耐甲氧西林的葡萄球菌(MRS)检测

耐甲氧西林的葡萄球菌（MRS）检测

1、苯唑西林琼脂筛选试验

培养基：MH琼脂+4﹪ΝαCL和苯唑西林（6ug/ml）倾注成平板。方法：对琼脂可进行“点”接种，或者用棉拭子蘸取相当于0.5麦氏单位的菌悬液进行“划线”接种。

35℃孵育24小时，为最好地从凝固酶阴性葡萄球菌中检测耐甲氧西林菌株，需要奖平板35℃孵育48小时。

结果判断：任何生长即为MRS

质控菌株：金黄色葡萄球菌ATCC29213——敏感株

2、纸片扩散法（K-B法）

苯唑西林和头孢西丁检测mecA基因介导的葡萄球菌耐药性解释标准

菌种头孢西丁纸片法（mm）苯唑西林纸片法（mm）

S I R S I R

金黄色葡萄球菌和路邓葡萄球菌≥22 －≤21 ≥13 11﹣12 ≤10

凝固酶阴性葡萄球菌≥25 －≤24

注：1、用透射光观察苯唑西林抑菌圈内如有任何可见的生长，都表示苯唑

西林耐药，而头孢西丁用反射光观察抑菌圈内如有任何可见的生长，都表示头孢西丁耐药。

2、根据此解释标准耐药者既为耐甲氧西林的葡萄球菌

药敏实验纸片扩散法的操作流程

于纯培养平板上挑取相同的菌落4-5个放入2ml无菌生理盐水中稀释呈0.5麦氏单位。

用无菌棉签蘸取菌液在试管壁上挤压几次，压去多余的菌液，涂布整个MH平板表面，反复数次，每次旋转平板60度，使整个平板涂布均匀。

涂布后的平板于室温中干燥3-5分钟，用无菌镊子取药敏纸片贴于平板表面，并用镊尖轻压一下纸片，使其贴平。每张纸片的间距不小于24mm，纸片的中心距平板的边缘不小于15mm，90mm的平板上宜贴6张药敏纸片。

将贴好纸片的平板置35o孵育18-24小时后取出判断结果。

判断结果：根据（CLSI规则）抑菌环的大小，判断为敏感

（S）、耐药（R）、或中度敏感（I）。

不应报告为敏感抗生素和微生物组合

依据CLSI规则第十八版信息

下列抗生素/微生物组合在体外可表现活性，但在临床上无效，

不应报告敏感