转EB病毒BLLF1基因小鼠的SPF级净化
EB病毒膜抗原BLLF1基因在转基因小鼠中的表达
EB病毒膜抗原BLLF1基因在转基因小鼠中的表达郭长占;韩文龙;潘秀芳;周为民;谷淑燕;田枫;刘斌;高晓明【期刊名称】《北京医科大学学报》【年(卷),期】2000(32)4【摘要】目的 :分析EB病毒膜抗原 (membraneantigen ,MA)BLLF1基因在转基因小鼠外周血淋巴细胞中的表达。
方法 :EB病毒膜抗原BLLF1基因转基因首建鼠4只 ,尾组织经PCR检测携带有BLLF1基因 ,用流式细胞仪分析MA在外周血淋巴细胞中的表达并用激光共焦显微镜确定MA在细胞中的表达部位。
结果 :4只首建鼠中有 2只KM Tg EBV1和KM Tg EBV5外周血淋巴细胞中有MA的表达 ,表达部位在细胞浆中和细胞膜上。
结论【总页数】3页(P326-327)【关键词】E-B病毒;膜抗原;BLLF1基因;转基因动物;表达【作者】郭长占;韩文龙;潘秀芳;周为民;谷淑燕;田枫;刘斌;高晓明【作者单位】北京大学;中国预防医学科学院病毒学研究所【正文语种】中文【中图分类】R392.11【相关文献】1.EB病毒膜抗原BLLF1基因转基因小鼠的制备 [J], 郭长占;周为民;潘秀芳;谷淑燕;田枫;刘斌;王兆绰;高晓明2.EB病毒膜抗原基因BLLF1转基因首建鼠的组织病理学和免疫组织化学研究 [J],潘秀芳;刘斌3.用显微注射法制备携带Epstein-Barr病毒膜抗原基因--BLLF1的转基因小鼠 [J], 潘秀芳;刘斌;郭长占;田枫;王兆绰4.EB病毒膜抗原的表达致转基因小鼠发生淋巴瘤的观察 [J], 郭长占;周为民;韩文龙;谷淑燕;田枫;高晓明5.应用荧光原位杂交检测EB病毒BNLF-1基因在转基因小鼠子代染色体上的整合及其定位 [J], 苗聪秀;卢光秀;王庸晋;谢奕因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
27096693_《活动性结核病患者免疫功能状态评估和免疫治疗专家共识(2021年版)》免疫辅助治疗
等$差异导致机体不能很好地激活固有免疫应答以 抵抗 QZS入侵&(-',巨噬细胞移动抑制因子基因差 异导致单核2巨噬细胞功能异常!肺泡内巨噬细胞吞 噬 QZS后形成不成熟的吞噬小体!并抑制巨噬细 胞活化%吞噬溶酶体成熟!使 QZS在巨噬细胞内长 期潜伏!随时可能激活而导致发病&(K2(4',作 为 调 理 素促进吞噬作用和增强补体作用的甘露聚糖结合植 物凝集素基因遗传缺陷会导致甘露聚糖结合植物凝 集素缺乏!而 易 使 结 核 病 感 染 复 发&(=',许 多 结 核 病 的罕见和常见遗传病因都会影响#]O2#免疫&(3'!如 程序性细胞凋亡(基因突变影响程序性细胞死亡蛋 白(#R@&F@766>%;>88%>7D?R@&D>'1(![$2($表达! 患者的淋巴细胞在分枝杆菌的刺激下只产生少量的 #]O2#!导致这些患者易患结核病&(H'!这些遗传因素 控制了宿主的免疫应答能力!决定了个体对 QZS 的抵抗力差异!也为结核病免疫辅助治疗提供了理 论基础!包括重组#]O2#的使用"肺泡巨噬细胞是 机体识别%吞噬%杀灭入侵 QZS 的重要免疫细胞" 然而 QZS感染机体后!可通过自身菌体成分%产物 阻断和抑制机体的免疫应答!逃避机体免疫系统的 监视和清除!产生免疫逃逸!从而长期潜伏于巨噬细 胞中!形 成 持 续 性 感 染"QZS 免 疫 逃 逸 机 制 有#($QZS 可 以 通 过 以 下 途 径 抵 抗 巨 噬 细 胞 的 杀 伤 作用-QZS诱导感染细胞组织蛋白酶的表达&(,'!阻 止吞噬溶 酶 体 的 成 熟!抑 制 吞 噬 体 与 溶 酶 体 的 融 合&(+'!抑制巨噬细胞的凋亡&-)'!诱导或抑制肺泡巨 噬细胞表达多种微小 <OG#6'<OG$!调控巨噬细 胞自噬过程!从而抑制巨噬细胞的自噬!增强 QZS 在巨噬细胞内的存活能力等&-(2--'"#-$QZS 通 过 抑制巨噬细 胞 的 抗 原 递 呈 作 用&-K'和 下 调 巨 噬 细 胞 对#]O2#刺激应 答 的 敏 感 性&-4'等 抑 制 抗 结 核 适 应 性免疫应答"#K$QZS 通过宿主泛素化系统抑制 宿主的免疫防御!诱导免疫逃逸&-='"合并各种基础 疾病#如合并艾滋病%糖尿病%尘肺病%恶性肿瘤等严 重疾病$!使用糖皮质激素%免疫抑制剂和化疗药物 等细胞毒性药物!以及营养不良等均会导致 QZS 感染者免疫功能低下"
抗黄曲霉毒素B1单链抗体基因克隆及其结构分析
抗黄曲霉毒素B1单链抗体基因克隆及其结构分析作者:马兰刘爱平王佳王小红来源:《南方农业学报》2017年第11期摘要:[目的]克隆构建黄曲霉毒素B1(AFB1)单链抗体(scFv)基因,并对其编码蛋白序列和结构进行分析预测,为scFv分子修饰改造及在免疫学检测中的应用提供参考依据。
[方法]以抗AFBl单克隆抗体杂交瘤细胞株为原料,通过PCR扩增重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),以(Gly4Ser),为柔性接头(Linker)拼接构建抗AFBlscFv基因,并采用在线生物信息学分析软件对其氨基酸序列、理化性质及蛋白结构进行分析预测。
[结果]抗AFBlscFv 基因全长744bp,编码248个氨基酸,分子量为26312.05Da,理论等电点(pI)5.70,其二级结构中含有35个α-螺旋(占14.11%)、28个β-折叠(占11.29%)、85个延伸链(占34.28%)和100个随机卷曲(占40.32%),在三级结构中连接肽卷曲将VH和VL区域牵拉而相互靠近,形成典型的抗体结构——沟槽结构,是scFv的抗原结合区域。
