%。

结论:苯酚-硫酸法及3,5-二硝基水扬酸法可以用于大枣浸膏、枣渣和粗多糖中总糖和还原糖含量测定,并通过总糖与还原糖含量之差,反映出低聚糖和多糖含量。

这可为脱糖大枣的研究提供参考。

[关键词]大枣;苯酚-硫酸法;3,5-二硝基水扬酸法[中图分类号]R283[文献标识码]A[文章编号]2096-9600(2021)04-0031-05Determination of Sugar Content in Different Processing Partsand Research Ideas of Sugar-free JujubeMA Baozhu1,2,3,LIU Shijun1,2,3△,LI Hui1,2,3,LIU Yong1,2,31Shaanxi Collaborative Innovation Center of Chinese Medicinal Resource Industrializationof Shaanxi University of Chinese Medicine,Xianyang712083,China;2Shaanxi Provincial Key Lab of the Study for Traditional Chinese Medicine and New Drugs;3Shaanxi Provincial Engineering Research Center of Rheumatism and Tumor Chinese Drugs PreparationAbstract Objective:To detect the contents of total sugar and reducing sugar in different processing parts of jujube,and calculate the contents of oligosaccharides and polysaccharides.Methods:The contents of total sugar and reducing sugar in jujube extract,residues and crude polysaccharide were measured by phenol-sulfuric acid method and DNS method.Results:Total sugar content of jujube was52.14%,the contents of reducing sugar was 36.90%,the contents of oligosaccharides and polysaccharides was15.24%.Reducing sugar accounted for70.78% of the total sugar content,oligosaccharides and polysaccharides accounted for29.22%of the total sugar content. Conclusion:Phenol-sulfuric acid method and DNS could be used for content determination of total sugar and reducing sugar in jujube extract,residues and crude polysaccharide,the contents of oligosaccharides and polysaccharides are reflected through the differences of the contents of total sugar and reducing sugar.It could provide the reference for the study on sugar free jujube.Keywords jujube;phenol-sulfuric acid method;3,5-dinitrosalicylic acid method大枣为鼠李科植物枣(Ziziphus jujuba Mill.)的干燥成熟果实[1],是我国传统的滋补保健食品,其价值与功效毋庸置疑。

陕北木枣中低聚糖的提取及其功效研究

陕北木枣中低聚糖的提取及其功效研究

陕北木枣中低聚糖的提取及其功效研究目前低聚糖生产虽已经得到产业化大规模发展,但是大多数低聚糖的生产都采用酶法合成或者化学合成的方法来得到,很少有企业直接从植物体内提取获得,归根结底最根本的原因就在于直接从植物中提取低聚糖的成本较高;另外目前已经得到广泛应用的植物天然低聚糖仅有大豆低聚糖,而对木枣低聚糖的研究尚在探索中,而且报道甚少。

陕北的优势产业----红枣产业近10年来出现了迅猛发展,而且已经跃居全国第五。

但是近年来因为生态环境的破坏,气候环境也受到了很大的影响,陕北雨水增多或者干旱,致使陕北红枣产业出现残次果增加,年产量下降等现象,致使红枣栽培户蒙受巨大的经济损失,因此寻找红枣产业利润的新增长点,弥补果农因产量降低,残次果增多而带来的经济损失,或是能够将残次果变废为宝,再次加工利用,增加果农收入,这将成为一项重要的研究课题。

本课题研究的意义和价值就在于通过对陕北木枣中木枣低聚糖的提取工艺优化及其功效研究:为陕北木枣中的低聚糖的制备奠定理论基础;为如何降低制备红枣天然低聚糖的成本提供理论依据;为陕北红枣产业寻找新的利润增长点提供开辟新的路径的理论依据。

