血小板黏附试验
血小板检验及临床意义
血小板检验及临床意义血小板检测方法可归纳为出血、血栓和药物监测3大类。
虽则有些方法能应用于多种检测目的,但为特殊目的而创建的方法亦有重要价值。
故在检测时应合理地运用。
血小板的基本功能是黏附、聚集、分泌、促凝血、血块回缩。
通过这些功能维持着正常人体的初期止血作用。
由于这些功能异常而导致的出血疾病包括遗传性和获得性两类,在有些疾病同时会有血小板功能异常和数量减少。
1 血小板数量检查1.1目测计数法将血液用适当的稀释液作一定量稀释,混匀后充入计数池内,在显微镜下计数一定体积内的血小板数量,经过换算得出每升血液中血小板数。
1.2细胞分析仪计数法1.2.1电阻抗法血小板通过小孔引起电阻变化,产生的脉冲经数字化后,根据不同的阈值,计算机分别给出血小板数目。
1.2.2光散射法折射率与细胞内容物有关,血小板有别于红细胞等其它非血小板颗粒,其折射率较低,通过低角度光散射即可与红细胞区别。
2 血小板形态、结构检查瑞氏染色,显微镜观察;MPV检查,应用全自动血细胞计数仪检测。
3 血小板功能检查3.1血块收缩试验(CRT)血块收缩时有相应的血清析出,计算占原有血量的百分数。
3.2血小板粘附试验一定量血液与一定表面积的异物接触后,即有相当数目的血板粘附于异物表面上,测定接触面后血小板数之差,可求出占血小板总数的百分率。
3.3血小板聚集试验血小板聚集是血小板的主要功能之一,主要有比浊法、剪切诱导血小板聚集测定法、散射性粒子检测法、全血电阻抗法、血小板计数法、微量反应板法等。
3.3.1比浊法在特定的搅拦条件下,在富含血小板血浆中加入诱导剂后,由于血小板发生聚集,悬液的浊度随之下降,根据描记曲线可以计算血小板聚集程度及速度[1]。
3.3.2剪切诱导测定法不加诱聚剂,血小板在高剪切力环境下血小板聚集,根据比浊法的原理采用旋转式铁板流体测定仪,仪器绘制成聚集曲线,以观察体外血小板聚集变化。
4 注意事项4.1全部用具和稀释液要特别清洁,无污染。
血小板功能试验与弹力血栓图试验
血小板功能试验与弹力血栓图试验1. 简介1.1 血小板功能试验血小板功能试验是一种用于评估血小板功能是否正常的实验性方法。
血小板是血液中的细胞片段,其主要功能是参与血液凝固和止血过程。
如果血小板功能受损或异常,可能导致出血或血栓等疾病。
血小板功能试验可以通过检测血小板的聚集能力、释放颗粒物质和粘附能力等指标来评估血小板功能的状态。
该试验可以帮助医生判断患者是否存在血小板功能障碍,并为治疗和预防相关疾病提供参考依据。
1.2 弹力血栓图试验弹力血栓图试验是一种评估血液的凝血功能及纤维蛋白形成过程的方法。
正常的凝血功能对维持人体血液循环至关重要,其失调可能导致出血或血栓等疾病的发生。
弹力血栓图试验基于血液的弹性原理,通过在试验中应用不同的压力和剪切力来模拟血液在不同情况下的流动状态。
该试验可以评估凝血功能的弹性、纤维蛋白形成速度和纤维蛋白溶解速度等参数,帮助医生了解患者的凝血功能状态,并为相关疾病的治疗和预防提供指导。
2. 血小板功能试验的方法和指标在血小板功能试验中,常用的方法包括血小板聚集试验、血小板释放试验和血小板粘附试验。
2.1 血小板聚集试验血小板聚集试验是一种通过观察血小板在刺激物影响下的聚集状态来评估血小板功能的方法。
常用的刺激物包括ADP、胶原、花生四烯酸等。
在试验中,可以使用血小板聚集率、聚集时间和聚集形态等指标来评估血小板的聚集能力和稳定性。
正常情况下,血小板在受到刺激后会迅速聚集形成血小板聚集体,从而参与血栓的形成。
2.2 血小板释放试验血小板释放试验是一种通过检测血小板释放颗粒物质的含量来评估血小板功能的方法。
当血小板受到刺激后,会释放出包括ATP、5-羟色胺、ADP和血小板因子等物质。
常用的血小板释放试验包括血小板ATP释放试验、5-羟色胺释放试验和血小板因子释放试验等。
这些试验可以通过测量释放物质的浓度或活性来评估血小板的释放能力和反应性。
2.3 血小板粘附试验血小板粘附试验是一种通过观察血小板与血管内皮细胞的粘附情况来评估血小板功能的方法。
【临床血液学-实验课课件】_10实验十 PT APTT 血小板功能
P
T
T
Ⅻa
Ⅲ
Ⅶa
Ⅺa
Ca2+
Ⅸa Ⅷ,PF3 ,Ca2+
Ⅹa
P
Ⅴ,PF3 ,Ca2+
T
凝血酶原 (Ⅱ)
凝血酶 (Ⅱa)
纤维蛋白原 (Ⅰ)
纤维蛋白 (Ⅰa)
血浆凝血酶原时间
(Prothrombin time, PT) 【原理】
组织因子(兔脑、胎盘、肺组织浸液) Ca2+ 血浆
[参考值] QUIK法:11-13s