[结论]构建的抗AFBlscFv其VH含有117个氨基酸、VL含有116个氨基酸,具备典型抗体结构——沟槽结构,能与抗原特异性结合。
关键词:黄曲霉毒素B1(AFB1);单链抗体(scFv);重链可变区(vH);轻链可变区(VL);沟槽结构中图分类号:S859.87 文献标志码:A 文章编号:2095-1191(2017)11-2064-070引言[研究意义]黄曲霉毒素(Anatoxins,AFTs)是由黄曲霉(Aspergillusflavus)、寄生曲霉(A.parasiti-CUS)等真菌产生的有毒次级代谢产物,至今共发现20多种黄曲霉毒素及其衍生物(Delmulleeta1.,2005;李鑫等,2012a),其中以黄曲霉毒素B1(AFBl)的毒性最强,已被世界卫生组织癌症研究机构列为I类致癌物质(庄振宏等,2011)。
转基因、基因克隆与基因敲除技术
内切酶消化 线性化打靶载体
打靶载体
转染 基因组
纯合子小鼠 (基因剔除)
兄妹交配
杂合子小鼠
同源重组
正常小鼠
交配
杂合子小鼠
同源重组的胚胎干细胞
杂合子小鼠
植入
胚泡
假孕小鼠
黑色雌性大鼠
B 、 制 备 基 因 敲 除 动 物 ( 小 鼠 )
来自褐色大鼠
1、Neor (neomycin-resistance gene)基因:阳性 筛选标志,使细胞具有抵抗新霉素(G418)能力。
1号发生位点同源重组,在G418培养基中生长;
2号为随机插入重组,带入tk基因,可在G418培养基中生长,但 在gangcyclovir培养基中被杀死;
3号未发生任何重组,为正常细胞,在G418培养基中被杀死。
抵抗G418的基因 1 2 tk基因 3
B、制备基因敲除动物(小鼠)
1、将发生同源重组的胚胎干细胞导入来自黑色的小鼠胚泡 中(形成嵌合体胚胎,两套基因物质) 2、将胚泡植入假孕小鼠子宫中发育。 3、诞生出杂合的嵌合体小鼠,具黑毛和褐色毛,胚胎干细 胞来自褐色小鼠,正常胚胎来自黑色小鼠。 4、嵌合体小鼠与野生黑色小鼠交配,产生纯黑色与纯褐色 的后代小鼠,其纯褐色小鼠为杂合子,有一目的基因已被敲 除。 5、近亲交配,产生纯合子基因敲除小鼠(第四代)。
G418(也称遗传霉素)是一种氨基糖类抗生素,其结构与新霉 素、庆大霉素、卡那霉素相似,它通过影响80S核糖体功能而阻 断蛋白质合成,对原核和真核等细胞都有毒性 ,包括细菌、酵母、 植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。是稳定转染最常 用的选择试剂。当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方 后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产 物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含有 G418的选择性培养基中生长。G418的这一选择特性 ,已在基 因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应 用。
211126690_中国毛虾活性肽对免疫抑制小鼠免疫调节作用的影响
杨志艳,惠婷婷,祝宝华,等. 中国毛虾活性肽对免疫抑制小鼠免疫调节作用的影响[J]. 食品工业科技,2023,44(9):380−386. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022080148YANG Zhiyan, HUI Tingting, ZHU Baohua, et al. Effects of Peptides from Acetes chinensis on Immunoregulation in Immunocompromised Mice[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(9): 380−386. (in Chinese with English abstract).doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022080148· 营养与保健 ·中国毛虾活性肽对免疫抑制小鼠免疫调节作用的影响杨志艳1,惠婷婷1,祝宝华1,徐晨晨1,李 燕1,2,3,李晓晖1,2,3,*(1.上海海洋大学食品学院,上海 201306;2.上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海 201306;3.农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(上海),上海 201306)摘 要:本文以毛虾为原料,采用蛋白酶酶解获得毛虾活性肽,通过建立免疫抑制小鼠模型探究了毛虾活性肽对免疫抑制小鼠的免疫调节功能。
小鼠随机分为六组:正常对照组、模型组、阳性对照组以及低、中、高剂量组,其中剂量组分别灌胃0.25 g·kg −1 BW 、0.5 g·kg −1 BW 、1.0 g·kg −1 BW 毛虾活性肽。
