实验八 大分子物质的水解实验及糖发酵实验
糖发酵生化实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 理解糖发酵的基本原理及其在微生物鉴定中的应用。
2. 掌握通过糖发酵实验来鉴别不同微生物的方法。
3. 观察并记录微生物对不同糖类的发酵情况，分析其代谢特征。
二、实验原理糖发酵实验是基于微生物能够利用糖类作为碳源和能源的特性进行的。
在实验中，微生物通过其代谢活动将糖类分解为酸性产物和/或气体。
这些酸性产物会导致培养基pH值下降，指示剂颜色发生变化；产气则表现为倒置小倒管中的气泡产生。
不同的微生物对糖类的利用能力不同，因此，通过观察微生物在糖发酵培养基中的反应，可以区分不同的菌种。
实验中常用的糖类包括葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖等，以及指示剂溴甲酚紫（B.C.P）。
三、实验材料1. 微生物菌种：大肠杆菌、伤寒杆菌、普通变形杆菌等。
2. 糖发酵培养基：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖等。
3. 指示剂：溴甲酚紫。
4. 培养基制备工具：试管、移液管、酒精灯、培养箱等。
四、实验方法1. 将不同微生物分别接种于糖发酵培养基中。
2. 将培养基置于37℃培养箱中培养24小时。
3. 观察并记录培养基中指示剂的颜色变化和气泡产生情况。
五、实验结果与分析1. 大肠杆菌的糖发酵结果- 葡萄糖：产酸产气。
- 乳糖：产酸产气。
- 麦芽糖：产酸产气。
- 蔗糖：产酸产气。
2. 伤寒杆菌的糖发酵结果- 葡萄糖：产酸不产气。
- 乳糖：不发酵。
- 麦芽糖：不发酵。
- 蔗糖：不发酵。
3. 普通变形杆菌的糖发酵结果- 葡萄糖：产酸产气。
- 乳糖：不发酵。
- 麦芽糖：不发酵。
- 蔗糖：不发酵。
六、实验讨论通过本次实验，我们了解到：1. 不同的微生物对糖类的利用能力不同，可以通过糖发酵实验来鉴别不同的菌种。
2. 大肠杆菌具有较强的糖发酵能力，可以分解多种糖类产生酸性产物和气体。
3. 伤寒杆菌对糖类的利用能力较弱，只能分解葡萄糖产生酸性产物。
4. 普通变形杆菌的糖发酵能力介于大肠杆菌和伤寒杆菌之间。
七、实验结论糖发酵实验是一种常用的微生物鉴定方法，通过观察微生物对糖类的发酵情况，可以有效地鉴别不同的菌种。
实验八 大分子物质的水解及营养元素对微生物生长的影响
实验八大分子物质的水解及营养元素对微生物生长的影响杨明轩生物111 1102040128一、实验目的1、通过了解不同细菌对不同的生物大分子及含氮化合物的分解利用情况，认识微生物代谢类型多样性。
2、了解营养元素对微生物生长的影响。
3、学习平板接种法（点接）及穿刺接种法。
二、实验原理某些微生物能产生胞外酶，将大分子的淀粉、蛋自质和脂肪等分解为小分子物质，然后再被微生物吸收利用。
不同的微生物因具有不同的代谢酶系而表现出不同的代谢类型，即当它们作用于相同的底物时可以产生不同的终产物。
这些可以作为微生物鉴定和分类的依据。
本实验通过微生物对碳水化合物（如淀粉）、含氮化合物（蛋白质）和含磷有机物（卵磷脂）的水解，证明微生物对于这些大分子有机化合物的水解作用。
淀粉的水解是由于微生物分泌淀粉酶作用的结果，可用碘液来检测；微生物产生并分泌磷酸酯酶，可水解卵磷脂为脂肪和甘油；蛋白质中的含硫氨基酸被分解产生硫化氢，遇到培养基中的铁盐或铅盐，就形成黑色的硫化铁或硫化铅。
微生物的生长发育需要一定的营养物质和环境条件，只有全面满足以上要求时，微生物才能进行正常的生命活动。
影响微生物生长、繁殖的主要营养元素主要包括碳、氢、氧、氮、磷、硫等，个别微生物还需要某些维生素和微量元素。
本实验通过将黑曲霉接种于缺乏不同营养元素的培养基中，观察它的生长情况，确知几种营养元素对微生物生长的作用。
三、实验材料1、菌种：大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、普通变形杆菌（Proteus vulgaris）、黑曲霉（Aspergillusniger）；2、培养基：淀粉培养基、LB培养基；3、试剂：20%蔗糖溶液、1.5%硝酸铵溶液、0.5%KH2PO4、混合液（1.2%MgSO4、0.05%NaCl、0.005%FeSO4等量混合）、蒸馏水、生理盐水，以上试剂灭菌备用；5、仪器：无菌培养皿、100ml无菌三角瓶、无菌吸管（5ml、10ml）、移液器、接种用具。
实验八微生物生理生化试验
伏－普试验用于测定某些细菌利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产 物的能力,如丙酮酸,丙酮酸进行缩合、脱羧生成乙酰甲基甲醇,此化合 物在碱性条件下能被空气中的氧气氧化成二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的 精氨酸的呱基作用,生成红色化合物,即伏－普试验阳性,不产生红色化 合物为反应阴性,