开启血小板凝聚仪,将诱聚剂放入仪器预热槽内进行温浴
操 用硅化移液管吸0.3mlPRP加入聚集反应杯中,并加入磁棒
作 用普通移液管准确吸0.3mlPPP加入聚集反应杯中,不加入磁棒
步
将PPP管放入反应通道内,选择血小板聚集试 验,按ENTER进行调零,调零结束后取出PPP管
骤 将PRP放入刚才的反应通道内,按ENTER,仪器读取PRP的浊度
(2)缩短:
高凝状态(hypercoagulation state) 血栓性疾病 口服避孕药
PT的报告方式
• 时间(S)
• PT比值(PTR)=
待测血浆PT 正常血浆PT
• 国际标准化比值(INR)= PTRISI
International Normalized Ratio International Sensitivity Index
注意事项
实验十
血小板功能检测(示教) PT APTT
目的要求
• 掌握PT、APTT测定的原理、方法、注意事项、临 床意义
• 掌握试管法 • 熟悉血凝仪法 • 熟悉血小板聚集仪
血小板功能检验
• 血小板黏附试验 • 血小板聚集试验
血小板聚集试验临床意义
血小板聚集试验临床意义概念:血小板聚集(platelet aggregation,PAg)是指血小板与血小板之间的粘附,显示活化的血小板相互作用聚集成团的特征。
在富含血小板的血浆(PRP或全血(WB)中,加入致聚剂(亦称诱导剂)连续搅拌能诱发这种现象。
血小板聚集试验(platelet aggregation test,PAgT)参考范围:1.ADP0.5μm时最大聚集率(MAR)0.627±0.143,ADP1.0μm时MAR0.678±0.178(比浊法)。
2.肾上腺素0.4μg/mlMAR0.678±0.178(比浊法)。
3.胶原0.2mg/mlMAR0.717±0.193(比浊法)。
4.瑞斯托霉素1.5mg/mlMAR0.875±0.114(比浊法);玻片定性法大多数在++~+++。
5.玻片法30s不出现凝集为异常。
影响因素:1.最好采用硅化或塑料注射器,玻璃试管等须涂硅处理或使用塑料制品。
因为玻璃可以激活凝血反应。
2.止血带不应扎得太紧,时间最好不超过5min,强调采血顺利,以防激活凝血反应。
3.必须在采血后3h内检测完毕。
4.必须避免用EDTA作抗凝剂,防止血浆中Ca2+的过度被螯合。
首选枸橼酸钠抗凝。
5.由于是比浊法,故避免溶血、红细胞混杂及牛奶、豆浆等脂类物质对检测的干扰。
6.阿司匹林、双嘧达莫、肝素、双香豆素类药物在检测前1周内不能应用。
7.血小板聚集试验受当日的环境和试剂影响颇大,最好每次以正常人血小板作对照。
8.血小板聚集作用随血浆中枸橼酸钠浓度的降低而增高,因此在贫血患者中应加入较正常者为多的抗凝剂。
9.采血后的标本以放在15~25℃的室温下为宜,低温会使血小板激活,聚集能力增加。
临床意义:1)PAgT增高:反映血小板聚集功能增强。
见于高凝状态和(或)血栓前状态和血栓性疾病,如心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、妊娠高血压综合征、静脉血栓形成、肺梗死、口服避孕药、晚期妊娠、高脂血症、抗原-抗体复合物反应、人工心脏和瓣膜移植术等。
血小板粘附试验与血小板聚集试验在检验肝硬化患者中的作用
邓 艳 波 刘 艳 杰
( 黑龙 江省集 贤县 第 一人 民医院 集 贤 1 5 0 ) 5 9 0
摘 要 : 文通过 对 6 例肝硬 化患者进行 的 P d P g 两项血小板功 能试 验, 本 3 A T、A T 就肝硬化 患者肝 功损 害 同血小板功能异 常的关系作 一初 步的撂 讨 。
【 中图分类号1 5 5 R 7
【 文献标识码】 B
【 文章编号】 O 8 8 9 2 1 )1 14 1 10 —17 (0 00 一O 0 一O
表 1 肝 硬化 C i 分 级 A、 、 hl d B c各级 间 的 P T、 A T的 比较 Ad患 者进 行 的 P d P T 两 项血 小 板 功能 3 A T、 Ag 试 验 , 肝硬 化 患 者 肝 功 损 害 同 血 小 板 功 能 异 常 的关 系 作 一 初 步 的 就
全血血小板膜粘附受体的流式细胞术检测及方法探讨
pe s n, Re ut CM p dya da c rtl ee tdP GPe pe s n t i ic p cf i n fce sn l vt rsi s o s lsF r il n c uaeyd tce M a x rsis wi ds n t e i ct a ds llm sf i o h t s i y u e i y