结果表明,剂量组免疫抑制小鼠体重明显增加(P <0.05),免疫器官指数中的胸腺指数显著提高(P <0.05),此外,毛虾活性肽还促进了小鼠血清中免疫球蛋白(IgA 、IgG 和IgM )以及细胞因子(IL-2、IL-6和TNF-α)水平的提升(P<0.05),外周血白细胞总数基本恢复至正常水平,NK 细胞活性也显著增强(P <0.05)。
EB病毒早期基因BHRF1转基因小鼠纯合子建立及建系
E B 病毒早期基因 BHR F 1 转基因小鼠 纯合子建立及建系
吴国才1 , 王笑峰1 , 胡顺霞1 , 李欣2 , 罗兵1
( 山东 青岛 2 1 青岛大学医学院微生物学教研室 , 6 6 0 2 1; 2 上海市松江区疾病预防控制中心 )
[ 摘要 ] 早期基因 B 基因纯合子转基因小 B 病毒 ( E B V) a mH I B HR F 1) 目的 构建整合有 E -H 右 向 读 码 框 1( 将 转 基 因 小 鼠 与 正 常 小 鼠 交 配, 得到子代 F 鼠 。 方法 通过显微注射技术构建 B HR F 1 阳性首建鼠 F 0共1 6只, 1 小鼠 , 鉴定筛选 B 筛 P C R 技术检测子鼠鼠尾组织 D NA, HR F 1 阳性鼠 。 阳性 鼠 再 与 同 系 阴 性 鼠 杂 交 得 到 F 2小鼠, 选出 F 得到纯阳性 F 2 小鼠中的阳性鼠近交得 F 3 小鼠 。 筛选出 F 3小鼠 中 的 纯 阳 性 鼠 进 行 近 交, 4 小 鼠 。F 4小鼠 测序 结 果 经 b 再近交得到纯阳性 F 5 小鼠 。 结果 经 P C R 及测序证实 , F 4、 F 5 小鼠均为 B HR F 1 阳性鼠 , l a s t比 对 , 与B 并成功筛选出纯阳 性 B HR F 1 基因完全相同 。 结论 本实验首次建立了 B HR F 1 转基因鼠模型 , HR F 1转基因 为深入研究 B 小鼠 , HR F 1 的生物学特性及其在 E B V 相关肿瘤发生发展中的作用提供了理想的动物模型 。 [ 关键词 ] 人; 早期基因 B 小鼠 , 转基因 HR F 1; 疱疹病毒 4 型 , [ ( ) 中图分类号 ] 文献标志码 ] 文章编号 ] 3 3 2 [ 6 7 2 4 4 8 8 2 0 1 2 0 4 0 3 4 3 0 3 R A [ 1 - - -
IL-17A、自噬在肺部疾病中的研究进展
IL67A、自噬在肺部疾病中的研究进展郭小旭贺艳飞IC-17A是一种生物学功能丰富的细胞因子,由于在许多疾病的进展中起着至关重要的作用,因此一直是深入研究的重点。
自噬是一种普遍存在并可调节细胞生长、存活、发育和死亡的细胞代谢过程,越来越多的证据表明其与人类多种疾病密切相关,如肺部疾病、肝病、神经退行性疾病、肌病、心脏病等。
有研究表明自噬受到EW7A的调节。
既往研究多关注于EO7A或自噬分别对肺部疾病的影响,或IC-17A调控自噬在类风湿性关节炎及银屑病等疾病中的作用,而较少着眼于EW7A影响自噬进而对肺部疾病的调控。
本文综述了近年来EW7A影响自噬活性在肺结核、肺纤维化等方面的研究进展。
IP-17A生物学特征及功能白细胞介素甲7A(AteAeukinO7A,IP-17A)既往被报道为一种介导中性粒细胞发挥炎症作用和抗微生物的细胞因子,现在普遍认为其生物学功能十分丰富,在自身免疫性疾病、肿瘤及炎症的进展中起着关作,在细和的程中也至关重要,如肺结核、肺纤维化等疾病;同时,IC-17A已被证明极有利于宿主对抗胞外细菌和真菌引起的感染[1_2]o IC-17A是由Rouvier等人在转录水平上发现的,编码EW7A的基因位于染色体的6p12区域,人体IC-17A包含155个氨基酸,并且以二硫键连接的同型二聚体模式分泌[1,3] #EW7A是EW7家族中研究最广泛的成员,EO7家族是具有高度保守C末端结构(包含半胱氨酸结折叠结构)的一组蛋白质⑷。
EW7细胞因子及其受体家族由6种蛋白质(IC-17A至IC-17F)和5种受体(IP-17RA至IC-17RE)组成[5]#IC-17A及EW7F由多doi:10.3969/周ion.1009-6663.2021.01.033基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.81460008.82060005);省长资金(CP00)遵义市科学技术局:遵市科合社字(2018)71作者单位:563000贵州遵义,遵义医科大学附属医院呼吸内科通信作者:欧阳瑶,E-mail:ouyangyao116@ 姚培学欧阳瑶种类型的免疫细胞分泌,而EN7B、EO7C及IC-17D主要由上皮细胞来源#有许多研究表明,IC-17A主要来源于CD4+T细胞、CD8a T细胞、'T细胞、固有淋巴细胞(ILC)和自然杀伤T细胞(NKT);然而在某些情况下,除T细胞外,嗜中性粒细胞也会产生ICN7A[6-7+。
转基因动物
• 问题:如何避免不理想的结果?
第二阶段:转基因 与内源基因同源重组。
1987年,美国北卡罗莱纳大学Smithies和犹他大学 Capecchi领导的研究小组根据同源重组的原理,实现了导 入的外源基因的定点整合,这一技术亦称为“基因打 靶”(gene targeting).基因打靶技术的应用,一方面可以使 导入的外源基因定点整合于人们希望整合的部位,从而避 免了外源基因随机整合对内源基因的影响。另一方面,人 们还可以利用基因打靶技术定点灭活一个内源基因,亦称 为“基因敲除”(gene knockout)。因此基因打靶技术为在 整体水平研究某一基因的功能以及进行基因治疗开辟了新 的途径。 问题:基因的整合有没有组织特异性?
