分子生物学考试复习资料
分子生物学复习资料
分子生物学复习资料分子生物学是研究生命体内分子结构和功能的一门学科,其研究范围包括基因表达和调控、蛋白质结构和功能、DNA重复和修复、细胞信号传递等多个方面。
以下是分子生物学复习资料,帮助大家复习此学科。
DNA1. DNA是双螺旋结构,由磷酸、核糖和四种碱基(腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶)组成。
2. DNA的复制包括三个步骤:解旋、合成和连接。
3. DNA合成是通过DNA聚合酶进行的,这些酶在模板链上添加互补碱基。
4. DNA可以通过DNA甲基化调节基因表达。
5. DNA可以被DNA锁蛋白等转录因子识别和结合。
RNA1. RNA是由核糖、磷酸和四种碱基 (腺嘌呤、尿嘧啶、胸腺嘧啶和鸟嘌呤)组成。
2. RNA主要分为三种类型:mRNA (信使RNA)、rRNA (核糖体RNA)和tRNA (转运RNA)。
3. 基因表达分为两个步骤:转录和翻译。
4. 转录过程分为三个步骤:启动、延伸和终止。
5. tRNA担任将氨基酸与相应的密码子匹配的角色。
蛋白质1. 蛋白质是由氨基酸组成的长链。
2. 氨基酸有20种类型,它们是由不同的侧链区分的。
3. 蛋白质折叠形态对其功能至关重要。
4. 蛋白质可以通过转录调节子的活性来控制基因表达。
5. 蛋白质可以通过磷酸化、甲基化和泛素化等方式进行修饰,从而调节其功能。
细胞信号传递1. 细胞信号传递是细胞中信号分子相互作用的过程。
2. 细胞信号分为内部信号和外部信号。
3. 细胞膜可以通过受体蛋白与外部信号相互作用。
4. 内部信号分子可以通过传递信号的级联反应来控制基因表达等生物过程。
5. 蛋白激酶和蛋白磷酸酶是关键的信号传递分子。
总结以上是分子生物学的复习资料,包括DNA、RNA、蛋白质和细胞信号传递等方面的知识点。
学习分子生物学需要积累大量的概念和实验技术,以便理解分子间相互作用和影响它们在细胞和生物中的功能。
希望此资料对大家的复习有所帮助。
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题型:名词解释10*2分;填空35*1分;简答5*7分;论述1*10分第二章核酸的结构与功能1.简述细胞的遗传物质,怎样证明DNA是遗传物质答:基因学说:基因作为遗传因子决定着生物的性状,并能自我复制,稳定地遗传给后代。
对于DNA是遗传物质的认识经历了三个阶段:①肺炎双球菌实验:说明性状可遗传给后代;②T2噬菌体侵染E.coli【35S、32P同位素示踪法】遗传物质是核酸,不是蛋白质;③DNA双螺旋结构模型:决定DNA分子具有自我复制和亲代向子代传递遗传信息能力。
2.研究DNA的一级结构有什么重要生物学意义(1)核酸的一级结构是指分子中的脱氧核苷酸/核苷酸的排列顺序即碱基排列顺序。
即一个核甘酸的戊糖3’醇羟基和另一个核苷酸的5’磷酸基形成3’,5’-磷酸二酯键。
(2)DNA分子一级结构定则:①不同物种间DNA碱基组成一般是不同的;②同一物种不同组织中的DNA样品的碱基组成相同;③一个物种的DNA碱基组成不会因个体的年龄营养状况和环境改变而改变;④任何一个DNA样品中,A=T,C=G,A+C=T+G,A+C+G+T=100%;⑤多聚核苷酸均有5’末端和3’末端;⑥一级结构决定了二级结构,而二级结构又决定和影响着一级结构的信息功能,两者处于动态平衡中;⑦碱基顺序就是遗传信息存储的分子形式。
3.DNA双螺旋结构有哪些形式,说明其主要特点和区别答:(1)稳定结构因素:①碱基对之间形成的氢键;②碱基堆积力;③正负电荷作用。
(2)结构特征:①主链:两主链以反平行方式盘绕,脱氧核糖和磷酸通过3’,5’-磷酸二酯键连成骨架,磷酸与核糖主链位于螺旋外侧,碱基排列在螺旋内侧。
②碱基配对:嘌呤与嘧啶配对,A、T形成两个氢键,C、G形成三个氢键→碱基互补;③螺旋参数:两个相邻碱基对之间绕螺旋轴旋转夹角为36°,旋转一圈包括10个核苷酸;④大沟与小沟─┬大沟(2.2nm)空间位阻较小,碱基种类差异易于识别,DNA结构│蛋白识别双螺旋结构的特异区域。
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分子生物学复习资料第一章:绪论1、DNA重组技术和基因工程技术答:将不同DNA片段(基因或基因的一部分)按照人们的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状一种技术称为DNA重组技术或基因工程技术。
2、请简述现代分子生物学的研究内容。
答:①DNA重组技术(基因工程),②基因表达调控(核酸生物学),③生物大分子结构功能研究(结构分子生物学),④基因组、功能基因组与生物信息学研究。
1.DNA重组技术和基因工程技术。
答:DNA重组技术又称基因工程技术,目的是将不同DNA片段(基因或基因的一部分)按照人们的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状2.请简述现代分子生物学的研究内容。
答:1 DNA重组技术(基因工程);2基因表达调控(核酸生物学);3生物大分子结构功能(结构分子生物学);4基因组、功能基因组与生物信息学研究。
第二章:遗传的物质基础及基因与基因组结构3、DNA的一、二、三级结构特征答:①DNA的一级结构:是指4种核苷酸的连接及其排列顺序,表示了该DNA分子的化学构成,DNA不仅具有严格的化学组成,还具有特殊的空间结构。
它主要以有规则的双螺旋形式存在,其基本特征是:a.DNA分子是由两条互相平行的双脱氧核苷酸长链盘绕而成的;b.DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接,排在外侧构成基本骨架,碱基排列在内侧;c.两条链上的碱基通过氢键相结合,形成碱基对,并遵守碱基互补配对原则。
②DNA的二级结构:是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构。