l f w帅 me y F ?) n o vl tte to oo i l c riv l d ^ 蛐 d x rsin oP PGPI GPⅡ o t (c f adte au e me d lgc f t sn ov . l r a h h aa o e sE pes s f MG o rI
EAT L E流式细胞 仪( 国 Colr 司 ) 美 ut 公 e 。
13 对 象 -
2 0例 正 常人 , 男女 各 I O例 , 年龄 2 3 2岁 , 近期 均 未服 过药 物 。
1 实 验 方 法 _ 4
集 等功 能中起着 重要 的作 用 , 它们 的检 测在 某些 血 对
维普资讯
・
4 6・ 5
第 一 军 压 大 学学 报 fFr MiMe nv J it l dU i s )
全血血小板膜粘 附受体 的流式细胞 术检测及 方法探讨
陈练 波 , 为人 2 东 方 第一 军 医大学 中心 实验 室 ; 织胚 胎学教 研 室 东 广 州 5 0 1 ) 董 , ( 组 广 1 5 5
JC-临床血液学检验-22血小板检验及疾病【44页】
由于检测结果的变异较大,临床上很少使用。
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七、血小板自身抗体
(platelet associated immunoglobulin,PAIg)
在某些免疫性疾病中,血小板膜表面存在着抗体(IgG、 IgA、IgM)或补体,导致血小板破坏过多, 检测PAIg和补 体的含量有助于判断血小板减少的原因
B:正常人血小板对低浓度ADP呈可逆性聚集
C:正常人血小板对中浓度ADP呈双峰、不可逆性聚集
D:正常人血小板对高浓度ADP呈单峰、不可逆性聚集
E:VWD患者血小板对瑞斯托霉素无反应
F:正常人血小板对瑞斯托霉素有反应
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PAgT参考值
最大聚集率 1分钟聚集率 聚集曲线斜率
不同仪器、不同诱导剂及浓度参考值有别 各实验室应建立自己实验室的参考值
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(5)其他检测
网织血小板↑,血小板生成素正常。
血小板寿命↓
ITP患者的实验室诊断主要根据: PLT、骨髓象、血小板相关抗体和补体
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3.ITP诊断
(根据2009年中华医学会血液学分会制定的标准)
至少2次化验检查血小板减少,血细胞形态无异常 脾脏一般不增大 骨髓检查显示巨系增生或正常,有成熟障碍 须排除继发性血小板减少症
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2.ITP检验
(1)ITP 血 象
计数:血小板数持续下降或↓↓,急性ITP <20×109/L,
慢性ITP为(30~80)×109/L,MPV及PDW↑。RBC数、
Hb及WBC数一般正常,严重出血或慢性反复出血者可
贫血
形态:血液涂片上可见大血小板、巨大血小板、畸形血小板、
经二甲基亚砜冷冻保存的血小板粘附率观察
医学 2 0 年第 2 07 2卷第 1 期 L br o e in 07 V 1 2 o1 a a r M d i 20 . o 2 .N o ty ce
文章 ̄ - 6 3 60 20 ) 1 0 1 2 : 7- 4 (070 - 8 - 1 8 0 0
加 D S 保 存 1个 月、 MO 3个 月、 6个 月 以及 加 D O 洗 涤 的 血 小 板 样 品作 血 小板 粘 附 试 验 。 MS 并
血小板 粘 附试验 用 Y A. D I V血液 黏度 仪进行 , 按说 明书操S .D O富含 血小 板 血浆 悬 液 制 备 、 冻 保 冷
一
存, 给临床应用带来很大 的困难 。以二甲基亚砜 ( M O 作保护剂在低温条件下保存血小板 的技 DS) 术可 稳定 血小板 溶 酶 体膜 , 高 血 小 板膜 受 体 结 提 合 能力 , 能较好 的保 持血 小板 功能 , 具有 临床 输注 安全 、 捷 、 果 好 等 优 点 … 。我 们 采 用 D O 快 效 MS 冷冻保存血小板 , 并对其制备效果进行检测。
材 料和方 法
一
置3 4 【的循环 水浴 中 , 3mi 7~ 2c = 2~ n内完成 复 温
过程 。 .