转基因技术与基因功能的研究
转基因动物技术建立以前研究基因 的功能是将外源基因导入原核细胞或 真核细胞来进行。 但基因在离体单个细胞中的功能并 不一定能代表基因在整体中的功能。 因为在一个复杂的动物个体中,众多 的基因彼此之间在功能上并不是孤立 的,而是相互关联、相互影响的。而 且一个基因在单一细胞中的表达究竟 会对整个机体的生理功能产生什么作 用也必须在整体水平上来研究。
2007年诺贝尔生理学或医学奖
• 北京时间2007年10月8日下午5点30分,2007年诺贝尔 生理学或医学奖揭晓,美国犹他大学Eccles 人类遗传 学研究所科学家Mario R. Capecchi 、美国北卡罗来纳 州大学教会山分校医学院教授Oliver Smithies 与英国 科学家卡迪夫大学卡迪夫生命科学学院Martin J. Evans因干细胞研究获得此奖项。 • 今年的三位诺贝尔奖获得者是由于在胚胎干细胞和哺 乳动物的DNA重组方面的开创性成绩而获奖。由于他 们的发现,产生了一种名为“小鼠中的基因打靶”的 技术。这项技术极其有用,目前已经被广泛应用在几 乎所有生物医学领域——从基础研究到新疗法的研制。
EB病毒转化外周血B淋巴细胞建永生细胞系的四种方法探讨
[2]黄小义,刘岸,于呖,等.中国 10 个民族永生细胞系的建立与
保存[J]援遗传 HERED~ AS(Beijing),2002(24):643-645.
[3]N eitzel H 援A r o utine m ethod for the establishm ent of
permanent growing lym phoblastoid cell lines援 H um Genet,
特定的疾病基因组资料成为可能。
EB 病毒是一种高效率的转化病毒,它的靶细胞仅限于人类
的 B 淋巴细胞,对其它类型的细胞没有感染的危险性[4]。利用
EB 病毒转化人类外周血细胞使成为具有永生化特性的 LCL 用
保存人类全基因组完全可以的。本文进一步证实,微量全血法
和全血冻存法适合于短时间内采集大样本量采集、储存然后逐
荡,以避免溶血。
保存备用。CyA 液:,环孢霉素 A (Cyclosporine A ,CyA )购自北
1.2 材料
京索菜宝科技有限公司,用无血清培养基稀释成 0.2mg/ml,使用
R PM I-1640 (Biosharp 北京),淋巴细胞分离液购自天津市 时最终浓度为 2ug/ml。
灏洋生物制品科技有限责任公司,环孢霉素 A (Cyclosporine A
冻存全血法:取抗凝全血 0.5ml,加入 1ml 细胞冻存液,混合
器、水平式离心机、超纯水仪、电子天平、恒温水浴箱、普通冰 后置低温冰箱(-40℃),2 天之后移至液氮中。细胞冻存一周以
箱、超低温冰箱、液氮保存罐和转运罐。
上后 分批 在 37℃ 水 浴 快 速 复 苏,转 入 T-25 培 养 瓶 中,8ml
1.5.3 外周血淋巴细胞的分离:取 3-5ml 肝素抗凝血,加倍
屋尘螨特异性免疫治疗抑制IgE易化变应原结合的检测方法的建立和验证
建立和验证特异性免疫治疗用于治疗变应性鼻炎已在很多地方得以开展,并获得良好的临床效果。
特异性免疫治疗可诱导机体发生一系列免疫学改变,包括抗体反应和细胞反应,其中血清特异性IgG4被认为是特异性免疫治疗诱导产生的抑制性―封闭抗体‖的主要成分。
但是,任何单一的免疫学产物表达水平的检测都不能令人信服地解释特异性免疫治疗所带来的临床改善,亟需找到一种综合反映特异性免疫治疗诱导的血清抗体抑制功能的生物学标记。
IgE易化变应原提呈(IgE-facilitated allergen presentation, FAP)涉及到变态反应发生的多个环节和方面,而特异性免疫治疗能够抑制这一过程。
其体外实验可以简化为IgE易化变应原结合(IgE-facilitated allergen binding, FAB)实验,后者可被一种基于流式细胞术的简单方法检测到。
变应原与含高浓度特异性IgE的血清共同孵育,形成变应原-IgE复合物,再经Fc段与EB病毒转化的B细胞的表面IgE低亲和力受体结合后,即可被流式细胞术检测到。
加入特异性免疫治疗后血清,变应原-IgE复合物的形成及其后与B细胞的结合受到抑制,在流式细胞术中则表现为结合有复合物的B细胞百分率下降,即特异性免疫后血清治疗可以抑制FAB,而且,这种抑制程度与特异性免疫治疗所导致的临床改善程度直接相关,使得特异性免疫治疗后血清对FAB的抑制活性成为提示特异性免疫治疗临床疗效的良好生物标记。
本研究严格按照International Conference on Harmonisation (ICH)的实验方法学建立指南,临床应用验证。
