实验十 大分子物质的水解试验
微生物实验
实验十细菌鉴定中的生理生化反应实验原理各种微生物在代谢类型上表现出很大的差异，如表现在对大分子糖类和蛋白质的分解能力以及分解代谢的最终产物的不同，反映出它们具有不同的酶系和不同的生理特性，这些特性可被用作为细菌鉴定和分类的内容。
（一）大分子物质水解实验1、淀粉水解试验2、油脂水解试验脂肪水解后产生脂肪酸可改变培养基的pH，培养基中的中性红指示剂在pH降低时从淡红色转变为深红色3、明胶水解试验明胶25℃以下维持凝胶状态，25℃以上则液化。
明胶被一种称为明胶酶的胞外酶所水解后，25℃甚至4 ℃保持液化状态4、石蕊牛奶实验石蕊+脱脂牛奶→ →呈浑浊蓝色牛奶中酪素水解成氨基酸和肽→ →培养基变透明乳糖发酵产乳酸→ →石蕊变粉红色，酸过量时还可引起牛奶凝固氨基酸分解产生碱性反应→ →石蕊变紫色石蕊被还原→ →白色5、尿素试验尿素酶分解尿素产生氨，培养基pH升高，培养基中指示剂酚红由黄色（pH6.8）转变为深粉红色（pH8.4）（二）糖发酵试验不同细菌分解糖类物质的能力有很大差别产酸产气、产酸不产气、不能利用产酸：溴甲酚紫指示剂（pH6.8紫色、pH5.2黄色）产气：倒置的杜氏小管用于收集气体（三）IMViC+硫化氢试验1、吲哚试验色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚和丙酮酸吲哚与对二甲基氨基苯甲醛接合后可形成玫瑰吲哚2、甲基红试验检验利用葡萄糖产生有机酸的能力甲基红指示剂：pH6.3橙黄色，pH4.2红色3、伏-普试验用来测定利用葡萄糖产生非酸性或中性末端产物的能力，如丙酮酸丙酮酸缩合、脱酸生成乙酰甲基甲醇乙酰甲基甲醇在碱性条件下被空气中的氧气氧化成二乙酰二乙酰与蛋白胨中精氨酸的胍基作用，生成红色化合物4、柠檬酸盐试验培养基中柠檬酸盐及磷酸铵被分解利用后，形成碱性化合物，使培养基的pH升高1%溴麝香草酚蓝指示剂：pH6.0以下黄色、pH6.5~7.0绿色、pH7.6以上蓝色5、硫化氢试验某些细菌分解含硫氨基酸产生硫化氢硫化氢与铅盐或铁盐反应形成黑色沉淀实验十二金黄色葡萄球菌检测实验原理金黄色葡萄球菌属于微球菌科葡萄球菌属，可产生肠毒素，人误食了含有毒素的食品，就会发生食品中毒，因此，由该菌引起的中毒为毒素型食物中毒。
实验八 大分子物质的水解实验及糖发酵实验
1．培养基（每组的量，由班长分发）
• 灭菌培养皿（淀粉水解）：3皿
• 明胶液化培养基： 4支
• 葡萄糖发酵培养基： 3支
• 乳糖发酵培养基： 3支
• 淀粉培养基：
1瓶/2组
2.接种用具
接种环（针），酒精灯，标签纸，试管架
3.实验菌种
枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，普通变形杆菌，
金黄色葡萄球菌
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四、实验内容
（2）将接种过和作为对照的6支试管置于37℃恒温培养箱培养 24h。
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..实ຫໍສະໝຸດ 结果糖发酵实验.五、实验结果
（1）大分子物质水解实验结果
将结果填入下表。“＋” 表示阳性，“－”表示阴性 注意：观察结果时，可打开皿盖，滴加碘液于平板上，轻轻旋转， 使碘液均匀铺满整个平板。如菌苔周围出现无色透明圈，则说明 淀粉已被水解，为阳性。透明圈的大小，说明该菌水解淀粉能力 的强弱，即产生胞外酶活力的高低。（以“+”、“—”表示有 无透明圈）
实 验八
大分子物质的水解实验 及糖发酵实验
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一、实验目的
1.证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力的 不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。
2.掌握进行微生物大分子水解实验的原理和方法 3.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作
用 4.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法