2 .质控检测 低温保存血小板复温后 , 按无 菌 操作 抽 样 检查 以下 指标 : 小 板 、 血 白细 胞 、 细 红
胞 计 数 、 s g 抗- C 抗 - I 、 毒 特 异 性 抗 HBA 、 H V、 H V 梅 体, 并作 细菌 培养 。 3 .血小 板 粘附试 验 随 机抽 取 未 加 D O、 MS
细菌生长 。抗丙型肝炎病毒 ( C 、 H V) 乙型肝炎表面抗原 ( s g 、 HBA ) 抗人类 免疫缺陷病毒( I 、 H V) 梅毒特异性抗体 检测均 为阴性 。血小板粘附试验结果 : 加入 D O血小板 的粘 附率低于未加 D O的血小板( O 0 )洗涤后 MS MS P< .5 ; 的血小板粘 附率 与未 加 D S M O的血小板相 比, 差异无统计学 意义 ( 0 0 ) P> .5 。结论 技术值得推广应 用。 关键词 : 血小板 ;D O; 存 MS 保 血小板 的 D S M O冷冻保存
血小板聚集试验临床意义
血小板聚集试验临床意义标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]血小板聚集试验临床意义概念:血小板聚集(platelet aggregation,PAg)是指血小板与血小板之间的粘附,显示活化的血小板相互作用聚集成团的特征。
在富含血小板的血浆(PRP或全血(WB)中,加入致聚剂(亦称诱导剂)连续搅拌能诱发这种现象。
血小板聚集试验(platelet aggregation test,PAgT)参考范围:时最大聚集率(MAR)±,μm时±(比浊法)。
2.肾上腺素μg/±(比浊法)。
3.胶原±(比浊法)。
4.瑞斯托霉素±(比浊法);玻片定性法大多数在++~+++。
5.玻片法30s不出现凝集为异常。
影响因素:1.最好采用硅化或塑料注射器,玻璃试管等须涂硅处理或使用塑料制品。
因为玻璃可以激活凝血反应。
2.止血带不应扎得太紧,时间最好不超过5min,强调采血顺利,以防激活凝血反应。
3.必须在采血后3h内检测完毕。
4.必须避免用EDTA作抗凝剂,防止血浆中Ca2+的过度被螯合。
首选枸橼酸钠抗凝。
5.由于是比浊法,故避免溶血、红细胞混杂及牛奶、豆浆等脂类物质对检测的干扰。
6.阿司匹林、双嘧达莫、肝素、双香豆素类药物在检测前1周内不能应用。
7.血小板聚集试验受当日的环境和试剂影响颇大,最好每次以正常人血小板作对照。
8.血小板聚集作用随血浆中枸橼酸钠浓度的降低而增高,因此在贫血患者中应加入较正常者为多的抗凝剂。
9.采血后的标本以放在15~25℃的室温下为宜,低温会使血小板激活,聚集能力增加。
临床意义:1)PAgT增高:反映血小板聚集功能增强。
见于高凝状态和(或)血栓前状态和血栓性疾病,如心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、妊娠高血压综合征、静脉血栓形成、肺梗死、口服避孕药、晚期妊娠、高脂血症、抗原-抗体复合物反应、人工心脏和瓣膜移植术等。
血小板功能检查的原理
血小板功能检查的原理
血小板功能检查的原理是通过测量血小板在血液中的聚集能力来评估其功能是否正常。
一般情况下,当血管受损时,血小板会通过黏附和聚集来形成血小板栓,以止血。
血小板功能检查可以评估血小板的聚集能力和黏附能力,从而判断其功能是否异常。
常用的血小板功能检查方法有多种,常见的包括:
1. 血小板聚集率测定法:通过将患者血液中的血小板与特殊试剂(如ADP、胶原蛋白等)接触,观察和测定血小板的聚集程度,来评估血小板的聚集能力。
2. 血小板激动素释放测定法:通过测量血小板释放的激动素(如血小板因子4等)的浓度,来评估血小板的活化程度和功能性。
3. 血小板粘附率测定法:通过将血液与含有相应黏附因子的介质(如胶原蛋白等)接触,观察和测定血小板在介质上的粘附程度,来评估血小板的黏附能力。
这些方法都可以提供关于血小板功能的信息,有助于评估相关疾病的诊断和治疗。
血小板功能检测
血小板聚集实验血小板活化PAC-I,CD62P一、血小板功能检测项目出血时间、粘附性、聚集性、释放产物、花生四烯酸代谢产物、胞浆游离钙水平测定、凝血活性、膜糖蛋白检测、基因多态性和突变。