分析发现该检测方法有着较小的批内和批间变异,重复性好,同时有着良好的敏感度、线性度和稳健性,临床敏感性和特异性高,是一种监测特异性免疫血清抑制活性的良好生物学标记,对提示特异性免疫性治疗效果有着重要指导意义。
SPF鸡与BALABc小鼠体内流感病毒唾液酸受体组织分布的差异性分析中期报告
SPF鸡与BALABc小鼠体内流感病毒唾液酸受体组织分布的差异性分析中期报告
这篇中期报告是对SPF鸡和BALB/c小鼠在体内流感病毒唾液酸受体的组织分布进行差异性分析的研究。
首先,我们将SPF鸡和BALB/c小鼠分别感染了H1N1亚型的流感病毒,并于感染后不同时间点进行了动物组织采集和处理。
针对采集的组织进行了唾液酸抗体染色,并进行了组织切片和荧光显微镜检查。
结果显示,SPF鸡和BALB/c小鼠的唾液酸受体在感染后的时间点上有较大的差异性,其中BALB/c小鼠在感染后的早期阶段(1天和3天)唾液酸受体表达水平明显高于SPF鸡,而在感染后的晚期阶段(7天和14天)唾液酸受体表达水平则逐渐下降,与SPF鸡表达水平相近。
其次,我们还对两种动物的不同组织部位进行了比较分析。
结果显示,BALB/c小鼠的肺部组织唾液酸受体表达水平明显高于SPF鸡,而SPF鸡的肠道组织唾液酸受体表达水平则明显高于BALB/c小鼠。
综上,这项研究揭示了SPF鸡和BALB/c小鼠在体内流感病毒唾液酸受体的组织分布存在差异性,这也可能解释了不同物种对流感病毒感染的敏感性和抗性的差异。
后续研究将继续深入探究唾液酸受体与免疫反应、病毒侵染等方面的关联,以加深对流感病毒感染和传播的理解。
SPF级KM小鼠主要脏器重量和血液生化值的测定
SPF级KM小鼠主要脏器重量和血液生化值的测定夏介英;雷培琪;曾晓兰;李鹤【期刊名称】《四川生理科学杂志》【年(卷),期】2009(031)003【摘要】目的:建立本实验动物中心SPF级KM小鼠主要脏器,血液及血生化等指标的背景资料,并分析比较雌雄之间的差异.方法:(1)选取同日龄出生的SPF乳鼠200只,雌雄各半,分别在28、56、114日龄时随机抽取60只(雌雄各半),活体称重,依次剖取心、肝等主要脏器器官称重,计算脏器系数.(2)同时采集28日龄SPF小鼠60只(雌雄各半)的血液,作血液学和血生化测定.结果:(1)同期雌、雄小鼠的心、肝、肺、肾、胸腺脏器系数差异显著(P<0.01);随着日龄增长心、肝、脾、肾、肾上腺和胸腺系数变小,但睾丸、附睾、卵巢和子宫系数增大.(2)28日龄雌、雄小鼠血液学检查表明HCT和PLT有差异(P<0.05);血生化检测表明ALT、AST、AKP、GLU、TG之间差异不显著(P>0.05),但CRE、TC、BUN结果差异显著(P<0.01).结论:性别因素对脏器重量、脏器系数以及血液、血生化指标都有一定的影响.【总页数】4页(P104-107)【作者】夏介英;雷培琪;曾晓兰;李鹤【作者单位】四川省中医药科学院,成都,610041;四川省中医药科学院,成都,610041;四川省中医药科学院,成都,610041;四川省中医药科学院,成都,610041【正文语种】中文【中图分类】R-332【相关文献】1.新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之六--SPF级Wistar大鼠血液生化参考值的建立 [J], 齐云;蔡润兰;王敏;宋杨;刘彬;李永超;赵德明2.新药长毒试验动物血液生化测定规范化研究系列之五--SPF级SD大鼠血液生化参考值的建立 [J],3.SPF级昆明小鼠血液生化值的测定 [J], 李雯雯;黄颖;黄敏慧;苏乔4.老龄Wistar大鼠脏器重量及血液生化值测定 [J], 李善如;王冬平5.BALB/c-HSF_1 Knockout小鼠的主要脏器重量、脏器系数及主要血液生化指标的测定 [J], 汤百争;刘惺;马亚东因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
EB病毒BNLF-1基因的分子生物学研究进展
EB病毒BNLF-1基因的分子生物学研究进展
马先勇;曹亚;姚开泰
【期刊名称】《生物化学与生物物理进展》
【年(卷),期】1997(24)5
【摘要】位于EB病毒基因组U5 TR区内的BNLF 1基因 ,其转译产物为潜伏膜蛋白 (latentmembraneprotein1 ,LMP 1 ) ,由于LMP 1可以导致细胞转化并在EB 病毒致癌过程中具有重要作用 ,因而成为近年来EB病毒分子生物学及相关肿瘤如人鼻咽癌、伯基特淋巴瘤、何杰金氏病等疾病病因发病学研究的热点 ,并取得了一批有重要意义的成果 ,文章从BNLF 1的基因结构及表达调控 ,LMP蛋白的结构及生化功能 ,LMP 1的生物学功能和LMP 1研究进行评述 .