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二、实验原理
微生物代谢重要特征之一，就是代谢类型的多样性，因此使得 微生物在自然界的物质循环中起着重要的作用，同时也为人类开 发利用微生物资源提供更多的机会与途径。人们在微生物的分类 鉴定工作中，常利用其生理生化反应作为重要依据。
的背面分别记下菌名。 （3）将接完种的平板倒置于37℃恒温培养箱，培养24h。 2. 明胶液化试验 （1）取4支明胶培养基试管，用接种针分别以穿刺接种法接种枯草
微生物鉴定中常用的生理生化试验
一、实验目的1.证明不同微生物对各种有极大分子物质的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。
2.掌握微生物大分子物质水解实验的原理和方法。
3.了解糖发酵的原理和在肠细菌鉴定中重要作用。
4.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
5.了解IMViC的原理。
二、实验原理由于各种微生物具有不同的酶系统，所以他们能利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌，尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中，生理生化试验占有重要的地位。
具体的原理如下：1.淀粉水解试验：在淀粉固体培养基上接种两种细菌（枯草杆菌，大肠杆菌），培养两天以后，再往培养基中加碘液染色，若该细菌能分泌胞外淀粉酶，则能利用其周围的淀粉，淡然在染色后，其菌落周围不呈蓝色，而是无色透明圈。
2.糖发酵试验：不同的细菌分解糖的能力不同，有些细菌能利用糖发酵产酸和产气，有些则不能。
酸在加入溴甲酚指示剂后会使溶液呈黄色，且德汉氏小管中会收集到一部分气体。
若细菌不能使糖产酸产气，则最后溶液为指示剂的紫色，且德汉氏小管中无气体。
3.IMVC实验主要用于快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌。
（1）吲哚试验：在蛋白胨培养基中，若细菌能产生色氨酸酶，则可将蛋白胨中的色氨酸分解为丙酮酸和吲哚，吲哚与对二甲基苯甲醛反应生成玫瑰色的玫瑰吲哚。
本次不做该试验。
（2）甲基红试验（MR）：某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成丙酮酸，后者进而被分解产生甲酸，乙酸和乳酸等多种有机酸，是培养液PH值降至4.2以下，加入甲基红后溶液呈红色。
三、实验材料1.菌种大肠杆菌（Escherichia coli），金黄色葡萄球(Staphyloccocus aureus Rosenbach)，铜绿假单胞菌（P.Aeruginosa），枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis Cohn），产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)，普通变形杆菌（Proteus.vulgaris)。
实验十大分子物质的水解实验
实验目的
证明微生物对各种大分子具有分解能力， 且其分解能力与微生物和有机物的种类 不同而不同。 掌握微生物大分子水解实验的原理与方 法。
实验原理
微生物对大分子物质不能直接吸收，必须靠产生的胞 外酶（胞外酶主要为水解酶）将大分子物质分解后 才能吸收利用。这些过程均可通过观察细菌菌落周 围的物质变化来证实：淀粉遇碘会产兰色，但细菌 水解淀粉的区域，用碘测定不再产生兰色，表明细 菌产生了淀粉酶。明胶是由胶原蛋白经水解产生的 蛋白质，有些微生物可产生一种称作明胶酶的胞外 酶，水解蛋白质，使明胶液化。
实验报告
结果（＋或－）
菌种名 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌 淀粉水解 明胶水解
思考题 1）你怎样解释淀粉酶是胞外酶而非胞内酶？ 2）不利用碘液，你怎样证明淀粉水解的存在？ 3）接种后的明胶试管可以在35 ℃培养，在培养后你 必须做什么才能证明水解的存在？
实验内容
1、淀粉水解实验
淀粉
加碘液 （蓝色） 水解
单糖
（无色）
2、明胶水解实验
明胶
25℃以下 （固态） 水解
氨基酸
（液态）
实验菌种
枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，金黄色葡萄 球菌