常用的检测功能的方法为:血小板聚集性测定(比浊法、阻抗法、循环血小板聚集体、自发性血小板聚集),近年来,流式细胞仪、PFA-100分析及激光衍射法检测微小聚集体也逐渐地进入临床或临床前阶段。
比浊法测定血小板聚集是应用较广泛的指标,可以用于遗传性血小板疾病诊断指标,也可以作为血栓性疾病中评估其病理反应,指导抗栓药物的应用以及作为抗血小板药物监测之用。
在比浊法的应用中,有几项关键问题应予以注意:(1)血液采集与分离。
(2)诱导剂应用:种类、浓度。
(3)正常值的选定。
流式细胞仪可以检测血小板功能、代谢、尘化及受体表达,而微小聚集体的形成作为血栓形成的早期敏感指标采用激光衍射法的测定也正在评估中,反映体内全血状态下的血小板阻抗法以及血小板内钙离子水平的检测在临床研究中显示其意义。
二、血小板功能检测的临床应用1、出血性疾病:分遗传性和获得性二类,采用常规的血小板聚集试验对遗传性血小板疾病即可作出初步诊断。
2、血栓性疾病:大多数血栓性疾病均可以检测到血小板反应性增高,(这对疾病的病理过程,指导疾病治疗均有一定;意义,许多指标在疾病中的意义也作比较研究,一些分子标志物在反映血小板活化方面有较高的灵敏度)。
P选择素是反映血小板活化的较敏感指标,而血小板聚集性测定较为简便。
最近的一些研究也表明血小板活化指标不仪在反映血小板活化方面有意义,而且对某些疾病具有预示意义。
譬如,胶原诱导血小板聚集在妊娠25周升高,则预示先兆子痫,具有较高的灵敏性和精确性,也有采用血小板数、MPV 和聚集三项来综合预示先兆子痫。
采用MPV、血小板数和P选择素,发现不稳定心绞痛和心肌梗死有差别。
这表明血小板检测在临床上足十分有用的。
在血小板参与功能血栓形成的机制中,除了上述获得性原因外,近年来的研究也证明存在遗传因素。
血小板功能试验与弹力血栓图试验 (3)
未知驱动探索,专注成就专业
血小板功能试验与弹力血栓图试验
血小板功能试验(Platelet Function Test)是用来评估血小板的功能状态的一种检测方法。
它可以通过不同的指标来评估血小板的聚集能力、粘附能力、释放能力和凝集能力等功能。
常见的血小板功能试验包括血小板聚集试验(Platelet Aggregation Test)、血小板粘附试验(Platelet Adhesion Test)、ADP释放试验(ADP Release Test)等。
弹力血栓图试验(Thromboelastography,TEG)是一种评估全血凝血功能和纤维蛋白形成的监测方法。
它可以通过测量血液样本在不同阶段的凝固过程中的机械性质和动力学参数来评估凝血功能的状态。
常见的弹力血栓图参数包括凝血时间(Coagulation Time)、凝固强度(Clotting Strength)、纤维蛋白形成速度(Fibrinogen Formation Rate)等。
这两种试验都可以用来评估人体的凝血功能和血小板功能状态,从而帮助医生判断出血或凝血相关的疾病,如血友病、血小板功能障碍等,并指导相应的治疗。
1。
体外血小板粘附试验在医疗器械评价中的应用研究
h s e r t. s l T e rs l e n t td t a i ts .a h e h ief r v u t g t eb o d c mp t i t o e i ae Re l t h e ut d mo s ae t h s e t sac ifc oc a ai lo o a i l y f v ls s r h t o el n h b i
i e i a v c s Ev l a i n n M d c lDe ie a u t o
L U n I Xi ,GU n q n Ha — i g ,ZENG ir n ,S n — a Zh —o g HIHo g d o
( 、 in nIstt o rl i S re ,Taj 0 2 l C ia 1Taj ntue fUo gc ugr inn3 0 l ,hn ) i i o y i
【 关键词】 医疗器械 ; 血小板粘附 ; 血液相 容性
中图分 类号 : 4 . R 46 1 文献标志码 : A 文章编号 :0 50 0 (0 7 0 —0 70 10 .89 20 )4 0 0 —3