通常情况下,DNA的二级结构分两大类:一类是右手螺旋,如A-DNA和B-DNA;另一类是左手螺旋,即Z-DNA;(B-DNA 是最常见的DNA构象, A-DNA和Z-DNA可能具有不同的生物活性)③DNA的高级结构:是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。
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第一章绪论1.1 分子生物学:研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。
1.2 分子生物学三条基本原理:(1)构成生物体各类有机大分子的单体在不同生物中都是相同的;(2)生物体内一切有机大分子的构成都遵循相同规律;(3)某一特定生物体所拥有的核酸及蛋白质分子决定它的属性。
1.3 现代分子生物学的四个研究方向:(1)重组DNA技术(基因工程);(2)基因表达调控研究;(3)生物大分子的结构功能研究(结构分子研究);(4)基因组、功能基因组与生物信息学研究。
第二章染色体与DNA2.1 遗传物质的主要载体是染色体2.1.1 染色体上蛋白质主要包括组蛋白和非组蛋白组蛋白(含有大量碱性AA:Lys、Arg):H1、H2A、H2B、H3、H4组蛋白特性:(1)进化上的极端保守性(2)无组织特异性(3)肽端上氨基酸分布的不对称性(4)组蛋白的修饰作用(5)富含Lys的组蛋白H5非组蛋白分类:HMG蛋白(high mobility group protein)、DNA结合蛋白、A24非组蛋白2.1.2 真核细胞DNA序列分为以下三类:不重复序列、中度重复序列(重复次数为10~104)、高度重复序列(仅发现真核)。
C值:通常是指一种生物体单倍体基因组DNA的总量,以每细胞内的皮克(pg)数表示。
C值反常现象:也称C值谬论,指C指往往与种系的进化复杂性不一致的现象,及基因组大小与遗传复杂性之间没有必然的联系,某些较低等的生物C值却很大,如一些两栖类物种的C值甚至比哺乳动物还大。
2.1.3 真核生物基因组的结构特点总结归纳如下:(1)真核基因组庞大,一般远大于原核基因组(2)真核基因组中存在大量的重复序列(3)真核基因组的大部分为非编码序列,占基因组序列的90%,该特点是真核生物与细菌和病毒之间的最主要的区别(4)真核基因组的转录产物为单顺反子(5)真核基因是断裂基因,有内含子结构(6)真核基因组中存在大量顺式作用元件,包括启动子、增强子、沉默子等(7)真核基因组中存在大量的DNA多态性。
分子生物学复习资料精选全文
可编辑修改精选全文完整版分子生物学复习资料名词解释:复制叉:复制时,双链DNA要解开成两股链分别进行,所以,这个复制起点呈现叉子的形式,被称为复制叉。
复制子:单独复制的一个DNA单元被称为一个复制子,是一个可移动的单位。
一个复制子在任何一个细胞周期只复制一次。
Klenow片段:用枯草杆菌蛋白酶处理大肠杆菌DNA聚合酶而从全酶中除去5’-3’外切酶活性的肽段后的大片段肽段。
外切酶:是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解3、5-磷酸二酯键,降解核苷酸的酶。
内切酶:是一种能催化多核苷酸的链断裂的酶,只对脱氧核糖核酸内一定碱基序列中某一定位置发生作用,把这位置的链切开。
前导链:在DNA复制过程中,与复制叉运动方向相同,以5'-3'方向连续合成的链。
冈崎片段:在DNA复制过程中,前导链连续合成,而滞后链只能是断续的合成5’-3’的多个短片段,这些不连续的片段称为冈崎片段。
端粒:是真核生物线性基因组DNA末端的一种特殊结构,它是一段DNA序列和蛋白质形成的复合体。
端粒酶:是负责染色体末端(端粒)复制,是由 RNA 和蛋白质组成的核糖核蛋白.其中的 RNA 成分是端粒复制的模板.(因此端粒是逆转录酶) 作用:维持端粒长度.DNA复制参与的酶和蛋白:拓扑异构酶,解链酶,单链结合蛋白(SSB蛋白),引发酶,DNA聚合酶,DNA连接酶。
线性DNA末端复制方式:1)环化;2)末端形成发卡结构;3)某些蛋白质的启动。
DNA修复的方式:错配修复,切除修复,重组修复,DNA直接修复,SOS反应。
AP位点:所有细胞中都带有不同类型、能识别受损核酸位点的糖苷水解酶,它能特异性切除受损核苷酸上的N-β糖苷键,在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点,统称为AP位点。
AP修复:DNA分子中一旦产生了AP位点,AP核酸内切酶就会把受损核苷酸的糖苷-磷酸键切开,并移去包括AP位点核苷酸在内的小片段DNA,由DNA聚合酶Ⅰ合成新的片段,最终由DNA连接酶把两者连成新的被修复的DNA链。
分子生物学复习题纲
下列关于 DNA 复制的说法不正确的有( A )。 按 3′ → 5′方向进行 需要 4 种 dNTP 的参与 需要 DNA 连接酶的作用 涉及 RNA 引物的形成 有关滚环复制不正确是( B ) 可以使复制子大量扩增 产生的复制子总是双链环状 是噬菌体 DNA 在细菌中最通常的一种复制方式 复制子中编码切口蛋白的基因的表达是自动调节的
2.一个复制子是( )。 A.细胞分裂期间复制产物被分离之后的 DNA 片段 B.复制的 DNA 片段和在此过程中所需的酶和蛋白质 C.任何自发复制的 DNA 序列(它与复制起点相连) D.任何给定的复制机制的产物(如单环) E.复制起点和复制叉之间的 DNA 片段
13.一个复制子是( C )。 A.细胞分裂期间复制产物被分离之后的 DNA 片段 B.复制的 DNA 片段和在此过程中所需的酶和蛋白质 C.任何自发复制的 DNA 序列(它与复制起点相连) D.任何给定的复制机制的产物(如单环) E.复制起点和复制叉之间的 DNA 片段 14.下述特征不是所有(原核生物、真核生物和病毒)复制起始位点都共有的是( B )。 A.起始位点是包括多个短重复序列的独特 DNA 片段 B.起始位点是形成稳定二级结构的回文序列 C.多聚体 DNA 结合蛋白专一性识别这些短的重复序列 D.起始位点旁侧序列是 A-T 丰富的,能使 DNA 螺旋解开