实验八 微生物生理生化试验
一 实验器材 1 菌种 大肠杆菌,普通变形杆菌,金黄色葡萄球菌,产气肠杆菌 2 培养基 尿素琼脂试管,蛋白胨水培养基,葡萄糖蛋白胨水培养基,葡萄糖发酵管 和乳糖发酵管各3支, 3 溶液和试剂 甲基红指示剂,5％萘酚,乙醚和吲哚试剂 4 仪器和其他用品 接种针
二 目的要求 1 大分子物质水解试验
三 糖发酵试验 1 在发酵管上标明所接种的细菌名称, 2 取葡萄糖发酵管3支,分别接入大肠杆菌、普通变形杆菌,第三支不接 种,作为对照,另取乳糖发酵管3支,同样操作, 3 将接种和对照的发酵管置37 ℃培养24－48h, 4 观察发酵管的颜色和有无气泡,
各试验需接种的菌种:
1 明胶水解试验：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌 20 ℃ 2－5 d
3 尿素试验 1 取2支尿素培养基试管,用记号笔表面各管欲接种的菌名, 2 分别接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌 两种细菌对尿素的分解速
度不同 ,需要观察2次, 3 将接种后的试管置35 ℃培养24－48h, 4 观察培养基颜色变化, 尿素酶存在时为红色,无尿素酶时为黄色,
二 IMViC试验
1 接种与培养 1 用接种针将大肠杆菌和产气肠杆菌分别穿刺接入2支醋酸铅培养基中
温15－30 min,红色为阳性,大肠杆菌阴性,产气肠杆菌阳性
思考题
1. 为什么尿素实验可用于鉴定变性杆菌属 细菌
实验八_大分子物质水解试验
实验八_大分子物质水解试验一、实验目的1. 了解大分子物质的水解2. 掌握大分子物质水解的实验原理和操作方法3. 比较不同大分子物质的水解速率二、实验原理大分子物质是由许多重复单元组成的生物高分子或合成高分子，如蛋白质、淀粉、纤维素、聚合物等。
由于其大分子结构，容易难以被生物体吸收直接利用，因此需要经过水解反应，使其分解为一个个低分子化合物，方便生物体吸收利用。
在本实验中，我们将研究3种大分子物质的水解反应，分别为淀粉、聚乳酸和聚酯。
淀粉的水解需要使用酶类，因为淀粉的分子结构中包含α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键，这些糖苷键需要在酶的作用下被分解。
聚乳酸和聚酯的水解则需要使用酸，因为它们的分子结构中包含酯键，酸可以在水的存在下水解酯键。
在水解过程中，大分子物质被分解为低分子量的化合物，如单糖、乳酸、酒精、苯甲酸等，这些化合物可以被生物体吸收利用。
三、实验步骤1. 淀粉水解试验步骤一：准备淀粉溶液将2克淀粉粉末加入100毫升蒸馏水中，搅拌至淀粉完全溶解，得到10mg/mL的淀粉溶液。
步骤二：加入淀粉酶将0.1毫升淀粉酶加入淀粉溶液中，搅拌均匀。
步骤三：加热反应将淀粉溶液加热至80℃，反应10分钟。
加入10毫升0.1mol/L NaOH，中和反应。
步骤五：检测还原糖取1毫升反应液，加入1毫升Benedict试液，加热10分钟，观察是否产生红色沉淀。
将2克聚乳酸粉末加入50毫升四氢呋喃中，搅拌至聚乳酸完全溶解。
四、实验结果加入Benedict试液后，反应液产生红色沉淀，说明淀粉水解后生成了还原糖。
聚乳酸水解试验：五、实验分析通过本实验，我们研究了3种大分子物质的水解反应。
淀粉是由多个葡萄糖单元组成的多糖，需要酶的作用才能进行水解，反应生成的还原糖可以被生物体吸收利用。
聚乳酸和聚酯含有酯键结构，在酸的作用下容易进行水解反应，生成的乳酸和苯甲酸也可以被生物体吸收利用。
本实验中，聚乳酸水解后未生成酒精的结果可能是因为聚乳酸的链长和结构不同，导致酯键的水解速率与其他酯键不同。
微生物实验 08.大分子物质的水解试验
2、掌握微生物大分子水解实验的原理和方法。
（二）实验原理
微生物对生物大分子（如：淀粉；蛋白质； 脂肪）不能直接吸收利用，只有那些能够 产生并分泌胞外酶的微生物才能利用大分 子有机物。
胞外酶主要为水解酶。
淀粉
淀粉酶 水解糊精（蓝红 ） Nhomakorabea双糖、单糖
（无色）
加碘（蓝色）
脂肪
脂肪酶 水解
甘油+脂肪酸
2、明胶水解试验 做标记------穿刺接种------培养（20℃ 2-5d） ------------观察液化情况
（五）注意事项
1 、淀粉水解试验中加碘液时碘液要铺 满整个平板； 2、倒平板时无菌操作
3、接种时防止菌种交叉污染。
（六）实验作业
分别将淀粉水解试验（“+”表示发生水解，“-”表示 不发生水解）和明胶水解试验（“+”表示发生水解，“-” 表示不发生水解）结果填入下表，并分析原因。 菌名 淀粉水解能力 明胶水解能力 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌
