正常骨髓形态学检查
正常骨髓象检查
正常骨髓象检查 （一）
一、 骨髓象检查的方法
检查步骤
1.低倍镜检查 （1）观察涂片情况：取材、制片、染色 （2）判断有核细胞增生程度：选择细胞分布均匀处
增生程度 极度活跃 成熟红： 有核细胞 1：1 有核细胞均数/ （高倍镜视野） ＞100 常见病例 各种白血病
明显活跃
活跃 减低 极度减低
粒系
1.增生程度：增高、偏高、大致正常、偏低、减低，也可以用百分比代替。 2.各阶段比例、形态描述（各阶段形态大致正常/未见异常；XX阶段可见XX， 其他阶段形态大致正常） 3.嗜酸性粒细胞及嗜碱性粒细胞增多时报，减少或正常时不报（大致正常）
巨核细胞
全片可见巨核细胞多少个，其中各阶段各为多少个（至少分类计数25个）， 有无血小板多少及分布（易见，少见，罕见，不见/未见；散在分布，成堆分布）
第二节 骨髓象检查的方法
结果计算和报告单的书写
2. 骨髓报告单填写
（2）血涂片检查结果 ①取材、涂片及染色情况 ②分类计数有核细胞（200个）注意有无各类幼稚细胞， 形态有无异常 ③观察血小板有无数量、形态、颗粒、聚集性等异常 ④有无病理细胞及寄生虫等 （3）报告细胞化学染色结果
第二节 骨髓象检查的方法
10：1
20：1 50：1 200：1
50～100
20～50 5～10 ＜5
各种白血病、增生性贫血
正常骨髓象，某些贫血 造血功能低下 再生障碍性贫血
第二节 骨髓象检查的方法
增 生 极 度 活 跃
第二节 骨髓象检查的方法
增 生 明 显 活 跃
第二节 骨髓象检查的方法
增 生 活 跃
第二节 骨髓象检查的方法
6.少量非造血细胞，无其他异常细胞及寄生虫
骨髓检查
红系
巨核系
淋巴系 单核系 浆细胞
良性：结核，疟疾，粒缺 恶性：白血病，MDS
增加
临床意义——各系变化意义
粒系
红系
巨核系
淋巴系 单核系 浆细胞
恶性：MM
增加
良性：AA，粒缺，慢性感染 结缔组织病，寄生虫，
二、常用细胞化学染色
过氧化物酶（peroxidase，POX ) 中性粒细胞碱性磷酸酶(Neutrophli alkaline phosphatase，NAP) 非特异性酯酶染色（NSE）+NaF抑制试验及特异 性酯酶染色（specific esterase，SE） 糖原染色(periodic acid –Schiff’s reaction，AS) 铁染色 酸性磷酸酶染色（acid phosphatase，ACP）
糖原染色
（Periodic acid-Schiff’s action,PAS） 鉴别红白血病与其他幼红细胞增多的疾病：
红白血病时幼红细胞的PAS染色呈强阳性反应， 积分值增高。 巨幼贫、溶贫时幼红细胞多阴性
鉴别良性与恶性淋巴细胞增生性疾病：
恶性淋巴细胞增生性疾病（ALL，CLL ，淋巴 瘤白血病），其淋巴细胞的PSA染色积分值增 高； 病毒感染等淋巴细胞良性增生时，淋巴细胞积 分值正常。
中性粒细胞碱性磷酸酶染色
（Neutrophilalkaline Phosphatase，NAP） 碱性磷酸酶主要存在于成熟阶段的中性粒细胞（分 叶及杆状核）其他血细胞均呈阴性反应。 CML与类白血病反应的鉴别：CML时NAP活性明显 减低，类白血病反应NAP活性极度增高。 PNH与AA的鉴别:前者NAP活性减低，后者增高。 急性白血病AL类型的鉴别：急性淋巴细胞白血病时 NAP活性增高，急性粒细胞白血病时减低。 其他血液病：淋巴瘤、骨髓增值性疾病、慢性淋巴 细胞性白血病等NAP活性中度增高。 其他情况：肾上腺皮质激素功能亢进、妊娠及应用 肾上腺皮质激素、雌激素等， NAP积分可增高。
