有关PCR习题

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pcr上岗试题及答案

pcr上岗试题及答案一、单选题（每题2分，共10题，满分20分）1. PCR技术中，引物的作用是什么？A. 提供DNA聚合酶的结合位点B. 作为DNA模板C. 促进DNA链的延伸D. 稳定DNA双链结构答案：A2. 在PCR反应中，变性步骤的目的是？A. 使DNA聚合酶失活B. 破坏DNA双链结构C. 促进引物与模板DNA结合D. 增加DNA聚合酶的活性答案：B3. PCR反应中，延伸温度的设定主要取决于什么？A. 引物的序列B. 模板DNA的长度C. DNA聚合酶的来源D. 反应体系的pH值答案：C4. 以下哪个不是PCR反应体系中的成分？A. 模板DNAB. 引物C. 限制性内切酶D. DNA聚合酶答案：C5. 进行PCR反应时，通常需要设置多少个循环？A. 1-5个B. 10-20个C. 25-30个D. 40-50个答案：D6. 在PCR反应中，TaqMan探针的作用是什么？A. 检测PCR产物B. 扩增DNAC. 稳定DNA双链结构D. 提供DNA聚合酶的结合位点答案：A7. 以下哪种PCR技术可以用于定量分析？A. 常规PCRB. 实时定量PCRC. 反转录PCRD. 多重PCR答案：B8. 在PCR反应中，Mg2+离子的作用是什么？A. 作为DNA聚合酶的辅助因子B. 提供DNA聚合酶的结合位点C. 促进DNA链的延伸D. 稳定DNA双链结构答案：A9. 以下哪个不是PCR反应的常见问题？A. 非特异性扩增B. 引物二聚体C. 模板DNA的降解D. 反应体系的pH值过高答案：D10. 进行PCR反应时，通常使用的DNA聚合酶是？A. E. coli DNA聚合酶B. Taq DNA聚合酶C. T4 DNA聚合酶D. 反转录酶答案：B二、判断题（每题1分，共5题，满分5分）1. PCR反应中，变性步骤的温度通常在94-98℃之间。

（对）2. PCR反应中，退火步骤的温度通常高于延伸步骤的温度。

pcr试题及答案

pcr试题及答案PCR（聚合酶链式反应）是一种在分子生物学领域广泛应用的技术，其主要作用是在体外扩增目标DNA片段。

下面将为您提供一些PCR试题及答案，希望对您的学习和研究有所帮助。

试题一：请简要介绍PCR的原理及其在分子生物学研究中的应用。

试题二：请从PCR实验所需的试剂、步骤以及PCR反应体系的优化方面，详细解释PCR实验的操作流程。

试题三：PCR存在哪些常见问题，如PCR产物无法扩增或扩增效果不佳等，同时提供相应的解决方案。

试题四：请解释PCR技术中的热循环条件，包括变性、退火和延伸的温度及时间设定及其意义。

试题五：请简要介绍常用的PCR变体技术，如逆转录PCR、荧光定量PCR、实时定量PCR等，并列举其特点与应用领域。

答案一：PCR的原理是利用DNA聚合酶酶在适宜的温度下，在DNA模板的两个末端的引物的引导下，通过不断循环的温度变化，实现DNA的扩增。

PCR在分子生物学研究中被广泛应用于基因检测、遗传疾病诊断、DNA克隆、形态学研究、散发性肿瘤基因突变检测等领域。

答案二：PCR实验主要需要的试剂包括DNA模板、引物、dNTPs、DNA聚合酶、缓冲液和Mg2+等。

操作流程一般包括样品预处理（DNA提取）、PCR反应体系的准备、PCR反应体系的优化（引物浓度、温度参数等的调整）、PCR扩增和PCR产物的分析。

答案三：常见的PCR问题包括无扩增、低扩增效果、非特异性扩增等。

解决方案可包括检查引物设计是否合理、优化PCR反应体系中引物和模板浓度、调整PCR反应体系的温度参数、选择合适的DNA模板，并进行反应条件的微调。

答案四：PCR的热循环条件一般包括变性、退火和延伸三个阶段。

变性温度一般为94-98°C，用于解开DNA双链结构，使DNA模板可供引物与之结合。

退火温度一般为45-72°C，用于引物与模板DNA的特异性结合。

延伸温度一般为72°C，DNA聚合酶在此温度下完成DNA链的合成。

pcr上岗证考试题及答案北京

pcr上岗证考试题及答案北京一、单选题（每题2分，共20分）1. PCR技术中，引物的主要作用是：A. 提供DNA聚合酶的活性中心B. 作为DNA合成的模板C. 引导DNA聚合酶合成互补链D. 提供DNA复制所需的能量答案：C2. 在PCR反应体系中，哪种成分是必不可少的？A. 引物B. 模板DNAC. Taq聚合酶D. 所有选项都是答案：D3. PCR反应中，变性步骤的主要目的是：A. 使DNA双链分离B. 使DNA聚合酶失活C. 使引物与模板DNA结合D. 增加反应体系的温度答案：A4. 下列哪项不是PCR反应体系中的成分？A. 四种脱氧核苷酸B. Mg2+C. 稳定剂D. 核糖核苷酸答案：D5. PCR产物的电泳分析中，通常使用的染色剂是：A. 溴化乙锭B. 碘化丙啶C. 甲基绿D. 荧光素答案：A6. PCR技术中，变性温度通常设置为：A. 94°CB. 55°CC. 72°CD. 37°C答案：A7. PCR产物的纯化方法不包括：A. 乙醇沉淀B. 琼脂糖凝胶电泳C. 柱层析D. 透析答案：B8. PCR产物的测序分析中，常用的终止剂是：A. 荧光标记的ddNTPsB. 放射性标记的dNTPsC. 未标记的ddNTPsD. 酶切位点答案：A9. PCR技术中，延伸步骤的主要作用是：A. 使DNA双链分离B. 使引物与模板DNA结合C. 合成新的DNA链D. 增加反应体系的温度答案：C10. PCR反应中，引物设计时需要考虑的因素不包括：A. 引物的序列B. 引物的浓度C. 引物的GC含量D. 引物的分子量答案：D二、多选题（每题3分，共15分）1. PCR技术在医学领域的应用包括：A. 病原体检测B. 遗传病诊断C. 法医学鉴定D. 药物筛选答案：ABC2. PCR反应体系中，下列哪些成分会影响反应效率？A. 引物的浓度B. Mg2+的浓度C. 模板DNA的纯度D. 反应体系的体积答案：ABC3. PCR产物的检测方法包括：A. 琼脂糖凝胶电泳B. 实时定量PCRC. DNA测序D. 南方印迹答案：ABC4. PCR技术的优化包括：A. 引物的优化B. 反应体系的优化C. 反应条件的优化D. 反应时间的优化答案：ABC5. PCR产物的克隆方法包括：A. TA克隆B. 限制性酶切克隆C. 同源重组克隆D. 电转化答案：ABC三、判断题（每题1分，共10分）1. PCR技术是一种体外DNA扩增技术。