乳糖蛋白胨培养液 蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 乳糖 5g NaCl 5g 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml 蒸馏水 1000mlpH 7.2-7.4 注：最后加溴甲酚紫。 115℃灭菌20min
实验八 大分子物质的水解试 验
（一）实验目的
1 、证明不同微生物对各种大分子的水解能力不 同，从而说明不同微生物具有不同的酶系统。
(四）实验方法
1、淀粉水解试验
注意无菌操 作
（1）制固体淀粉培养基平板；冷却凝固。 （2）标记后将大肠杆菌、枯草芽孢杆菌接种。
大肠杆菌
枯草杆菌
（3）36℃恒温倒置培养1-2d；
（4）观察生长情况，将平板打开盖子，滴入少 量碘液于平皿中，轻轻旋转平板，使碘液 均匀铺满整个平板；
糖发酵实验报告
一、实验目的1. 了解糖发酵的原理和在微生物鉴定中的应用。
2. 掌握通过糖发酵实验鉴别不同微生物的方法。
3. 分析不同微生物对糖类的分解利用能力，为微生物分类提供依据。
二、实验原理糖发酵实验是微生物学中常用的生化反应之一，主要用于微生物的鉴定。
不同微生物具有不同的酶系统，对糖类的分解利用能力各异。
在糖发酵实验中，当微生物分解糖类时，会产生酸性产物或气体，导致培养基pH值下降，同时指示剂颜色发生变化，从而判断微生物对糖类的分解情况。
三、实验材料1. 微生物：大肠杆菌、乳酸菌、酵母菌等。
2. 糖类：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖等。
3. 培养基：糖发酵培养基（含有蛋白胨、指示剂等）。
4. 实验仪器：培养皿、移液枪、酒精灯、显微镜等。
四、实验方法1. 将微生物接种于糖发酵培养基中，进行培养。
2. 观察培养基中指示剂的颜色变化，判断微生物对糖类的分解情况。
3. 观察发酵过程中是否产生气泡，判断微生物是否产生气体。
五、实验结果与分析1. 大肠杆菌对葡萄糖、乳糖、麦芽糖均能分解，产生酸性产物和气体。
2. 乳酸菌对乳糖、麦芽糖能分解，产生酸性产物，不产生气体。
3. 酵母菌对葡萄糖、蔗糖能分解，产生气体，不产生酸性产物。
六、实验讨论1. 不同微生物对糖类的分解利用能力存在差异，这是由于微生物具有不同的酶系统。
2. 糖发酵实验是微生物鉴定的重要手段，通过观察微生物对糖类的分解情况，可以初步判断微生物的种类。
3. 实验过程中，应注意以下几点：- 控制好培养温度和培养时间，以保证实验结果的准确性。
- 选择合适的指示剂，以便更好地观察微生物对糖类的分解情况。
- 注意无菌操作，避免实验过程中污染。
七、实验结论糖发酵实验是一种常用的微生物鉴定方法，通过观察微生物对糖类的分解情况，可以初步判断微生物的种类。
实验结果表明，不同微生物对糖类的分解利用能力存在差异，这与微生物具有不同的酶系统有关。
八、实验拓展1. 研究不同微生物对其他糖类的分解利用能力。
细菌的生理生化反应
实验名 称
培养基
菌种
接种 方式
现象
油脂水 大分 解
子水 解实 淀粉水 验解
油脂培养基 淀粉培养基
金黄葡、 平板 水解出现红色斑点 枯草
枯草、大 平板 加入碘液后出现透明
肠
水解圈
明胶液 明胶培养基 化
大肠、枯 穿刺 沿穿刺接种的痕迹进
草、绿脓
行明胶的液化水解
糖发 葡萄糖 酵实 发酵 验
乳糖发 酵
葡萄糖发酵培 养基
实验八 细菌的生理生 化实验
一、实验目的
微生物代谢与其他生物代谢有着许多相似之处， 也有不同之处。微生物代谢重要持征之一，就是 代谢类型的多样性。即使同属化能异养菌中的不 同微生物，它们分解生物大分子的能力，分解利 用含碳化合物、含氮化合物的途径和产生代谢产 物也各不相同等等。
由于微生物代谢类型多样性，使得微生物在自然 界的物质循环中起着重要作用，同时也为人类开 发利用微生物资源提供更多的机会与途径。
酸、醋酸、甲酸、琥珀酸)及各种气体(如氢、 甲烷、二氧化碳)。 有的细菌只产酸不产气。 酸的产生可利用指示剂来指示。 在配制培养基时可预先加入溴甲酚紫【pH 5(黄)－pH7(紫)】。 当细菌发酵糖产酸时，可使培养基由紫色变 为黄色。
气体的产生可由糖发酵管中倒置的杜氏小管 中有元气泡来证明。
乳糖发酵培养 基
大肠、变 形
大肠、变 形
试管 颜色变化、有气泡积 聚
试管 同上
思考题
P115：2（4） P116：2
三、实验原理和步骤
大分子物质水解实验
不同微生物分解利用生物大分子能力各 有不同。只有那些能够产生并分泌胞外
酶的微生物才能利用大分子有机物。 淀粉水解ห้องสมุดไป่ตู้明胶液化
微生物生理生化实验
【实验题目】微生物生理生化实验【实验目的】1.了解生理生化的意义。
2.掌握几种常用生理生化的实验方法。