在DNA修复过程中除了需要DNA聚合酶外,还需要DNA连接酶
3
,其作用是将DNA中相邻的碱基链接起来,原核生物DNA聚合酶
4
具有两种外切酶活性,分别从5’→3’和3’→5’降解DNA
5
DNA聚合酶Ⅱ和Ⅲ只有3’→5’外切酶活性。
6
DNA修复包括三个步骤: DNA修复核酸酶 对 DNA链上不正
分子生物学复习资料全
分子生物学复习资料全1. 概述- 分子生物学是研究生物体分子层面结构和功能的科学领域。
- 分子生物学主要关注DNA、RNA、蛋白质等生物分子的合成、结构和功能。
2. DNA- DNA是遗传物质,储存了生物体的遗传信息。
- DNA由核苷酸组成,包括脱氧核糖核苷酸和四种碱基:腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鳕嘧啶。
- DNA的双螺旋结构由两条互补链以螺旋形式相互缠绕而成。
3. RNA- RNA在细胞中起着重要的生物学功能。
- RNA由核苷酸组成,包括核糖核苷酸和四种碱基:腺嘌呤、鸟嘌呤、尿嘧啶和胞嘧啶。
- RNA分为多种类型,包括mRNA、tRNA和rRNA等。
4. 蛋白质合成- 蛋白质合成是通过转录和翻译两个过程完成的。
- 转录是将DNA转录成mRNA的过程。
- 翻译是将mRNA翻译成蛋白质的过程。
5. 基因调控- 基因调控是控制基因表达水平的过程。
- 基因调控包括转录因子的结合、DNA甲基化和染色质重塑等。
6. 克隆技术- 克隆技术是复制生物体基因或DNA序列的方法。
- 主要克隆技术包括限制性内切酶切割、聚合酶链式反应和DNA串联。
7. PCR- PCR是一种通过体外扩增DNA片段的技术。
- PCR包括三个步骤:变性、退火和延伸。
8. 分子遗传学- 分子遗传学研究基因在遗传传递中的分子机制。
- 分子遗传学主要研究基因突变、基因重组和基因表达等。
9. DNA测序- DNA测序是确定DNA序列的方法。
- DNA测序技术包括Sanger测序和高通量测序等。
10. 基因工程- 基因工程是利用DNA技术修改或转移基因的技术。
- 基因工程在农业、医药和生物学研究等领域有着广泛的应用。
以上是关于分子生物学的简要复习资料,希望能对你的学习有所帮助。
(生物科技行业类)分子生物学复习资料
1.探针:带有某些标记物的特异性核酸序列片段。
2.分子杂交:是核酸研究中一项最基本的实验技术。
其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA或RNA片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子。
3.限制性核酸内切酶:是可以识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA 的一类内切酶,简称限制酶。
4.cDNA:与RNA链互补的单链DNA,以其RNA为模板,在适当引物的存在下,由RNA与DNA 进行一定条件下合成的,就是cDNA。
5.基因组DNA:组成生物基因组的所有DNA。
6.基因(gene):是生物体遗传物质的基本单位,是载有特定遗传信息的DNA分子的片段。
7.基因组(genome):一个细胞或病毒所携带的全部遗传信息或整套基因。
8.基因表达(gene expression):是指储存遗传信息的基因经过一系列步骤表现出其生物功能的整个过程,即转录和翻译过程。
9.时间特异性(temporal specificity):单细胞生物的某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生;多细胞生物的相应基因的表达在机体发育的不同阶段严格按一定的时间顺序开启或关闭。
10.空间特异性(spatial specificity):在机体发育的某一阶段,同一个基因的表达产物在不同的组织器官分布不同。
11.组成性基因表达(管家基因):不大受环境变动而变化的一类基因表达,在个体生长过程中,几乎在所有的组织中持续表达或变化很小。
这些基因一般被称为管家基因。
12.反式调节(trans-regulation):由某一基因表达产生的蛋白质因子,通过与另一基因的特异的顺式作用元件相互作用,调节其表达。
13.顺式调节(cis-regulation):由蛋白质因子可特异识别、结合自身基因的调节序列,调节自身基因的表达。
14.单顺反子:在多数真核生物中,编码蛋白质的基因的初级转录物,被加工成一种mRNA,一般翻译出一条多肽链。
分子生物学复习资料
1.分子生物学的主要研究内容核酸的分子生物学;蛋白质的分子生物学;分子生物学技术2。
理论上的三大发现40年代,Avery发现了生物遗传物质的化学本质是DNA;50年代,Walson-crick提出了DNA结构的双螺旋模型,搞清楚了生物遗传的分子机制;60年代,确定了遗传信息的传递方式:DNA→RNA→protein.3。
技术上的3大发明“基因剪刀”—限制性核酸内切酶发明;载体(“车子”)-基因工程(技术)诞生的第2个技术准备;1970年,Baltimore和Temin等同时各自发现了逆转录酶,打破了遗传学的中心法则,使真核基因的制备成为可能。
4。
证明遗传物质是核酸的试验:肺炎球菌转化试验;噬菌体转染试验5。
B—DNA双螺旋结构1953年Watson和Crick提出DNA双螺旋结构模型。
DNA是由两条反向平行的多核苷酸链组成的,分子的主链(磷酸核糖骨架)位于螺旋的外侧,碱基则堆积于螺旋的内部,两条多核苷酸链通过碱基间的氢键相结合。
6。
双螺旋模型参数直径20Å;螺距为34Å(任一条链绕轴一周所升降的距离);每圈有10个核苷酸(碱基);两个碱基之间的垂直距离是 3.4Å。
螺旋转角是36度;有大沟和小沟配对碱基并不充满双螺旋空间,且碱基对占据的空间不对称。
7。