PCR试题答案版

PCR试题答案版一、选择题〔共20题，每题2分〕1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( A ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反响的浓度一般为〔 D 〕A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L3、多重PCR需要的引物对为〔 D〕A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反响，其特异性决定因素为〔 B〕A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子5、在PCR反响中，以下哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( C )A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高6、PCR技术的创造人是〔A 〕A、MullisB、史蒂文.沙夫C、兰德尔.才木7、PCR产物短期存放可在〔 A 〕保存。

A、4℃B、常温C、-80℃D、高温8、PCR产物长期储存最好置于〔 D 〕。

A、4℃B、常温C、16℃D、-20℃9、PCR的根本反响过程包括〔A 〕A、变性、退火、延伸B、变性、延伸C、变性、退火10、在实际工作中，基因扩增实验室污染类型包括( D )A、扩增产物的污染B、天然基因组DNA的污染C、试剂污染和标本间穿插污染D、A、B、C都可能11、PCR技术于哪一年创造〔 A 〕A、1983B、1971C、 1987D、199312、Taq DNA聚合酶酶促反响最快最适温度为〔C 〕A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃13、以下哪种物质在PCR反响中不需要〔 D 〕A、Taq DNA聚合酶B、dNTPsC、镁离子D、RNA酶14、PCR检测中，经过n个循环的扩增，拷贝数将增加〔 C 〕A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因扩增仪最关键的局部是〔 A 〕A、温度控制系统B、荧光检测系统C、软件系统D、热盖16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原那么〔 A 〕A、各区合并B、注意风向C、因地制宜D、方便工作17、PCR实验室一般包括( D )A、试剂准备区B、标本制备区C、扩增区和产物分析^p 区D、A、B、C都含18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改良了检测细菌和病毒的方法。

pcr考试题库及答案2022年

pcr考试题库及答案2022年1. PCR技术中，变性、退火和延伸三个步骤的基本原理是什么？答案：PCR技术中的变性步骤是通过升高温度使DNA双链分离成单链；退火步骤是降低温度使引物与单链DNA配对；延伸步骤是保持适宜温度，使DNA聚合酶沿单链DNA合成互补链。

2. PCR反应体系中，通常需要哪些主要组分？答案：PCR反应体系中通常需要模板DNA、引物、dNTPs（四种脱氧核苷酸三磷酸）、DNA聚合酶（如Taq酶）以及缓冲液等主要组分。

3. 什么是实时定量PCR（qPCR）？答案：实时定量PCR是一种在PCR反应过程中实时监测荧光信号强度变化，以定量分析DNA模板量的技术。

它能够实时监测DNA扩增的每一个循环，从而实现对起始模板量的精确定量。

4. 在PCR扩增过程中，为什么需要使用热稳定DNA聚合酶？答案：在PCR扩增过程中，需要使用热稳定DNA聚合酶是因为PCR过程中的变性步骤需要高温，而大多数DNA聚合酶在高温下会失活。

热稳定DNA聚合酶能够在高温下保持活性，从而在整个PCR周期中持续催化DNA合成。

5. 简述PCR技术在分子诊断中的应用。

答案：PCR技术在分子诊断中的应用包括病原体检测、遗传性疾病诊断、肿瘤基因检测、法医学DNA鉴定等。

通过PCR技术，可以快速、灵敏地检测到微量的特定DNA序列，为疾病的早期诊断和治疗提供重要依据。

6. 什么是多重PCR技术？答案：多重PCR技术是指在同一反应体系中同时进行多个PCR反应，以检测多个不同的DNA序列。

通过设计特异性引物，可以同时扩增多个目标基因，从而提高检测效率和准确性。

7. PCR产物的电泳分析中，通常使用哪种凝胶？答案：PCR产物的电泳分析中，通常使用琼脂糖凝胶。

琼脂糖凝胶具有良好的孔隙结构，能够根据DNA片段大小进行有效分离，常用于PCR 产物的初步鉴定。

8. 如何提高PCR反应的特异性？答案：提高PCR反应的特异性可以通过优化引物设计、调整反应体系组分、控制循环条件（如退火温度和延伸时间）等方法实现。

完整版)PCR试题答案版-pcr的判断题答案

完整版)PCR试题答案版-pcr的判断题答案A、样品制备区B、扩增区C、检测区D、以上都是18、PCR扩增反应的最佳温度是（C）A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃19、PCR扩增反应的最佳pH值是（B）A、5.0B、8.3C、9.5D、10.020、PCR扩增反应的最佳时间是（C）A、30minB、1hC、2minD、10min二、问答题（共5题，每题10分）1、PCR技术的原理是什么？请简要说明PCR技术的基本步骤。

（10分）PCR技术是一种体外扩增DNA的技术，其基本原理是利用DNA聚合酶在引物的引导下，将DNA模板的目的区段反复扩增，从而获得大量的目的DNA产物。

其基本步骤包括变性、退火和延伸三个阶段。

在变性阶段，将DNA双链分离为单链；在退火阶段，引物与单链DNA结合形成双链；在延伸阶段，DNA聚合酶在引物的引导下合成新的DNA链，最终得到两个DNA分子，重复以上步骤可扩增出大量的目的DNA 产物。

2、PCR技术在哪些领域得到了广泛应用？请列举至少三个领域。

（10分）PCR技术在医学、生物学和法医学等领域得到了广泛应用。

在医学领域，PCR技术可用于病原体检测、基因诊断、药物代谢分析等方面；在生物学领域，PCR技术可用于基因克隆、基因表达分析、基因组测序等方面；在法医学领域，PCR技术可用于鉴定个体身份、鉴定亲子关系、鉴定遗传病等方面。

3、PCR反应中，引物的选择和设计对扩增结果有重要影响，请简要说明。

（10分）引物是PCR反应中的重要组成部分，其选择和设计对扩增结果有重要影响。

引物的选择应基于目的基因序列，需要确保引物与目的序列的互补性，同时避免引物间的互补性，以避免非特异性扩增。

引物的长度、Tm值和GC含量也会影响PCR反应的效率和特异性。

引物的设计应尽量避免引物与非特异性序列的结合，同时确保引物的长度和Tm值的一致性，以提高PCR反应的特异性和效率。

4、PCR反应中，如何避免污染？请列举至少三种方法。

PCR重点习题

第十七章PCR基因扩增仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1．PCR技术2．TaqDNA聚合酶3．水浴锅PCR基因扩增仪4．压缩机PCR基因扩增仪5．overshooting6．undershooting7．半导体PCR基因扩增仪8．离心式空气加热PCR基因扩增仪9．梯度PCR仪10．原位PCR仪11．原位PCR技术12．荧光实时定量PCR技术13．位置的边缘效应14．模块温控模式15．反应管温控模式二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。