淀粉水解实验步骤
倒平板 用记号笔在平板底部划成三部分 37 ℃培养24小时
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
将三菌种分别在不同的部分划线接种， 在平板的反面分别对应写上菌名 用碘液测定结果
菌苔周围出现无色透明圈，说明淀粉已被水解，为阳性。 透明圈的大小可初步判断该菌水解淀粉能力的强弱，即产 生胞外淀粉酶的高低
淀粉水解实验
明胶水解实验步骤
实验十 微生物鉴定中常用的生理生化试验
实验十微生物鉴定中常用的生理生化试验摘要本次实验包括大分子水解试验、糖发酵试验和IMViC试验（吲哚、甲基红试验）三类试验，根据要求本实验使用六种培养基分别对所需菌种组合进行了大约24h的培养，之后按照实验要求进行各个试验。
最后观察到了实验现象，了解了所用菌种鉴别的方法和原则。
关键词微生物鉴定；生理生化试验；大分子水解试验；糖发酵试验；IMViC试验前言类的微生物有着不同的代谢类型，例如对一些物质的分解能力及分解代谢的产物的不同反映出他们不同的生理特征，这些特征可以用来对不同种类微生物进行鉴定和分类。
因此可以对微生物的不同生化反应进行试验，以此证明微生物生理特征的多样性，证明微生物分类鉴别的依据。
生理生化试验相比其他鉴别方法而言相对简便、快捷、经济实用，在一般的实验室中都可以进行，因此在微生物种类的初步鉴别中被广泛使用。
一、实验目的1、大分子水解试验证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统，掌握进行微生物大分子物质水解试验的原理和方法。
2、糖发酵试验了解糖发酵的原理和在肠细菌鉴定中的重要作用，掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
3、IMViC试验了解IMViC的原理及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。
二、实验原理在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢。
代谢过程主要是酶促反应过程。
具有酶功能的蛋白质多数在细胞内，称为胞内酶（endoenzymes）.许多细菌产生胞外酶(exoenzymes)，这些酶从细胞中释放出来，以催化细胞外的化学反应。
各种微生物具有不同的酶系统，所以它们能利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌，尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中，生理生化试验占有重要的地位。
具体的原理如下：1、大分子水解试验：微生物对大分子如淀粉、蛋白质和油脂不能直接利用，必须依靠产生的胞外酶将大分子物质分解后才能被微生物吸收利用。
实验十、大分子水解实验
一,目的:掌握进行微生物大分子水解试验的原理 和方法 二,原理:微生物对某些大分子如淀粉,蛋白质, 脂肪等不能直接利用,必须靠产生的胞外酶将大 分子物质分解后才能吸收利用.如淀粉酶可将淀 粉水解成小分子的糊精,双糖及单糖;蛋白酶可 将蛋白质水解成氨基酸等.微生物在利用这些物 质时可能会产生酸性或碱性代谢物并使培养基pH 值升高或降低,应用指示剂与代谢物质的显色反 应可以初步判断微生物利用状态. 三,材料:大肠杆菌,枯草杆菌,变形杆菌,葡萄 球菌,糖发酵培养基,明胶液化培养基,淀粉水 解培养基,接种环(针),酒精灯
四,操作步骤 1.糖类发酵试验
用接种环以无菌操作方式挑取大肠杆菌,变形杆菌-→分别接种于葡萄 糖和乳糖培养基中,轻轻摇动试管使其均匀-→置37℃温箱中培养24-48小 时-→观察并记录结果.
2.明胶液化试验
用接种针以无菌操作方式挑取大肠杆菌,枯草芽孢杆菌和葡萄球菌-→ 以穿刺法分别接种于明胶培养基中-→置20℃温箱中培养2-5天-→观察并 记录结果.
3.淀粉水解试验
先在淀粉琼脂平板背面划十ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ线分区并标记数字-→用接种环以无菌操 作方式挑取大肠杆菌,枯草芽孢杆菌,葡萄球菌和变形杆菌-→分别在不同 标记区内划十字接种-→将平板倒置在37℃温箱中培养24小时-→打开平 板,加入少量卢哥氏碘液并使其均匀铺满平板-→观察并记录结果.
