第13章.分枝杆菌属
分枝杆菌属
• 结核菌素皮肤试验：检测潜伏结核感染的唯 一的方法
• 细菌学基因诊断：PCR • 动物试验
结核分枝杆菌痰标本抗酸染色 结核分枝杆菌尿标本抗酸染色
荧光金胺染色
结核分枝杆菌
涂片镜检的报告方式
半定量报告
未找到抗酸菌 可疑抗酸杆菌； 再送标本检测
石炭酸复红染色：抗 荧光染色：抗酸
酸杆菌（1000×）
杆菌
（450×）
0 1～2/300视野
0 1～2/70视野
1＋
1～9/100视野
2～18/50视野
2＋
1～9/10视野
4～36/10视野
3＋
1～9/视野
4～36/视野
4＋
>9/视野
>36/视野
结核病快速诊断方法
分枝杆菌属
• 分类
–结核分枝杆菌复合群 • 结核分枝杆菌 • 牛型分枝杆菌 • 非洲分枝杆菌 • 田鼠分枝杆菌
–麻风分枝杆菌
–非结核分枝杆菌
根据生长速度
快生长菌 慢生长菌
一、 结核分枝杆菌
Mycobacterium tuberculosis (TB)
流行病学
• 结核病的病原菌
– 1882年德国细菌学家 Koch 证明
培养特性
• 专性需氧，最适pH6.5-6.8 • 生长缓慢：繁殖一代耗时18h • 营养要求高
– 罗氏培养基：甘油、天门冬素、 蛋黄、马铃薯、无机盐类、孔 雀蓝
– 液体培养基 吐温-80 (Tween 80)
培养特性
• 细菌在罗氏培养基上菌落呈颗粒、 结节或花菜状，乳白色或米黄色， 不透明。在液体培养基中由于接 触营养面大，细菌生长较为迅速。 一般1～2周即可生长。临床标本 检查液体培养比固体培养的阳性 率高数倍。
基础医学概要三：分枝杆菌属
菌落培养
基因分析
通过培养基培养分枝杆菌属细菌， 形成可见的菌落进行确认。
应用基因分析技术可以进一步确 定分枝杆菌属的种类和分类。
分枝杆菌属与其他细菌的区别
分枝杆菌属
• 独特的分枝状形态 • 需氧生长 • 高温要求
球菌属
• 球状形态 • 厌氧生长 • 较低的温度范围
杆菌属
• 直杆状形态 • 需氧或厌氧生长 • 较广泛的温度范围
分枝杆菌属的病原性与致病机制
分枝杆菌属细菌 菌核分枝杆菌 人类分枝杆菌
牛分枝杆菌
病原性和致病机制 引起农作物疾病，通过鞭毛运动进行侵染。 引起人类分枝杆菌感染，在免疫受损患者中常见。
引起牛分枝杆菌病，导致牛的健康问题。
分枝杆菌属的检测方法
显微镜观察
分枝杆菌属细菌可以通过显微镜 观察菌体形态来进行初步检测。
基础医学概要三：分枝杆 菌属
分枝杆菌属是一类重要的细菌。本节将介绍其基本概述、分类与命名、形态 与结构、生长特性、代谢特性、生态分布、病原性与致病机制等内容。
分枝杆菌属的生长特性
1
需氧菌
分枝杆菌属细菌需要氧气进行生长和代谢。
2
高温要求
分枝杆菌属细菌需要较高的温度范围来进行生长。
3
缓慢生长
分枝杆菌属细菌的生长速度相对较慢，需要更长的时间来形成可见的菌落。
分枝杆菌属的分类与命名
科级分类
分枝杆菌属属于杆菌目，支原体科。
物种命名
各物种依据形态、代谢特性、基因分析等进行命名和分类。
分枝杆菌属的形态与结构
分枝杆状
分枝杆菌属细菌以其分枝状的形态而得名。
复杂结构
分枝杆菌属细菌具有复杂的内部结构，包括细胞壁、 胞浆和核酸。
分枝杆菌属
– (近年发现结核分枝杆菌在 细胞壁外尚有一层荚膜。一 般因制片时遭受破坏而不易看 到。若在制备电镜标本固定前 用明胶处理，可防止荚膜脱水 收缩。在电镜下可看到菌体外 有一层较厚的透明区，即荚膜， 荚膜对结核分枝杆菌有一定的 保护作用。)
• 培养特性
–专性需氧
–营养要求高－馋 –生长缓慢－懒
–罗氏固体培养基－丑
抵抗力 对某些理化因素有较强的抵抗力 抗干燥
抗酸碱
抗染料 在干燥痰中可存活6－8个月
生化反应 抵抗力
• 四怕
• 不发酵糖类 • 触酶试验阳性，而热触酶试验阴性
• 四不怕
–干燥 –酸（3% HCl或6% H2SO4) 或碱（4% NaOH) 有抵抗 力 –碱性染料 –青霉素等抗生素
–乙醇 –湿热 –紫外线 –抗痨药物（链霉素、异烟 肼、利福平等）
• 变异性
–形态 结核杆菌的L型：颗粒状、丝状 –菌落 –耐药性
耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益增多
–毒力
• 卡介苗（BCG）：将有毒的牛型结核分枝
杆菌培养于含甘油、胆汁、马铃薯的培养 基中，经230次移种传代，历时13年而获 得的减毒活菌株，目前广泛用于人类结核
原发感染（primary infection）
结核分枝杆菌 肺泡 吞噬细胞
原发性感染 吞噬细胞内繁殖 （渗出性炎症）
全身性粟粒性结核
结核结节 淋巴结病 灶逐渐纤维化和钙化
原发性感染见于学龄儿童及未受过感染的成人。
• 免疫性(传染、免疫、超敏反应共存)
–结核的免疫为有菌免疫或称传染性免疫。 –细胞免疫在抗感染免疫中更重要。
分枝杆菌属的特点
分枝杆菌属的特点分枝杆菌属（Bacillus）是一类革兰氏阳性的芽孢杆菌，其中包括许多常见的细菌种类。
以下是分枝杆菌属的一些主要特点：1. 形态：分枝杆菌属的细菌是革兰氏阳性细菌，通常呈现为长杆状的细胞形态，有时会有分枝的外观，因此得名“分枝杆菌”。