本论文主要内容如下:1、用石油醚作为浸提溶液进行回流浸提,研究了去除红枣中脂类物质的最佳工艺。

通过对实验结果的综合分析最终得出去除红枣中的脂类物质的最佳条件是:在料液比为1:10(g/ml)时,在70℃下连续回流浸提2小时。

2、用蒸馏水作为浸提溶液进行回流提取,研究了从红枣中浸提可溶性糖的最佳工艺。

通过单因素和正交实验结果分析最终得出:在料液比为1:20(g/ml)时,在70℃下连续回流浸提2小时,可溶性糖的得率可以达到75%左右。

3、先用蒸馏水作为浸提溶液浸提红枣中的可溶性糖,然后再用Savage法去除蛋白质,95%乙醇沉淀法去除多糖,最后再通过聚丙烯酰胺凝胶柱和活性炭硅藻土柱两种不同的柱层析对木枣低聚糖进行分离比较,研究陕北木枣低聚糖提取与分离的最佳工艺。

果糖及低聚果糖的分离 纯化

果糖及低聚果糖的分离 纯化

果糖及低聚果糖的分离、纯化目录一、除杂 (3)二、脱色 (3)1.活性炭脱色 (3)2.新生态碳酸钙法脱色 (3)3.树脂脱色 (3)3.1 LSA-8吸附树脂 (3)3.2 D318树脂 (3)4.离子交换 (3)三、提纯 (4)1.分子量不同的糖的分离 (4)1.1 纳滤分离 (4)1.2 分级纳滤分离 (4)1.3 柱层析凝胶分离 (5)2.相同分子量的糖的分离 (5)2.1 葡萄糖和果糖的分离 (5)2.1.1化学试剂法 (5)2.1.2吸附分离 (5)2.1.3 GOD-CAT双酶法氧化 (6)2.1.4复盐法 (6)2.1.5连续色谱分离(CSEP) (6)3.手性拆分 (7)3.1分子印迹聚合物分离手性分子 (7)3.1.1功能单体的选择 (7)3.1.2 M I P s的制备 (7)3.2手性膜拆分法 (8)3.3优先结晶方法 (8)3.4 化学拆分法 (9)3.4.1生成非对应异构体拆分法 (9)3.4.2生物化学拆分法 (9)参考文献 (10)一、除杂1.通过低温下冷冻和用乙醇-正己烷除去油脂和脂类物质;2.加入磷酸和氢氧化钙,絮凝沉淀出果胶;3.用盐析法、等电点法、溶剂沉淀法(sevage法)除去蛋白质;4.加淀粉酶除去淀粉;5.用阳离子聚丙烯酞胺吸附溶液中带负电荷的部分如蛋白质、多糖、蹂质、树胶、淀粉和单宁等,最佳条件52℃,pH=6,CPAM添加量为0.08%,絮凝时间3h.二、脱色1.活性炭脱色通过极差最优化分析,确定出最佳影响因素pH>脱色温度>脱色时间>活性炭用量,最优化工艺条件为:活性炭用量1.4%,脱色温度70℃,pH值3.8,脱色时间50min.【1】经试验验证的透光率为99.7%,同时在实验过程中用高效液相色谱方法检测活性炭脱色后的低聚果糖溶液中低聚果糖含量,结果显示低聚果糖在脱色前后并无损失.2.新生态碳酸钙法脱色在低聚果糖液中加入Ca(OH)2混合均匀后,再缓慢通入CO2来反应生成碳酸钙,这时新生态碳酸钙便与低聚果糖液中的色素发生吸附作用,从而达到脱色的效果.在原样液锤度:190Bx透光率:92.31%,pH值:6.4电导率:26mV的条件下,测试结果不如活性炭.【1】3.