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实验八_大分子物质水解试验
实验八_大分子物质水解试验一、实验目的1. 了解大分子物质的水解2. 掌握大分子物质水解的实验原理和操作方法3. 比较不同大分子物质的水解速率二、实验原理大分子物质是由许多重复单元组成的生物高分子或合成高分子，如蛋白质、淀粉、纤维素、聚合物等。
由于其大分子结构，容易难以被生物体吸收直接利用，因此需要经过水解反应，使其分解为一个个低分子化合物，方便生物体吸收利用。
在本实验中，我们将研究3种大分子物质的水解反应，分别为淀粉、聚乳酸和聚酯。
淀粉的水解需要使用酶类，因为淀粉的分子结构中包含α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键，这些糖苷键需要在酶的作用下被分解。
聚乳酸和聚酯的水解则需要使用酸，因为它们的分子结构中包含酯键，酸可以在水的存在下水解酯键。
在水解过程中，大分子物质被分解为低分子量的化合物，如单糖、乳酸、酒精、苯甲酸等，这些化合物可以被生物体吸收利用。
三、实验步骤1. 淀粉水解试验步骤一：准备淀粉溶液将2克淀粉粉末加入100毫升蒸馏水中，搅拌至淀粉完全溶解，得到10mg/mL的淀粉溶液。
步骤二：加入淀粉酶将0.1毫升淀粉酶加入淀粉溶液中，搅拌均匀。
步骤三：加热反应将淀粉溶液加热至80℃，反应10分钟。
加入10毫升0.1mol/L NaOH，中和反应。
步骤五：检测还原糖取1毫升反应液，加入1毫升Benedict试液，加热10分钟，观察是否产生红色沉淀。
将2克聚乳酸粉末加入50毫升四氢呋喃中，搅拌至聚乳酸完全溶解。
四、实验结果加入Benedict试液后，反应液产生红色沉淀，说明淀粉水解后生成了还原糖。
聚乳酸水解试验：五、实验分析通过本实验，我们研究了3种大分子物质的水解反应。
淀粉是由多个葡萄糖单元组成的多糖，需要酶的作用才能进行水解，反应生成的还原糖可以被生物体吸收利用。
聚乳酸和聚酯含有酯键结构，在酸的作用下容易进行水解反应，生成的乳酸和苯甲酸也可以被生物体吸收利用。
本实验中，聚乳酸水解后未生成酒精的结果可能是因为聚乳酸的链长和结构不同，导致酯键的水解速率与其他酯键不同。
微生物实验 08.大分子物质的水解试验
2、掌握微生物大分子水解实验的原理和方法。
（二）实验原理
微生物对生物大分子（如：淀粉；蛋白质； 脂肪）不能直接吸收利用，只有那些能够 产生并分泌胞外酶的微生物才能利用大分 子有机物。
胞外酶主要为水解酶。
淀粉
淀粉酶 水解糊精（蓝红 ） Nhomakorabea双糖、单糖
（无色）
加碘（蓝色）
脂肪
脂肪酶 水解
甘油+脂肪酸
2、明胶水解试验 做标记------穿刺接种------培养（20℃ 2-5d） ------------观察液化情况
（五）注意事项
1 、淀粉水解试验中加碘液时碘液要铺 满整个平板； 2、倒平板时无菌操作
3、接种时防止菌种交叉污染。
（六）实验作业
分别将淀粉水解试验（“+”表示发生水解，“-”表示 不发生水解）和明胶水解试验（“+”表示发生水解，“-” 表示不发生水解）结果填入下表，并分析原因。 菌名 淀粉水解能力 明胶水解能力 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌
乳糖蛋白胨培养液 蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 乳糖 5g NaCl 5g 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml 蒸馏水 1000mlpH 7.2-7.4 注：最后加溴甲酚紫。 115℃灭菌20min
实验八 大分子物质的水解试 验
（一）实验目的
1 、证明不同微生物对各种大分子的水解能力不 同，从而说明不同微生物具有不同的酶系统。
(四）实验方法
1、淀粉水解试验
注意无菌操 作
（1）制固体淀粉培养基平板；冷却凝固。 （2）标记后将大肠杆菌、枯草芽孢杆菌接种。
大肠杆菌
枯草杆菌
（3）36℃恒温倒置培养1-2d；
（4）观察生长情况，将平板打开盖子，滴入少 量碘液于平皿中，轻轻旋转平板，使碘液 均匀铺满整个平板；
实验十一 大分子物质的水解实验
2．淀粉水解试验