【实验器材】1、菌种：枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，铜绿假单胞菌，变形杆菌，产气肠杆菌2、试剂：卢戈氏碘液、乙醚、吲哚试剂、甲基红试剂、蒸馏水等3、仪器和用具：酒精灯、接种针、培养皿、试管、试管架、烧杯、量筒、德汉氏小管等4、培养基淀粉培养基、油脂培养基（大分子物质水解实验）葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基（内附倒置的德汉氏小管）（糖发酵实验）蛋白胨水培养基（吲哚实验）葡萄糖蛋白胨水培养基（甲基红培养基）【实验原理】在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢，代谢过程主要是酶促反应过程。
具有酶功能的蛋白质多数在细胞内，称为胞内酶。
许多细菌产生胞外酶，这些酶从细胞中释放出来，以促进细胞外的化学反应。
各种微生物在代谢类型上表现出很大的差异，如表现在对大分子糖类和蛋白质的分解能力以及分解代谢的最终产物的不同，反映出他们具有不同的酶系和不同的生理特性，这些特性可被用作为细菌鉴定和分类的内容。
具体实验原理如下：一、大分子物质的水解实验原理1、淀粉水解由于微生物对淀粉这种大分子物质不能直接利用，所以必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。
胞外酶主要为水解酶, 通过加水裂解大的物质为较小的化合物使其能被运输至细胞内。
如淀粉酶将淀粉水解为小分子的糊精, 双糖和单糖，能分泌胞外淀粉酶的微生物，则能利用其周围的淀粉。
已知淀粉遇到碘会显现蓝色，因此可通过在淀粉培养基上滴加碘液来判断微生物是否能产生淀粉酶分解淀粉，菌落周围不呈蓝色，出现无色透明圈，则该菌种能够水解淀粉。
2、油脂水解脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，而产生的脂肪酸可改变培养基的PH,因此在油脂培养基上接种细菌，培养一段时间后可通过观察菌苔的颜色判断菌种是否能够水解油脂，若出现红色斑点，则说明这种菌可产生分解油脂的酶。
二、糖发酵实验原理糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应, 在肠道细菌的鉴定上尤为重要.绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源, 但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异. 有些细菌能分解某种糖产生有机酸（如乳酸,醋酸,丙酸等）和气体（如氢气,甲烷,二氧化碳等）; 有些细菌只产酸不产气. 例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气。
糖发酵实验报告分析(3篇)
第1篇一、实验背景糖发酵实验是微生物学中一个重要的基础实验，通过观察微生物对糖类的分解利用情况，可以鉴定微生物的种类、研究微生物的代谢特性。
本实验旨在通过糖发酵实验，了解糖发酵的原理、掌握糖发酵实验的操作方法，并对实验结果进行分析。
二、实验目的1. 了解糖发酵的原理和在微生物鉴定中的重要作用。
2. 掌握糖发酵实验的操作方法。
3. 分析实验结果，了解不同微生物对糖类的分解利用情况。
三、实验原理糖发酵实验的基本原理是利用微生物对糖类的分解利用能力，通过观察微生物在发酵培养基中的产酸、产气情况，以及培养基pH值的变化，来鉴定微生物的种类。
实验中常用的糖类有葡萄糖、乳糖、麦芽糖等。
四、实验方法1. 准备实验材料：糖发酵培养基、微生物样本、接种环、培养皿、无菌水等。
2. 将微生物样本接种于糖发酵培养基中。
3. 将培养皿放入恒温培养箱中培养。
4. 定期观察培养基中pH值的变化和产气情况。
5. 记录实验结果。
五、实验结果与分析1. 实验结果（1）pH值变化：实验结果显示，不同微生物对糖类的分解利用能力不同，导致培养基pH值的变化也不同。
例如，大肠杆菌在葡萄糖发酵培养基中产酸，pH值下降；而伤寒杆菌在葡萄糖发酵培养基中只产酸不产气，pH值变化不明显。
（2）产气情况：实验结果显示，部分微生物在糖发酵过程中产生气体。
例如，大肠杆菌在乳糖发酵培养基中产酸产气，而伤寒杆菌在乳糖发酵培养基中只产酸不产气。
2. 实验结果分析（1）pH值变化分析：pH值变化是微生物发酵过程中产生的酸性物质导致的。
不同微生物分解糖类的能力不同，产生的酸性物质种类和数量也不同，从而引起pH值的变化。
通过分析pH值的变化，可以初步判断微生物的种类。
（2）产气情况分析：产气是微生物发酵过程中产生的气体，如二氧化碳、氢气等。
不同微生物的产气情况不同，可以根据产气情况进一步鉴定微生物的种类。
例如，大肠杆菌在乳糖发酵培养基中产酸产气，而伤寒杆菌在乳糖发酵培养基中只产酸不产气。
大分子物质的水解实验报告
大分子物质的水解实验报告大分子物质的水解实验报告引言：大分子物质是由许多小分子通过化学键连接而成的复杂化合物。
在自然界和生活中，我们经常接触到各种大分子物质，如蛋白质、淀粉、纤维素等。
这些大分子物质在生物体内起着重要的作用，但它们的结构和性质往往难以直接观察和理解。