树脂脱色3.1 LSA-8吸附树脂在温度为70℃,pH为6的条件下用脱色2h,实验结果色素的吸附率高达92.35%;【14】3.2 D318树脂树脂用量为低聚果糖样品溶液的3.7%,pH=5.2,脱色时间3h,脱色温度为52℃.4.离子交换钟振声等选择了D392大孔阴离子交换树脂对大豆低聚糖进行脱色,在与低聚糖比为1:11的条件下,常温脱色3-4小时,色素的吸附率达86%.【14】三、提纯低聚果糖溶液中非有效成分葡萄糖、果糖、蔗糖,其相对分子质量分别为180,180,342;有效成分蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖的相对分子量分别为504,666,828.1.分子量不同的糖的分离1.1 纳滤分离最佳条件:跨膜压差为1.1 MPa,料液浓度为10 g/100 g,温度40℃,循环流量6 L/min, pH=6.【13】物料初始浓度30g/L、操作压力0.2Mpa、纯化15倍.【12】1.2 分级纳滤分离先将样品通过0.3微米的微滤膜,将其透过液作为分级纳滤的母液.【1】采用全回流方式,对样品共进行两级纳滤膜分离处理和一次反渗透膜回收处理.第一级纳滤膜分离,在0.3MPa,25℃,初始料液浓度为10倍稀释下,选用JN 1812-34纳滤膜,对原始料液进行分离,之后三倍洗脱,截留蔗果五糖;第二级纳滤膜分离,在0.4MPa,25℃下,选用DK1812C-47D纳滤膜,对一级纳滤的透过液进行分离,截留蔗果三糖与蔗果四糖;经过两级纳滤和反渗透分离,可以将低聚果糖溶液按其所含溶质的不同分为三部分,分别>800部分为蔗果五糖、200^800部分为低聚果糖和<200部分为葡萄糖、果糖及部分蔗糖混合物.最后对二级透过液进行反渗透膜过滤,回收其中的葡萄糖、果糖等成分和大量的水.工艺流程图如下:为了避免因膜污染而造成的实验误差,每处理完一次样品后,均用蒸馏水对纳滤装置和纳滤膜进行3次清洗,每次清洗时间约为8min.如果长时间(大于一周)应该先用浓度为2%的表面活性剂进行清洗,最后用蒸馏水冲洗至无泡沫为止.将清洗干净的膜管保存在0.5%的甲醛溶液或1%的亚硫酸氢钠溶液中,以防止长霉长菌,损坏膜表面层.实验证明,冲洗时间和浸泡时间分别为60 min和90 min时二者都可使膜的纯水透过通量恢复系数达到100%左右.【13】1.3 柱层析凝胶分离吸取一定量低聚果糖(过0.45微米的膜)均匀滴加在层析柱聚丙烯酞胺凝胶表面,打开底部阀门,待低聚果糖刚好渗入凝胶时关闭阀门,用少量的脱气超纯水洗下残留在柱壁上的糖液,打开阀门让洗脱液刚好渗入凝胶表面后关闭.接上泵开始洗脱,同时将柱下端接在蒸发光散射检测器(N流速为2.5L/min,温度为100℃)上直接进行检测分析.2【1】在1.6cm*100cm的玻璃柱上最佳的层析条件:洗脱速度0 2 mL/min上样量0. 5 mI_(样液质量浓度0.4g/ml)、柱温40℃,以Megaz]aae公司的标准品为对照,经HPLC 和MS分析,证明层析分离所得组分峰4峰、3和峰2分别是蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖。