骨髓检查进展与骨髓细胞形态学检查规范化
・特 载・骨髓检查进展与骨髓细胞形态学检查规范化朱忠勇 骨髓检查是一项古老的技术。
据文献记载,早在1868年,Neumann和Bizzozero等就发现骨髓是一种造血器官:Neumann并首先证实白血病与骨髓异常造血有关[1]。
随着时间的推移,骨髓检查的内容愈加丰富,技术手段也越来越多、现代的骨髓检查.已从早期单纯的形态学发展到涵盖细胞化学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学、超微结构分析等诸多方面,常规的形态学检查也逐步向规范化[2]。
本文就骨髓检查的现状和进展,作简要介绍。
1 骨髓检查的内容 1.1 一般形态学检查 包括常规的罗氏染色(R o2 manowsky stain,即瑞氏一姬姆萨染色),和有选择的细胞化学或免疫化学染色检查骨髓涂片。
1.2 细胞免疫表型分析 即细胞分化抗原簇(C D)分析。
用各种荧光染料标记的抗C D单克隆抗体与流式细胞术结合,鉴定包括造血干细胞、各种淋巴细胞、髓系细胞、单核细胞、巨核细胞等的C D表型。
目前在血液细胞学分析,特别是白血病分型方面应用越来越广。
1.3 细胞遗传学分析 白血病、M DS等恶性血液病,往往有染色体异常。
骨髓直接制片或短期培养,即可进行染色体鉴定,目前巳逐步发展为白血病分型的常规方法。
1.4 分子遗传学分析 从基因(DNA或RNA)水平研究和诊断血液系统疾病,是当前的热点,例如,由于9号和12号染色体易位t(9:22)形成的,在慢粒白血病常见的Ph染色体,以往多用染色体分析法鉴定,后来发现这种易位形成了一个新的融合基因bcr-abl,从而可用较简单的PCR或基因探针技术进行鉴定。
目前类似的报告越来越多[3.14]。
1.5 直接查找微生物 如黑热病的利-朵体、弓形虫等。
近年来,由于临床免疫抑制剂的大量使用和爱滋病的发生率增高,许多以往很少见的微生物如鸟分枝杆菌、组织胞浆菌(Hisloplasma)等常可在骨髓片中找到。
1.6 骨髓细胞超微结构的研究、集落形成单位(colony forming unit)的培养。
《实验诊断学》骨髓细胞形态学检查
四.血细胞的细胞化学染色
细胞化学染色是以细胞形态学 为基础，根据化学反应的原理应 用骨髓涂片进行固定，化学反应 显色，复染等程序染色光学显微 镜下观察
㈠过氧化物酶染色（ Peroxidase POX）
Peroxidase( POX ) Staining
骨髓涂片和染色注意事项
➢ 载玻片要洁净；推端要光滑 ➢ 推玻片与载玻片呈约30度角 ➢ 骨髓抽取后要立即涂片,推制骨髓片约8张左右
送检 ➢ 涂片一般不用抗凝剂 ➢ 涂片时要保留片尾和边缘 ➢ 涂片制成后，快速摇动或扇干，不可火烤 ➢ 染色太浅－干燥后重染，若太深－干燥后－滴
数滴甲醇－稍停片刻－冲洗
为0.1－0.2ml ➢多部位穿刺：可提高某些疾病诊断率
骨髓取材满意的指标
➢抽取时病人有短暂的疼感 ➢骨髓液中可见到淡黄色骨髓小粒或油滴 ➢涂片检查有骨髓特有的细胞 ➢含大量幼稚细胞，杆状核多于分叶核
干抽
❖概念：是指非技术错误或穿刺位置不当 而抽不出骨髓液或只抽到少量血液。
❖原因： ➢原发性和继发性骨髓纤维化症 ➢骨髓极度增生 ➢骨髓增生减低 ➢肿瘤骨髓浸润
骨髓细胞形态学检查 Xiaoyan Zhang
概念