1．以下哪种物质在PCR反应中不需要（）A．Taq DNA聚合酶B．dNTPsC．Mg2+D．RNA酶E．合适pH缓冲液2．以下哪种酶可耐高温（）A．Taq DNA聚合酶B．Hind ⅢC．T4连接酶D．RNA酶E．Klenow片段3．PCR反应正确过程应为（）A．退火→变性→延伸B．变性→退火→延伸C．退火→延伸→变性D．变性→延伸→退火E．延伸→变性→退火4． PCR技术的本质是（）A．核酸杂交技术B．核酸重组技术C．核酸扩增技术D．核酸变性技术E．核酸连接技术5．Taq DNA聚合酶酶促反应最适温度为（）A．37℃B．50℃～55℃C．70℃～75℃D．80℃～85℃E．94℃～95℃6．温度均一性较好的PCR仪为（）A．水浴锅PCR基因扩增仪和压缩机PCR基因扩增仪B．半导体PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪C．压缩机PCR基因扩增仪和半导体PCR基因扩增仪D．压缩机PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪E．水浴锅PCR基因扩增仪和离心式空气加热PCR基因扩增仪7．一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为（）A．普通PCR仪B．梯度PCR仪C．原位PCR仪D．荧光PCR仪E．实时PCR仪8．能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为（）A．普通PCR仪B．梯度PCR仪C．原位PCR仪D．荧光PCR仪E．实时PCR仪9．SteadySlope技术是下列哪一家公司的专利技术（）A．eppendorf公司B．MJ公司C．Cepheid公司D．Roche公司E．ABI公司10．应用SteadySlope技术的是哪种PCR仪（）A．普通PCR仪B．梯度PCR仪C．原位PCR仪D．荧光PCR仪E．实时PCR仪11．在下列哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数（）A．普通PCR仪B．梯度PCR仪C．原位PCR仪D．荧光实时PCR仪E．定性PCR仪12．以下是经过PCR扩增后得到的Ct值，哪个样品的DNA原始拷贝数最多（）A．样品A，Ct = 20B．样品A，Ct = 22C．样品A，Ct = 24D．样品A，Ct = 26E．样品A，Ct = 2813．以空气为加热介质的PCR仪是（）A．金属板式实时定量PCR仪B．96孔板式实时定量PCR仪C．离心式实时定量PCR仪D．各孔独立控温的定量PCR仪E．荧光实时定量PCR仪14．以下哪个PCR扩增仪的PCR扩增样品槽被设计为离心转子（）A．ABI 7500B．ABI 7900C．Light Cycle TMD．SmartCyclerⅡE．RG300015．以下哪个PCR扩增仪使用的是同一个激发光源和检测器（）A．ABI 7500B．ABI 7900C．Light Cycle TMD．SmartCyclerⅡE．RG300016．可以在同一台定量PCR仪上分别进行不同条件定量PCR反应的是（）A．ABI 7500B．ABI 7900C．Light Cycle TMD．SmartCyclerⅡE．RG300017．拥有独立智能升降温模块的是（）A．ABI 7500B．ABI 7900C．Light Cycle TMD．SmartCyclerⅡE．RG300018．容纳样品量大，无需特殊耗材的是（）A．ABI 7500B．ABI 7900C．Light Cycle TMD．SmartCyclerⅡE．RG300019．PCR基因扩增仪最关键的部分是（）A．温度控制系统B．荧光检测系统C．软件系统D．热盖E．样品基座20．“位置的边缘效应”是指（）A．温度的准确性欠佳B．温度的均一性欠佳C．边缘升降温速度快D．边缘升降温速度慢E．梯度模式和标准模式温度不一致21．PCR扩增仪升降温速度快有很多优点，以下哪一项应除外（）A．缩短反应时间B．提高工作效率C．消除位置的边缘效应D．缩短非特异性反应时间E．提高反应特异性22．在梯度模式下得出最佳反应条件，并以此条件在标准模式下单独做，但结果却不如人意，最有可能的原因是（）A．样品孔温度与设定温度不一致B．样品孔间的温度有差异C．样品孔位置的边缘效应较高D．升降温速度不够快E．不同模式温度特性有差异23．定量PCR扩增仪的关机次序一般为（）A．关软件→关PCR仪→关电脑B．关软件→关电脑→关PCR仪C．关PCR仪→关软件→关电脑D．关PCR仪→关电脑→关软件E．关电脑→关PCR仪→关软件【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。

PCR习题高中生物选择性必修三

1.某科研小组从土壤菌株A、B中分离到同源性为93%的Bt1抗虫基因和Bt2抗虫基因的编码序列，并运用交错延伸PCR技术获得了抗虫性能强的重组B基因，转入烟草获得成功，过程如下图所示。

注：①交错延伸PCR：基因Bt1和Bt2均作为模板，所需引物相同，图中仅表示其中一条链的延伸情况。

②Eco RⅠ限制酶的识别序列及切点：↓5′—GAATTC—3′。

③启动子Pr1a可在烟草叶肉细胞中特异性启动基因的转录。

④图中生长素合成酶基因是通过成熟mRNA逆转录获得的DNA片段，可使植物细胞合成生长素。

⑤抗草甘膦基因(oroA)正常表达可使植物对除草剂草甘膦有较好抗性；抗卡那霉素基因(Kan r)正常表达可使细菌对卡那霉素有较好抗性。

(1)若用Eco R Ⅰ和限制酶XmaⅠ(↓5′—GCCGGG—3′)双酶切多个目的基因，随机连接________(填“能”或“不能”)避免两个目的基因连接成环。

图中所示Ti质粒部分至少含有______个启动子，复制原点是___________酶识别和结合的位点。

(2)在培养愈伤组织的培养基中添加____________可以筛选含有Bt重组基因的细胞。

图中生长素合成酶基因是否能促进愈伤组织生根？作出判断并解释____________________ ________________________________________________________________________________________________________________________________________________。

(3)已知交错延伸PCR中所用引物片段均为30个核苷酸，Taq DNA聚合酶在72 ℃下的扩增速度为1 000个碱基/min，本实验的循环扩增条件为：95 ℃变性30 s,50 ℃复性15 s,72 ℃延伸15 s，共80个循环。