大沟中碱基差异容易识别,往往是蛋白质因子结合特异DAN序列的位点.8.DNA的双螺旋结构稳定因素氢键;碱基堆积力,碱基处于疏水环境中;磷酸基上负电荷被胞内组蛋白或正离子中和,离子键;范德华力9.B-DNA来自相对湿度为92%所得到的DNA钠盐纤维;还发现了A、C、D、E等右手双螺旋和左手双螺旋,Z构象等形式。
在溶液中,DNA一般为B型.但在水的活度降低时,就转变为A型.自然状态下,A-DNA可能存在于DNA-RNA的杂交分子,和双链RNA分子中。
与B—DNA相比,Z—DNA更为细长.有证据表明,Z—DNA存在于天然DNA中,但量极微小,有些证据表明,Z—DNA的存在与基因表达的调控有关。
分子生物学考试复习重点
分子生物学重点1.将外源基因导入的方法常用的基因工程真核细胞包括酵母细胞、动物细胞和植物细胞。
(1)外源基因导入酵母细胞:在对酵母细胞进行外源DNA转化时,一般先需要用酶将其细胞壁消化水解,变成原生质体。
蜗牛消化酶具有纤维素酶、甘露聚糖酶、葡萄糖酸酶以及几丁质酶等,对酵母菌细胞壁有良好水解作用。
原生质体在氯化钙和聚乙二醇存在下,重组DNA能容易地被宿主细胞吸收,转化的原生质体悬浮在营养瓶中,即可再生出新的细胞壁。
(2)外源基因导入动物细胞常用的方法有:1.磷酸钙共沉淀法。
2.DEAE-葡聚糖或聚阳离子,它们能结合DNA并促使细胞吸收;3.脂质体法4.脂质转染法5.电穿孔法6.显微注射法(3)外源基因导入植物细胞常用的方法有:1.转化法2.电穿孔和脂质体法3.显微注射法5.基因枪法4.农杆菌感染法:根瘤农杆菌的Ti质粒上有一段T-DNA ,又称转移DNA,能携带外源基因转移到植物细胞内,并整合到染色体DNA中,因此Ti质粒是目前植物基因工程中最常用的理想的基因载体。
2.核糖体活性中心(核糖体的活性位点)(1)mRNA结合位点(2)P位点(3)A位点(4)肽基转移酶活性位点(转肽酶中心)(5)5SrRNA位点(50S上)(6)E位点(50S上)与氨酰基-tRNA释放有关。
大小亚基在合成中的分工小亚基:对mRNA特殊序列的识别(SD序列)密码子与反密码子的相互作用。
大亚基:AA-tRNA,肽基-tRNA的结合,肽键的形成等。
3.凝胶电泳(操作的主要因素)技术原理流程图目的:分离不同的DNA分子电泳迁移率:电泳分子在电场作用下的迁移速度。
影响迁移率的因素:(1)与电场强度、电泳分子净电荷成正比;(2)与电泳分子的摩擦系数成反比分子摩擦系数为分子大小、极性、介质粘度的函数。
.DNA和RNA在电场中为多聚阴离子,电泳时向正极移动。
速度在于分子大小和构型。
.电泳介质:一般用琼脂糖和聚丙烯酰胺,浓度与所分离的DNA和RNA的大小有关。
分子生物学考试资料
1.参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些?它们具有什么功能?(1)mRNA:蛋白质合成的模板;(2)tRNA:蛋白质合成的氨基酸运载工具;(3)核糖体:蛋白质合成的场所;⑷辅助因子:(a)起始因子—参与蛋白质合成起始复合物形成;(b)延长因子—肽链的延伸作用;(c)释放因子—终止肽链合成并从核糖体上释放出来。
2.原核细胞和真核细胞在合成蛋白质的起始过程有什么区别。
(1)起始因子不同:原核为IF-1,IF-2,IF-2,真核起始因子达十几种:(2)起始氨酰-tRNA不同:原核为fMet-tRNA fMet,真核Met-tRNA Met: (3)核糖体不同:原核为70S核粒体,可分为30S和50S两种亚基,真核为80S核糖体,分40S和60S两种亚基。
3.请比较原核生物和真核生物mRNA的结构特征;真核生物的帽子结构的加工方式和功能;Poly(A)的加工方式和功能。
(1)原核生物的半衰期短(2)许多原核生物mRNA可能以多顺反子的形式存在,(3)原核生物mRNA5'端无帽子结构,3'端没有或只有较短的poly A结构;真核生物的5'端存在帽子结构(4)绝大多数真核生物mRNA具有多聚A尾巴。
5’帽子结构:在细胞核内对hnRNA的5’端加上m7GTP的结构。
在磷酸酶的作用下,将5’端的磷酸基水解,然后再由鸟苷酸转移酶加上鸟苷三磷酸,形成GpppN的结构,尿苷酸-7-甲基转移酶再对G进行甲基化。
mRNA5’端的这种结构成为帽子功能:①对翻译起识别作用—为核糖体识别RNA提供信号②增加mRNA 的稳定性,使5’端免遭外切核酸酶的攻击③与某些RNA病毒的正链合成有关3’端加尾:在细胞核内完成。
首先由核酸内切开mRNA3’端的特定部位,然后由poly(A)合成酶催化多聚腺苷酸反应,加入poly(A)的尾巴。
在poly(A)位点上游10-35核苷酸处有AAUAAA序列,下游约50核苷酸处存在富含GU的序列,这两处是剪切和加poly(A)所需的信号。
分子生物学复习资料-绝对重点
分子生物学复习资料(第一版)一名词解释1 Southern blot / Northern blot—DNA斑迹法 / RNA转移吸印技术。
是为了检测待检基因或其表达产物的性质和数量(基因拷贝数)常用的核酸分子杂交技术。
二者均属于印迹转移杂交术,所不同的是前者用于检测DNA样品;后者用于检测RNA样品。
2 cis-acting element / trans-acting factor—顺式作用元件 / 反式作用因子。
均为真核生物基因中的转录调控序列。
顺式作用元件是与结构基因表达调控相关、能被基因调控蛋白特异性识别和结合的特定DNA序列,包括启动子和上游启动子元件、增强子、反应元件和poly(A)加尾信号。
反式作用因子是能与顺式作用元件特异性结合、对基因表达的转录起始过程有调控作用的蛋白质因子,如RNA 聚合酶、转录因子、转录激活因子、抑制因子。
3VNTR / STR—可变数目串联重复序列 / 短串联重复。
均为非编码区的串联重复序列。
前者也叫高度可变的小卫星DNA,重复单位约9~24bp,重复次数变化大,变化高度多态性;后者也叫微卫星DNA,重复单位约2~6 bp,重复次数约10~60次,总长度通常小于150bp 。
