染色体核型分析在男性不育症患者中的应用

染色体核型分析在男性不育症患者中的应用

陶洪昌,万寒征,罗金生,张永涛,周凯歌,王 燕,贺丽芳 (河南省南阳市不孕不育症医院,河南 南阳 473000)摘 要:目的 研究染色体核型分析在男性不育症患者中的诊断价值。方法 收集精液分析合并染色体核型分析593例,胚胎停滞发育染色体分析94例,并将其分为:无精子症组,少精子症组,弱精子症组,及胚胎发育停滞组,综合分析各组染色体核型,分析异常的比例及分布特点。结果 无精子症组染色体畸形率为29 4%,少精子症组患者中的染色体畸形率为18%,胚胎停止发育组中染色体畸形率41 2%,弱精子症及精子基本正常组染色体畸形率分别为10 8%及6 1%,无精子症及胚胎停滞发育组畸形率明显高于精液正常组。结论 生精功能障碍越严重,染色体异常核型检出率越高,对生精功能障碍及胚胎发育停滞的患者,应必须进行染色体核型分析。

关键词:男性不育;精液;染色体畸变

中图分类号:R698 2 文献标识码:B 文章编号:1006-9534(2009)07-0045-02

近年来,在引起男性不育的诸多因素中,遗传因素所起的作用越来越受到重视,染色体数目和结构异常或精子生成相关基因突变均能影响精子的生成导致男性不育,本文利用我院积累的男性不育症患者染色体资料,综合分析不同生精功能不育患者的染色体畸变率,从而明确染色体检查在男性不育患者中的适用范围为临床医生更好地进行诊断和治疗提供依据。

资料与方法

1.研究对象

选择2006年7月15日 2008年7月15日来我院进行染色体检查及精液分析检查患者687例,均同居1.5年以上性生活正常,未避孕且排除女方因素未能使女方受孕者,年龄在18-55岁之间,结婚时间最长的为20年,最短的为1.5年。所有患者精液分析均在排精后的3-7天采集并化验2次以上,根据精液等结果将试验对象分为以下4组。

(1)无精子症组:精液中未见精子,经反复离心,沉淀后仍未发现精子,两次检查结果相同。

(2)少精子症组:精子密度 20百万/m l。

(3)弱精子症组:精子活力a级<25%或a+b级<50%

(4)精液正常组:精子密度 20 106/m,l精子活率> 60%,精子活力a级 25%或b级+a级 50%,正常精子形态 30%。

(5)胚胎停滞组:女方胚胎发育均在1-3个月左右自行停滞流产。

2.方法

(1)精液常规检查:采用计算机辅助精液分析系统对精液进行全自动分析。

(2)细胞遗传学检查[1]:取静脉血进行淋巴细胞培养常规方法收获细胞制备染色体,点片,G显带镜检。每例计数30个分裂中期相,分析3-5个核型,作细胞遗传学诊断,异常核型则计算80个分裂中期相。必要时进行C显带。核型分析采用人类细胞遗传学国际命名体制(ISCN)进行。

结果

在这687例实验对象中有158例染色体畸变。529例染色体核型分析正常。其中,无精子患者252人,异常核型74人次,异常率29.4%;少精子患者155人,异常核型28人次,异常率18%,胚胎发育停滞,患者94人次,异常核型染色体39人次,异常核型率41.2%,精子情况基本正常组65人次,检出异常核型4人次,异常率6.1%;不同生精功能组间的染色体畸形率比较见表1。具体的异常染色体核型见表2。

表1 不同生精功能组间染色体畸形率的比较

名称总人数异常染色体人数异常染色体比率%无精子症组2527429.4

少精子症组1552818

弱精子症组1211310.8

正常精子症组6546

胚胎停滞组943941.2

表2 各组染色体畸形的具体核型

组别 异常核型例数(人)组别 异常核型例数(人)

无精子症46,XY(Y>18号)1046,XY Y<22号4 46,XY(Y<21号)546,XY,del(Y q)2

47,XXY3646,XY,t(2;12)2

46,XY(Y<22号)1246,XY(Y<18号)4

46,XY(Y=18号)5胚胎发育停滞46,XY(Y>18号)8

46,XY,Y q-Y<22号146,XY,t(1;9)21

46,XY,t(15;16)146,XY del(Yq)10

48,XXY+m i n1弱精子症46,XY(Y>18号)6

46,XY,r(18)146,XY(Y<22号)5

46,XX246,XY,t(2;12)1

少精子症45,X Y,-15,-21,t(15;21)(Y<21号)146,XY(Y=18号)1 46,XY(Y>18号)8精子正常组46,XY(Y=18号)3

46,XY Xq-Y=D组146,XY,t(18;21)(q1.1q1.2)1

46,XY Y=18号5

从以上列表上可以看出,胚胎发育停滞组中的染色体核型异常检出率明显增高,高达41.2%,紧随其后的是无精子症患者,其染色体畸形检出率为29.4%,主要异常染色体核型为47,XXY。少精子症患者中畸形染色体检出率为18%,弱精子及精子情况基本正常的检出率分别为10.8%;6%。这说明生精障碍程度越高,染色体异常检出率越高。