第二轮循环后所得重组型子链长度为______个核苷酸。

荧光定量pcr+选择题

荧光定量pcr+选择题
荧光定量PCR（qPCR）是一种用于测量PCR产物数量的技术。

它结合了传统PCR和荧光探针技术，可以实时监测DNA的扩增过程。

下面是一些关于荧光定量PCR的选择题，希望可以帮助你更好地理
解这项技术。

1. 什么是荧光定量PCR的主要优势？
A. 实时监测扩增过程。

B. 产物纯度更高。

C. 更便宜。

D. 不需要荧光标记。

2. 在荧光定量PCR中，哪种荧光探针常用于检测PCR产物？
A. SYBR Green.
B. Taq DNA聚合酶。

C. 磷酸化探针。

D. 碱基对。

3. 以下哪种情况适合使用荧光定量PCR技术？
A. 检测单个基因的存在与否。

B. 快速扩增DNA.
C. 分析蛋白质结构。

D. 检测细胞形态变化。

4. 在荧光定量PCR实验中，什么是Ct值？
A. 荧光信号开始增加的阈值周期数。

B. PCR反应的温度。

C. DNA扩增的速率。

D. 荧光探针的浓度。

5. 荧光定量PCR和传统PCR相比，哪个更适合定量分析？
A. 荧光定量PCR.
B. 传统PCR.
C. 两者一样适合。

D. 取决于实验目的和样本类型。

希望这些选择题能够帮助你更好地理解荧光定量PCR技术。

如果你还有其他问题，欢迎继续提问。

专题八 PCR重难集训(解析版)

PCR重难集训题型一利用PCR获取目的基因【典例1】“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。

下列叙述错误的是()A．第一轮复制得到2个DNA分子，即①②各一个B．第二轮复制得到4个DNA分子，即①②③④各一个C．第四轮复制得到16个DNA分子，其中有4个X基因D．经五轮循环后产物中有五种不同的DNA分子答案 C解析据图分析可知，第一轮复制形成2个DNA分子，即①②各一个，A正确；第二轮复制得到22＝4(个)DNA分子，即①复制得①和③、②复制得②和④，即得到①②③④各一个，B正确；第四轮复制得到16个DNA分子，其中有8个⑤(X 基因)，C错误；经五轮循环后共形成32个DNA分子，其中①②各一个，③④各四个，22个⑤，故产物中有五种不同的DNA分子，D正确。

题型二利用PCR鉴定目的基因的连接方式【典例1】为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。

图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选择的一对引物是________。

某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400 bp片段，原因是____________________。

答案乙、丙目的基因反向连接解析分析题图可知，理论上可以选择的引物组合有甲和丙、乙和丙两种情况。

如果选择甲和丙这对引物，则无论目的基因是否正确插入，扩增的片段都是50＋300＋100＝450(bp)，不符合要求；如果选择乙和丙这对引物，正向连接和反向连接后所得结果不同，所以应选择乙和丙这对引物进行PCR鉴定。

如果目的基因和质粒反向连接，则引物乙会出现在重组质粒的外侧，此时若加入引物甲和乙，则可以扩增出300＋100＝400(bp)的片段。

题型三利用PCR引导基因定点突变【典例1】重叠延伸PCR可实现定点基因诱变，其操作过程如图所示(凸起处代表突变位点)。

陕西省pcr上岗证考试题及答案

陕西省pcr上岗证考试题及答案一、单项选择题（每题1分，共10分）1. PCR技术中，引物的作用是什么？A. 提供DNA聚合酶的活性中心B. 稳定DNA模板C. 引导DNA聚合酶开始合成新的DNA链D. 提供DNA合成所需的能量答案：C2. 在PCR反应中，变性温度通常设置为多少？A. 90-95℃B. 50-60℃C. 70-80℃D. 30-40℃答案：A3. 下列哪项不是PCR反应体系中的基本组分？A. 模板DNAB. 引物C. 热稳定DNA聚合酶D. 限制性内切酶答案：D4. PCR扩增过程中，哪个步骤会导致DNA链的延伸？A. 变性B. 退火C. 延伸D. 以上都不是5. 实时荧光定量PCR技术中，荧光信号的检测发生在哪个阶段？A. 变性B. 退火C. 延伸D. 所有阶段答案：C6. 以下哪种PCR技术可以实现多个基因的同时扩增？A. 普通PCRB. 多重PCRC. 反转录PCRD. 巢式PCR答案：B7. 在PCR反应中，Mg2+离子的作用是什么？A. 作为DNA聚合酶的辅助因子B. 作为DNA聚合酶的抑制因子C. 作为DNA模板的稳定剂D. 作为DNA聚合酶的底物答案：A8. 以下哪种DNA聚合酶最常用于PCR反应？A. Taq聚合酶B. E.coli DNA聚合酶C. T4 DNA聚合酶D. 反转录酶答案：A9. PCR产物的纯化通常使用哪种方法？B. 过滤C. 凝胶电泳D. 柱层析答案：D10. 以下哪种方法可以用于PCR产物的定量分析？A. 紫外分光光度计B. 凝胶电泳C. 实时荧光定量PCRD. 所有选项答案：D二、多项选择题（每题2分，共10分）1. PCR技术可以用于以下哪些应用？A. DNA指纹分析B. 基因克隆C. 病原体检测D. 基因表达分析答案：ABCD2. 以下哪些条件会影响PCR反应的效率？A. 引物的浓度B. 反应体系的pH值C. 模板DNA的纯度D. 反应体系中的盐浓度答案：ABCD3. 实时荧光定量PCR技术中，荧光信号的来源可以是：A. SYBR GreenB. TaqMan探针C. 引物二聚体D. 内参基因答案：ABD4. 以下哪些因素可能导致PCR反应失败？A. 模板DNA量不足B. 引物设计不当C. 反应体系中Mg2+离子浓度过高D. 反应体系中Mg2+离子浓度过低答案：ABCD5. 多重PCR技术中，引物设计时需要考虑的因素包括：A. 避免引物间的二聚体形成B. 避免引物间的互补C. 引物的Tm值相近D. 引物的GC含量相近答案：ABCD三、判断题（每题1分，共10分）1. PCR技术中，变性步骤是为了使DNA双链分离。