本实验旨在通过水解实验，研究大分子物质的结构和性质。
实验材料和方法：材料：淀粉、酵母、盐酸、碘液、滴管、试管、试管架、加热装置等。
方法：1. 将一小块淀粉加入试管中。
2. 加入适量的盐酸。
3. 用滴管加入碘液，观察试管中的颜色变化。
4. 另取一小块淀粉，加入试管中。
5. 加入适量的酵母。
6. 将试管加热至沸腾，观察试管中的气体产生情况。
结果与讨论：第一部分：淀粉的水解在实验中，我们首先将淀粉与盐酸反应。
盐酸是一种强酸，具有强氧化性。
当淀粉与盐酸反应时，淀粉分子中的化学键会被破坏，导致淀粉分子的结构发生改变。
同时，我们加入了碘液，碘液可以与淀粉形成暗蓝色的复合物。
实验结果显示，当盐酸与淀粉反应后，试管中的溶液由暗蓝色变为无色。
这说明淀粉的分子结构已经发生了改变，无法再与碘形成复合物。
第二部分：淀粉的酵解在第二部分实验中，我们将淀粉与酵母一起加热。
酵母是一种微生物，它具有酵素活性，可以加速化学反应的进行。
当淀粉与酵母一起加热时，酵母中的酵素会与淀粉分子发生作用，将其分解成较小的分子。
实验结果显示，加热后试管中产生了气体，并且溶液呈现出白色浑浊的状态。
这表明淀粉被酵母分解成了较小的分子，并产生了气体。
结论：通过本实验，我们观察到了大分子物质淀粉在不同条件下的水解反应。
在与盐酸反应时，淀粉的分子结构发生了改变，无法再与碘形成复合物。
而在与酵母一起加热时，淀粉被分解成了较小的分子，并产生了气体。
这说明大分子物质的结构和性质受到环境条件的影响，通过改变条件可以改变大分子物质的结构和性质。
实验的结果对于我们深入理解大分子物质的结构和性质具有重要意义。
实验大分子物质的水解试验
实验大分子物质的水解试验一、目的要求1．证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统；2．掌握进行微生物大分子水解试验的原理和方法。
二、基本原理微生物的胞外酶（如淀粉酶、脂肪酶等）将大分子物质的分解过程可以通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实。
三、器材1．菌种：枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌，普通变形杆菌。
2. 培养基：固体油脂培养基，固体淀粉培养基，明胶培养基试管，石蕊牛奶试管，尿素琼脂试管3.溶液或试剂：革兰氏染色用卢戈氏碘液。
4.仪器或其他用具：无菌平板，无菌试管，接种环，接种针，试管架。
四、操作步骤1．淀粉水解试验制成淀粉培养基平板后，将平板分为四个区域，划线接种枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌后置于37℃培养24h。
观察各细菌的生长情况，并滴加少量碘液于平皿中。
若菌苔周围有透明圈，说明水解反应阳性。
透明圈大小可初步判定该菌水解淀粉酶的能力强弱。
2．油脂水解试验制成油脂培养基平板后，同样划线接种上述四菌株，置于37℃培养24h后观察各细菌的菌苔颜色，若出现红色斑点，则为脂肪水解阳性。
3．明胶水解试验在明胶培养基中穿刺接种枯草芽孢杆菌、大肠杆菌及金黄色葡萄球菌，置于20℃培养2～5d后观察液化情况。
4．石蕊牛奶试验接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌于石蕊牛奶培养基中，置于35℃培养24～48h 后观察培养基颜色变化情况。
石蕊在酸性条件下为粉红色，碱性为紫色，而被还原时为白色。
5．尿素试验接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌于尿素培养基中，置于35℃培养24～48h后观察培养基颜色变化情况。
尿素酶存在时为红色，否则为黄色。
五、实验报告将结果添入下表，“+”表示阳性，“-”表示阴性六、结果与讨论。
实验八、九、十 大分子水解、抗生素、膜法大肠杆菌实验
将滤膜放入装有蒸馏水的烧杯中，加热煮沸15分钟，共煮沸三次，前 两次煮沸后换水洗涤2—3次再煮，以洗去滤膜上残留的溶剂。（分装到无 菌的培养皿中）。
2．滤膜过滤器装臵
用无菌手续将已灭菌的过滤膜装到无菌滤头上，注意不能有缝隙，其 中滤膜用灭菌镊子（浸在95%酒精内，用时通过火焰灭菌）装臵在滤头上。 其他可直接用手或夹钳操作，但不要碰到滤头，以免染菌。
四、实验器材
淀粉，纤维素，魔芋粉牛肉膏固体培养基， 接种环，酒精灯，地衣芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌，短小芽孢杆菌
五、实验方法及步骤
1、三种不同培养基分别倒平板各一块； 2、每块平板分为四个区，各点上地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、 短小芽孢杆菌和大肠杆菌 3、37℃倒臵培养，第二天观察结果，淀粉培养基上加上碘液， 铺平，观察透明圈，其它两块平板直接观察水解圈。
