树鼩在医学实验研究中的新进展

１乙型肝炎病毒
苏建家等…用人ＨＢＶ接种５３只树嗣，发现４５ 只树嗣（８４．９％）的血清和肝细胞有人ＨＢＶ标记 物，利用血清学、免疫组织化学、分子杂交以及电镜 检查等技术，在接种了人ＨＢＶ的树嗣血中可查见 ＨＢｓＡｇ及Ｄａｎｅ颗粒，在肝细胞也检测出ＨＢｓＡｇ， ＨＢｃＡｇ及ＨＢＶ ＤＮＡ，表明树嗣可感染人ＨＢＶ形成 动物模型。Ｙａｎ等口’人进一步证实树嗣能够感染人 ＨＢＶ，且Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ复制中间 体，ＨＢＶ能在树嗣连续传代感染。Ｗａｌｔｅｒ等¨１用树 胸原代肝脏细胞培养人ＨＢＶ，在上清中检测到 ＨＢｓＡｇ，随后用人ＨＢＶ接种树晌，接种２—３周后，
４肝癌
Ｙａｈ等¨副在建立了树嗣实验感染人ＨＢＶ模型 的基础上，进行了黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢｌ）与人ＨＢＶ 双因素在肝细胞癌（ＨＣＣ）形成中作用的研究，结果 首次在动物体内证实ＡＦＢｌ和ＨＢＶ在ＨＣＣ形成过 程中有协同作用。苏建家等¨刮通过动态观察ＡＦＢｌ 和ＨＢＶ在诱发树鼢ＨＣＣ形成过程中一些癌基因及 抑癌基因表达的变化，发现ｅｙｅｌｉｎ Ｄ１，ｃ·ｍｙｃ和ｐ１６ 基因的变异主要参与了肝癌的形成和演进，而ＣＤＫ ，Ｋｉ—ｒａ５和ｐ５３基因的变异既参与了ＨＣＣ的发生过 程，又参与了ＨＣＣ的形成和演进过程；ｐ２１和ｃ．ｆｏｓ 蛋白的过表达与Ｐ５３基因的失活，促进了ＨＣＣ的发 生和演迸。Ｓｕ等¨纠在上述实验的基础上又进一步 研究ｐ５３蛋白和ｐ２１蛋白在树胸肝癌形成过程中的 表达，发现ｐ５３蛋白的变异和肝癌的发生密切相关， ｐ２１蛋白的过量表达在肝癌的发生发展过程中起到 重要的作用。Ｌｉ等¨副利用ｅＤＮＡ微阵列技术对 ＡＦＢｌ诱发树嗣肝癌过程中的基因表达进行动态分 析，将观察到的基因归为四类，通过目的基因的筛 选和差异表达基因的分析，将有助于探明肝癌发生 的机制。秦雪等¨别通过比较ＡＦＢｌ诱发树嗣肝细 胞癌生长不同阶段的蛋白质表达谱的改变，筛查 ＡＦＢｌ诱发肝癌发生发展中的重要的蛋白质分子， 发现不同过氧化物蛋白的异常表达与肿瘤的发生 有密切关系。“等Ⅲｏ在上述研究的基础上，利用 ＲＴ—ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ迸一步研究过氧化物蛋白 ＰｒｘＩＩ在树嗣肝癌组织中过表达，表明其将在肝癌的 形成过程中发挥重要的作用。ＨＢｘ基因与肝癌发生 有明显的相关性。岳惠芬等¨¨通过研究构建了 ＨＢｘ基因表达载体，用微注射针注入树莉睾丸曲纲 精管，探讨用精原干细胞介导法建立表达ＨＢｘ基因 的转基因树嗣动物模型，结果表明带乙肝病毒ｘ基 因的树嗣转基因动物模型是可行的，但仍在 探索中。
６糖尿病
冼苏等ｍ１利用链服佐菌素（ＳＴＺ）腹腔注射于 树嗣诱其患糖尿病（ＤＭ）来探讨链服佐菌索树嗣糖 尿病动物模型的建立及其空腹血糖标准和最佳药 物剂量。结果ＳＴＺ能诱导树嗣ＤＭ模型，树嗣ＤＭ 模型标准为：ＦＢＧ＞１１．１ ｍｍｏｌ／Ｌ最佳ＳＴＺ剂量为 １５０ ｍｇ／ｋｇ。随后梁真等旧纠研究ＳＴＺ诱导树嗣ＤＭ 模型肝脏功能及形态学变化与肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－ ａ）的关系，发现早期即可出现明显的肝脏病理改 变，病理改变与肝功能异常程度无明显相关，但 ＴＮＦ－ａ血清浓度及在肝组织的表达明显增高，提示 ＴＮＦ·仅在糖尿病肝损害的发生中起一定的作用。 Ｍｅｎｇ等Ⅲ１入通过建立树晌ｌ型糖尿病模型 （ＴＩＤＭ）来探讨糖尿病肌病的发生机制，发现树嗣骨 骼肌纤维明显萎缩，肌纤维平均截面积明显减少， 电镜下呈散在灶性肌溶解，类似人类糖尿病肌病表 现。随着研究的深入，树晌ＤＭ模型的应用将会越 来越广泛。