PCR检测原理练习题

PCR检测原理练习题1.PCR技术扩增DNA,需要的条件是(A)①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体①②③④(正确答案)②③④⑤①③④⑤①②③⑥2.PCR的基本反应过程包括（）变性、退火、延伸(正确答案)变性、延伸、退火退火、变性、延伸延伸、变性、退火3.在实际工作中, 基因扩增实验室污染类型包括（）A.扩增产物的污染B.天然基因组DNA的污染C.试剂污染和标本间交叉污染D.A.B.C都可能(正确答案)4.以下哪种物质在PCR反应中不需要（）TaqDNA聚合酶dNTPs也就是四种脱氧核苷酸DNA母链RNA酶(正确答案)5.PCR过程中, 经过n个循环的扩增, 拷贝数将增加（）n2nn二次方2的n次方(正确答案)6.下列关于DNA复制的叙述, 正确的是()DNA聚合酶不能从头开始合成DNA, 只能从5′端延伸DNA链DNA复制不需要引物引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合(正确答案)DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸7、PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比, 主要有两点不同, 它们是()①PCR 过程需要的引物是人工合成的单链DNA②PCR过程不需要DNA聚合酶③PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶, 而是通过对反应温度的控制来实现的④PCR过程中, DNA 不需要解旋, 直接以双链DNA为模板进行复制③④①②①③(正确答案)②④8. 若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒, 你认为可以用PCR扩增血液中的（）A. 白细胞DNAB. 病毒蛋白质C. 血浆抗体D. 病毒核酸(正确答案)9、TaqDNA聚合酶酶促反应最快最适温度为（）摄氏度A37B50～55C70～75(正确答案)D80～8510、PCR技术最突出的优点是（）A.原理简单B.原料易找C.TaqDNA聚合酶有耐热性D.快速、高效、灵活、易于操作(正确答案)11.做PCR使用的微量离心管、枪头、缓冲液及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是（）A.反复洗涤B.不怕外源DNA污染C.高压灭菌(正确答案)D.在—20℃储存12.下列有关PCR反应的叙述, 正确的是（）A. PCR反应所需要的引物是RNAB. PCR反应所需要的材料是核糖核苷酸C. PCR反应所需要的酶在60℃会变性D. PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行(正确答案)答案解析: PCR反应需要的引物是DNA, 反应所需要的材料是脱氧核苷酸, PCR所需要的酶是耐高温的, 在60℃不会变性。

上海市pcr上岗证考试题及答案

上海市pcr上岗证考试题及答案一、单选题（每题1分，共20分）1. PCR技术中，引物的作用是（）。

A. 提供DNA聚合酶B. 提供模板DNAC. 稳定DNA双链D. 引导DNA聚合酶合成互补链答案：D2. PCR反应中，变性温度一般设置在（）。

A. 94℃B. 56℃C. 72℃D. 37℃3. PCR反应中，延伸温度一般设置在（）。

A. 94℃B. 56℃C. 72℃D. 37℃答案：C4. PCR反应中，退火温度一般设置在（）。

A. 94℃B. 56℃C. 72℃D. 37℃答案：B5. PCR技术中，Taq酶的最适活性温度是（）。

B. 56℃C. 72℃D. 37℃答案：C6. PCR反应中，Mg2+离子的作用是（）。

A. 提供模板DNAB. 提供引物C. 稳定DNA双链D. 激活DNA聚合酶答案：D7. PCR产物的纯化方法不包括（）。

A. 琼脂糖凝胶电泳B. 乙醇沉淀D. 离心答案：D8. PCR产物的检测方法不包括（）。

A. 琼脂糖凝胶电泳B. 乙醇沉淀C. 酶切分析D. 测序答案：B9. PCR产物的克隆方法不包括（）。

A. TA克隆B. 同源重组C. 转染D. 转化答案：C10. PCR产物的测序方法不包括（）。

A. Sanger测序B. 焦磷酸测序C. 纳米孔测序D. 质谱分析答案：D11. PCR技术的主要用途是（）。

A. DNA测序B. DNA克隆C. DNA扩增D. DNA修复答案：C12. PCR技术的发明者是（）。

A. Kary MullisB. Frederick SangerC. Maxam GilbertD. Walter Gilbert答案：A13. PCR技术的基本原理是（）。

A. DNA复制B. RNA转录C. 蛋白质翻译D. 基因重组答案：A14. PCR技术的循环次数一般为（）。

A. 10-20B. 20-30C. 30-40D. 40-50答案：C15. PCR技术的扩增效率一般为（）。

江苏省pcr上岗证考试题及答案

江苏省pcr上岗证考试题及答案一、单选题1. PCR技术中，引物的作用是（）。

A. 提供DNA聚合酶的结合位点B. 提供RNA聚合酶的结合位点C. 作为DNA聚合酶的原料D. 作为RNA聚合酶的原料答案：A2. PCR反应中，变性步骤的主要目的是（）。

A. 使DNA双链解离成单链B. 使DNA聚合酶失活C. 使引物与模板DNA结合D. 使DNA聚合酶与模板DNA结合答案：A3. PCR反应中，延伸步骤的主要目的是（）。

A. 使DNA双链解离成单链B. 使DNA聚合酶失活C. 使引物与模板DNA结合D. 合成新的DNA链答案：D4. PCR反应中，退火步骤的主要目的是（）。

A. 使DNA双链解离成单链B. 使DNA聚合酶失活C. 使引物与模板DNA结合D. 合成新的DNA链答案：C5. PCR反应中，哪个酶是必不可少的（）。

A. DNA聚合酶B. RNA聚合酶C. 逆转录酶D. 限制性内切酶答案：A二、多选题6. PCR技术可以用于以下哪些应用（）。

A. 基因克隆B. 基因表达分析C. 病原体检测D. 基因突变分析答案：ABCD7. PCR反应体系中通常包含哪些组分（）。

A. 模板DNAB. 引物C. 四种脱氧核苷酸D. DNA聚合酶答案：ABCD8. PCR反应中，哪些因素会影响PCR效率（）。

A. 引物设计B. 模板DNA质量C. 反应体系中酶的活性D. 反应体系中盐浓度答案：ABCD三、判断题9. PCR技术是一种体外扩增DNA片段的技术。

（）答案：正确10. PCR反应中，每个循环都包括变性、退火和延伸三个步骤。

（）答案：正确四、填空题11. PCR技术中，引物的延伸方向是________。

答案：5'→3'12. PCR反应中，DNA聚合酶的作用是________。

答案：合成新的DNA链13. PCR技术中，变性步骤的温度通常设置在________。

答案：94-98℃14. PCR技术中，退火步骤的温度通常设置在________。

内蒙古pcr培训班考试题及答案

内蒙古pcr培训班考试题及答案一、单项选择题（每题2分，共20分）1. PCR技术中，引物的主要作用是（）。

A. 提供DNA聚合酶的结合位点B. 稳定DNA双链结构C. 作为DNA合成的起始点D. 提供DNA模板答案：C2. PCR反应中，变性步骤的主要目的是（）。

A. 使DNA双链分离成单链B. 使引物与模板DNA结合C. 使DNA聚合酶失活D. 使DNA模板变性答案：A3. 在PCR反应中，Taq聚合酶的最适温度是（）。

A. 37°CB. 50°CC. 72°CD. 95°C答案：D4. PCR产物的电泳分析中，DNA分子的迁移速度主要受以下哪个因素的影响？（）A. DNA分子的大小B. DNA分子的浓度C. DNA分子的电荷D. DNA分子的构象答案：A5. 以下哪种PCR技术主要用于检测基因突变？（）A. 普通PCRB. 定量PCRC. 巢式PCRD. 突变PCR答案：D6. 以下哪种PCR技术可以用于检测DNA序列的多态性？（）A. 普通PCRB. 定量PCRC. 巢式PCRD. 限制性片段长度多态性PCR（RFLP）答案：D7. 在PCR反应中，dNTPs的主要作用是（）。