Th p i a i n S u y o a e e he i e Te ti ir e Ap lc to t d n Pl t l tAd sv s n v t o
法, 分别对流经涂有 甲基硅油的玻璃珠 、 白玻璃珠和试验材料 的血液进行血 小板 计数 , 空 计算血小
板 粘附率 、 检验材料血液相容性。结果
化提供可靠 的依据。
试验结果 表明体外 血小板粘 附试 验能快捷 、 准确地对 医
疗器械进行评价 , 医疗器械进行血液相容性评 价的重要试 验 , 而为 国家血液 相容性评价标 准 是 从
血小板贴壁培养-概述说明以及解释
血小板贴壁培养-概述说明以及解释1.引言1.1 概述血小板贴壁培养是一种重要的实验技术,通过将血小板与培养基贴壁培养在细胞培养皿表面,使血小板形成单层薄膜,有利于其功能的研究。
血小板作为血液中的重要细胞成分,其功能异常会导致多种疾病的发生。
因此,血小板贴壁培养在疾病机制研究、药物筛选和治疗效果评估等方面具有重要的应用价值。
本文将对血小板贴壁培养的定义、原理、优势及应用进行详细介绍,以期为读者提供更深入的了解。
1.2 文章结构文章结构部分的内容可以包括以下几个方面:1. 简要介绍文章的结构,说明文章将从哪些方面展开讨论,包括引言、正文和结论部分。
2. 引导读者对整篇文章的内容有一个整体的了解,以便他们更好地理解和阅读后续的内容。
3. 提醒读者文章各个部分之间的逻辑关系和衔接,使其更容易跟随文章的思路和论证过程。
4. 强调文章的完整性和逻辑性,让读者对文章的组织和内容有一个清晰的认识。
5. 最后,可以陈述作者的写作目的,即通过不同章节的论述来阐明血小板贴壁培养这一技术的重要性和广泛应用。
1.3 目的:本文旨在介绍血小板贴壁培养这一实验技术的定义、原理、优势和应用,以及在疾病研究中的意义。
通过深入探讨血小板贴壁培养的相关知识,旨在增进读者对于该技术的理解,进一步推动相关领域的研究和应用,促进医学科研的发展。
同时,希望通过本文的介绍,能够引起更多人对于血小板贴壁培养在疾病治疗和研究中的重要性的关注,为未来的相关研究提供有益的参考资料。
2.正文2.1 血小板贴壁培养的定义和原理血小板贴壁培养是一种体外实验技术,通过将血小板与细胞培养皿表面贴壁培养,使其在一定的条件下附着生长,有助于模拟体内环境,促进血小板的活化和功能研究。
血小板贴壁培养的原理主要是利用培养皿表面的亲水性和亲油性相结合的特点吸附血小板,使其在培养皿上形成完整的单层薄膜。
一般来说,先将培养皿表面特定涂覆液体,形成亲水或亲油表面,然后加入抗凝血剂处理后的血液,在倒置培养皿的过程中,液体薄层将血小板留置在表面。
医用植入材料表面血小板粘附
医用植入材料表面血小板粘附血小板粘附是医用植入材料表面研究中的一个重要课题。
血小板是血液中的细胞成分之一,具有促进止血和修复伤口的功能。
而医用植入材料的表面性质对血小板的粘附起着至关重要的作用。
血小板粘附是指血小板与医用植入材料表面相互结合的过程。
在这个过程中,血小板会通过血浆中的一种叫做血小板表面受体的蛋白质与植入材料表面相互作用,从而形成血小板聚集。
这种血小板粘附对于植入材料的生物相容性和功能性至关重要。
血小板粘附的程度取决于植入材料的表面特性。
一些研究表明,表面粗糙度和化学性质可以影响血小板的粘附。
例如,表面粗糙度越大,血小板粘附的几率就越高。
另外,一些特殊的表面处理方法,如表面涂层和功能化修饰,也可以调控血小板的粘附。
血小板粘附在医学领域有着广泛的应用。
例如,在人工心脏瓣膜和血管支架等植入材料上,通过控制血小板的粘附,可以减少血栓形成和血管狭窄的风险。
另外,在骨科植入材料上,促进血小板粘附可以加速骨组织的生长和修复。
然而,血小板粘附也可能带来一些负面影响。
过度的血小板粘附可能导致血栓形成和植入材料的阻塞。
因此,如何控制血小板的粘附程度,是医用植入材料研究中的一个关键问题。
为了解决这个问题,研究者们提出了一些方法。
例如,可以通过改变植入材料的表面性质来控制血小板的粘附。
另外,一些药物也可以用来抑制血小板的粘附,从而减少血栓的形成。
此外,一些新型的材料和技术,如纳米材料和生物打印技术,也被应用于医用植入材料的研究中,以进一步改善血小板粘附的控制。
医用植入材料表面血小板粘附是一个重要的研究课题。