2. 芽孢形成：这类细菌有很强的芽孢形成能力。
在适宜条件下，它们会形成芽孢，这是一种耐受恶劣环境的休眠状态，可以保护细菌免受极端温度、干旱、紫外线等条件的伤害。
3. 好氧性：大多数分枝杆菌属细菌是好氧生物，也就是说它们需要氧气来生存和进行代谢。
然而，有一些分枝杆菌属细菌也可以在缺氧条件下生长。
4. 好热性：分枝杆菌属有一些细菌种类在高温下生长能力强，甚至可以在70°C以上的温度下生存。
5. 好盐性：部分分枝杆菌属细菌对盐的耐受力较强，可以在含盐的环境中生活。
6. 常见食源细菌：分枝杆菌属的一些细菌是常见的食源细菌，例如肉毒杆菌和炭疽杆菌。
它们会引起食物中毒或其他食源性疾病。
总的来说，分枝杆菌属细菌的特点包括形态特征、芽孢形成能力、好氧性、热耐受性、盐耐受性等。
不同的分枝杆菌属细菌种类可能具有不同的特点。
当然，还有一些其他特点：7. 嗜酸性：某些分枝杆菌属细菌能够在酸性环境中生存和繁殖，这使得它们在一些发酵食品（如酸奶）的制作过程中发挥重要作用。
8. 广泛存在：分枝杆菌属细菌广泛分布于自然界中的土壤、水体、空气等环境中，同时也存在于宠物、农产品和人体等生物体表面和内部。
9. 产生酶和代谢产物：分枝杆菌属的许多细菌能够产生多种酶，例如淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶，以利用和分解广泛的有机物质。
此外，一些分枝杆菌属细菌还能产生抗生素等代谢产物。
10. 重要的工业应用：由于其特殊的生理特性和代谢功能，分枝杆菌属细菌在食品加工、饲料添加剂、环境修复和生物工程等领域中具有重要的应用价值。
需要注意的是，尽管分枝杆菌属细菌中的一些种类对人类和环境具有积极作用，但也有一些种类是致病菌，可以引起人类和动物的疾病。
第章 分枝杆菌属
分枝杆菌属分枝杆菌属（Bacillus）是一类芽孢杆菌科中的细菌属，是一种常见的细菌。
分枝杆菌属细菌的形态为革兰氏阳性，有芽孢，不运动。
分枝杆菌属细菌存在于自然界中的土壤、水、空气、动植物沙门氏菌以及人体消化道中等地方。
此外，分枝杆菌属细菌还是许多纤维素降解菌之一，有着重要的应用价值。
1. 发现历史分枝杆菌属的物种首先被德国微生物学家F. Cohn于1872年所描述。
分枝杆菌属名称来源于拉丁语Baculum（杆子）而得名。
起初，包括芽孢杆菌属（Sporolactobacillus）和马铃薯杆菌属（Solanum）在内的多个属别被归于分枝杆菌属之下。
到了20世纪30年代，随着生物学的发展以及生物化学研究的深入，分枝杆菌属内部结构不断明朗起来。
1953年，福克勒（Foukceler）首次使用荧光染色技术，证实了分枝杆菌属细胞内有芽孢的产生，并为之制定了现代概念。
目前，分枝杆菌属内部物种的划分还在持续调整之中。
2. 特征2.1 形态学特征分枝杆菌属细菌形态为革兰氏阳性菌杆，大小为0.5 ~ 1.2 µm × 2 ~ 10 µm，杆状或为不规则形状。
除了胶孢杆菌属之外，其他细菌均不产生胶质囊或鞭毛等结构，而且周围亦不具有较多的纤毛或糖胶成份。
芽孢的形成是分枝杆菌属的一个显著特征。
分枝杆菌属细胞在恶劣环境条件下，通过细胞内分裂并将核质分割成若干形状不一、结构各异的小体，然后将其包裹在亚细胞层次的膜结构内，最终形成成熟的芽孢。
2.2 生理生化特征分枝杆菌属细胞在吸取营养和能量方面非常多样化，能够利用许多有机物和少数无机物。
分枝杆菌属能产生许多酶，包括外排酶、代谢酶、溶解酶等，具有泛酸稳定性。
此外，分枝杆菌属能抵抗许多化学物质和物理条件的影响，能生长于广泛的嗜酸或嗜碱环境中，也能在较高的温度下繁殖。
2.3 分类根据细胞结构、代谢特征及生命周期等特征，目前分枝杆菌属细菌被分为16个物种。
微生物第章 分枝杆菌属
微生物第章：分枝杆菌属一、概述分枝杆菌属（Bacillus）是革兰氏阳性的芽孢杆菌科中最常见的属之一。
其名称来源于其在培养基上形成的分枝的菌体形态。
该属菌体大小相对较大，形态多样，包括直形、杆形、梭形或球形等不同类型。
分枝杆菌属包括很多种类的细菌，一些种类在自然环境中很常见，有着重要的生态、工业和医学应用价值。
二、生态学和鉴定分枝杆菌属中的细菌生活在许多不同的环境中，包括土壤、水、植物、食品和动物的肠道中。
细菌在自然环境中存在着极为广泛的分布，在枯萎的植物、渣滓、泥炭、海水和河流等地方都可以发现其存在。
在实验室条件下，分枝杆菌属可以通过形态特征、代谢特性和生长特点等鉴定方法进行分离和鉴定。
最常用的方法是通过对分枝杆菌在特定培养基上的生长型态观察和菌落形态分析来确定其种属。
三、病原学分枝杆菌属在人类和动物中可以引起多种疾病，包括但不限于食物中毒、牲畜疾病和人类疾病。
尽管其中很多细菌是无害的或有益的，但某些菌株却可以对人类或动物健康构成威胁。
常见的分枝杆菌病原体包括：芽孢杆菌（B. anthracis）, 糖原芽胞杆菌（B. cereus），乳酸吸收性芽胞杆菌 (B. coagulans) 和枯草杆菌（B. subtilis）等。
分枝杆菌的病原性与其产生的细胞外毒素和内毒素有关，而这些毒素的分泌与生长环境和条件有很大关系。