【总页数】6页(P409-414)
【关键词】EB病毒;BNLF-1基因;疱疹病毒;分子生物学
【作者】马先勇;曹亚;姚开泰
【作者单位】湖南医科大学肿瘤研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R373.11
【相关文献】
1.EB病毒BNLF-1基因在恶性血液病的表达及临床意义 [J], 马旭东;林为澄;郑瑞玑;吴文乔;游慧萍;陈丽丽;陈元仲
2.EB病毒BNLF-1基因在淋巴瘤和急性白血病的表达及临床意义 [J], 马旭东;陈元
仲;林为澄;郑瑞玑;吴文乔;游慧萍
3.EB病毒BNLF-1基因转基因小鼠整合位点FISH检测的研究 [J], 苗聪秀;卢光琇;李晨霞;李娜;魏武;贾书花;王炯
4.应用荧光原位杂交检测EB病毒BNLF-1基因在转基因小鼠子代染色体上的整合及其定位 [J], 苗聪秀;卢光秀;王庸晋;谢奕
5.EB病毒BNLF-1基因研究的新进展 [J], 蓝轲
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免疫磁珠分选法原代培养小鼠肺微血管内皮细胞
免疫磁珠分选法原代培养小鼠肺微血管内皮细胞周玲萍;冯成;汤雪斌;徐红蕾【期刊名称】《温州医科大学学报》【年(卷),期】2016(046)008【摘要】目的:探讨一种高效、稳定的小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)原代培养方法。
方法:选取45只1周龄Balb/c小鼠,随机分成3组,分别用酶消化法、组织贴块法、免疫磁珠分选法3种方法分离培养小鼠PMVECs,观察细胞形态学以及VIII因子相关抗原免疫荧光染色鉴定内皮细胞,计算各组原代培养成功率及从原代培养开始到首次传代所需时间,测定细胞纯度,MTT法绘制生长曲线。
结果:3组原代培养的细胞在倒置显微镜下均能见到短梭形、多边形的微血管内皮细胞,血管内皮细胞特异性标志物VIII因子相关抗原表达阳性。
免疫磁珠分选法组原代培养成功率及细胞活性显著高于其他2组,差异有统计学意义(P〈0.01),从原代培养至首次传代所需的时间短于组织贴块法组,差异有统计学意义(P〈0.05),细胞纯度显著高于酶消化法组,差异有统计学意义(P〈0.01)。
结论:相比于酶消化法与组织贴块法,免疫磁珠分选法原代培养小鼠PMVECs具有重复性好,分离速度快,细胞纯度高及活性好的优点。
【总页数】4页(P590-593)【作者】周玲萍;冯成;汤雪斌;徐红蕾【作者单位】温州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科,浙江温州325015【正文语种】中文【中图分类】R331【相关文献】1.免疫磁珠分选法原代培养小鼠肺微血管内皮细胞2.免疫磁珠法分选小鼠肝脏Kupffer细胞及其特性观察3.小鼠肺微血管内皮细胞磁珠分选法分离和原代培养4.免疫磁珠法结合条件培养基进行低密度条件下的神经元原代培养5.原代小鼠肺微血管内皮细胞的培养及鉴定因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
蛋白质组学筛选沙眼衣原体感染依赖性免疫优势抗原
蛋白质组学筛选沙眼衣原体感染依赖性免疫优势抗原陆春雪;彭波;陈超群;孙豫辉;栾秀丽;伍海英;孙珍洁;彭昕珂;吴移谋【期刊名称】《中国免疫学杂志》【年(卷),期】2018(34)11【摘要】目的:采用蛋白质组学方法筛选沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)感染依赖性免疫优势抗原.方法:将纯化的Ct D型标准株EB经紫外线照射制备UV-EB,然后将未经处理的活EB和紫外线处理的UV-EB分别感染体外培养的HeLa细胞,间接免疫荧光法检测紫外线对EB的灭活效果;分别将低剂量活EB滴鼻感染小鼠或将较高剂量UV-EB经肌肉接种免疫小鼠,首先检测两种接种方式下Ct在体内的增殖情况,然后收集两组小鼠的血清,分别与Ct D型全基因组908个开放读码框编码的GST-Ct融合蛋白进行ELISA反应,蛋白质组学筛选仅与活EB感染组小鼠血清反应且反应频率高的Ct感染依赖性免疫优势抗原;最后用筛选到的抗原体外刺激Ct生殖道感染小鼠的脾细胞,ELISA法检测细胞因子IFN-y的产生情况.结果:经紫外线灭活的UV-EB体外不能感染HeLa细胞,肌肉接种免疫小鼠后也不能在小鼠肌肉组织内增殖,而活EB滴鼻感染组小鼠的肺组织中可检出大量的Ct;活EB滴鼻感染组小鼠与UV-EB肌肉接种免疫组小鼠的血清抗Ct抗体滴度差异无显著统计学意义;将两组小鼠血清分别与Ct全基因组编码的蛋白反应,通过蛋白质组学方法共鉴定出60个抗原能被至少1份小鼠血清识别;22个抗原能同时被两组或任一组血清以≥50%的频率识别,为Ct免疫优势抗原,其中5个抗原仅被活EB滴鼻免疫组血清优势识别,即为Ct感染依赖性免疫优势抗原;该类抗原体外刺激小鼠脾细胞,能诱导良好的Th1型细胞免疫回忆应答.结论:筛选获得了Ct D型感染依赖性免疫优势抗原,为Ct亚单位疫苗研究提供了新的研究靶标.【总页数】6页(P1684-1689)【作者】陆春雪;彭波;陈超群;孙豫辉;栾秀丽;伍海英;孙珍洁;彭昕珂;吴移谋【作者单位】南华大学医学院病原生物学研究所,衡阳421001;南华大学医学院肿瘤研究所,衡阳421001;南华大学医学院病原生物学研究所,衡阳421001;南华大学医学院病原生物学研究所,衡阳421001;南华大学医学院病原生物学研究所,衡阳421001;南华大学医学院病原生物学研究所,衡阳421001;南华大学医学院病原生物学研究所,衡阳421001;南华大学医学院病原生物学研究所,衡阳421001;南华大学医学院病原生物学研究所,衡阳421001【正文语种】中文【中图分类】R392.7【相关文献】1.