通过控制血小板的粘附,可以提高植入材料的生物相容性和功能性,从而减少植入材料的并发症和风险。
然而,要实现这一目标,还需要进一步的研究和技术创新。
只有不断地探索和发展,才能为患者提供更好的医疗服务。
血小板粘附聚集释放的三个过程
血小板粘附聚集释放的三个过程
血小板是人体血液中的一种形态酷似鱼鳞的细胞,它们起着非常重要的作用——在血管受到损伤时,能迅速地聚集在伤口处,形成血栓,帮助机体止血。
而血小板的这种功能效果是通过血小板粘附、聚集和释放三个过程来完成的。
第一个过程:血小板粘附
处理损伤伤口的第一步是让损伤处的局部组织释放一系列的化学物质以吸引血小板向该部位聚集。
其中最重要的化学物质是一种名为von Willebrand因子的蛋白质。
当损伤组织产生的化学信号引导第一批血小板朝受损血管的方向前进时,这些血小板的表面上的受体会“识别”von Willebrand因子,并将血小板紧紧地粘连在损伤区域的血管壁上。
第二个过程:血小板聚集
粘连好的血小板会继续朝着伤口处前进,同时也会向周边的血小板释放一个名为血小板活化因子的生物活性物质。
血小板活化因子可以刺激附近的血小板表面上的再生肝细胞生长因子受体,从而引发这些血小板的聚集,形成血栓。
第三个过程:血小板释放
血小板聚集最终会引起一系列生化反应,这些生化反应在血小板中形成了一种被称为“凝血因子”的复杂网络,使得这些小细胞迅速地释放大量的凝血因子,尤其是一种名为血小板导致生长因子的物质。
这些物质不仅可以维持以后的血栓形成,还能够促进伤口处的新生组织增长,促进创伤愈合。
总之,血小板粘附、聚集和释放三个过程相互配合,使得人体在受伤时,能够让血管受损处快速地形成血栓,尽可能地防止大量的血液流失。
随着科学的不断进步,人们对于血小板的这一重要功能也越来越了解,相信未来会有更多的研究成果帮助我们更好地利用这些精细的机制,为人类的健康做出更大的贡献。
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PFA-100 REV. 2.00 00370
14/07/97
ID#: Test Type: Collagen/EPI SAMPLE A:
S/N: 14:01 23456.17 110 SEC
正常值范围: 胶原/ADP膜: 57-120秒 胶原/肾上腺素膜:75-160秒
PFA-100® 测定结果异常的常见原因
血流方向
血小板粘附、聚集过程模式图
由此可见,血小板粘附功能的发挥依赖血小板膜糖 蛋白GPIb-IX-V、GPVI 、GPIa-IIa 、GPIIb-IIIa 、 vWF的结构与功能的正常。
静息血小板
血小板伪足形成
血小板伸展
血小板黏附功能的实验室检查
1,血小板黏附试验(玻璃珠柱法)
原理: 当血流以一定速率流经玻珠后,血小板黏附于玻珠和塑 料管表面,所形成的血小板聚集体滞留在柱内,使过柱后 血液中血小板数降低,计数过柱前后血液血小板数,计算 血小板黏附率: 正常参考值:62.5%±8.6%
释放
v WF EC SE
初期止血机制
TXA2
ADP
凝血酶
PF4 -TG PDGF
粘附
纤维蛋白原 纤维蛋白
PGI2
聚集 白色血栓
血小板在初期止血过程中的重要性
在生理状态下,血小板与暴露的血管内皮下基质发生
血小板粘附; 血小板聚集; 释放反应(TXA2,ADP等); 促凝活性表达(PS暴露,凝血因子释放); 血小板收缩。
血小板黏附率减低见于: 血管性血友病; Bernard-Soulier综合征; 尿毒症; 使用抗血小板药物 等
该方法由于操作繁琐,影响因素多,不能模拟体内状况, 现已较少采用。
2,血小板功能分析仪 PFA-100®
PFA-100® 工作原理
The PFA-100® System Simulates In Vivo Conditions
现状:参与黏附的相关分子的结构、信号传导以及这些分子 缺陷所引 起的临床疾病和症状;
进展:vWF-A1/GPIb, vWF-A2/ADAMTS13, vWF-A3-胶原
抗血栓药物:抗GPIb/IX/V-vWF-胶原轴; 抗GPⅥ/α2β1-胶原轴制剂;
GPIb-IX-V
platelet
Place the cassette onto the carousel of the analyzer.