(参考第7题)4 viral oncogene / cellular oncogene—病毒癌基因 / 细胞癌基因。
病毒癌基因指存在于逆转录病毒中、体外能使细胞转化、体内能导致肿瘤发生的基因;细胞癌基因也叫原癌基因,指存在于细胞内,与病毒癌基因同源的基因序列。
正常情况下不激活,与细胞增殖相关,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守。
当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤。
第1 页/共16 页5 ORF / UTR—展开阅读框 / 非翻译区。
均指在mRNA中的核苷酸序列。
前者是特定蛋白质多肽链的序列信息,从起始密码子开始到终止密码子结束,决定蛋白质分子的一级功能;后者是位于前者的5'端上游和3'端下游的、没有编码功能的序列,主要参加翻译起始调控,为前者的多肽链序列信息改变为多肽链所必须。
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第一章绪论一、三大发现:列文·虎克的细胞学说、焦耳用实验确立的能量守恒定律、达尔文的进化论。
二、分子生物学定义:从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学,主要指遗传信息的传递(复制)、保持(损伤和修复)、基因的表达(转录和翻译)与调控。
三、分子生物学研究内容:1、DNA重组技术(基因工程) 2、基因的表达调控 3、生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学) 4、基因组、功能基因组与生物信息学研究四、DNA发现的几个实验:美国科学家AVERY用S型和R型致病菌侵染小鼠的实验、美国科学家HERSHEY在1952年从事的同位素分子标记法噬菌体侵染细菌的试验。
第二章染色体与DNA一、染色体的结构和组成原核生物:DNA形成一系列的环状附着在非组蛋白上形成类核。
真核生物染色体有蛋白质和DNA组成,蛋白质包括组蛋白(H1,H2A、H2B、H3、H4)和非组蛋白。
2、C值是一种生物的单倍体基因组DNA的总量。
C值往往与种系的进化的复杂程度不一致,某些低等生物却有较大的C值,这就是著名的“C值反常现象”。
3、DNA的一级结构:指4种脱氧核苷酸的连接及其排列顺序, DNA序列是这一概念的简称。
4、双螺旋的基本特点:双链反向平行配对而成;脱氧核糖和磷酸交替连接,构成DNA骨架,碱基排在内侧;内侧碱基通过氢键互补形成碱基对(A:T,C:G)。
5、DNA 的二级结构指两条多核苷酸链反向平行盘绕所产生的双螺旋结构。
是有Watson 和Crick在1953年共同发现的。
分类:右手螺旋(是其通常存在形式):A-DNA,B-DNA。
左手螺旋:Z-DNA。
6、超螺旋:DNA双螺旋结构中,一般每转一圈有十个核苷酸对,双螺旋总处于能量最低状态。
正常DNA双螺旋额外的多转或少转几圈,就会出现双螺旋空间结构改变,在DNA 分子中形成额外张力,若此时DNA分子的末端是固定的或是环状分子,双联不能自由转动,额外的张力就不能释放而导致DNA分子内部院子空间位置的重排,造成扭曲,即出现超螺旋结构。
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第一题:1) Replicon复制子是DNA复制是从一个DNA复制起点开始,最终由这个起点起始的复制叉完成的片段。
DNA 中发生复制的独立单位称为复制子。
2) leading strand前导链:与复制叉移动的方向一致,通过连续的5′-3′聚合合成的新的DNA 链。
3) transposable element转座因子:又叫可移动因子,它是指一段特定的DNA序列,可从原来的位置上单独复制或自动脱落下来,经环化后再插入到染色体其他位置,并对插入位置的附近基因产生各种遗传学效应。
4) proteome 蛋白质组:蛋白质组是指组织或细胞中所有的蛋白质的集合。
5) interrupted gene间隔基因或断裂基因(splitting gene)即真核生物的结构基因是由若干个外显子和内含子序列相间隔排列组成的间隔基因。
6) trans-acting反式作用:DNA通过其产物(mRNA或蛋白质) 间接调节基因的表达。
Transcription转录,epigenetics表观遗传学,transcriptome转录组,metabolome代谢组, allele等位基因,cistron顺反子,muton突变子,recon重组子,lactose operon乳糖操纵子,insertion sequence (IS )插入序列,RNA polymerase RNA聚合酶, retro-transposon反转录转座子,genome基因组,semiconservative replication半保留复制, semi-discontinuous replication半不保留复制, translation翻译, lagging strand后随链, replisome复制体, telomerase 端粒酶,sense strand正义链, isoaccepting tRNA同工tRNA, antisense strand反义链, promoter启动子, terminator终止子, intron内含子,exon外显子.1) genome基因组:基因组应该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA 分子。
分子生物学考试复习资料
一、重要名词类(部分):●DNA半保留复制(简称复制)(semiconservative replication):DNA复制时,亲代DNA双螺旋结构解开,分别以解开的两股单链为模板,以dNTP为原料,按照碱基互补的原则,合成与模板链互补的新链,从而形成两个子代DNA双链,其结构与亲代DNA双链完全一致。