5．将平板倒臵于37℃下培养22—24小时。
计算公式：
1升水样中的大肠菌群数=滤膜上的大肠菌群菌落数×稀释倍数
六、实验报告
1．实验结果： 一升自来水和沙湖水样中的大肠菌群数是多少？
2．思考题：滤膜法检查大肠菌群有什么优点？
实验十 抗生素敏感性的测定
一、目的和要求
1、了解管碟法的原理。 2、掌握二剂量法测定抗生素效价单位的技术和计算方法。
六、作业
1、描述观察结果，并解释。
七、配制培养基（为下两次实验做准备）
1、 （3人）伊红美蓝培养基： 蛋白胨水琼脂培养基：100ml（蛋白胨1g+NaCl 0.5g+蒸馏水100ml+2g琼脂） 20%乳糖溶液 2ml；2% 伊红水溶液 2ml；0.5%美蓝水溶液 1ml。 培养基在115℃灭菌20min，等冷却到60-70℃ ，或在倒培养基之前加入 用过滤除菌的伊红和美蓝。
各类微生物生化实验方式原理
各类微生物生化实验方式原理通常利用生化实验的方式，检测细菌对各类物质的代谢作用及其代谢产物，称为细菌的生化反映，经常使用于细菌的辨别。
一、糖类分解产物（1）糖发酵实验（carbohydrate fermentation test）不同种类的细菌对糖的分解利用能力不同，一样以可否分解某种糖，是不是产酸产气等现象来辨别。
例如大肠杆菌能分解葡萄糖和乳糖，产酸且产气；而伤寒杆菌只分解葡萄糖产酸不产气，且不分解乳糖。
这是因为大肠杆菌分解葡萄糖等产生甲酸，经甲酸解氢酶的作用生成H2和CO2。
而伤寒杆菌无此酶，故分解葡萄糖只产酸不产气。
（2）VP实验（Voges-Proskauer test）产气杆菌将分解葡萄糖产生的两分子丙酮酸脱羧，生成一分子乙酰甲基甲醇。
乙酰甲基甲醇在碱性溶液中被空气中氧气氧化，生成二乙酰，二乙酰可与培育液中含胍基的化合物（如蛋白胨中的精氨酸）反映，生成红色的化合物，此为VP实验阳性。
大肠杆菌分解葡萄糖不生成乙酰甲基甲醇，故VP实验阴性。
（3）甲基红实验（methyl red test）大肠杆菌和产气杆菌均属G-短杆菌，且都能分解葡萄糖、乳糖产酸产气，二者不易区别。
但二者所产生的酸类和总酸量不一：大肠杆菌可产生甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸等，而产气杆菌只产生甲酸、乙醇及乙酰甲基甲醇。
故大肠杆菌培育液PH在以下，加入甲基红指示剂呈红色，为甲基红实验阳性；产气杆菌培育液PH在以上，加入甲基红后呈桔黄色，为甲基红实验阴性。
（4）枸橼酸盐利用实验(citrate utilization test）产气杆菌在以枸橼酸盐为唯一碳源的培育基上生长，分解枸橼酸盐产生CO2，并转变成碳酸盐，使培育基由中性变成碱性，含溴麝香草酚蓝（BTB）指示剂的培育基由淡绿色变成深兰色，此为枸橼酸盐利用实验阳性。
大肠杆菌不能利用枸橼酸盐，故在此培育基上不能生长，培育基仍为绿色。
二、蛋白质及氨基酸的分解产物（1）硫化氢实验（hydrogen sulfide test）有些细菌能分解培育基中的含硫氨基酸（如胱氨酸、甲硫氨酸等）产生H2S，如遇醋酸铅或硫酸亚铁，能生成黑色的硫化物，为硫化氢实验阳性。
糖发酵实验
10、低头要有勇气，抬头要有低气。2 021/4/ 152021 /4/152 021/4/ 154/15 /2021 9:22:59 PM
11、人总是珍惜为得到。2021/4/1520 21/4/1 52021/ 4/15Apr-2115 -Apr-2 1
12、人乱于心，不宽余请。2021/4/15 2021/4
产酸产气的鉴定
产酸的判断：指示剂溴甲酚紫(pH5．2为黄 色，pH6．8为紫色)，当发酵产酸时，使培 养基由紫色变为黄色。
产气的判断：倒置的德汉氏小管（有无气泡）
糖发酵试验结果： 右侧为空白对照， 左侧为发酵产酸阳 性，但不产气，中 间为产酸、产气
三、实验器材
大肠杆菌，普通变形杆菌斜面各1支；盛有 葡萄糖发酵培养基的试管和乳糖发酵培养 基的试管各3支（内装有倒置的德汉氏小 管），试管架，接种环等。
13、生气是拿别人做错的事来惩罚自 己。202 1/4/15 2021/4 /15202 1/4/15 2021/4 /154/1 5/2021
14、抱最大的希望，作最大的努力。2 021年4 月15日 星期四 2021/4 /15202 1/4/15 2021/4 /15
15、一个人炫耀什么，说明他内心缺 少什么 。。202 1年4月 2021/4 /15202 1/4/15 2021/4 /154/1 5/2021
四、实验方法和步骤
1、编号 用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌
名。 2、接种 取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3支，按编号1支接种大肠杆