Using the integrated keypad, initiate the test run.
PFA-100® 测定结果分析
Occlusion of the Aperture
“Closure Time”
Adhension: platelet-VWF-subendothelial Axis
Immunoinhibitory probes using GPIb MoAb AN 51 suggest that GPIb on the platelet membrance is the vWF receptor.
(Ruan et al: Brit. J. Haematal,1981)
SZ 1 SZ 2 SZ 21
SZ 22
SZ 51
GPIX
中国科学1986, Blood 1987
GPIb
中国科学1986, Blood 1987
GPIIIa Thromb. Hemostas. 1987
中华内科杂志 1987
Injured Blood Vessel
Flow
PFA-100 Test Cartridge
Agonist
Collagen
Platelet Plug
剪切率:5000-6000s-1 孔隙直径:150tte 800 µL of citrated whole blood into the sample reservoir of the test cartridge(s).
正常止血机制
正常生理性止血是由血管、血小板及血浆凝血因子 等共同参与的一个复杂、连续的过程 。 初期止血
血管内皮细胞损伤,内皮下组织成分暴露(主要为 胶原),血小板发生黏附、聚集和释放反应,形成血小 板血栓。 二期止血
是凝血、抗凝和纤溶诸系统相互协调、有序完成的 过程,血浆中一系列凝血因子经级联酶促反应依次被活 化,最终形成纤维蛋白凝块。
Platelet Disorder
Aspirin
GP IIb/IIIa antagonists Underlying Disease
21
GPVI-Fc
vWF
A1 A2 A3
Exposed collagen
血小板胶原受体
1, GPIb-IX-V结构
Canobbio I et al. Cellular Signalling 2004;16:1329–13440
3, vWF结构与功能
胶原结合位点
Structure and Function of VWF
血小板膜糖蛋白、血小板内在结构、血浆vWF和纤维蛋 白原功能的正常发挥是完成初期止血过程所必需的。任何 因素发生数量和/或质量异常将会导致初期止血障碍性出 血性疾病,如血小板无力症、Bernard-Soulier 综合征、 血管性血友病等。
血小板膜糖蛋白与血小板的止血功能
活化 聚集 粘附
(Fn:纤维结合蛋白,Coll:胶原,Ec:内皮细胞)
GPIIb
Thromb. Hemostas. 1987
中华血液杂志 1987
GMP140 ( P-Selectin ) Nouv. Rev. Fr. Hematol.1990
血小板黏附、活化在血栓形成中的重要性
在生理性止血及动脉血栓形成过程中,血小板粘附到暴露的血管内皮下 基质并发生血小板活化是血栓形成的起始阶段,进而产生血小板聚集和 释放反应,最终导致血小板血栓形成。
4, GPIa-IIa结构与功能
2
1
2, GPVI结构
三、血小板黏附过程
血小板与胶原粘附是生理止血和血栓形成的起始阶段。
目前认为血小板与胶原相互作用方式是: 在高剪切力条件下血小板初期不稳定粘附依赖 GPIb/IX/V复合物和GPⅥ的协同作用; 黏附后的血小板活化由GPⅥ介导; 血小板牢固粘附则依赖GPIa/IIa和GPIIb/IIIa 的共同作用。 活化的血小板释放ADP、 TXA2,进一步加强 血小板粘附和聚集。