沙眼衣原体pORF5质粒蛋白免疫优势片段的筛选与鉴定 [J], 何战胜;邹燕;粟胜梅;雷文波;李忠玉2.雄激素依赖性和雄激素非依赖性前列腺癌差异膜抗原的筛选 [J], 张晓波;唐正严;齐琳;陈合群;罗启占3.泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清抗衣原体免疫优势蛋白抗体检出率研究 [J], 刘东明;施瑾4.人血白蛋白免疫优势抗原表位的筛选及鉴定 [J], 李婷婷;修冰水;郭兴道;张癸荣5.用免疫蛋白质组学技术筛选烟曲霉分泌蛋白中的免疫优势抗原 [J], 史利宁;李芳秋;孔小祥;王仕钦;黄梅;邵海枫因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
维生素A对C_(57)BL小鼠黑色素瘤肺转移的影响及其机理研究
维生素A对C_(57)BL小鼠黑色素瘤肺转移的影响及其机理
研究
程洁;姚立人
【期刊名称】《中国药理学通报》
【年(卷),期】1991(7)4
【摘要】本研究从免疫学角度观察了维生素A(V-A)对肺泡巨噬细胞(Mφ)功能的影响和体内抗肿瘤血道肺转移的作用。
实验结果显示,V-A处理后小鼠肺泡Mφ细胞毒活性及其细胞表面补体C_3b受体功能均有所增强,小鼠肿瘤血道肺转移减少,且两者之间有较好的相关性。
【总页数】4页(P293-296)
【关键词】维生素A;肿瘤转移;肺泡MФ
【作者】程洁;姚立人
【作者单位】安徽医科大学病生教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R979.1
【相关文献】
1.海参皂苷Echinoside A和Ds-echinoside A对C57BL/6小鼠黑色素瘤B16自发性肺转移的影响 [J], 赵芹;薛长湖;杨玉红;薛勇;王玉明;李兆杰
2.维生素A对C57BL小鼠黑色素瘤肺转移的影响及其机理研究 [J], 程浩
3.鲨鱼软骨提取对物C57BL6/J小鼠B16黑色素瘤肺转移的影响 [J], 吕家本;蒋
定文
4.鲨鱼软骨提取物对C<sub>57</sub>BL/6J小鼠B<sub>16</sub>黑色素瘤肺转移的影响 [J], 吕家本;蒋定文;于志洁;蔡平;徐惠;魏红军;苏福强
5.亚麻木酚素抑制C_(57)BL/6小鼠Lewis肺癌生长及肺转移 [J], 郑书国;杨慧;王宏婷;杨解人
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EBV转化的人B淋巴母细胞和人B淋巴细胞杂交瘤细胞表面标记表达的研究
EBV转化的人B淋巴母细胞和人B淋巴细胞杂交瘤细胞表面标记表达的研究朱勇;金伯泉;赵宁;刘雪松;黄传书【期刊名称】《单克隆抗体通讯》【年(卷),期】1995(11)2【摘要】本文用碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化染色技术,对EB病毒(EBV)转化的人B淋巴母细胞(LCL)、人B淋巴细胞杂交瘤以及它们的亲本骨髓瘤细胞系的部分表面标记进行了检测。
结果显示,人B淋巴细胞在EBV转化或杂交过程中表面标记发生了较大的变化;对LCL和杂交瘤细胞表面标记的检测可能为探寻人B细胞在这些过程中染色体保留或丢失的规律提供一种手段。
此外,LCL及人B细胞杂交瘤细胞系有可能被用作一种新的模型,来研究人B淋巴细胞的分化和功能。
【总页数】4页(P1-4)【关键词】表面标记;B细胞;杂交瘤;APAAP;E-B病毒【作者】朱勇;金伯泉;赵宁;刘雪松;黄传书【作者单位】第四军医大学免疫学教研室【正文语种】中文【中图分类】R392-33【相关文献】1.EB病毒转化的人B淋巴母细胞低密度培养条件的研究 [J], 孙忱;金伯泉2.EBV转化B淋巴细胞中丙型肝炎病毒抗原表达的免疫组化研究 [J], 程计林;耿直;仝文斌;范涛;高建恩;马文彬;冯百芳3.富硒米提取液对EB病毒转化脐血B淋巴细胞及EBV早期抗原表达的影响 [J], 简少文;梅承恩;梁永能;李端;陈巧伦;罗慧玲;李永强;蔡体育4.EBV转化的人乳头瘤病毒感染者B淋巴母细胞系的建立及应用 [J], 王雪莲;王佐周;安春丽;宋阳5.气功“外气”对人外周血淋巴细胞的体外效应初探——对淋巴母细胞转化率、总E花环及活性E花环的影响 [J], 叶明;沈家麒;杨远景;范钰芬;刘桂贞;吴晓红因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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胞, 显然 M A与宿主细胞受体的结合在淋 巴细胞的 活 化 中具 有 重要意 义 。为 了探 讨 E B病毒 感 染 和人
类 免疫 系统 疾 病 的关 系 , 别是 E 特 B病 毒 膜 抗 原 在
术后 处 理 : S F级 的 代 乳 母 的仔 鼠取 出 , 将 P 操
这一过程中的作用 , 长 占等 用 E 郭 B病毒膜抗原 B L F 基 因制 备 了转 基 因小 鼠。 限 于转 基 因小 鼠 L 1 制备 时的条件 , 转 基 因小 鼠模 型是 用 普 通 级 昆 明 该