四、工业应用除了在疾病治疗上的作用外，分枝杆菌属在工业生产中还有广泛的应用。
例如，在饮食加工业中，分枝杆菌可以用于制造豆腐、酱油等食品。
同时，分枝杆菌的一些菌株也可以进行微生物发酵生产出某些化合物，如抗生素、植酸酶、纤维蛋白溶酶等。
这些化合物在医药和普通日常生活中也被广泛使用。
五、分枝杆菌属在自然环境、医学、动物和食品加工业、以及其他工业领域都存在着广泛的应用和研究价值。
随着科学技术的发展和研究范围不断扩大，分枝杆菌属的多样性和作用将会得到更深入的了解和研究。
分枝杆菌属
白喉棒状杆菌
Corynebacterium. diphtheriae
形态与染色
• 革兰阳性，细长弯 曲，一端或两端膨 大呈棒状
• 美蓝或奈瑟染色， 菌体两端或一端可 见着色较深的异染 颗粒
培养特性
• 需氧或兼性厌氧 • 吕氏培养基 • 亚碲酸钾血琼脂平板
变异、抵抗力
• 变异
–形态、菌落和毒力 –S型变为R型
–无鞭毛，不形成芽胞
• 人工培养必须有新鲜血液成分（主要是X因 子和V因子）才能生长，故名嗜血杆菌
培养特性
• 需氧或兼性厌氧 • 生长需要含X因子、V
• 结核病是一种古老的疾病。从新石器 时代人类的遗骨和古代木乃伊的骨关 节的病理组织中，已发现人类在史前 时代已患过结核病。
• 中国医史中，结核病最早记载于《内 经》并形容为“虚痨”之症。古代文 献有提及肺痨为痨虫于肺所致，但未 能确定致病的成因。
• 19世纪，结核病在欧洲和北美大肆 流行，散布到社会的各个阶层，生 活困顿的人群成了结核病的温床。 而且是当时造成死亡的主要原因， 被人们称为“巨大的白色瘟疫”。
出现超敏反应 不表示正患结核病
硬结直径超过 15mm以上
表明可能有活动性结 核，应进一步检查
注射部位有针眼大的 红点或稍有红肿，硬 结直径小于5mm
无结核感染，但应考虑： 原发感染的早期 正患严重结核病 正患其他传染病（麻疹） 细胞免疫功能低下
结核菌素试验应用
• 1. 选择卡介苗接种对象、测定卡介苗接种 后的免疫效果
麻风分枝杆菌
Mycobacterium leprae
麻风分枝杆菌（M. leprae）
• 麻风病的病原菌
–慢性传染病
• 世界各地均有报道
第十三章分枝杆菌属-课件
3.多糖
与脂质成分结合存在于胞壁中
4.rRNA
刺激机体产生特异性的细胞免疫
5.荚膜
11
（二）所致疾病
结核病，以肺结核常见
传染源：排菌的肺结核患者
传播途径：呼吸道、消化道、皮肤黏膜损伤.
12
临床类型
肺部感染：原发感染
继发感染
肺外感染：脑、肾、骨、关节、生殖器官等
全身播散性结核 消化道结核 皮肤结核
13
结核分枝杆菌 肺泡
吞噬细胞内繁殖释放 原发综合症
(原发灶)肺泡渗出性炎症 淋巴管炎 肺门淋巴结肿大 特异性免疫建立
14
机体抵抗力强 形成结核结节→纤维化→钙化
→自愈
结局
（但病灶内常有细菌的潜伏）
机体抵抗力差 活动性肺结核→干酪样坏死 全身播散→粟粒样结核 或结核性脑膜炎
15
（2）继发感染 内源性感染或外源性感染
第十三章分枝杆菌属
精品jin
分 类： 结核分枝杆菌
非结核分枝杆菌 麻风分枝杆菌
1882年3月24日德国Koch发现结核病的病原菌 全球处于结核病紧急状态中 回升的原因
艾滋病流行 多种耐药菌株的出现
我国被WHO列为“特别引起警示的国家和地 区”之一
2
第一节 结核分枝杆菌 (M. tuberculosis)
一、生物学性状
“红、馋、懒、顽、变”
（一） 形态与染色
菌体细长微弯，有分枝，排列不规则，多单个散在， 易发生L型，无芽胞、鞭毛,抗酸染色阳性（红色）。
红
抗酸染色 1000× 3
（二）培养特性
专性需氧，pH偏酸6.5-6.8 馋
营养要求高，罗氏花样菌落”，乳白色干燥不透明，
医学微生物学各章节复习要点和试题练习
医学微生物学各章节复习要点和试题练习第一章微生物基本概念【考纲要求】1．微生物的定义。
2．三大类微生物及其特点。
【考点纵览】1．微生物定义。
2．微生物按其结构组成等，可分3大类：非细胞型微生物、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物。
【历年考题点津】1．不属于原核细胞型的微生物是A．螺旋体 B．放线菌 C．衣原体D．真菌 E．立克次体答案：D第二章细菌的形态与结构【考纲要求】1．细菌的三种形态及测量单位。
2．细菌基本结构的构成。
3．肽聚糖的结构。
4．革兰阳性菌和荫性菌细胞壁的结构和医学意义。
5．细菌胞质内与医学有关的重要结构与意义。
6．荚膜及其与细菌致病性的关系。
7．鞭毛及其与医学的关系。
8．菌毛的分类及其与医学的关系。
9．芽孢及其与医学的关系。
10．革兰染色的步骤、结果判定和医学意义。
【考点纵览】1．细菌以微米为测量单位。
2．细菌按基本形态分三种：球菌、杆菌和螺形菌。
3．细菌的基本结构包括细胞壁、细胞膜、细胞浆和核质。
4．不同细菌细胞壁组成及结构不同主要成分为肽聚糖。
革兰阳性菌的肽聚糖由聚糖骨架四肤侧链和甘氨酸五肽交联桥三部分组成，革兰阳性菌肽聚糖仅由聚糖骨架和四肽侧链两部分织成。
除此之外革兰阳性菌有磷壁酸，革兰荫性菌有脂蛋白，脂质双层和脂多糖。
5．革兰阳性菌和革兰荫性菌细胞壁的区别。