因子代DNA双链中的一股单链源自亲代,另一股单链为合成的新链,形成的双链与亲代双链的碱基序列完全一致,故称为半保留复制。
●复制叉:原核生物DNA的复制从单一起点开始,双螺旋结构被打开,分开的两股单链分别作为新DNA 合成的模板,DNA合成从起点开始向两个方向进行,与单一起点相连的局部结构形状呈“Y”型,称复制叉结构。
●复制子:基因组中能独立进行复制的DNA单位称为复制子或复制单位。
它含有控制复制起始或终止的特定位点,从复制起始点到终止点的区域为一个复制子。
●半不连续复制:复制过程中,催化DNA 合成的DNA聚合酶只能催化核苷酸从5’→3’方向合成,以3’→5’链为模板时,新生的DNA以5’→3’方向连续合成;而以5’→3’为模板只能合成若干反向互补的岡崎片段,这些片段再相连成完整的新链,故称半不连续复制。
(前导链、滞后链)●冈崎片段:DNA双链是反向平行的,复制时,亲代双链DNA在复制叉处打开,由于新链的合成具有方向性,即从5’→3’,以5’→3’DNA链为模板合成反向互补的新链时,只能合成小片段DNA,这些片段根据发现者命名为岡崎片断。
●转录:是指以DNA为模板,合成RNA的信息传递过程。
除了某些RNA病毒的基因组之外,所有的RNA 都是转录产物。
●反义链:在基因的DNA双链中,转录时作为mRNA合成模板的那条单链叫做模板链或反义链。
●上游顺式作用元件:在真核基因中存在着很多的位于转录起始点上游的顺式调控序列,这些DNA序列称之为上游顺式作用元件。
是指与结构基因表达调控相关、能够被调控蛋白特异性识别和结合的DNA 序列,包括启动子、上游启动子元件等,它们是通过与反式作用因子的相互作用来调节基因转录活性。
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分子生物学“95%疾病产生的原因源自基因的无序表达。
”分子生物学的意义,就是消除疾病。
第一章绪论分子生物学研究:核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。
1861年,孟德尔的豌豆杂交试验揭示遗传的物质性(性状表征)1909年,Wilhelm Ludvig Johannsen使用"基因"代表遗传学最基本单位。
1910年,Morgan (美)通过果蝇实验证明:基因遗传性状分离,基因连锁交换现象。
1928年,Griffith (英)肺炎双球菌转化实验。
10年后,Avery (美)证明DNA分子是遗传信息的有效载体。
即标记核昔酸,%标记氨基酸。
噬菌体侵染过程:1尾端吸附,2 DNA注入,3利用细菌生命过程合成自身物质,4合成新 DNA和蛋白质,并组装为新子代噬菌体,5细菌裂解,噬菌体释放。
1953年,Watson和Crick提出脫氧核糖核昔酸的双螺旋膜型。
1958年,Crick提出中心法则。
基因表达调控主要表现:信号转导、转录因子、RNA剪辑。
基因组:人体全部基因总和。
蛋白组:人体全部蛋白总和基因组计划:人体全部基因序列测序。
蛋口组计划(后基因组计划):鉴定基因产物和功能。
第二章染色体与DNA真核细胞染色体蛋白质组成:组蛋片(染色体结构蛋白,组成核小体)、非组蛋白(RNA聚合酶、肌动蛋白、肌球蛋白、微管蛋白)组蛋白特点:1进化上的极端保守性。
2无组织特异性。
3肽链上氨基酸分布不对称。
4具有修饰作用:甲基化、磷酸化5富含赖氨酸的组蛋白H5真核生物基因组DNA分类:1不重复序列:结构基因基本为单拷贝基因2中都重复序列:3髙度重复序列:只在真核生物内出现,不转录。
包含:卫星DNA.反相重叠序列(互补序列重复)、较攵杂单位的重攵(灵长类特有)DNA包装步骤:1核小体的组成:组蛋白+200bp DNAo•核小体组蛋白:H2A S H2B、出、出各两分子生成的八聚体,并伴有Hi在核小体在外边, 直径lOnmo2将200bp的DNA分子(2nm)缠绕在核小体外,从68nm压缩到10nm中,压缩率1/73六个核小体形成一个螺线管,压缩率1/6,直径30血4螺线管形成超螺线管,压缩率1/40,直径4000nni5超螺线管形成染色单体,压缩率1/5原核生物基因组特点:1结构简单2存在转录单元3有重壳基因DNA的一级结构:四种核昔酸的连接排列顺序。
现代分子生物学考试复习资料
现代分子生物学考试复习资料一、绪论1分子生物学:在分子水平上研究生命现象的科学。
通过研究生物大分子(核酸、蛋白质)的结构、功能和生物合成等方面来阐明各种生命现象的本质。
2、1953年Watson 和Crick提出DNA双螺旋模型3、分子生物学研究内容:DNA重组技术(基因工程)、基因表达的调控、生物大分子的结构和功能研究、基因组、功能基因组与生物信息学研究二、染色体与DNA核小体:由H2A、H2B、H3和H4四种组蛋白各两个分子组成八聚体和大约200 bp的DNA 区段组成。
组蛋白:分为5种类型(H1,H2A,H2B,H3,H4),其特性如下:1、进化上的极端保守性;2、无组织特异性;3、肽链上氨基酸分布的不对称性;4、组蛋白的修饰作用包括甲基化、乙基化和磷酸化;5、富含赖氨酸的组蛋白H5C值(C value)一种生物单倍体基因组所含DNA的总量。
C值反常现象也称为C值谬误。
指C值往往与种系的进化复杂性不一致的现象,即基因组大小与遗传复杂性之间没有必然的联系,某些较低等的生物C值却很大,如一些两栖动物的C 值甚至比哺乳动物还大。
基因:编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位,是染色体或基因组的一段DNA序列真核生物基因组的结构特点:1 真核基因组庞大一般都远大于原核生物基因组,2真核基因有断裂基因,即有内含子,3转录产物是单顺反子,4非编码区域多于编码区域.,占90%以上5有大量顺式作用元件。