２０１０年２月 第２０卷第２期
中国比较医学杂志 ＣＨＩＮＥＳＥ ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＣＯＭＰＡＲＡＴｌＶＥ ＭＥＤＩＣＩＮＥ
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２０１０ Ｖ０１．２０ Ｎｏ．２
树嗣在医学实验研究中的新进展
王晓娟，杨 春，苏建家
（广西医科大学附属肿瘤医院实验病理研究室，南宁５３００２１）
【摘要】树胞的许多生物学特性近似于人类，人们利用树嗣成功建立了多种人类病毒感染的动物模型。并在
［基金项目】国家自然科学基金委（项目号：３０５６０１６８）。 【作者简介】王晓娟（１９８２一），女，在读研究生，研究方向：肿瘤学。Ｅ—ｍａｉｌ：ｗｘｊ０２１０２１＠１２６．ＣＯｒｎ。 【通讯作者】杨春（１９６１一），男，副教授。Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｅｘ—ｙｓｎｇ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ。
万方数据
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２丙型肝炎病毒
近些年来，国内外的学者在树嗣是否可作为 ＨＣＶ感染的动物模型方面作过十分有益的尝试。 王海平∽１，谢志春等¨１研究发现树嗣可以感染人 ＨＣＶ。随后，赵西平等¨１研究发现树嗣肝细胞能够 有效地感染ＨＣＶ，在树嗣原代肝细胞培养的上清液 中可检出ＨＣＶ ＲＮＡ，揭示树晌肝细胞体外可支持 ＨＣＶ复制。Ｂａｒｔｈ等一１研究发现树娲肝细胞上的Ｂ 类Ｉ型清道夫受体，ＣＤ８１和其它细胞分子在ＨＣＶ 包膜粘合到树嗣肝细胞中起到重要作用。Ｘｕ 等¨引通过研究将人血清ＨＣＶ和细胞培养的ＨＣＶ 接种到成年树嗣中，利用巢式ＰＣＲ检测，发现只有 接种足量的人血清ＨＣＶ或者细胞培养的ＨＣＶ的并 且未使用免疫抑制剂的成年树砌的血浆中可检测 到ＨＣＶ．ＲＮＡ，且其数值变化与所测得的ＡＬＴ的数 值变化呈正相关。Ｔｉａｎ等¨川进一步研究树嗣肝细 胞ＣＤ８１与ＨＣＶ包膜上的糖蛋白Ｅ２的相互作用发 现，与人ＣＤ８１ ＬＥＬ相比较，由于树嗣ＣＤ８１ ＬＥＬ的 第六号氨基酸残基的改变，从而使树嗣ＣＤ８１与 ＨＣＶ Ｅ２的相互作用显著降低。随着研究的迸一步 深入，树嗣可能成为理想的ＨＣＶ感染动物模型。
７神经系统研究的模型
何宇红等旧刊采用ＰＨＡ—Ｌ顺行追踪法，以树嘲 为实验动物，观察了内侧隔核－斜角带核垂直部的 不同部位对海马各亚区的投射纤维的形态与分布 特征。研究结果为进一步认识内侧隔核．斜角带核 垂直部一海马通路提供了新的形态学依据。赵刚 等弘副建立光化学反应诱导树胸局部脑缺血模型， 用高效液相色谱一ＰＩＴＣ衍生法和ＩＬ．１３０６型血气分 析仪检测海马细胞外液，结果发现氨基酸平衡紊乱 参与了脑损伤的发生，氨基酸的代谢改变与缺血后 细胞微环境的变化有关。Ｌｉ等Ⅲ１建立树鼢血栓性 局部脑缺血及缺血后适应（ＰＣ）模型，发现多次短暂 的闭塞动物的颈动脉可延长树嗣脑缺血治疗的“时
万方数据
间窗”，为未来脑缺血Ｐｃ研究提供依据。
８视觉系统的模型