(1)将淀粉培养基溶化后，冷至45℃左右， (1)将淀粉培养基溶化后，冷至45℃左右，以无菌操作 45℃左右 将淀粉培养基溶化后 制 成平板。 成平板。 (2)接种从土壤中分离的菌株 (2)接种从土壤中分离的菌株 (3)将上述已接种的平板倒置于37℃温室中培养24小时。 (3)将上述已接种的平板倒置于37℃温室中培养24小时。 将上述已接种的平板倒置于37℃温室中培养24小时 (4)将已培养24小时的平皿取出 打开皿盖， 将已培养24小时的平皿取出， (4)将已培养24小时的平皿取出，打开皿盖，加少量卢 戈 氏碘液于平板上，轻轻旋转平皿， 氏碘液于平板上，轻轻旋转平皿，使碘液均匀铺满 整 个平板。如菌苔周围出现无色透明圈， 个平板。如菌苔周围出现无色透明圈，说明淀粉已 被
一.实验目的及要求
1、了解不同微生物对各种有机大分子的水 解能力。 解能力。 了解不同微生物有不同的酶系统。 2、了解不同微生物有不同的酶系统。 掌握微生物大子水解试验的原理和方法。 3、掌握微生物大子水解试验的原理和方法。 掌握大分子试验在微生物鉴别中的作用。 4、掌握大分子试验在微生物鉴别中的作用。
三.实验器材
菌种： 菌种：土壤中分离的菌株 材料：油脂培养基，淀粉培养基，无菌平皿、 材料：油脂培养基，淀粉培养基，无菌平皿、 接种环、卢戈氏碘液（ 接种环、卢戈氏碘液（Lugol's iodine solution） solution）等。
四.实验步骤
1．油脂水解试验 (1)将溶化的油脂培养基冷至45℃左右时 将溶化的油脂培养基冷至45℃左右时， (1)将溶化的油脂培养基冷至45℃左右时，充分 振荡，使油脂均匀分布， 振荡，使油脂均匀分布，用无菌操作倒入平 皿中，待凝。 皿中，待凝。 (2)接种从土壤中分离的菌株 (2)接种从土壤中分离的菌株 (3)将接种的平板倒置于37℃温室中培养24h。 将接种的平板倒置于37℃温室中培养24h (3)将接种的平板倒置于37℃温室中培养24h。 (4)取出平板 观察平板底层长菌的地方， 取出平板， (4)取出平板，观察平板底层长菌的地方，如出 现红色斑点，说明脂肪被水解，为阳性反应。 现红色斑点，说明脂肪被水解，为阳性反应。
微生物生理生化实验
姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目微生物学实验题目微生物生理生化实验组别3【实验题目】微生物生理生化实验【实验目的】1.了解生理生化的意义。
2.掌握几种常用生理生化的实验方法。
【实验器材】1、菌种：枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，铜绿假单胞菌，变形杆菌，产气肠杆菌2、试剂：卢戈氏碘液、乙醚、吲哚试剂、甲基红试剂、蒸馏水等3、仪器和用具：酒精灯、接种针、培养皿、试管、试管架、烧杯、量筒、德汉氏小管等4、培养基淀粉培养基、油脂培养基（大分子物质水解实验）葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基（内附倒置的德汉氏小管）（糖发酵实验）蛋白胨水培养基（吲哚实验）葡萄糖蛋白胨水培养基（甲基红培养基）【实验原理】在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢，代谢过程主要是酶促反应过程。
具有酶功能的蛋白质多数在细胞内，称为胞内酶。
许多细菌产生胞外酶，这些酶从细胞中释放出来，以促进细胞外的化学反应。
各种微生物在代谢类型上表现出很大的差异，如表现在对大分子糖类和蛋白质的分解能力以及分解代谢的最终产物的不同，反映出他们具有不同的酶系和不同的生理特性，这些特性可被用作为细菌鉴定和分类的内容。
具体实验原理如下：一、大分子物质的水解实验原理姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目微生物学实验题目微生物生理生化实验组别31、淀粉水解由于微生物对淀粉这种大分子物质不能直接利用，所以必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。
胞外酶主要为水解酶,通过加水裂解大的物质为较小的化合物,使其能被运输至细胞内。
如淀粉酶将淀粉水解为小分子的糊精,双糖和单糖，能分泌胞外淀粉酶的微生物，则能利用其周围的淀粉。
已知淀粉遇到碘会显现蓝色，因此可通过在淀粉培养基上滴加碘液来判断微生物是否能产生淀粉酶分解淀粉，菌落周围不呈蓝色，出现无色透明圈，则该菌种能够水解淀粉。