菌，另1支接种枯草芽孢杆菌，第3支不接种，作为对照。另 取乳糖发酵培养基试管3支，同样1支接种大肠杆菌，1支接种 枯草芽孢杆菌，第3支不接种，作为对照。 3．将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置37℃温 室中培养24小时。 4．观察结果，并填表记录。
大分子物质水解实验
实验八 大分子物质（淀粉）水解实验郑州大学生物工程系微生物实验一、目的要求1、了解不同细菌对含碳及含氮化合物的分解和利用情况，认识微生物代谢类型的多样性2、掌握进行微生物大分子水解实验的原理和方法。
二、基本原理微生物代谢与其他生物代谢有着许多相似之处，也有不同之处。
微生物代谢重要特征之一，就是代谢类型的多样性，表现在对生物大分子糖类和蛋白质分解能力以及最终代谢产物的不同，反映出它们具有不同的酶系。
微生物在自然界的物质循环中起着重要的作用，同时也为人类开发利用微生物资源提供更多的机会与途径。
人们在微生物的分类鉴定工作中，常利用其生理生化反应作用作为重要依据。
有些细菌具有合成淀粉酶的能力，可以分泌胞外淀粉酶。
淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖，淀粉水解后遇碘不再变蓝色。
本实验安排微生物对生物大分子的分解利用（淀粉水解实验），让同学们对微生物的代谢类型多样性有一个初步和感性的了解，同时学习利用微生物形态、结构以及生化反应的特征对某些细菌进行初步的分类。
三、实验材料1、菌种金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌。
2、培养基淀粉水解培养基：蛋白胨10 g，氯化钠5 g，牛肉膏5 g，可溶性淀粉2 g，水1000mL，琼脂15-20 g,121 ℃灭菌20 min3、接种用具平皿，试管，移液管，接种环，酒精灯，打火机，废物杯，油性笔。
4、试剂卢哥氏碘液四、实验步骤（1）配制固体淀粉培养基，灭菌冷却至50℃左右，无菌操作制备平板（2）翻转平板使底皿背面向上，用油性笔在其背面玻璃上划线均分为三个部分。
（3）在平板底部三个区域分别标注三种供试菌株名称，并用接种环以划线方式在三个区域分别接上菌种。
（4）将接完种的平板倒置于37℃恒温培养箱，培养24h。
（5）观察结果时，可打开皿盖，滴加少量的碘液于平板上，轻轻旋转，是碘液均匀铺满整个平板。
如菌苔周围出现无色透明圈，则说明淀粉已被水解，为阳性。
透明圈的大小，说明该菌水解淀粉能力的强弱，即产生胞外酶活力的高低。
大分子物质的水解实验报告
大分子物质的水解实验报告实验报告实验名称：大分子物质的水解实验实验室名称及编号：化学实验室 76231实验时间：20XX年XX月XX日实验者：XXX实验目的：通过对大分子物质聚乙烯醇的水解实验，观察水解现象，探究大分子物质的化学性质和反应机理。
实验原理：聚乙烯醇是一种大分子物质，分子中含有羟基（OH）基团。
水解反应的反应机理是，在催化剂的作用下，大分子物质中的羟基和水反应，形成较为稳定的中间产物羟基化合物，接着再与催化剂中的另一种基团组成酸酐结构，从而完成大分子物质的水解反应。
实验步骤：1.取10克聚乙烯醇样品，测量其粉末形状的质量，并记录下来。
2.将10克聚乙烯醇样品加入到锥形瓶中。
3.加入50毫升稀酸（相当于浓度为0.2mol/L的硫酸）溶液，并加入少量碎石，作为催化剂。
4.装上纱布过滤器，将玻璃杯置于热水浴中，使反应处于恒温下。
5.反应5小时后，取出玻璃杯，冷却至室温，然后再用蒸馏水洗涤数次，并再次过滤，得到白色凝胶状产物。
6.记录下产物的重量、颜色、物态等性质，并进行表征分析。
实验结果与分析：本实验得到的大分子物质产物为白色凝胶状物质。
产物的重量为6.54克，比起原材料的减少量为3.46克。
产物的pH值为6左右。
通过进行傅里叶变换红外光谱分析，可以发现产物分子中含有酸酐结构，同时含有羟基结构。
这也证实了实验原理提到的反应机理。
实验结论：本实验可以成功地将聚乙烯醇进行水解反应，得到了白色凝胶状产物。
产物的含酸基团结构证实了该反应中酸催化剂的作用，而羟基结构证实了产物来自大分子物质的羟基。
通过实验可以深入探究大分子物质的化学性质，同时证实了水解反应的反应机理。
实验过程中存在的问题：在实验中，过滤器使用不当可能会导致产物的损失。
改进措施：在使用过滤器时，要注意将过滤网置于底部，这样能够更好地过滤产物且减小产物的损失。
以上就是本次大分子物质的水解实验报告，谢谢您的阅读。
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1．培养基（每组的量，由班长分发）
• 灭菌培养皿（淀粉水解）：3皿
• 明胶液化培养基： 4支
• 葡萄糖发酵培养基： 3支
• 乳糖发酵培养基： 3支
• 淀粉培养基：
1瓶/2组
2.接种用具
接种环（针），酒精灯，标签纸，试管架
3.实验菌种
枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，普通变形杆菌，
金黄色葡萄球菌
.