6．不同抗生素作用机制。
7．质粒的概念和特点。
8．芽孢、荚膜、鞭毛和菌毛的概念功能和与细菌致病性的关系。
9．最常用的革兰染色的方法和医学意义。
【历年考题点津】1．细菌细胞壁特有的成分是A．肽聚糖B．外膜C．脂蛋白D．脂多糖E．类脂A答案：A2．细菌芽胞最显著的特性是A．抗吞噬性B．具有毒素活性C．耐热性D．粘附性E．侵袭性答案：C3．细菌“核质以外的遗传物质”是指A．mRNAB．核蛋白体C．质粒D．异染颗粒E．性菌毛答案：C(4～6题共用备选答案）A．中介体B．包涵体C．吞噬体D．线粒体E．异染颗粒4．与细菌的呼吸作用有关的结构是答案：A5．可用于鉴别细菌的结构是答案：E6．在病毒的增殖过程中，可出现的结构是答案：B第三章细菌的生理【考纲要求】1．细菌生长繁殖的基本条件与方式。
13 分枝杆菌属
第一节 结核分枝杆菌 (M. tuberculosis)
2. 培养特性
专性需氧（液体培养基中表面生长，菌膜） 营养要求高——“馋”（含蛋黄、马铃薯、甘油、 天门冬酰胺、无机盐、孔雀绿等的罗式培养基） 生长缓慢——“懒”（12~24 h繁殖一代，3~4周出现 肉眼可见菌落） 菜花样菌落——“丑”（干燥坚硬，表面颗粒状， 乳酪色或黄色）
第一节 结核分枝杆菌 (M. tuberculosis)
（3）试验方法：
OT或PPD于前臂皮内注射，48～72h后， 红肿硬结直径≥5mm 者为阳性； ≥15mm为强阳性；<5mm者为阴性；
（4）结果分析：
阳性——有超敏反应，也有免疫力； 有过感染或接种过卡介苗 强阳性——可能有活动性结核病灶，尤其婴儿 阴性——无超敏反应，也无免疫力； 未感染过结核杆菌【原发感染早期、严重结核病、 细胞免疫低下(老年人、AIDS、肿瘤患者、用过 免疫抑制剂)例外】
原发后肺结核
严重而恶化的肺结核
第一节 结核分枝杆菌 (M. tuberculosis)
5. 结核菌素试验 （1）定义：
应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是 否能引起迟发型超敏反应（Ⅳ型变态反应）的一种试验；
（2）结核菌素试剂：
旧结核菌素 (old tuberculin, OT) 纯蛋白衍生物 (purified protein derivative, PPD）
第一节 结核分枝杆菌 (M. tuberculosis)
结核病的病原体：1882年德国细菌学家 Koch 证明； 世界上1/3人感染，70%在亚洲； 全世界每年有800万新增病例，300万人死于结核病； 世界防治结核病日 ：每年3月24日。 近年来由于耐药菌株增多、艾滋病、免疫抑制剂，发病率有 上升趋势。
第九版医学微生物学-第一篇 细菌学 第十三章 分枝杆菌属
医学微生物学（第9版）
2. 原发后感染（post-primary infection） * 也称继发感染（secondary infection），多见于成年人；
* 大多为内源性感染，原发感染的残留菌复燃（recrudescence）或再激活（reactivation）； * 少数由外源性感染所致。 * 原发后感染特点：病灶局限，一般不累及邻近的淋巴结；病变发生迅速且剧烈（迟发型
牛分枝杆菌（M. bovis）
牛、人类的结核病
非洲分枝杆菌（M. africanum）
非洲国家部分结核病
田鼠分枝杆菌（M. micoti）
野鼠，豚鼠等的结核病变
配套题库请下载 医学猫 APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。
医学微生物学（第9版）
结核病（tuberculosis，TB）
配套题库请下载 医学猫 APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。
医学微生物学（第9版）
IFN-γ释放试验
1）原理：感染后，体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞，当再次遇到抗原刺激时， 能迅速活化增殖，产生多种细胞因子，其中IFN-γ是关键的细胞因子
2）方法：以结核分枝杆菌与BCG差异蛋白ESAT-6和CFP10多肽刺激致敏的T细胞 分泌IFN-γ，通过酶联免疫斑点试验（ELISPOT）进行检测
配套题库请下载 医学猫 APP，执业、三基、规培、主治、卫生资格、正副高等题库都已入库。
医学微生物学（第9版）
（一）致病物质
二、致病性
1. 脂质（lipid）：主要毒力因子，多为糖脂形式，种类多
微生物学：第13章 分枝杆菌属
盲部)
三、免疫性与超敏反应
人体对MTB有相当强的免疫力
(一)免疫性
❖ 结核的免疫为带菌免疫(传染性免疫) ❖ 以细胞免疫为主,免疫力持久 ❖ 机体能产生的抗体中和力弱
(二)免疫与超敏反应 ❖ 免疫防御的同时,引起Ⅳ型超敏反应
❖ 索状因子(分枝菌酸):能破坏宿主细胞线
粒体膜,抑制白细胞游走,引起肉芽肿。
❖ 硫酸脑苷酯:抑制溶菌酶体与吞噬体的结
合,使该菌胞内寄生。 ❖ 蜡质D：佐剂,能引起Ⅳ型超敏反应
Hale Waihona Puke 2. 蛋白质 •菌体内合成,重要的是结核菌素 •单独存在不致病,与蜡质D结合后, 引起较强的迟发型超敏反应。