2、油脂水解脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，而产生的脂肪酸可改变培养基的PH,因此在油脂培养基上接种细菌，培养一段时间后可通过观察菌苔的颜色判断菌种是否能够水解油脂，若出现红色斑点，则说明这种菌可产生分解油脂的酶。
大分子物质的水解实验报告
大分子物质的水解实验报告大分子物质的水解实验报告引言：大分子物质是由许多小分子通过化学键连接而成的复杂化合物。
在自然界和生活中，我们经常接触到各种大分子物质，如蛋白质、淀粉、纤维素等。
这些大分子物质在生物体内起着重要的作用，但它们的结构和性质往往难以直接观察和理解。
本实验旨在通过水解实验，研究大分子物质的结构和性质。
实验材料和方法：材料：淀粉、酵母、盐酸、碘液、滴管、试管、试管架、加热装置等。
方法：1. 将一小块淀粉加入试管中。
2. 加入适量的盐酸。
3. 用滴管加入碘液，观察试管中的颜色变化。
4. 另取一小块淀粉，加入试管中。
5. 加入适量的酵母。
6. 将试管加热至沸腾，观察试管中的气体产生情况。
结果与讨论：第一部分：淀粉的水解在实验中，我们首先将淀粉与盐酸反应。
盐酸是一种强酸，具有强氧化性。
当淀粉与盐酸反应时，淀粉分子中的化学键会被破坏，导致淀粉分子的结构发生改变。
同时，我们加入了碘液，碘液可以与淀粉形成暗蓝色的复合物。
实验结果显示，当盐酸与淀粉反应后，试管中的溶液由暗蓝色变为无色。
这说明淀粉的分子结构已经发生了改变，无法再与碘形成复合物。
第二部分：淀粉的酵解在第二部分实验中，我们将淀粉与酵母一起加热。
酵母是一种微生物，它具有酵素活性，可以加速化学反应的进行。
当淀粉与酵母一起加热时，酵母中的酵素会与淀粉分子发生作用，将其分解成较小的分子。
实验结果显示，加热后试管中产生了气体，并且溶液呈现出白色浑浊的状态。
这表明淀粉被酵母分解成了较小的分子，并产生了气体。
结论：通过本实验，我们观察到了大分子物质淀粉在不同条件下的水解反应。
在与盐酸反应时，淀粉的分子结构发生了改变，无法再与碘形成复合物。
而在与酵母一起加热时，淀粉被分解成了较小的分子，并产生了气体。
这说明大分子物质的结构和性质受到环境条件的影响，通过改变条件可以改变大分子物质的结构和性质。
实验的结果对于我们深入理解大分子物质的结构和性质具有重要意义。
实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验PPT教学课件
乳糖发酵
2020/12/10
12
PPT教学课件
谢谢观看
Thank You For Watching
13
2020/12/10
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图 糖类发酵试验
2020/12/10
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三、实验器材
1、菌种：枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌、大肠杆菌、金黄色
葡萄球菌
2、培养基： 淀粉培养基
2块培养血/每组(6人）
明胶半固体培养基 5支试管/每组(6人）
乳糖发酵培养液
3支试管/每组(6人）
葡萄糖发酵培养液 3支试管/每组(6人）
2、试剂：碘液
3、仪器或其他用具：培养箱、水浴锅、接种环、接种针、酒
精灯、无菌培养血等。
2020/12/10
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四、操作步骤
1、淀粉水解试验
溶化三角瓶内的淀粉培养基 → 趁热倒入二块无菌培养皿各内 约15ml → 冷凝后点植法接入大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄 色葡萄球菌 → 贴好标签 →平板倒置，370C培养24小时 → 滴 加碘液鉴别有无淀粉水解圈
实验八 大分子物质的水解和糖发酵试验
主 讲:
2020/12/10
1
一、目的与要求
• 证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力不同，
从而说明不同微生物有着不同的酶系。
• 掌握微生物大分子水解试验的原理和方法。
• 了解糖发酵的原理及在肠道细菌鉴定中的重要作用。
• 掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