E 病 毒 是 人 群 中普 遍 感 染 的病 毒 , 次 感 染 B 初 后 大 多数人 可转 为 终 生潜 伏 感 染 。E B病 毒 在 感 染 宿主细 胞时 , 先 是病 毒外 膜 上的膜抗 原 ( e — 首 m m baeate ,MA)与 宿 主 细 胞 膜 上 的 受 体 C 2 rn ni n g R (D 1 C 2 )结合 , 后经 胞饮 进入 宿 主细胞 。E 然 B。( ) 乳 鼠 : ,P 2代 2只 S F级 ,
1 4周龄 , 由北 京 大学 实验 动物科 学 部 提供 。 1 2 操 作 方法 . 把 经 颈 椎 脱 臼 法 处 死 后 的 孕 鼠 放 入 0 29 . 6 m lL 氧 乙 酸 中 , 泡 3 S 置 于蜡 盘 上 , 大 头 针 o 过 / 浸 , 用
M 是 相对分 子 质量约 为 2 0 3 0 A 20 0— 40 0的糖 蛋 白
1 13 动 物 ( ) .. 1 剖产 鼠 : B病 毒 址 基 因转 E
基 因小 鼠 4只 , 通 级 ,2周 龄 , 别 于 2 0 普 1 分 0 5年 3
月1 7日、8日、9日和 2 日见阴道 栓 , 1 1 0 由北 京 大 学
2 结果
胎作 为一种 生物 净 化方 法 , 有 效 提 高 实 验 动 物 微 是 生物学 质量 的重 要 手 段 。 因此 ,P S F化 后将 进 一 步 提高该 转基 因小 鼠在 生物 医学研 究 中 的应 用价 值 。
1 材 料与 方法
剖 宫取 出仔 鼠 9只 , 离乳 存活 4只 , 乳母 哺乳 代 仔 鼠的平均 离乳 成 活率 为 4 . % ;P 44 S F种 群建 立 后 统计 l O窝共 产 下 8 4只仔 鼠 , 均 产 仔 只 数 为 8 4 平 . 只 , 均 离 乳 只数 为 8 4只 , 均 离 乳 率 为 10 ; 平 . 平 0% 观 察 SF环境 条件 下 饲养 的小 鼠 6 P O只 , 发现雌 性 小
( M) 鼠制备 的 。普通 级 实 验 动 物不 能 排 除一 些 K 小 对 实验研 究结 果影 响较 大 的细菌 、 毒 , 其是 对 免 病 尤 疫 学研 究结 果 的影 响 。随着 我 国实验 动 物标 准要求 的提 高 , 该 转 基 因 小 鼠的 无 特 定 病 原 体 (pc l 对 sei a
p toe e , P ) 就 具 有 重 要 意 义 了。剖 宫取 a g nf e S F 化 h r
作人员将其用一只手仰卧固定 , 另一只手在其下腹
部加 压 , 手法 既轻 柔 又有力 , 当增加 的压力 使实 验 动
物膀 胱括 约 肌松 弛 时 , 液会 自动流 出 , 其尿 液涂 尿 将 抹在 已变 成 肉红 色 的 剖 产仔 鼠身 上 , 般 1只仔 鼠 一 的尿 液 可涂 抹 2只 以 上 的仔 鼠 ; 成 活仔 鼠放 人上 将 述代 乳母 鼠窝 中 ( 此代乳 母 鼠于剖 腹产 的前 1~ 将 2 d换 好窝 , 且将 水 、 料加 足 ) 一 般术 后 1周 内不 宜换 , 窝、 加水 、 料 , 加 以免惊 吓代 乳母 鼠 。
・
短 篇 论 著
・
转 E B病 毒
基 因小 鼠的 S F级净 化 P
10 8 ) 00 3
周淑佩 康 爱君 冕 胡 建 国 陈 宝军 李佳礼 郭长 占 , ,刘 , , , ,
(. 1北京大学实验动物科学部 ;. 2 北京大学 医学部 免疫学 系 , 北京 [ 关键 词 ]疱疹病毒 4型 , ; 人 动物 , 基因修饰 ; 巴瘤 淋 [ 中图分类号 ]R 32 一3 [ 文献标识码 ]A [ 文章编号 ]17 -6 X(0 7 0 -0 20 6 117 20 ) 1 9 -2 0
固定 其 四肢 和头部 。用碘酒 棉 逆毛 消毒 并用 酒精 棉 脱碘后 , 一块 碘 酒 棉 塞 于 阴道 口处 。沿 腹 中线 剪 将
开腹 部 , 充分 暴露 子宫 , 止血 钳夹 住 子宫 颈及 双侧 用
子宫 角上 端 , 外侧 将 其剪 断 。经 盛有 3 C 0 29 在 7o .6 m lL 氧 乙酸温 水 300mL的传 递槽 中传 人 隔离 o 过 / 0 器后 , 用灭 菌水 冲净 , 在数 块敷 料 上 。立 即打开 再 放 子宫 , 出仔 鼠 , 其 呼吸 , 露 促 如变 成 肉红 色 , 明仔 鼠 说
(p5 ) R g30 。C 2是 主 要 表 达 于 B细 胞 、 细 胞 和 某 T 些上 皮细 胞膜 上 的 E B病 毒受 体 和 补 体 C d受 体 , 3 因此 E 病毒 主要 感 染 B细 胞 、 胞 以及 部 分 上 B T细 皮 细胞 。大量研 究 表 明 ,E 病 毒 感 染 与 自身 免 疫 B 病 、 巴瘤 以及 某些 黏膜 恶性 变有 关 淋 。E 病毒 B MA在 复制 型感 染 时表达 , 潜伏 感 染 的 E B病 毒 在体 内外 因子 的刺 激下 可 多次 活 化从 而表 达 M A。 另有 研究 表 明灭 活的 E B病 毒在 体 外 亦 可 以活 化 淋 巴 细
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京
大
学
学
报
( 医
学
版
)
92 ・
J RN LOFP KIG U IE ST HE T S INC S V 13 N . Fb 0 7 OU A E N NV R IY( AL H CE E ) o. 9 o 1 e .20