3.其他(自学)：多糖、核酸、荚膜
(三)免疫与超敏反应
❖ 分别由不同的MTB抗原诱导 细胞免疫:rRNA和十几种分泌蛋白诱导 超敏反应:众多菌体蛋白和蜡质D诱导
❖ 分别由不同的淋巴细胞介导 细胞免疫:Lytl+2- 和Lytl-2-淋巴细胞 超敏反应:Lytl+2+淋巴细胞
(四)结核菌素试验
1.原理:结核菌素+蜡质D→Ⅳ型超敏反应 2.试剂:旧结核菌素(OT)—副作用明显 纯蛋白衍生物(PPDC和BCGPPD)—OT纯化 3.方法:两前臂掌侧各皮内 注射PPDC和BCGPPD 5单 位(目前仍单侧注射PPD), 48～72h后观察结果。
2.原发后感染
(3)开放性TB 浸润型肺结核→干酪样坏死液化 外源性感染→细菌经呼吸道感染 菌体扩散至气管或胸腔→随痰排出→慢 性纤维空洞型肺结核(传染性最强;IV型)
干酪样肺结核 慢性纤维空 洞性肺结核
第13章 分枝杆菌属
（三）免疫与超敏反应的关系
结核菌感染时，细胞免疫与迟发型超敏反应同
时存在，此可用郭霍现象说明： ①给健康豚鼠皮下首次注射一定量结核菌， 10~14天后注射部位缓慢出现溃疡，深而不易愈合， 邻近淋巴结肿大，细菌扩散至全身，结核菌素试验 为阴性；
M.tuberculosis
②用相同剂量结核分枝杆菌注入曾感染 并已康复的豚鼠皮下，在1~2天内迅速发生 溃疡，但浅而易愈合，淋巴结不肿大，细菌
优点：1天出结果。 但应避免假阳性、注意假阴性。
五、防治原则
控制结核病： ①发现和治疗痰菌阳性者
M.tuberculosis
②接种卡介苗（新生儿、7岁、12岁）。
M.tuberculosis
目前耐药性已成为结核病治疗的头号 顽敌。据第四次全国结核病流病调查报告 表明，在我国耐药性肺结核病患者中有60% 耐两种以上、10.2%耐四种以上抗结核药。
M.tuberculosis
3）蜡质D可激发机体产生迟发型超敏反应， 具有佐剂作用。 4）硫酸脑苷脂和硫酸多酰基化海藻糖可抑制
吞噬体与溶酶体的结合，导致不完全吞噬。
M.tuberculosis
（2）蛋白质：多种，其中的结核菌素与
蜡质D结合，激发迟发型超敏反应;
（3）多糖可使中性粒细胞增多，引起
局部病灶（细胞浸润）。
菌膜形成，比固体培养阳性率高。
M.tuberculosis
有毒株在液体基表面有蜿蜒生长现象。
M.tuberculosis
结核分枝杆菌 牛分枝杆菌
烟酸合成+ 硝酸盐还原+ -
M.tuberculosis
菌落变异
耐药性变异：单一或多重耐药，主张联合用
药，以减少耐药性产生，增强疗效。
临床执业医师医学微生物学习题集第13章
2015年临床执业医师医学微生物学习题集第13章第13章呼吸道感染细菌A型题1. 分枝杆菌属最主要的特点是A.无特殊结构B.能分枝生长C.一般不易着色D.胞壁含大量脂质E.不产生内外毒素2. 下列细菌中生长速度最慢的是A.大肠杆菌B.霍乱弧菌C.结核分枝杆菌D.乙型链球菌E.脑膜炎球菌3. 结核分枝杆菌常用的培养基是A.罗氏培养基B.庖肉培养基C.巧克力平板D.吕氏血清斜面培养基E. SS培养基4. 关于结核分枝杆菌生物学特性的叙述，错误的是A.专性需氧B.抗酸染色阳性C.培养的菌落呈颗粒、结节状D.耐酸碱性强E.耐盐性强5. 与结核杆菌抗酸性有关的成分是A.分枝菌酸B.磷脂C.蜡脂DD.索状因子E.结核菌素6. 区别结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌有重要意义的试验是A.乳糖发酵试验B.锡克试验C.热触酶试验D.结核菌素试验E.毒力鉴定试验7. 卡介苗的制备是利用结核杆菌的哪种变异?A.形态B.菌落C.耐药性D.抗原性E.毒力8. 病后获得感染免疫的细菌为A.霍乱弧菌B.结核杆菌C.破伤风梭菌D.白喉杆菌E.痢疾杆菌9. 卡介苗的性质属于A.死菌苗B.类毒素C.抗毒素D.抗生素E.减毒活疫苗10.结核杆菌所致疾病最常见的是A.肺结核B.淋巴结核C.肾结核D.肠结核E.结核性胸膜炎11.不是通过内毒素或外毒素为致病物质的细菌是A.白喉杆菌B.伤寒杆菌C.结核分枝杆菌D.霍乱弧菌E.产气荚膜梭菌12.下列对结核分枝杆菌的免疫特点叙述正确的是A.以体液免疫为主B.属于感染免疫C.体液和细胞免疫并重D.不能通过人工主动免疫获得E.细胞免疫与Ⅰ型超敏反应同时建立13.卡介苗的接种对象主要是A.结核菌素试验阳性者B.成年人C.严重结核病人D.新生儿和结核菌素试验阴性的儿童E.细胞免疫功能低下的患者14.能从痰液中检出具有临床诊断意义的细菌是A.表皮葡萄球菌B.结核分枝杆菌C.白喉杆菌D.脑膜炎奈氏菌E.脆弱类杆菌15.下列哪组细菌均属于胞内寄生菌?A.伤寒杆菌、痢疾杆菌B.伤寒杆菌、结核杆菌C.破伤风梭菌、结核杆菌D.炭疽杆菌、结核杆菌E.霍乱弧菌、白喉杆菌16.鉴别非结核分枝杆菌有无致病性的试验是A.热触酶试验B.乳糖发酵试验C.抗煮沸试验D.乳化试验E.触酶试验17.结核杆菌胞壁中脂质含量高与下列特性无关的是A.免疫性B.致病性C.生长特性D.抵抗力E.染色性18.下列关于结核杆菌形态染色方面的特点，错误的是A.