• 学习微生物接菌技术。
4、葡萄糖发酵试验
取三支葡萄糖蛋白胨培养基 → 分别接入大肠杆菌、普通变形杆
菌，另一支不接菌为空白对照管→ 贴好标签 → 370C培养24小时
大分子物质的水解实验报告
大分子物质的水解实验报告实验报告实验名称：大分子物质的水解实验实验室名称及编号：化学实验室 76231实验时间：20XX年XX月XX日实验者：XXX实验目的：通过对大分子物质聚乙烯醇的水解实验，观察水解现象，探究大分子物质的化学性质和反应机理。
实验原理：聚乙烯醇是一种大分子物质，分子中含有羟基（OH）基团。
水解反应的反应机理是，在催化剂的作用下，大分子物质中的羟基和水反应，形成较为稳定的中间产物羟基化合物，接着再与催化剂中的另一种基团组成酸酐结构，从而完成大分子物质的水解反应。
实验步骤：1.取10克聚乙烯醇样品，测量其粉末形状的质量，并记录下来。
2.将10克聚乙烯醇样品加入到锥形瓶中。
3.加入50毫升稀酸（相当于浓度为0.2mol/L的硫酸）溶液，并加入少量碎石，作为催化剂。
4.装上纱布过滤器，将玻璃杯置于热水浴中，使反应处于恒温下。
5.反应5小时后，取出玻璃杯，冷却至室温，然后再用蒸馏水洗涤数次，并再次过滤，得到白色凝胶状产物。
6.记录下产物的重量、颜色、物态等性质，并进行表征分析。
实验结果与分析：本实验得到的大分子物质产物为白色凝胶状物质。
产物的重量为6.54克，比起原材料的减少量为3.46克。
产物的pH值为6左右。
通过进行傅里叶变换红外光谱分析，可以发现产物分子中含有酸酐结构，同时含有羟基结构。
这也证实了实验原理提到的反应机理。
实验结论：本实验可以成功地将聚乙烯醇进行水解反应，得到了白色凝胶状产物。
产物的含酸基团结构证实了该反应中酸催化剂的作用，而羟基结构证实了产物来自大分子物质的羟基。
通过实验可以深入探究大分子物质的化学性质，同时证实了水解反应的反应机理。
实验过程中存在的问题：在实验中，过滤器使用不当可能会导致产物的损失。
改进措施：在使用过滤器时，要注意将过滤网置于底部，这样能够更好地过滤产物且减小产物的损失。
以上就是本次大分子物质的水解实验报告，谢谢您的阅读。
实验八、九、十 大分子水解、抗生素、膜法大肠杆菌实验
将滤膜放入装有蒸馏水的烧杯中，加热煮沸15分钟，共煮沸三次，前 两次煮沸后换水洗涤2—3次再煮，以洗去滤膜上残留的溶剂。（分装到无 菌的培养皿中）。
2．滤膜过滤器装臵
用无菌手续将已灭菌的过滤膜装到无菌滤头上，注意不能有缝隙，其 中滤膜用灭菌镊子（浸在95%酒精内，用时通过火焰灭菌）装臵在滤头上。 其他可直接用手或夹钳操作，但不要碰到滤头，以免染菌。
四、实验器材
淀粉，纤维素，魔芋粉牛肉膏固体培养基， 接种环，酒精灯，地衣芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌，短小芽孢杆菌
五、实验方法及步骤
1、三种不同培养基分别倒平板各一块； 2、每块平板分为四个区，各点上地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、 短小芽孢杆菌和大肠杆菌 3、37℃倒臵培养，第二天观察结果，淀粉培养基上加上碘液， 铺平，观察透明圈，其它两块平板直接观察水解圈。
5．将平板倒臵于37℃下培养22—24小时。
计算公式：
1升水样中的大肠菌群数=滤膜上的大肠菌群菌落数×稀释倍数
六、实验报告
1．实验结果： 一升自来水和沙湖水样中的大肠菌群数是多少？
2．思考题：滤膜法检查大肠菌群有什么优点？
实验十 抗生素敏感性的测定
一、目的和要求
1、了解管碟法的原理。 2、掌握二剂量法测定抗生素效价单位的技术和计算方法。
六、作业
1、描述观察结果，并解释。
七、配制培养基（为下两次实验做准备）
1、 （3人）伊红美蓝培养基： 蛋白胨水琼脂培养基：100ml（蛋白胨1g+NaCl 0.5g+蒸馏水100ml+2g琼脂） 20%乳糖溶液 2ml；2% 伊红水溶液 2ml；0.5%美蓝水溶液 1ml。 培养基在115℃灭菌20min，等冷却到60-70℃ ，或在倒培养基之前加入 用过滤除菌的伊红和美蓝。
微生物理化性质实验
微生物理化性质实验生命学院生科四班张行润200900140177 摘要通过不同菌种的代谢方式和产物的不同，在一定的培养基下，对照实验，以简单方便的观察出不同鉴定菌种之间的差异。
比如铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌可以分解使用淀粉，而金黄色葡萄球菌和大肠杆菌却是不行。