讨论

染色体所引起的男性不育其异常核型临床表现虽不尽相同,但其共同特征是影响精子的发育造成无精子,少精子,弱精子症,以及胚胎发育停滞。据文献报道,目前国内外对无精子症患者染色体异常率报道为11.9% 50%[2],本文无精子症患者染色体异常率为29.4%,胚胎发育停滞组染色体异常率为41.2%,各家异常检出率差别较大,其原因可能与研究对象及筛选的标准不一致有关。

根据本文统计显示染色体改变特别是性染色体改变多发生在无精子症组且检出率较高。从精子化验情况结合染色体分析来看,生精障碍越重,染色体异常检出率越高对生精障碍程度越重的患者染色体检查的必要性越大。

本文中,胚胎发育停滞组中的染色体核型检出的异常率最高,主要异常核型表现为染色体易位及染色体多态现象,可见对于一个无明显原因引起自然流产患者必须进行染色体检查。

在本文染色体异常核型中,克氏症占的比例最大且主要发生在无精子患者中,其核型主要为47,XXY,患者表现为无精子,双侧睾丸体积很小,无胡须及喉结,值得提出的是这些患者中阴茎发育大部分是正常的,且性生活正常。此类患者多了一条X染色体,其原因可能是由于亲代配子减数分裂时X染色体不分离的结果[3]本文检出46,XX男性2例,其染色体核型与男性外表不符,其发生机制可能是Yp-Xp末端交换,即在父源生殖细胞的减数分裂过程中,X和Y染色体的拟常染色体区片段发生交换[4],该2例患者均为无精子症且都发生在无精子症组。

染色体多态现象在本文中的出现率也比较常见,主要异常核型为大Y,即Y 18号染色体和小Y即Y 21号染色体,大小Y染色体本质上是Y q异染色质DNA过多的重复所产生的Y染色质长臂异染色质延长或短缺现象,有人认为Y 染色体的变异是有世代父系遗传中积累突变造成的是一种正常变异无临床意义。但从本文统计的情况来看,染色体多态在无精子症组、少弱精子症组及胚胎停滞组的出现率均较高,因此Y染色体多态不能简单地认为是一种无意义的遗传多态现象,临床医生应引起高度的重视。

综上所述,造成男性不育的原因很多,染色体异常是导致男性不育的重要原因之一,通过染色体检查不仅可以排除遗传因素造成的男性不育,减少不必要的经济开支而且对于及时确诊合理诊治具有重要作用,因此对有生精功能障碍中的无精子症及少精子症,死精子症,高畸形精子症,不明原因的不育症患者,以及胚胎发育停滞的患者应常规进行染色体核型分析,对于弱精子症及精液正常的患者,必要的情况下也应当进行染色体检查。另外随着ART等辅助生育技术的发展,特别是植入前遗传学诊断(PGD)的发展使染色体的检查提升到一个新的高度,更有效的避免了将遗传缺陷传给下一代的问题。

对于染色体异常而引起不育的患者,至今没有很好的有效的治疗方法,对于睾丸生精功能已破坏的克氏症患者来说,他人人工受精是唯一的获得生育的机会,对于其他类型的染色体异常患者,可根据睾丸生精功能受损的不同程度合理的选择治疗方法包括试管婴儿等技术。相信随着辅助生育技术的不断发展,将给染色体异常引起的不育患者带来更大的希望和治疗空间。

参考文献

[1]何家超,张名扬,等.染色体畸变与男性不育关系的探讨[J].中

国优生与遗传杂志,2007,12(15);38-40.

[2]王友宝.睾丸生精阻滞的病理,病因及治疗[J].国外医学泌尿系

系统分册,1997,17(4):147.

[3]何晓艳,梁毓,等.265例男性不育患者的染色体分析[J].中国优

生与遗传杂志,2006,14(1):47-48.

[4]牟海燕,邹叶青,等.5例性反转综合征的SRY基因检测[J].江

西医学检验,2005,8(23):359-366.

收稿日期:2008-11-18

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