细长略弯的杆菌B.菌体外有荚膜C.一般染色不易着色D.一般用抗酸染色法E.Albert染色后可见异染颗粒19.结核杆菌的微生物学诊断方法不正确的是A.标本直接涂片镜检B.血清学试验测抗体C.动物试验D.分离培养鉴定E. PCR技术鉴定结核杆菌的DNA20.目前麻风病的微生物学诊断主要依靠A.在鼻粘膜或皮损处取材，用抗酸性染色后检查B.麻风菌素试验C.测血清中麻风杆菌特异性抗体D.分离培养E.动物试验B型题问题 21~24A.分枝菌酸B.结核菌素C.索状因子D.蜡质DE.磷脂21.与结核杆菌毒力密切有关的物质是22.具有免疫佐剂作用的物质为23.用于测定机体细胞免疫功能的物质是24.与结核杆菌抗酸染色性有关的物质是问题 25~27A.霍乱弧菌B.结核杆菌C.破伤风梭菌D.肉毒梭菌E.痢疾杆菌25.耐碱不耐酸的细菌是26.耐酸又耐碱的细菌是27.抗酸染色阳性的细菌是问题 28~30A.肥达试验B.抗O试验C.结核菌素试验D.锡克试验E.神奈川试验28.能辅助诊断肠热症的试验是29.测定机体对结核杆菌有无免疫力的试验是30.风湿热的辅助诊断试验是问题 31~33A.蛋白质B.多糖C.脂质D.肽聚糖E.核酸31.结核菌素的性质属于32.结核杆菌能在巨噬细胞内长期存活是因该菌含大量33.青霉素能诱导结核杆菌L型形成是作用于C型题问题 34~36A. 结核杆菌B. 麻风杆菌C. 两者均是D. 两者均不是34.侵入细胞内，可使胞浆呈泡沫状的细菌是35.可在人工培养基上生长繁殖的细菌是36.属于细胞内寄生的细菌有问题 37~40A. 非结核分枝杆菌B. 结核杆菌C. 两者均是D. 两者均不是37.通过生化反应，热触酶试验阴性的细菌是38.通过生化反应，热触酶试验阳性的细菌是39.属于抗酸性细菌是40.能形成芽胞的细菌有X型题41.分枝杆菌属中细菌具有的特点是A.胞壁含大量脂质B.有分枝生长趋势C.抗酸染色阳性D.有芽胞E.不产生毒素42.结核杆菌在液体培养基中生长后形成皱褶的菌膜浮于液面是由于A.有菌毛粘附B.有鞭毛运动C.专性需氧D.含脂质量多E.液面营养更丰富43.对于结核杆菌抵抗力的叙述，正确的有A.耐干燥，在干燥痰内可存活6~8天B.煮沸即被杀死C.对紫外线敏感D.对酸碱有抵抗力E.对抗结核药物易产生耐药性44.结核杆菌可发生的变异有：A.形态B.毒力C.菌落D.免疫原性E.耐药性45.抗感染以细胞免疫起主要保护作用的细菌是A.结核杆菌B.霍乱弧菌C.伤寒杆菌D.白喉杆菌E.痢疾杆菌46.结核菌素试验阳性可能为A.已感染过结核杆菌B.曾作过OT试验C.接种过卡介苗D.已患有结核病E.机体细胞免疫功能正常47.结核菌素试验阴性可能为A.未感染过结核杆菌B.对结核杆菌无特异性免疫C.感染初期D.严重的结核病病人E.获得性细胞免疫功能低下48.麻风杆菌感染人类的途径有A.破损皮肤B.呼吸道C.破损粘膜D.密切接触E.消化道49.麻风杆菌的防治原则有：A.开展普查B.定期检查密切接触者C.早期诊断D.早期隔离E.联合用药进行彻底治疗50.培养结核杆菌的罗氏培养基的作用有A.营养作用B.选择作用C.可长期培养D.因含脂质生长因子而刺激生长E.鉴别作用参考答案A型题 1.D 2.C 3.A 4.E 5.A 6.C7.E 8.B 9.E 10.A 11.C 12.B13.D 14.B 15.B 16.C 17.A 18.E19.B 20.AB型题 21.C 22.D 23.B 24.A 25.A 26.B 27.B 28.A 29.C 30.B 31.A 32.C33.DC型题 34.B 35.A 36.C 37.B 38.A 39.C 40.DX型题 41.ABCE 42.CD 43.BCDE44.ABCDE 45.AC 46.ACDE47.ABCDE 48.ABCD 49.ABCDE50.ABCD。
第13章 分枝杆菌属
* 六项原则：早期、联合、规律、适量、全程、督导
异烟肼
利福平 一线 链霉素 吡嗪酰胺 乙胺丁醇 二线
阿米卡星
卷曲霉素 丙硫异烟胺 氧氟沙星 帕星肼
第二节 麻风分枝杆菌(M.leprae)
麻风分枝杆菌可引起麻风病。该病是一种慢性传染 病，世界各地均有流行，发展中国家为主。病菌可 侵犯皮肤、黏膜和外周神经组织，晚期可侵入深部 组织和脏器，形成肉芽肿。 从 1985 年以来，麻风病在全球的流行已降低 90% 。 1985年全球有122个国家呈地方流行，到2003年已减 少至 10 个，集中在非、亚和拉丁美洲，高发国家为 印度、尼泊尔和巴西。
结核病流行现状
全球 感染 现患 约20亿 2000万
死亡
我国 活动性肺结核患者 死亡
300万/年
500万 25万/年
世界结核病防治现状
WHO已将TB作为重点控制的传染病之一，并于
1995年起将每年的3月24日定为“世界防治结核病
日”，以提醒公众加深对TB的认识。
世界结核病防治现状
近年有许多报道，肺外结核标本中结核分枝杆菌L型 的检出率比较高，应引起足够重视。
三、免疫性与超敏反应
（一）免疫性
抗结核免疫力的持久性依赖于TB在机体 内的存活，一旦体内TB消亡，抗结核免 疫力也随之消失，这种免疫称为有菌免疫 或传染性免疫。 抗结核免疫主要是细胞免疫，包括致敏T 淋巴细胞和Mφ。