乳糖发酵实验中，大肠杆菌产气产酸，但是普通变形杆菌却无法产酸产气。
通过与对照组的对照，我们便可以轻松区分，以达到鉴定区别菌种的目的。
关键词糖酵解（glycolysis）大分子水解吲哚试验甲基红试验前言用生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生化反应。
各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物或多或少地各有区别，可供鉴别细菌之用。
不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。
可用指示剂及发酵管检验。
某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。
淀粉水解后，遇碘不再变蓝。
这些都可以作为鉴定菌种的指标性特征。
一、实验材料1.1.菌种：枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）大肠杆菌（Escherichia coli）铜绿假单胞杆菌（P.Aeruginosa）金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus）普通变形杆菌（P. vulgaris）产气肠杆菌（Enterobacter amnigenus）等。
1.2.试剂及药品：卢戈式碘液、溴甲酚紫指示剂、甲基红指示剂、吲哚试剂、蛋白胨、牛肉膏、NaCl、1.6%花生油中性红水溶液、琼脂、蒸馏水、可溶性淀粉、1.6%溴甲酚紫乙醇溶液、葡萄糖、乳糖、蔗糖等。
1.3.器材：培养皿、锥形瓶、试管、烧杯、接种环、试管架、酒精灯等。
二、实验原理微生物对大分子物质如淀粉、蛋白质和脂肪不能直接被利用，必须依靠产生的胞外酶将大分子物质分解后，才能被微生物吸收利用。
胞外酶主要为水解酶，通过加水裂解大分子物质为较小化合物，使其能被运输到细胞内。
各种微生物生化试验方法原理
各种微生物生化试验方法原理通常利用生化试验的方法，检测细菌对各种物质的代谢作用及其代谢产物，称为细菌的生化反应，常用于细菌的鉴别。
1、糖类分解产物（1）糖发酵试验（carbohydrate fermentation test）不同种类的细菌对糖的分解利用能力不同，一般以能否分解某种糖，是否产酸产气等现象来鉴别。
例如大肠杆菌能分解葡萄糖和乳糖，产酸且产气；而伤寒杆菌只分解葡萄糖产酸不产气，且不分解乳糖。
这是因为大肠杆菌分解葡萄糖等产生甲酸，经甲酸解氢酶的作用生成H2和CO2。
而伤寒杆菌无此酶，故分解葡萄糖只产酸不产气。
（2）VP试验（V oges-Proskauer test）产气杆菌将分解葡萄糖产生的两分子丙酮酸脱羧，生成一分子乙酰甲基甲醇。
乙酰甲基甲醇在碱性溶液中被空气中氧气氧化，生成二乙酰，二乙酰可与培养液中含胍基的化合物（如蛋白胨中的精氨酸）反应，生成红色的化合物，此为VP试验阳性。
大肠杆菌分解葡萄糖不生成乙酰甲基甲醇，故VP试验阴性。
（3）甲基红试验（methyl red test）大肠杆菌和产气杆菌均属G-短杆菌，且都能分解葡萄糖、乳糖产酸产气，二者不易区别。
但两者所产生的酸类和总酸量不一：大肠杆菌可产生甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸等，而产气杆菌只产生甲酸、乙醇及乙酰甲基甲醇。
故大肠杆菌培养液PH在4.5以下，加入甲基红指示剂呈红色，为甲基红试验阳性；产气杆菌培养液PH在5.4以上，加入甲基红后呈桔黄色，为甲基红试验阴性。
（4）枸橼酸盐利用试验(citrate utilization test）产气杆菌在以枸橼酸盐为唯一碳源的培养基上生长，分解枸橼酸盐产生CO2，并转变为碳酸盐，使培养基由中性变为碱性，含溴麝香草酚蓝（BTB）指示剂的培养基由淡绿色变为深兰色，此为枸橼酸盐利用试验阳性。
大肠杆菌不能利用枸橼酸盐，故在此培养基上不能生长，培养基仍为绿色。
2、蛋白质及氨基酸的分解产物（1）硫化氢试验（hydrogen sulfide test）有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸（如胱氨酸、甲硫氨酸等）产生H2S，如遇醋酸铅或硫酸亚铁，能生成黑色的硫化物，为硫化氢试验阳性。