包括启动子、增强子、沉默子等6有大量重复序列7有大量的DNA多态性8具有端粒结构原核生物基因组的特点:1基因组很小DNA含量少,2有重叠基因,转录产物是多顺反子,3结构简练,大部分都是编码区域,4DNA一般不与蛋白质结合5存在转录单元,转录形成多顺反子mRNA单顺反子:只编码一个蛋白质的mRNA;多顺反子mRNA:两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸(mRNA),由DNA链上的邻位顺反子所界定;顺式作用元件:存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。
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一、重要名词类(部分):●DNA半保留复制(简称复制)(semiconservative replication):DNA复制时,亲代DNA双螺旋结构解开,分别以解开的两股单链为模板,以dNTP为原料,按照碱基互补的原则,合成与模板链互补的新链,从而形成两个子代DNA双链,其结构与亲代DNA双链完全一致.因子代DNA双链中的一股单链源自亲代,另一股单链为合成的新链,形成的双链与亲代双链的碱基序列完全一致,故称为半保留复制。
●复制叉:原核生物DNA的复制从单一起点开始,双螺旋结构被打开,分开的两股单链分别作为新DNA 合成的模板,DNA合成从起点开始向两个方向进行,与单一起点相连的局部结构形状呈“Y”型,称复制叉结构.●复制子:基因组中能独立进行复制的DNA单位称为复制子或复制单位。
它含有控制复制起始或终止的特定位点,从复制起始点到终止点的区域为一个复制子.●半不连续复制:复制过程中,催化DNA 合成的DNA聚合酶只能催化核苷酸从5’→3'方向合成,以3'→ 5'链为模板时,新生的DNA以5'→3’方向连续合成;而以5’→3’为模板只能合成若干反向互补的岡崎片段,这些片段再相连成完整的新链,故称半不连续复制。
(前导链、滞后链)●冈崎片段:DNA双链是反向平行的,复制时,亲代双链DNA在复制叉处打开,由于新链的合成具有方向性,即从5’→3’,以5'→3’DNA链为模板合成反向互补的新链时,只能合成小片段DNA,这些片段根据发现者命名为岡崎片断.●转录:是指以DNA为模板,合成RNA的信息传递过程。
除了某些RNA病毒的基因组之外,所有的RNA 都是转录产物。
●反义链:在基因的DNA双链中,转录时作为mRNA合成模板的那条单链叫做模板链或反义链.●上游顺式作用元件:在真核基因中存在着很多的位于转录起始点上游的顺式调控序列,这些DNA序列称之为上游顺式作用元件.是指与结构基因表达调控相关、能够被调控蛋白特异性识别和结合的DNA 序列,包括启动子、上游启动子元件等,它们是通过与反式作用因子的相互作用来调节基因转录活性。
●启动子:是基因DNA中一段特定的核苷酸序列,是与启动机因表达相关的顺式作用元件,式RNA聚合酶在转录起始时对模板DNA的识别位点和结合位点,是基因转录的开始部位,也即是转录是否能起始的决定位点.●终止子:促进转录终止的DNA序列,在RNA水平上通过转录出的终止子序列形成茎-环结构而起作用。
又可分为依赖于ρ因子的终止子和不依赖于ρ因子的终止子两类。
●转录后加工:在转录中新合成的RNA往往是较大的前体分子,需要经过进一步的加工修饰,才转变为具有生物学活性的、成熟的RNA分子,这一过程称为转录后加工。
●多顺反子:在原核细胞中,通常是几种不同的mRNA连在一起,相互之问由一段短的不编码蛋白质的间隔序列所隔开,这种mRNA叫做多顺反子mRNA.●RNA编辑:某些mRNA的核苷酸序列,在生成转录产物后还需插入、删除或取代一些核苷酸残基,方能生成具有正确翻译功能的模板,遗传信息在mRNA水平上的改变过程,称为RNA编辑。
●PCR:即聚合酶链式反应,扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定的DNA序列的一种技术.在该反应中,使用与目的DNA序列互补的寡核苷酸作为引物,进行多轮DNA合成。
其中包括DNA 变性、引物退火和在TaqDNA聚合酶催化下的DNA合成。
●基因:能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列,是决定遗传性状的功能单位.●结构基因:指一类编码细胞结构和基本代谢活动所必要的RNA、蛋白质或酶。
一般来说,它们不是调控因子。
●调控基因:是指那些编码那些控制其他基因表达的RNA或蛋白质的基因.调控基因的表达产物是调控因子。
调控基因也是结构基因,只是它的编码蛋白质具有基因调控的功能,是在基因水平上而不是蛋白质水平上的控制.●基因组:细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。
●翻译(translation):以mRNA为模板,氨酰-tRNA为原料直接供体,在多种蛋白质因子和酶的参与下,在核糖体上将mRNA分子上的核苷酸顺序表达为有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。
●端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒.该结构是一段DNA 序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在.●操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子。
●顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。
包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。
●反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子.●增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列.它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远。