概述
19世纪，结核病在欧洲和北美大肆流行，散布到 社会的各个阶层，生活困顿的人群成了结核病的 温床。而且是当时造成死亡的主要原因，被人们 称为“巨大的白色瘟疫”。 德国科学家Robert Koch在1882年发现了一种特殊 的微生物 ——结核杆菌，结核病的致病细菌。他 还证明了这种微生物是可以在培养基里培养出来 的。这一发现使得结核的实验研究成为现实。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
与非结核分枝杆菌区别： 触酶试验(+)、热触酶试验(+)
可合成烟酸和还原硝酸盐
与牛分枝杆菌区别
无内毒素 不产生外毒素和侵袭性酶类 主要菌体成分及其作用 脂质 蛋白质 多糖 核酸 荚膜
脂质
磷脂
刺激单核细胞增生，抑制蛋白酶的分解作用，使病灶组织溶解不完全， 形成结核结节和干酪样坏死 分枝菌酸：抗酸性 索状因子(cord factor)：6,6-双分枝菌酸海藻糖，破坏细胞线粒体膜， 毒害微粒体酶类，抑制中性粒细胞游走和吞噬，引起慢性肉芽肿 蜡质D：肽糖脂与分枝菌酸的复合物 佐剂作用，引起迟发型超敏反应 硫酸脑苷脂和硫酸多酰基化海藻糖：能结合中性红燃料
物
质
蛋白质
引起迟发型超敏反应 局部病灶中性粒细胞浸润
多糖
结核分枝杆菌可通过呼吸道、消化道和破损的皮肤 进入机体，侵犯多种组织器官--结核病
• • • • • 肺部感染--肺结核 原发感染 多见于儿童 飞沫、飞沫核、尘埃 原发灶 原发综合征 转归
原发后感染
肺外感染
原发感染
结核分枝杆菌
偶发分枝杆菌 极少致病 龟分枝杆菌 麻风
第一节 结核分枝杆菌 (Mycobacterium tuberculosis)
2014年，有960万人罹患结核病
2014年，共计150万人死于结核病 （包括40万HIV携带者）
结核病是世界范围内主要的传染病杀手
2014年，有960万人罹患结核病 2014年，共计150万人死于结核 病（包括40万HIV携带者）， 约95%的结核病死亡发生在低 收入和中等收入国家，是导致 15至44岁妇女死亡的五大原因 之一 2014年，估计有100万名儿童罹 患结核病，有14万名儿童死于 结核病 结核病是艾滋病毒携带者的头 号杀手：2015年，三分之一的 艾滋病死亡由结核病引起 2014年，全球预计有48万人患 耐多药结核病 1990年至2015年间，结核病死 亡率下降了47% 2000年至2014年间，通过结核 病的诊断和治疗，估计已挽救 4300万人的生命 2015年遏制并扭转结核病流行 的千年发展目标已经在全球得 以实现：自2000年以来，结核 病发病率每年平均下降1.5%， 现在比2000年的水平要低18% 到2030年终结结核病流行是新 近通过的可持续发展目标中涉 及卫生的具体目标之一
• 多种酶可降解宿主组织中的大分子物质，提供入侵的结核分枝杆菌繁 殖所需的营养 • 防止宿主的有害物质进入结核分枝杆菌
抵抗力 四怕 – 乙醇 – 湿热：62~63℃15min – 紫外线：直射日光2~3h – 抗痨药物（链霉素、异 烟肼、利福平等），但 长期使用会出现耐药性
四不怕 – 干燥：干痰6~8个月， 尘埃8~10d – 酸(3%HCl或6%H2SO4) 或碱(4%NaOH)有抵抗 力，30min – 碱性染料 – 青霉素等抗生素
免疫与超敏反应
结核分枝杆菌感染时，细胞免疫与迟发型超敏反应同时存 在 郭霍现象(Koch’s phenomenon)
罗氏培养基菌落涂片
液体培养物涂片
染色--Ziehl-Neelsen抗酸染色 胞壁中含有大量脂质--分枝菌酸，一般不易着色 加热条件下使分枝菌酸与5％石炭酸复红牢固结合成复合 物，用3%盐酸酒精处理也不脱色；碱性美蓝复染后，分 枝杆菌仍然为红色，而其他细菌及背景中的物质为蓝色 抗酸杆菌(acid-fast bacilli)：经加温或延长染色时间而着 色后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色
杀伤含有TB 菌的靶细胞
释放多种 细胞因子
活化巨噬细胞
促吞噬细胞吞噬 杀灭TB菌的能力
三、免疫性与超敏反应
免疫性：感染、免疫、超敏反应共存 结核分枝杆菌是胞内感染菌 感染后能产生多种抗菌体蛋白的抗体，但仅对细胞外的细菌具 有一定作用，而对细胞内细菌不起作用 感染后诱发机体产生由T淋巴细胞介导的两种免疫应答反应 • 细胞免疫应答 • 迟发型超敏反应：蛋白质+蜡质D 有菌免疫/感染免疫(infection immunity) • 抗结核免疫力的持久性，依赖于结核分枝杆菌或其组分在体内 的存在，一旦体内结核分枝杆菌或其组分全部消失，抗结核免 疫力也随之消失
二、致病性
不产生内、外毒素 无侵袭性酶
致病性主要由于
菌体成分 细菌在组织细胞内顽强繁殖引起炎症反应
代谢产物毒性作用
机体对菌体成分产生的免疫应答导致免疫损伤
与吞噬细胞表面CR3结合，细菌黏附与入侵
荚膜
防止宿主抑制物质进入菌体 降解宿主组织中的大分子物质
致 病
脂质