骨髓象检查是用细胞形态学检查的方法 来观察骨髓中细胞的数量和质量的变化， 借以了解骨髓的造血功能，对疾病的诊 断、疗效观察、预后的判断等都具有重 大价值。
骨髓细胞形态学检查的临床应用
⒈确诊某些造血系统或非造血系统疾病
特征性细胞形态改变
各类白血病
恶性组织细胞增生症 海兰组织细胞增生症
Rubricyte （中幼红细胞） 8-12 u Nucleus no nucleoli with clumpy chromatin Cytoplasm moderate amount gray-blue with pink-tan
骨髓细胞形态学检查-协和医院血研所李景岗
10-18um
核圆形居中，染色质粗颗 粒状有部分块状聚集，核 仁模糊或消失 胞质较多，深蓝色，无颗 粒，可有核周浅染及瘤状 突起
8-15um
核圆形居中，染色质凝集 呈块状如碎墨砚感，副染 色质明显，无核仁 胞质多，呈多色性（灰蓝 色、灰红色），无颗粒。
7-10um
核圆形，染色质固缩呈团 块状(碳核样) 胞质较多，颜色接近成熟 红细胞，无颗粒
胞核同产血小板型巨核 细胞，常不规则 胞质少或无
巨核细胞的演变
（四）淋巴细胞系统 lymphocyte 原始淋巴细胞、幼稚淋巴细胞 淋巴细胞（大、小）
10-18um 胞体较小，圆形或类圆形 胞质少，淡蓝色，无颗粒 胞核圆形或类圆形，染色 质较细，核仁1-2个，较 清晰
10-16um 胞体较小，圆形或类圆形 胞质少，淡蓝色 胞核圆形或类圆形，染色 质较原始淋巴细胞粗，核 仁模糊或消失
6-9um(小) 胞体较小，圆形或卵圆形， 胞质极少，淡蓝色，无颗 粒。大淋巴细胞(1215um)胞质较多，可见少 量紫红色颗粒 胞核圆形或卵圆形，染色 质聚集呈大块状
（五）单核细胞系统 monocyte 原始单核细胞、幼稚单核细胞、单核细胞
14-25um 胞体较大，圆形或不规则， 可有伪足 胞质较多，灰蓝色不透明， 毛玻璃样，颗粒无或少许 胞核圆形或不规则，可有扭 曲凹陷折叠，染色质细致疏 松呈细丝网状，核仁清晰1-2 个
10-14um 胞质及核上有少量嗜碱性 颗粒 其他基本同中性晚幼粒细 胞
10-15um 核凹陷>1/2,弯曲呈带状、 “S”形、“U”形，染色 质粗糙，块状，副染色质 明显 胞质成熟，有较多淡红色 中性颗粒
骨髓细胞形态学检查
[骨髓象]
（1）增生极度活跃或明显活跃，粒红比 例↑↑ （2）某一系细胞极度增生，但以中幼以 下为主。 （3）红系受抑制； （4）巨核正常或 ↑↑，晚期↓ 慢粒会在晚期发生急变
三、骨髓增生异常综合症（MDS）
主要表现：
难治性贫血 外周血细胞减少而骨髓增生增多 成熟和幼稚细胞形态异常 又有人称之为白血病前期、难治性贫血等。
[骨髓象]
（1） （ 2） （ 3） （4） 增生明显活跃或极度活跃 一系或两系原始细胞明显增多，≥30％ 其他系细胞受抑制 急淋：蓝细胞多见 急粒、急单 见 Auer小体 急性红白血病见巨幼红细胞
（一）分型
1、 临床分型：急性白血病 慢性白血病 特殊类型白血病
2、
MICM分型法
M—Morphology 形态学 I—Immunology 免疫学 C—Cytogenetics 细胞遗传学 （以细胞染色体为基础） M—Molecular biology 分子生物学
谢 谢
骨 髓 细 胞 形 态 学 检 查
第 一 军 医 大 学 珠 江 医 院 刘 兰 平
一、 骨髓细胞形态学检查 的临床应用