四、实验内容
（2）将接种过和作为对照的6支试管置于37℃恒温培养箱培养 24h。
.
..实ຫໍສະໝຸດ 结果糖发酵实验.五、实验结果
（1）大分子物质水解实验结果
将结果填入下表。“＋” 表示阳性，“－”表示阴性 注意：观察结果时，可打开皿盖，滴加碘液于平板上，轻轻旋转， 使碘液均匀铺满整个平板。如菌苔周围出现无色透明圈，则说明 淀粉已被水解，为阳性。透明圈的大小，说明该菌水解淀粉能力 的强弱，即产生胞外酶活力的高低。（以“+”、“—”表示有 无透明圈）
实 验八
大分子物质的水解实验 及糖发酵实验
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一、实验目的
1.证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力的 不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。
2.掌握进行微生物大分子水解实验的原理和方法 3.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作
用 4.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法
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二、实验原理
微生物代谢重要特征之一，就是代谢类型的多样性，因此使得 微生物在自然界的物质循环中起着重要的作用，同时也为人类开 发利用微生物资源提供更多的机会与途径。人们在微生物的分类 鉴定工作中，常利用其生理生化反应作为重要依据。
的背面分别记下菌名。 （3）将接完种的平板倒置于37℃恒温培养箱，培养24h。 2. 明胶液化试验 （1）取4支明胶培养基试管，用接种针分别以穿刺接种法接种枯草
/大肠/金葡,第4支不接种，作为对照。 （2）接种后置于20℃恒温培养箱，培养2-5d（或37℃培养，冰浴
后观察结果）。 3.糖类发酵试验
（1）取葡萄糖发酵培养基试管3支，分别接种大肠杆菌和变形杆菌， 第3支不接种，作为对照。另取乳糖发酵培养基试管3支，同样分 别接入大肠杆菌和变形杆菌，第3支不接种，作为对照。接种后， 轻缓摇动试管，使其均匀，防止倒置的小试管进入气泡。
菌名 枯草芽孢杆菌 大肠杆菌
淀粉水解试验
明胶液化试验
.
（2）糖发酵实验结果
将结果填入下表。“＋” 表示产酸或产气，“－” 表示不产酸或不产气。
糖类发酵
葡萄糖发酵 乳糖发酵
大肠杆菌
变形杆菌
对照
产酸 产气 产酸 产气 产酸 产气
.
微生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必须靠产 生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。胞外酶主 要为水解酶，通过加水裂解大的物质为较小的化合物，使其能被 运输至细胞内。淀粉遇碘液会产生蓝色，但细菌水解淀粉的区域， 用碘测定不再产生蓝色，表明细菌产生淀粉酶。明胶是由胶原蛋 白经水解产生的蛋白质，在25℃以下可维持凝胶状态，以固体形 式存在，有些微生物可产生一种称作明胶酶的胞外酶，水解这种 蛋白质，而使明胶液化。
试验名称 培养基名称 接种菌名称 接种方式 每组个数
淀粉水解 淀粉培养基 枯草/大肠
平板
3
明胶水解 明胶培养基 枯草/大肠/金 穿刺
4
葡
葡萄糖发酵 葡萄糖发酵培 大肠/变形
液体
3
养基
乳糖发酵 乳糖发酵培养 大肠/变形
液体
3
基
.
1. 淀粉水解试验 （1）将固体淀粉培养基溶化后冷却至50℃，无菌操作倒平板。 （2）将枯草/大肠分别在不同部分划线接种（划十字），并在平板
糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定 上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是 它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。不同的细菌含有发 酵不同糖(醇)的酶，因而发酵糖(醇)的能力各不相同，其产生的 代谢产物亦不相同，如有的产酸产气，有的产酸不产气。
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三、实验材料