索状因子（引起慢性肉芽肿） 磷脂（形成结核结节和干酪样坏死） 硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体溶合） 蜡质D（引起迟发型超敏反应）
Ziehl-Neelsen抗酸染色结果 (×1000)：红色杆菌为抗酸 杆菌，蓝色为非抗酸菌
痰涂片脱色5min
痰涂片脱色10min
痰涂片脱色15min
Ziehl-Neelsen抗酸染色不同脱色时间分枝杆菌显微镜下的形态，×1000
培养特性 专性需氧，营养要求高(蛋黄、马铃薯、甘油、天门冬酰胺等) 最适生长温度为37℃，最适pH为6.5~6.8 胞壁脂质含量较高，影响营养物质吸收，生长缓慢，约12~24h繁殖一 代，一般3~4周肉眼可见菌落 常用罗氏（Lowenstein-Jensen）固体培养基：蛋黄(含脂质生长因子， 刺激生长)、甘油、马铃薯、无机盐和孔雀绿(抑制杂菌生长)等
菌落特征：粗糙、干燥、凸起，呈颗粒、结节或花菜状，呈乳白色或 米黄色，不透明 液体培养基：生长较为迅速，一般1~2周即可生长；颗粒状沉淀生长
结核分枝杆菌在L-J培养基上的菌落，培养30d
结核分枝杆菌在液体培养 基中颗粒状沉淀生长
生化反应 糖类发酵试验(-) 触酶试验(+) 热触酶试验(-)
长期迁延，有破坏性的组织病 变(肉芽肿)
临床检验诊断分类
分类 结核分枝杆菌复合群 非结核分枝杆菌 菌落不见光时为奶 油色，光照1h后则 变为橘黄色或橙色 在暗处培养时菌落 呈橘黄色，长时期 曝光培养呈赤橙色 堪萨斯分枝杆菌 肺结核样病变 海分枝杆菌 皮肤丘疹、结节与 溃疡 生长特性 生长缓慢 菌落和色素产生 主要对人致病的 分枝杆菌 致病性
2014年，全球预计有48万人患耐多药结核病
结核病是世界范围内主要的传染病杀手
2014年，有960万人罹患结核病 2014年，共计150万人死于结核 病（包括40万HIV携带者）， 约95%的结核病死亡发生在低 收入和中等收入国家，是导致 15至44岁妇女死亡的五大原因 之一 2014年，估计有100万名儿童罹 患结核病，有14万名儿童死于 结核病 结核病是艾滋病毒携带者的头 号杀手：2015年，三分之一的 艾滋病死亡由结核病引起 2014年，全球预计有48万人患 耐多药结核病 1990年至2015年间，结核病死 亡率下降了47% 2000年至2014年间，通过结核 病的诊断和治疗，估计已挽救 4300万人的生命 2015年遏制并扭转结核病流行 的千年发展目标已经在全球得 以实现：自2000年以来，结核 病发病率每年平均下降1.5%， 现在比2000年的水平要低18% 到2030年终结结核病流行是新 近通过的可持续发展目标中涉 及卫生的具体目标之一 世界防治结核病日：3月24日
→ →
肺泡
→
巨噬细胞
→
巨噬细胞内繁殖
巨噬细胞死亡崩解
↓
肺泡渗出性炎症（原发灶） 肺门淋巴结（肿大） 扩散（炎症）
沿淋巴管
原发综合征（哑铃型） 特点：特异免疫没有建立，故局部病变较轻，但易扩散 机体抵抗力强 形成结核结节→纤维化→钙化→自愈 （但病灶内常有细菌的潜伏）
机体抵抗力差 活动性肺结核→干酪样坏死 全身播散→粟粒样结核
机体抵抗力差 活动性肺结核→干酪样坏死 全身播散→粟粒样结核
结局
原发后感染
常见成人 内源性感染：原发病灶潜伏 的结核分枝杆菌引起 外源性再感染：再次侵入 特点 病灶多局限，常发生在肺尖 部位 局部病症较重 • 主要表现为慢性肉芽肿性炎 症，形成结核结节 • 易发生纤维化或干酪样坏死， 可形成空洞--开放性肺结核
慢纤空洞性结核
肺外感染
部分患者结核分枝杆菌可经血液、淋巴液扩散侵入肺外组织 器官：脑、肾、骨、关节、生殖器官等
骨结核、肠结核、肾结核、结核性脑膜炎、结核性腹膜炎、 结核性胸腔炎、结核性关节炎 免疫力低下者：全身播散性结核 痰菌被咽入消化道或食入了消毒不严格的牛奶：肠结核、结 核性腹膜炎等 通过破损皮肤感染：皮肤结核 大多与结核分枝杆菌L型有关
结核分枝杆菌 结核病 牛分枝杆菌
Ⅰ群光产色菌
生长缓慢
Ⅱ群暗产色菌 Ⅲ群不产色菌 Ⅳ群快速生长菌 麻风分枝杆菌
在37℃生长缓慢
瘰疠分枝杆菌 儿童颈部淋巴结炎 鸟-胞内分枝杆菌
40~42 ℃生长缓慢 通常不产生色素 25~42℃快速生长、 个别种产生色素 5-7d即可见到菌落 人工培养基上不生长
结核样病变，多见 于肺与肾
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
变异性 形态结构 – 经青霉素、环丝氨酸、溶菌酶、异烟肼作用变成 L型结核菌： 颗粒状、丝状、Much颗粒 毒力 – 卡介苗BCG：1908年，Calmette和Gué rin将牛分枝杆菌培 养于含胆汁、甘油、马铃薯的培养基中，经 13年230次传代 而获得的对人物致病性的减毒活疫苗株--卡介苗(Bacille Calmette-Gué rin, BCG) 耐药性 – 耐异烟肼、利福平、链霉素及其他抗结核药物的结核菌株 日益增多；MDR
第十三章 分枝杆菌属 (Mycobacterium)
蒋露芳 jianglufang@ Department of Public Health Microbiology School of Public Health