（一）临床应用： 1、诊断造血系统疾病及非造血系统疾病 明确诊断： 各型白血病、多发性骨髓瘤、巨幼细 胞性贫血、ITP、恶性组织细胞病、 铁粒幼细胞性贫血、尼曼-匹克病、 原发性转移癌、黑热病或疟疾等。
4) 红系增生良好： a.占有核细胞的20%左右 b. 各阶段比例适当； c．形态无明显异常或红细胞形态大致正 常。 5) 淋巴细胞及单核细胞系统百分率、 形态无异常（主要是成熟细胞） 6）浆细胞系统百分率、形态无异常
（主要是成熟细胞）
7) 巨核细胞 a.数量/全片：7-35个； b.各阶段情况正常； c.血小板形态正常。 8)其他细胞: 网状细胞及组织嗜碱细胞等未见异常。 9)无特殊细胞及寄生虫。
骨髓报告单正常值
骨髓报告单正常值
骨髓报告单是临床上确定某些疾病的重要参考指标之一。
骨髓是人体内最重要的造血器官，它能制造各种血细胞，如红细胞、白细胞和血小板。
因此，骨髓报告单往往被用来评估各种血液和造血系统的疾病，如贫血、白血病、骨髓衰竭等。
那么，骨髓报告单上的正常值是多少呢？下面是骨髓报告单上几个常见指标的正常范围：
1. 骨髓芯片象类：骨髓芯片象类是从骨髓中取出的组织样本，用于鉴定癌细胞或恶性淋巴瘤细胞。
正常情况下，骨髓芯片象类的比率应低于5%。
2. 骨髓涂片：骨髓涂片是将骨髓细胞制成薄片，进行染色和观察，用于评估血细胞的数量和形态。
正常情况下，成熟的红细胞占骨髓涂片细胞总数的50-70%，白细胞占20-40%，血小板占1-3%。
3. 骨髓细胞计数：骨髓细胞计数是测量骨髓中血细胞的数量。
正常情况下，骨髓细胞计数为10~15亿/L。
4. 骨髓基本细胞分析：骨髓基本细胞分析是对骨髓中各种血细胞的数量、形态、大小等进行评价。
正常情况下，成熟的红细胞和白细胞应具有特定的形态和比例。
需要注意的是，骨髓报告单的正常值与性别、年龄等因素密切相关，不同的人群正常值会稍有差异。
因此，在评估骨髓报告单时，医生应该结合患者的临床情况和其他检查结果综合判断。
最后，骨髓报告单的正常值只是参考范围，不同的人体体质和健康状况也会影响结果。
如果您的骨髓报告单结果偏离正常值，在诊疗方案制定和治疗过程中应该注意调整。
骨髓涂片细胞形态学检查
实验十一骨髓涂片细胞形态学检查Morphologic examination of bone marrow smear 试剂器材正常骨髓涂片、光学显微镜、香柏油、擦镜纸、镜头清洁液。
实验内容一、粒系细胞形态观察（一）粒系细胞形态的总特征1．胞体规则。
2．胞核有明显的变化规律(圆形→椭圆形→一侧偏平→肾形→杆状→分叶) 1．胞质中的颗粒也有明显的变化规律(无颗粒→非特异性颗粒出现→特异性颗粒出现→特异性颗粒增多、非特异性颗粒减少→特异性颗粒)。
（一）粒系各期细胞形态1．原始粒细胞：圆形或椭圆形，直径10μm~18μm左右。
胞核大，呈圆形或椭圆形，可以有浅的凹陷。
有2至5个较小而清楚的核仁，染色质呈淡紫红色，细致均匀平坦，如一层薄纱。
胞质少，无颗粒或少量嗜天青颗粒（称副原粒），胞质均匀透明，染天蓝或深蓝色核周常无淡染区。
2．早幼粒细胞：较原粒细胞大，直径12μm~25μm左右。
外形与原粒细胞相似，平均直径可达15μm。
胞核较原粒细胞略小，圆形或椭圆形，随细胞发育逐渐出现凹陷，核内常染色质仍占优势，但异染色质在核周的凝集较原粒细胞明显，核仁常见。
胞质比原粒细胞丰富，胞质内开始出现一些紫红色非特异性嗜苯胺蓝颗粒，大小、形态不一，分布不均，可盖于核，染浅蓝色。
3．中性中幼粒细胞：比早幼粒细胞小，直径10μm~18μm左右。
外形呈圆形或椭圆形，有时外形较不规则。