A. 提供DNA聚合酶的结合位点B. 提供DNA合成的原料C. 稳定DNA双链结构D. 作为DNA合成的起始点答案：B8. PCR产物的纯化方法中，哪种方法可以去除未结合的引物和dNTPs？（）A. 乙醇沉淀B. 琼脂糖凝胶电泳C. 柱纯化D. 透析答案：C9. 以下哪种PCR技术可以用于检测基因表达水平？（）A. 普通PCRB. 定量PCRC. 巢式PCRD. 突变PCR答案：B10. PCR反应中，Mg2+的主要作用是（）。

A. 提供DNA聚合酶的结合位点B. 稳定DNA双链结构C. 作为DNA合成的起始点D. 激活DNA聚合酶答案：D二、多项选择题（每题3分，共15分）11. PCR技术中，以下哪些因素会影响PCR产物的产量？（）A. 引物的质量B. 模板DNA的纯度C. 反应体系中的dNTPs浓度D. 反应体系中的Mg2+浓度答案：ABCD12. 以下哪些因素会影响PCR产物的特异性？（）A. 引物的特异性B. 反应体系中的Mg2+浓度C. 反应体系中的dNTPs浓度D. PCR反应的循环次数答案：ABD13. 在PCR产物的电泳分析中，以下哪些因素会影响DNA分子的迁移速度？（）A. DNA分子的大小B. DNA分子的电荷C. DNA分子的构象D. 电泳缓冲液的pH值答案：ABC14. 以下哪些PCR技术可以用于基因克隆？（）A. 普通PCRB. 巢式PCRC. 逆转录PCRD. 突变PCR答案：ABC15. 以下哪些因素会影响PCR产物的纯度？（）A. PCR反应体系的污染B. PCR产物的纯化方法C. PCR反应的循环次数D. PCR产物的电泳分析答案：AB三、判断题（每题2分，共20分）16. PCR技术是一种体外扩增DNA片段的方法。

pcr上岗证考试题及答案2020年湖北省

pcr上岗证考试题及答案2020年湖北省一、单项选择题（每题2分，共20分）1. PCR技术中，引物的作用是：A. 提供DNA聚合酶B. 作为DNA合成的模板C. 提供DNA合成所需的能量D. 稳定DNA模板答案：B2. 在PCR反应中，变性温度一般设定为：A. 94℃B. 56℃C. 72℃D. 37℃答案：A3. 以下哪个不是PCR反应体系的组成成分？A. 模板DNAB. 引物C. 核糖核酸D. 热稳定DNA聚合酶答案：C4. PCR反应中，延伸时间的设定主要取决于：A. 反应体系的体积B. 引物的长度C. 反应温度D. DNA聚合酶的活性答案：B5. 以下哪种方法可以用于检测PCR产物？A. 琼脂糖凝胶电泳B. 紫外光照射C. 离心D. 离心沉淀答案：A二、多项选择题（每题3分，共15分）1. PCR技术的优点包括：A. 高灵敏度B. 高特异性C. 操作简便D. 耗时短答案：ABCD2. 以下哪些因素会影响PCR反应的效率？A. 模板DNA的质量和数量B. 引物的浓度和特异性C. DNA聚合酶的活性D. 反应体系的温度答案：ABCD3. 以下哪些是PCR反应中常用的DNA聚合酶？A. Taq DNA聚合酶B. Pfu DNA聚合酶C. T4 DNA聚合酶D. E.coli DNA聚合酶答案：AB三、判断题（每题1分，共10分）1. PCR技术可以用于DNA的定性分析。

答案：正确2. PCR技术不能用于DNA的定量分析。

答案：错误3. PCR反应中，DNA聚合酶在94℃变性时会失活。

答案：错误4. 引物设计时，需要考虑引物的Tm值。

答案：正确5. PCR反应中，延伸时间与模板DNA的长度成正比。

答案：正确四、简答题（每题5分，共20分）1. 简述PCR技术的基本原理。

答案：PCR技术是一种在体外快速扩增特定DNA片段的技术。

它利用DNA聚合酶在体外进行DNA复制，通过反复的变性、退火和延伸三个步骤，实现DNA片段的指数级扩增。

PCR技术专题练习题

PCR技术专题练习题1.PCR的含义是（）A．亲子代反应技术B．多聚酶链式反应(正确答案)C．DNA片段的复制D．DNA序列测定2.用于PCR的引物长度通常为20～30个核苷酸，是一小段（）A．DNA(正确答案)B．RNAC．DNA或RNAD．双链DNA3.有关PCR技术，下列叙述不正确的是（）A．是聚合酶链式反应，是利用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术B．在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似C．PCR反应只需在一定的缓冲溶液中提供：DNA模板以及四种脱氧核苷酸(正确答案)D．PCR一般经历三十多次循环从第二次循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应4.DNA的合成方向总是________延伸（）A．从DNA分子的左端向右端B．从DNA分子的右端向左端C．从子链的5′端向3′端(正确答案)D．从子链的3′端向5′端5.标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是（）A．95℃、55℃、72℃(正确答案)B．72℃、55℃、95℃C．55℃、95℃、72℃D．80℃、55℃、72℃6．聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。

PCR过程一般经历下述30多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。

下列有关PCR过程的叙述中不正确的是（）A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸(正确答案)D．PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高答案解析：变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，解旋酶也具有该作用，A正确。

复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的，B正确。

PCR上岗证考试题及答案

PCR上岗证考试题及答案PCR上岗证考试题及答案一、填空题1、扩增DNA的体外方法是，该技术首先由Kary Mullis于1983年发明，该技术对分子生物学有极大的贡献，尤其在研究方面。