树嗣具有很好的色觉，较高的辨色准确率，且 对光暗度很敏感，很早就应用于视觉系统的实验研 究。Ｔｈｏｍａｓ等ｐ叫通过研究持续的黑暗状态对幼年 树胸的折光系统及玻璃体前房深度的影响，并利用 单眼近视镜片对已经造成的近视的矫正，发现视觉 信号的传导不仅能建立正视眼而且能在少年期树 嗣维持。Ｓａｎｇｅｅｔｈａ等¨ｕ研究树嗣对双目透镜的反 应，双目透镜可以降低眼睛的伸张度，并进一步研 究其机理发现树驹对正透镜产生持续反应的范围 是＋４Ｄ到＋６Ｄ之间，正透镜的散焦抑制了近视眼 的发展。Ｐｏｒｔｉａ等¨刈研究发现激活乙酰胆碱受体可 诱导树鼬视觉皮层的兴奋性突触的长期可塑性，但 是根据在该皮层区所激活的受体量的不同，而存在 着可塑性方向的差异性和具体的乙酰胆碱受体及 其所需要的信号传导机制的不同。ＭｃＢｒｉｅｎ等¨２１通 过单眼视觉剥夺诱导树嗣近视模型来研究眼组织 毒蕈碱受体及其亚型的表达和在近视发展过程中 调节作用，利用ｒｅａｌ ｔｉｍｅ－ＰＣＲ技术和免疫组织化学 技术发现树嗣视网膜，脉络膜和巩膜上表达所有五 个胆碱受体亚型，但是在近视的发展过程中没有发 现相应的变化，表明乙酰胆碱系统对于树晌眼睛的 生长发育起到间接作用。随着研究的深入，树嗣将 会成成为重要的视觉实验模型。
中国比较医学杂志２０１０年２月第２０卷第２期Ｃｈｉｎ Ｊ ＣｏｍｐＭｅｄ，Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１０，Ｖ０１．２０．Ｎｏ．２
５ 人类免疫缺陷病毒
Ｈｏｆｍａｎｎ等＂２１用ＨＩＶ一１基因复制缺陷载体感 染树嗣细胞，发现树胸细胞可以支持ＨＩＶ一１进入靶 细胞后的转录及复制等步骤。张立等¨刮以ＨＩＶ一１ 全病毒体外感染树嘲免疫细胞，结果表明，树驹的 这些免疫细胞在体外未能感染上ＨＩＶ－１，推测可能 是树嗣免疫细胞的ＨＩＶ受体（ＣＤ４）和辅助受体 （ＣＣＲ５和ＣＸＣＲ４）与人免疫细胞的差别较大。树 胸ＨＩＶ模型仍在探索中。
３丁型肝炎病毒
李奇芬等ｍ川以树胸为对象，建立丁型肝炎病 毒（ＨＤＶ）／乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）实验感染动物模 型，研究证实树嗣在感染ＨＢＶ的基础上，可通过同 时和重叠感染的方式感染ＨＤＶ。肝组织病理学观 察发现，树胸感染ＨＤＶ后，引起的丁型肝炎的肝脏
万方数据
病理变化与人类的极其相似，可呈现不同的病理类 型，易形成慢性发病过程。蒋业贵等¨引采用免疫 组化技术对ＨＤＶ／ＨＢＶ感染树驹肝组织中Ｆａｓ／ ＦａｓＬ、Ｂｃｌ／Ｂａｘ和ＩＣＥ的表达进行检测；应用原位末 端标记技术对肝细胞凋亡进行检测。结论表明肝 细胞内ＨＤＡ ｇ表达可诱导Ｆａｓ、ＦａｓＬ、Ｂａｘ和ＩＣＥ表 达，但对Ｂｅｌ２表达无明显诱导作用。上述实验表 明树嗣可作为感染ＨＤＶ实验动物。
中国比较医学杂志２０１０年２月第２０卷第２期Ｃｈｉｎ Ｊ ＣｏｍｐＭｅｄ。Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１０，Ｖ０１．２０．Ｎｏ．２
即可在实验树血嗣清中检测到不断增多的抗一ＨＢｅ 抗体和抗一ＨＢｓ抗体，并大多数实验动物还能检测 到抗．ＨＢｅ抗体，说明树嗣的确对人ＨＢＶ易感。 Ｇｌｅｂｅ等Ｈ１建立优化树嗣肝细胞培养，并利用定量 ＲＴ．ＰＣＲ来检测ＨＢＶ ＤＮＡ及其转运，病毒基因的表 达，结果表明树嗣肝细胞培养适合ＨＢＶ感染周期的 早期研究及相关抗体的测定。杨芳等¨１利用分子 生物学、免疫学和形态学等多种检测方法，对新生 树嗣接种ＨＢＶ后进行长达１年以上的体内感染标 志物动态观察，表明新生树嗣能够长期感染ＨＢＶ， 并且ＨＢＶ能够在树嗣体内稳定复制和长期存在。 但是成年树嗣能够成为长期的ＨＢＶ慢性携带者未 见报道，树嗣能否成为人乙型肝炎的理想动物模型 仍需进一步研究。
肿瘤、内分泌、神经、视觉等方面有相当广泛和深入的应用和研究。本文概述了树朐在医学实验研究中的新进展。
【关键词ｌ树嗣；模型，动物
【中图分类号】Ｒ一３３
【文献标识码】Ａ
【文章编号】１６７１－７８５６（２ｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｒｅｅ Ｓｈｒｅｗ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