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2.3
大枣粗低聚糖的膜分离
2000u 的 大枣提取液过微滤膜后 , 透 过 10000 、 , , 膜 然后经反渗透膜浓缩 得到截留液为大枣粗低聚 糖提取液, 其所含总糖质量相对于去核干制大枣的 质量百分比为 10.3% ± 0.6% 。
2.4
DEAE-52 分离纯化
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
大枣粗低聚糖提取液经 DEAE - 52 纤维素初步 B、 C, 分离得到 3 个组分: A、 如图 1 所示, 所含总糖质 3.19 量相对于去核干制枣的质量分别为 10.83 ± 0.82 、 ± 0.43 、 0.67 ± 0.13mg· g - 1 。 可见大枣中低聚糖含量 并不高, 也可能是提取工艺对大枣低聚糖损失较大, 需要在今后的实验中进一步研究 。
2.2
还原糖的线性范围
图2 3 种大枣低聚糖组分过 Sephadex G15 凝胶柱层析洗脱曲线 Gel filtration chromatography of
[17 ] 还原糖的测定采用菲林试剂分光光度法 , 将 0.4 、 0.6 、 0.8 、 葡萄 糖 标 准 溶 液 稀 释 成 浓 度 为 0.2 、
1.0mg · mL - 1 的系列标准溶液, 进样在 420nm 波长下 mL - 1 测定并绘制标准曲线, 结果表明在 0.2 ~ 1.0mg· · mL - 1 ) 与吸光度值 y 呈 浓度范围内, 标品浓度 x ( mg 2 线性方程为 y = 现出良好的线性关系 ( R = 0.9955 ) , 0.2495x-0.0014 。
低聚糖又称为寡糖, 是由 2 ~10 个单糖组成的糖 类。功能性低聚糖含热量低, 有利于人体肠道内双 有调节肠道, 促进钙的吸收等生理功 歧杆菌的增加, , 能 适合于做各类功能性食品的配料。 尽管功能性 低聚糖广泛存在于自然界中 , 常见的蔬菜水果中低 [1-4 ] 。 目前低聚糖分离纯化 聚糖的含量却非常有限 、 微生物发酵法 、 膜分离法 [8 ] 以及色谱柱分离法 等。前二者为化学提纯法 , 能利 用生物技术消耗掉小分子糖, 但操作复杂成本偏高。 纳滤是上世纪 80 年代中后期出现的一种新型压力 驱动膜分离技术, 对于分子量介于 200 ~ 2000u 及以 上的有机物具有良好的截留性能 , 对单价盐离子和 并且在应用中 具有 小分子物质的截留率相对较低, 节能高效、 低污染、 可连续生产、 操作简单、 过程无相变 等优点, 被广泛用于水处理及生物制品的浓缩过程。
2.6
2.6.1
平均分子量的测定
聚乙二醇标准曲线
实验选用葡萄糖、 蔗糖以 1000 、 6000 , 及不同分子量的聚乙二醇 800 、 通过高效凝
胶色谱分析, 以保留时间 t ( min ) 为横坐标, 以分子量 Mw( u ) 的常对数 lgMw 为纵坐标得到标准曲线方程
2 lgMw = -2.0325t + 30.450 , 相关系数 R = 0.9905 。
Fig.2
3 various oligosaccharide on Sephadex G15 column by elution with distilled water 注: a: A 组分洗脱曲线; b: B 组分洗脱曲线; c: C 组分洗脱曲线。
由图 2 可以看出, 组分 C 出峰时间较组分 B 和 组分 A 早, 分子量最大, 曲线陡, 分级效果最好。 组 B A , 分 和组分 的出峰时间晚 且峰形几乎重叠, 说明 这两个组分的分子量偏小且比较接近 , 其具体的分 子量数值需要进一步分析测定 。
Isolation and purification of 3 oligosaccharides from Ziziphus Jujube dates
2, * ZHAO Zi- qing1 , LIN Qin- bao1 , , YUAN Chao1 , LI Peng- fei1
( 1.Institute of Applied Chemistry, Shanxi University, Taiyuan 030006 , China; 2.Packaging Engineering Institute, Jinan University, Zhuhai 519070 , China) Abstract: Oligosaccharides from Ziziphus Jujube are natural oligosaccharides with high nutritional value. The crude membrane separation. The oligosaccharides were obtained from Ziziphus Jujube dates by hot water extraction, oligosaccharides fractions were purified by gel chromatography after DEAE-52 anion- exchange chromatography. According