2、扩增DNA的体外方法发展的动力是解决________________ 的问题。

3、“PCR”的中文全称是 ______________。

4、“上游引物”实际上是 ______________的作用。

5、耐高温的DNA聚合酶是在 ____________ 的嗜热菌中分离出来的。

二、判断题1、只有PCR技术才能对DNA进行体外扩增。

（）2、Taq DNA聚合酶是从耐热的温泉细菌中分离出来的。

（）3、在PCR反应中加入两种引物是绝对必要的。

（）4、只要引物和模板DNA正确，就肯定能扩增出目的DNA。

（）5、在PCR反应中加入的物质有模板DNA、耐高温的DNA聚合酶、dNTP、引物及适宜的缓冲液。

（）三、选择题1、一个PCR反应管中，加入的dNTP应该是下面哪一种？（） A. dAMP+dGMP+dCMP+dTMP B. dATP+dTTP+dCTP+dUTP C.dADP+dGDP+dCDP+dTDP D. dATP+dUTP+dCTP+dGTP2、PCR技术中的“循环”指的是下面哪一种？（） A. 变性、复性、延伸 B. 变性、退火、延伸 C. 变性、复性、延伸、初始合成 D. 变性、退火、延伸、打开双链模板进行合成3、在PCR反应中，退火温度的选择依据是下面的哪一个？（） A. 引物的碱基种类 B. 引物碱基对的含量 C. 模板DNA的碱基组成 D.模板DNA的含量及二级结构4、下列哪一种酶可以作为PCR的耐高温DNA聚合酶？（） A. Taq DNA 聚合酶 B. E. coli DNA聚合酶Ⅰ C. T4 DNA聚合酶 D. T7 DNA聚合酶5、下列哪一种方法不能获得大量PCR产物？（） A. 酚/氯仿抽提 B. 酚/氯仿/异戊醇抽提 C. 硅胶膜离心管离心 D. 真空干燥6、PCR产物中可能出现下面哪一种污染最难避免？（） A. 嗜热菌污染 B. 细菌污染 C. 真菌污染 D. 人源性污染7、下列哪一组是PCR最常用的引物？（） A. 20聚体RNA和20聚体DNA B. 20聚体RNA和21聚体DNA C. 20聚体RNA和24聚体DNAD. 20聚体RNA和20聚体RNA8、用PCR技术鉴定某一病毒时，用同位素标记的病毒的哪种组分最为合适？（） A. 蛋白外壳 B. 单股正链RNA C. 双股正链RNA D. 双股负链RNA9、下列哪一组是PCR反应中必需要加入的物质？（） A.模板、耐高温的DNA聚合酶、dNTP、引物及Mg2+ B.模板、耐高温的DNA聚合酶、dNTP、及Mg2+ C模板、耐高温的DNA聚合酶、引物及Mg2+ D模板、E.coli DNA聚合酶Ⅰ、dNTP、引物及Mg2+。

pcr上岗考试试题及答案

pcr上岗考试试题及答案一、选择题（每题2分，共40分）1. PCR是指（）A. 聚合酶链式反应B. 聚乙烯链式反应C. 聚苯胺链式反应D. 聚氨酯链式反应2. PCR方法的发明者是（）A. 诺贝尔奖获得者马克斯·佩尔茨B. 诺贝尔奖获得者阿尔伯特·埃恩斯坦C. 诺贝尔奖获得者凯瑟琳·德·恩霍芬D. 诺贝尔奖获得者科里·肖利3. PCR方法可以在实验室中大量复制DNA，其原理是利用（）A. 热解、退火和延伸B. 冷冻、解冻和离心C. 溶解、稀释和混合D. 融化、固化和吸收4. PCR方法包括以下几个步骤，其中顺序正确的是（）A. 延伸、退火、退火B. 融化、延伸、退火C. 延伸、融化、退火D. 延伸、退火、融化5. PCR扩增反应的必要条件是（）A. 反应体系中含有模板DNA、引物和聚合酶B. 反应体系中含有蓝色染料、酶和辅助因子C. 反应体系中含有酶、酵母和酸性物质D. 反应体系中含有水、盐和碱性物质二、判断题（每题2分，共20分）判断下列说法的正误，并在括号内标注“对”或“错”。

1. PCR方法可以扩增RNA分子。

（）2. PCR方法需要专门的PCR仪器进行实验。

（）3. 引物在PCR反应中的作用是定位扩增序列的起始点。

（）4. 扩增反应的最佳温度通常为50-60摄氏度。

（）5. PCR方法可以在同一反应体系中同时扩增多个目标序列。

（）三、简答题（每题20分，共40分）1. 请简要描述PCR方法的原理及其在实验室中的应用。

2. 请说明PCR反应中的三个主要步骤，并解释其在扩增过程中的作用。

四、应用题（共30分）请根据以下DNA序列，设计适当的引物，并进行PCR扩增。

DNA序列：ATGCTAGCTAGCTAGCTAGCT要求：设计合适的引物扩增出CTAGCTAGCTAGCTAGCTAG序列。

请给出引物序列，并标注合适的引物结合位点。

参考答案：一、选择题1. A2. A3. A4. B5. A二、判断题1. 错2. 对3. 对4. 错5. 对三、简答题1. PCR方法的原理是通过一系列的温度循环，在反应体系中反复扩增目标DNA序列。

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一、选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。

在一定条件下，加入模板DNA、DNA聚合酶、dA TP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。

据此判断不合理的是A．dATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作DNA合成的原料B．dTTP完全水解后产物有胸腺嘧啶、磷酸、核糖C．DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋D．CTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一17、多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。

PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。

下列有关PCR过程的叙述中不正确的是：（）A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C．延伸过程中需要DNA聚合酶、A TP、四种核糖核苷酸 D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高18、下列有关PCR技术的叙述，不正确的是：（） A．PCR技术经过变形、复性、延伸三个阶段 B．PCR 技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等C．PCR技术需在体内进行 D．PCR技术是利用碱基互补配对的原则19、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个）放入PCR仪中扩增4代，那么，在PCR仪中放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数至少应是A．640 B．8100 C．600 D．864020、对禽流感的确诊，先用PCR技术将标本基因大量扩增，然后利用基因探针，测知待测标本与探针核酸的碱基异同。

下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置，M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置，哪份标本最有可能确诊为禽流感（）A．M B．N C．Q D．W21、某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中，发现了一种冰冻的已灭绝的巨大动物的肌肉。