胞核较早幼粒小，可有凹陷，核内常染色质相对减少，异染色质在核周凝集进一步增加，并逐渐向胞核中央发展，两种染色质的比例相近，核仁少见。
胞质更丰富，胞质内常出现很多特异性颗粒，可分为中性、嗜酸性和嗜碱性颗粒。
中性颗粒呈淡红色，非常细小、均匀而密集，如粉末状；嗜酸性颗粒较粗大，形如小珠，橘黄或土黄色，分布均匀，充满胞质；嗜碱性颗粒呈深紫蓝色，大小不规则，排列凌乱，常盖于核上，以致核形不易看出，胞膜也常常显得不完整。
胞质呈浅红色或浅蓝色，常被特异性颗粒掩盖了颜色。
正常骨髓形态学检查
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粒系各阶段细胞示意图 箭
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原粒
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红系示意图
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幼稚
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幼稚红细胞
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晚幼红
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淋巴系示意图
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原始淋巴细胞
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原始 幼稚淋巴细胞
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淋巴细胞
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骨髓细胞形态学检查操作流程
骨髓细胞检验一、骨髓的取材骨髓取材方式主要有两种，即骨髓穿刺术及环钻术，后者又称骨髓活检。
特别适合用于“干抽”情况下且可看到造血组织的天然结构，能判断造血组织与脂肪组织的比例，有助于对再生障碍时病情严重程度的估计，也有助于骨髓纤维化、骨髓转移癌及MDS 的诊断。
（一）骨髓穿刺部位1.胸骨穿刺在第二与第三肋骨之间的胸骨正中线上穿刺，穿刺针长度固定在1cm以下。
2.脊突穿刺第三、四腰椎脊突为穿刺点，在此处进行穿刺。
3.髂前上棘穿刺髂骨前上棘后约3cm处。
4.髂后上棘穿刺此处骨质较薄，容易穿刺，骨髓液较丰富，若作骨髓培养，须取5ml~10ml骨髓液。
（二）骨髓穿刺时应注意的问题骨髓穿刺一般由临床医生自行操作，检验人员也应了解以下有关问题：1.穿刺前必须向患者作耐心的解释，以尽量减少患者的恐惧心理。
2.穿刺术必须严格无菌操作，盛骨髓的玻片不能接触穿刺针头。
3.骨髓抽取量不宜过多，一般以少于0.2ml为最好。
抽量过多可导致外周血液稀释，失去诊断意义。
穿刺困难时，只要针芯有一小滴骨髓即可涂片，若需要作细菌培养或其他检查，也应先抽少量涂片，然后再抽所需量。
4.干抽的意义干抽是指多部位多次穿刺均抽不出骨髓。
可见于骨髓造血细胞异常增生，如白血病、真性红细胞增多症等，更易见骨髓纤维化症。
肯定干抽时可用环钻术取活检标本，同时将环钻针内沾有的骨髓液涂片。