to HPLC analysis, the average molecular weight of the oligosaccharides was estimated. The average 334 , 1459 u. molecular weights of oligosaccharides were estimated to be 543 , Key words: Ziziphus Jujube date; oligosaccharide; nano- filtration; separation; purification 中图分类号: TS201.1 文献标识码: A 文 章 编 号: 1002-0306 ( 2013 ) 23-0101-04 为原料, 结合膜分离以及色谱柱分离方法, 优化操作条 分离纯化得到大枣功能性低聚糖, 为大枣低聚糖的 件, 功能性产品实现工业生产提供参考。
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2013.23.086
三种大枣低聚糖的分离纯化
1 1, 2, * 1 1 , 赵子青 , 林勤保 原 超 , 李鹏飞 ( 1. 山西大学应用化学研究所, 山西太原 030006 ; 2. 暨南大学包装工程研究所, 广东珠海 519070 )
摘 要: 大枣低聚糖是天然低聚糖, 具有很好的营养价值。本实验将大枣水提液通过膜分离得到大枣粗低聚糖 , 再经 DEAE 纤维素、 Sephadex G-15 凝胶柱层析进一步分离纯化, 得到 3 种大枣低聚糖组分, 并用高效液相色谱法测定平均 334 、 1459u。 分子量分别为 543 、 关键词: 大枣, 低聚糖, 纳滤, 分离, 纯化
-1
图 1 DEAE-52 纤维素层析柱纯化大枣粗低聚糖 Fig.1 DEAE-52 Cellulose anion-exchange chromatogram of various oligosaccharide fractions
2.5
Sephadex G-15 分离纯化
B、 C 分别过 Sephadex G- 15 层析柱, 组分 A、 见 过凝胶色谱柱分离纯化后, 相对于过 DEAE-52 图 2, B、 C, 纤维素分离得到的粗低聚糖组分 A、 其得率分 64.2% ± 7.3% 、 40.3% ± 5.7% 别为 78.4% ± 5.6% 、 ( 以总糖计) 。
1.3
大枣粗低聚糖的分离纯化
14 ] , 根据文献[ 取大枣粗低聚糖溶液 15mL ( 可 溶性固形物含量为 4% ) , 上 DEAE-52 纤维素层析柱 ( 2.6cm × 30cm ) , 先用 200mL 蒸馏水进行洗脱, 再 -1 0.3mol · L NaCl 溶液进行分段梯度洗脱, 部分 用 0.1 、 5mL / 管, · min 。 分光光度 收集器收集, 流速为 lmL 计测定 总 糖 含 量, 得 到 三 个 组 分 分 别 过 Sephadex G-15 凝胶层析柱( 1.6cm × 80cm ) , 得到最终大枣低 聚糖产品。
1.4 条件
高效液相色谱法检测大枣低聚糖的分子量仪器
TM 15 ] , 根 据 文 献[ 色 谱 柱: Ultrahydrogel Linear -1 300 × 7.8mm, 美国 Waters 公司; 流速: 0.4mL·min ; 温 度: 35℃ ; 时 间: 60min ; 流 动 相: 超 纯 水; 进 样
[9 ] 有研究表明 , 采用纳滤技术可达到与高效液相色谱 ( HPLC) 法同样的效果, 甚至在很高的浓度区域内实
1
1.1
材料与方法
材料与仪器
大枣水提原液 本研究室自行制得 ( 大枣品种 分析纯, 上海中邦化工
的方法主要有酶法
[5 ]
[6 ]
[7 ]
为临县木枣, 水提原液由热水浸提得到, 可溶性固形 物的含量为 67.5% ) ; 苯酚 厂; 浓硫酸 石酸钾钠 800 分析纯, 天津市化学试剂厂; 硫酸铜、 酒 分析纯, 成都市科龙化工试剂厂; 葡聚糖 美国 Pharmacia 公司; 聚乙二醇
蔗糖的分离和精制。 现三糖以上的低聚糖同葡萄糖、 纳滤的这些特性正适合于高品质低聚糖的生产, 近年 来, 已有研究者采用纳滤技术分离纯化或浓缩各种低 [10-11 ] 。大枣有很高的营养价值和保健作用, 聚糖溶液 而且富含功能性糖分
收稿日期: 2013-04-08
[12 ]
。本实验以大枣水提浓缩汁
* 通讯联系人
量: 50 μL。
2
2.1
结果与分析
总糖的线性范围
[16 ] 总糖的测定采用苯酚 - 硫酸法 , 将葡萄糖标准 10 、 20 、 30 、 40 、 60 、 80 、 100 μg · mL - 1 的 溶液稀释成浓度为
系列标准溶液, 进样在 490nm 波长下测定并绘制标准 · mL - 1 浓度范围内, 结果表明在 10~100 μg 标品浓 曲线, -1 x ( g mL ) y 度 μ 与吸光度值 呈现出良好的线性关系 ( R2 = 0.9950 ) , 线性方程为 y = 0.0098x -0.0002 。
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