他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下检测工作，其中正确的操作步骤及顺序是①降低温度，检测处理后形成的杂合DNA双链区段②通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA ③把巨型动物的DNA导入大象的细胞中④在一定的温度条件下，将巨型动物和大象的DNA水浴共热 A.②④③ B.②④③① C.③④① D.②④①22、 PCR的发明人是A. MullisB. 牛顿C.KennyD. James23、退火温度一般比引物的熔解温度（Tm）低多少合适A. 7℃B. 10℃C. 5℃D. 2℃E. 20℃24、引物的最佳浓度为A. 0.1-0.5 μMB. 1-2μMC. 5-10μMD. 100μME. 200μM25、专门用于制备单链DNA的PCR技术是A、对称PCRB、反向PCRC、RT－PCRD、不对称PCRE、嵌套PCR26、PCR变性温度一般为A． 96℃ B. 85℃ C. 72℃ D. 55℃ E. 100℃27、pre-mRNA 内含子的5'-末端一般为（）A、AU B、GU C、AG D、CG E、AC28、在大肠杆菌的DNA损伤修复时，对于填补缺口可能最重要的酶是A、DNA聚合酶ⅠB、DNA聚合酶ⅡC、DNA聚合酶ⅢD、RNA聚合梅E、以上都不是29、可用于扩增未知序列的PCR方法是（） A、对称PCR B、反向PCR C、 RT-PCR D、不对称PCR E、嵌套PCR30、在聚合酶链反应（PCR）中最常用的DNA聚合酶是 A．T4 DNA连接酶 B．T7 DNA聚合酶 C． Taq DNA 聚合酶 D．E. coli DNA聚合酶I E．E. coli DNA聚合酶II31、下列关于PCR引物设计的说法错误的是（）A．设计引物时应考虑使3’端引物和5’端引物具有相似的Tm值B．每条引物自身不应有稳定的发夹结构C．上下游引物之间不宜形成稳定的二聚体结构 D．引物的5’和3’端必须和模板严格配对结合E．引物与非特异扩增区的序列无同源性32、Taq DNA聚合酶可以不依赖模板在dsDNA的3’末端加上一个碱基为（）A. GB. AC. TD. CE. I33．PCR反应中，所设计引物的长度一般为（）A．5～10核苷酸 B. 15～30核苷酸 C. <50个核苷酸 D.长度任意 E. 以上答案均不对34．引物设计时G＋C含量在引物中一般占（）A. 20～40﹪B. 30～60﹪C. 45～55﹪D.越高越好E.含量随意35．以下说法错误的是（）A引物中的碱基组成应该尽可能的随机分布。

B 引物自身不应该存在互补序列C 设计引物时应考虑使3‘端引物和5‘端引物具有相似的Tm值D 引物的5‘和3’端必须和模板严格配对结合E 引物与非特异扩增区的序列的同源性不要超过70﹪36．下列说法正确的是（）C. PCR反应常用的缓冲液为10－50mmol/L的Tris-HCl（室温 PH 8.3－8.8）D. 10mmol/L的KCl能促进引物的退火E. 加入的BSA有利于破坏模板的二级结构F.二甲基亚砜有利于保护TaqDNA酶的活性。

E. Mg2+能降低Taq DNA聚合酶的活性。

37. TaqDNA聚合酶活性需要以下哪种离子（ c ）A．K+ B. Na+ C. Mg2+ D. Ca2+ E. Cl-38．适用于DNA序列中单个碱基突变的检测的方法是：( d )A．筑巢PCR B. 多重PCR C. 锚定PCR D. LCR39．以下哪种PCR技术广泛应用于组织胚胎学和肿瘤学的研究（ a ）A．原位PCR B．差异显示PCR C．不对称PCR D．反向PCR40.已知一段设计好的引物的序列为GTGGATCCATGGCTCCTCTGAAGATTC,其Tm值为（）A. 78B. 80C. 82D. 84E. 无法计算41．以下关于dNTP的说法错误的是（）B.dNTP具有较强的酸性，使用时应将pH调至7.0-7.5C.PCR反应中，四种dNTP必须按比例配制，以减少反应的错配率。

D.dNTP的浓度过高会增加碱基的错配率E.dNTP的浓度低，反应速度下降，但特异性提高42. TaqDNA聚合酶可以不要模板在ds DNA的末端加上一个( )碱基.A. dGTPB. dCTPC. dATPD. dTTP43. 有关PCR的描述哪个不对( )A.是一种酶促反应B.引物决定扩增的特异性C.扩增的对象是DNA序列D.扩增的对象是氨基酸序列44. 催化PCR的酶是 ( )A.RNA聚合酶B.DNA聚合酶C.Taq DNA聚合酶D.反转录酶45. PCR产物具有特异性是因为( )A.Taq DNA酶保证了产物的特异性B.合适的变性,退火,延伸温度C.选择特异性的引物D.引物的Tm值不同.46．LCR的说法正确的是 ( )A.体系中采用DNA聚合酶B.须设计一对引物C.反应需经过变性,复性,连接D. LCR中,酶将dNTP加到引物的3-OH端E. LCR具有高度敏感性二、多项选择题1．下列关于退火温度说法正确的是（）A. 合适的退火温度应低于引物Tm值5℃左右。

B. 引物与模板的退火温度一般在45－55℃之间C. 在Tm值允许的范围内，选择偏低的退火温度可以提高PCR反应的特异性。

D. 退火时间至少需要一分钟。

2．进行PCR实验时以下措施有助于防止污染和结果的假阳性（）B.隔离不同的操作区C.分装试剂，减少重复取样所致的污染D.严格实验操作E.设立实验对照3．适用于扩增3‘或5‘端未知序列的PCR技术是（）A．反向PCR B. 锚定PCR C. 多重PCR D.不对称PCR4．以下关于PCR技术应用说法正确的是（）B.筑巢PCR和共享引物PCR有利于增强PCR反应的特异性，适用于模板含量极少的样品的检测C.不对称PCR可以大量制备单链DNA，可用于DNA的序列测定D .彩色PCR适用于基因诊断和自动化DNA序列测定E .定量PCR可用于基因表达和调控的研究F.差异显示PCR可用于筛选和克隆受发育，突变等各种因素影响下差异表达的基因5. 关于引物设计说法正确的是（）B.为保证PCR反应的特异性，所设计的引物长度一般>30个核苷酸C.引物设计时G＋C含量在引物中一般为45～55﹪D.按经验，引物自身存在的连续互补序列一般不超过3个碱基E.两个引物之间不应存在互补序列，尤其避免3‘端的互补重叠F.引物的3‘端可以游离而不影响PCR反应的进行6. 以下关于PCR的说法正确的是（）A.PCR的模板可以是DNA也可以是RNAB.PCR的模板必须从组织细胞中分离出来C.PCR反应的特异性取决于引物和模板DNA的结合位点。