5.骨髓液稀释此情况由于吸取骨髓液用力过大或穿刺针头刺入骨髓血窦所致，可见涂片上骨髓小粒及脂肪滴减少，各阶段细胞比例失调，中性粒细胞分叶核﹥杆状核，无巨核细胞、组织嗜碱细胞、网状细胞等。
6.穿刺部位的差异骨髓造血组织分布不均，且某些病变也可限于局部，因此穿刺部位的不同，其结果可有显著差异。
如再生障碍性贫血，特别是慢性再障，往往远心部位的髂骨最易首先受损，棘突次之，而胸骨则可再生良好。
即或是同一部位的髂骨也有灶性增生现象，可致两次穿刺结果不相同。
某些疾病诊断阳性率也因穿刺部位而异。
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血细胞分化
粒系各阶段细胞示意图
原粒
早幼粒
中性中幼粒
中性中幼粒
中性晚幼粒
红系示意图
幼稚红细胞
幼稚红细胞
晚幼红
淋巴系示意图
原始淋巴细胞
原始 幼稚淋巴细胞
淋巴细胞
5 单核细胞系统
原始单核细胞
幼稚单核细胞
4 浆细胞系统
浆细胞
巨核细胞
巨核细胞
产ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ巨核细胞
组织嗜碱细胞
1、取髂骨,其次胸骨.
2、量:0.2-0.3ML 3、制片:迅速推片3-5张，头、体、尾分明，较薄，易 于观察。 4、涂片进行瑞氏染色
1.低倍镜观察骨髓细胞涂片：增生程度、巨核 细胞数量、异常细胞团、寄生虫等。
骨髓增生程度： 极度活跃 明显活跃 活跃 低下 极度低下 1：1 1：10 1：20 1：50 1：300
骨髓增生程度
骨髓增生程度
（1）观察细胞形态：浏览全片，观察骨髓有核细胞、成熟 红细胞和血小板的形态变化 （2）有核细胞分类计数：一般选取涂片体、尾交界处细胞 展的较好部位，逐一视野分类计数200-500个有核细 胞，包括粒、红、淋巴、单核和浆细胞系，按细胞所 属系列、分化发育阶段分别记录，并计算百分比。疑 为巨核细胞系统疾病，需分类计数各阶段巨核细胞百 分比。 （3）计算粒、红比值：各阶段粒系百分比之和除以各阶段 幼红细胞百分比之和（M:E）。 （4）书写骨髓报告，得出结论。
骨髓形态学检查
北京同仁医院 检验科 许晓风
骨髓细胞形态学检查的注意事项
（1）骨髓取材、涂片、染色良好时，才能准确进行形态观察 （2）对有严重出血倾向的疾病，禁忌骨髓检查，如血友病
（3）书写骨髓申请单时，需提供患者主要临床症状、外周血 细胞检查情况，肝、脾、淋巴结肿大情况及其它相关检 查等，便于骨髓形态检查报告结论更具体
显微镜油镜检查：
正常骨髓象特点：
（1）骨髓增生活跃，粒：红=2～4：1 （2）粒系增生活跃：占有核细胞40～60% 原始粒细胞 Myeloblast <2% 早幼粒细胞 Promyelocyte <5% 中幼粒细胞 Myelocyte <15% 晚幼粒细胞 Metamyelocytes <15% 中性粒细胞 Neutrophil 7～30 % 嗜酸性粒细胞 Eosinophil <5% 嗜碱性粒细胞 Basophil <1%
（3）红系增生活跃：占有核细胞20%左右 原始红细胞<1% 早幼红细胞<5% 中幼红细胞10%左右 晚幼红细胞10%左右 成熟红细胞形态基本正常 （4）淋巴细胞约占20%左右,儿童可达40%以上 （5）单核细胞<4% （6）浆细胞（plasma cell）< 2% （7）全片巨核细胞约为7～35个，多为产板型巨核 （8）可见少量骨髓特有的非造血细胞：内皮细胞、吞噬细 胞、组织嗜碱细胞等
非造血细胞团
正常组织细胞
谢谢！