●基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。
●分子克隆:在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入合适宿主,使其在宿主中扩增和繁殖,以获得该DNA分子的大量拷贝。
●DNA变性:在物理或化学因素的作用下,导致两条DNA链之间的氢键断裂,而核酸分子中的所有共价键则不受影响。
●DNA复性:当促使变性的因素解除后,两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构●突变(mutation):基因组DNA顺序上的任何一种改变都叫做突变。
分点突变和结构畸变。
●点突变(Point mutation)是指一个或几个碱基对被置换(replacement),这种置换又分两种形式:转换(transition)一--指用一个嘌呤碱置换另一个嘌呤碱,一个嘧啶碱置换另一个嘧啶碱;颠换(transversion)一—-指用嘌呤碱置换嘧啶碱或用嘧啶碱置换嘌呤碱。
●错义突变:DNA分子中碱基对的取代,使得mRNA的某一密码子发生变化,由它所编码的氨基酸就变成另一种的氨基酸,使得多肽链中的氨基酸顺序也相应的发生改变的突变。
●无义突变:由于碱基对的取代,使原来可以翻译某种氨基酸的密码子变成了终止密码子的突变。
●同义突变:碱基对的取代并不都是引起错义突变和翻译终止,有时虽然有碱基被取代,但在蛋白质水平上没有引起变化,氨基酸没有被取代,这是因为突变后的密码子和原来的密码子代表同一个氨基酸的突变。
.●同义密码子(synonym codon):为同—种氨基酸编码的各个密码子,称为同义密码了。
●移码突变:在编码序列中,单个碱基、数个碱基的缺失或插入以及片段的缺失或插入等均可以使突变位点之后的三联体密码阅读框发生改变,不能编码原来的蛋白质的突变.●管家基因:在生物体生命的全过程都是必须的,且在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达的基因。
●SD序列:转录出的mRNA要进入核糖体上进行翻译,需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆菌16S rRNA3,末端富含嘧啶的序列互补,是核糖体的识别位点。
●CAP:是大肠杆菌分解代谢物基因活化蛋白,这种蛋白可将葡萄糖饥饿信号传递个许多操纵子,使细菌在缺乏葡萄糖时可以利用其他碳源。
●回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。
●蓝-白斑筛选:含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X—gal(5-溴—4—氯—3—吲哚-β-D—半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。
当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。
称之为蓝-白斑筛选。
●DNA聚合酶(DNA polymerase):指以脱氧核苷三磷酸为底物,按5’→ 3'方向合成DNA的一类酶,反应条件:4种脱氧核苷三磷酸、Mg+、模板、引物。
DNA聚合酶是多功能酶,除具有聚合作用外,还具有其它功能,不同DNA聚合酶所具有的功能不同。
●拓扑异构酶(topoisomerase):是一类引起DNA拓扑异构反应的酶,分为两类:类型I的酶能使DNA 的一条链发生断裂和再连接,反应无需供给能量,类型Ⅱ的酶能使DNA的两条链同时发生断裂和再连接,当它引入超螺旋时,需要由ATP供给能量。
●单链DNA结合蛋白(single-strand binding protein ,SSB):是一类特异性和单链区DNA结合的蛋白质。
它的功能在于稳定DNA解开的单链,阻止复性和保护单链部分不被核酸酶降解。
●修复(repair):除去DNA上的损伤,恢复DNA的正常结构和功能是生物机体的一种保护功能。
●光裂合酶修复(又称光复活)(photoreactivation):可见光将光裂合酶激活,它分解DNA上由紫外线照射而形成的嘧啶二聚体,使它们恢复成两个单独的嘧啶碱。
●切除修复(excision repair):在一系列酶的作用下,将DNA分子中受损伤部分切除,以互补链为模板,合成出空缺的部分,使DNA恢复正常结构的过程。
●重组修复(recombination repair):DNA在有损伤的情况下也可以复制,复制时子代链跃过损伤部位并留下缺口,通过分子间重组,从完整的另一条母链上将相应的核苷酸序列片段移至子链缺口处,然后用再合成的多核苷酸的序列补上母链的空缺,此过程称重组修复。
●诱导修复和应急反应(induction repair and SOS response)(SOS修复):由于DNA受到损伤或复制系统受到抑制所诱导引起的一系列复杂的应急效应,称为应急反应。
SOS反应主要包括两个方面:DNA损伤修复(SOS修复或称诱导修复)和诱变效应。
SOS修复是一种易出差错的修复过程,虽能修复DNA的损伤而避免死亡.但却带来高的变异率.●DNA重组(recombination):DNA重组是指在真核生物减数分裂过程中,细菌细胞的转化中、病毒转导中等发生的DNA片段的交换或插入。
●基因工程(又称基因重组技术)(gene/genetic engineering):是将外源基因经过剪切加工,再插入到一个具有自我复制能力的载体DNA中,将新组合的DNA转移到一个寄主细胞中,外源基因就可以随着寄主细胞的分裂进行繁殖,寄主细胞也借此获得外源基因所携带的新特性。
●转录(transcription):由依赖于DNA的RNA聚合酶催化,以DNA的一条链的一定区段为模板,按照碱基配对原则,合成一条与DNA链互补的RNA链的过程。
●模板链(template strand)[又称负(-)链,反意义链(antisense strand)]:转录过程中用作模板的这条DNA链,称模板链。