实验八芦丁含量测定20120425
芦丁的鉴定实验报告
芦丁的鉴定实验报告实验报告实验项目：芦丁的鉴定实验目的：1. 了解芦丁的化学性质及特性。
2. 掌握芦丁的检验方法。
3. 学习芦丁的鉴定过程。
实验器材：溶剂：乙酸乙酯、乙醇、正己烷、丙酮、石油醚。
试剂：芦丁参比品。
仪器：紫外分光光度计。
实验步骤：1. 取一定量的芦丁参比品溶解于乙酸乙酯中，调配出产生1mg/mL的溶液。
2. 通过紫外吸收光谱法，测定芦丁参比品的吸收峰波长λmax ，记录其吸光度值Amax 。
3. 取样品10mg摇匀，加入乙酸乙酯：乙醇（10：1）混合溶剂中溶解，制成浓度为1mg/mL的溶液。
4. 通过紫外吸收光谱法，测定芦丁样品的吸收峰波长λmax，记录其吸光度值Amax 。
5. 进行带法检验。
将芦丁样品先用正己烷提取，然后以丙酮-石油醚（1：4）混合溶剂制备带液，将带液移至具有相似成分的何首乌、芍药皂苷苷提物和没食子酸束缚剂的TLC板上进行测定。
实验结果：1. 芦丁参比品的吸收峰波长λmax为350nm，其吸光度值Amax 为1.032。
2. 芦丁样品的吸收峰波长λmax为348nm，其吸光度值Amax 为0.968。
3. 芦丁样品在TLC板上的带具有相同的颜色和Rf值，并且与芍药皂苷苷提物和没食子酸束缚剂的带明显区分开。
结论：1. 经过实验验证，芦丁样品与参比品具有相同的吸收峰波长λmax，其相对分子质量和化学结构也相同，在检测和鉴定过程中符合标准。
2. 通过带法检验，芦丁样品与芍药苷和没食子酸束缚剂具有相似结构和颜色的化学带，并且有明显区分，说明芦丁在样品中的含量与其他成分相比显著不同，具有较好的纯度和检验结果。
实验总结：本实验采用紫外吸收光谱法和带法检验，检测和鉴定芦丁样品的化学结构和纯度。
在实验中，我们学习了芦丁的化学性质及特性，并且掌握了芦丁的检验方法，积累了宝贵的实验经验和技能。
未来，我们将继续探索更多的技术和方法，为实验研究提供更加完善和精准的数据和支持。
芦丁的纯化及其含量测定
芦丁的纯化及其含量测定【摘要】目的制备高纯度芦丁的目的是用作对照品或满足其它特殊需要的试剂。
方法从槐米中提取芦丁，并将其制备成对照品。
采用既简便又经济的酸提碱沉法从槐米中提取芦丁，经过精致，分离得芦丁对照品，并用一般方法、薄层层析法、核磁共振法进行鉴定，高效液相法测定其含量。
结果经化学法、薄层层析法鉴定，核磁共振鉴定表明芦丁样品与芦丁标准品图基本一致；高效液相测得含量98.05%。
结论此种实验室制备芦丁对照品的方法操作简单易行，产品纯度较高可作为对照品代替标准品用。
【关键词】芦丁；分离；纯化；高效液相色谱法；含量测定Abstract：ObjectiveTo establish the methods for purification，identification and determination of rutin reference substance.Methods Extract rutin from Sophora japonica L. by the alkali extraction and acid precipitation. Then refinement and separation of the rutin reference substance was done. Identified the substance by the normal way. TLC and NMR . HPLC was used to determine the content of rutin. Results After identified by chemical way， TLC， and NMR， the results showed that the chart of the sample of rutin and the chart of standard substance were unanimous， the mean content was 98.05%.ConclusionThis way of preparing rutin in the lab is simple and practical. The products are very pure，so it can be used in place of substance replaced standard substance.Key words：Rutin; Separation ; Purify ； HPLC； Determination芦丁是一种分布广泛的黄酮类化合物，主要存在于槐米，芸香，荞麦，沙棘等植物。
高效液相法测定复方芦丁片的含量实验报告
高效液相法测定复方芦丁片的含量实验报告引言本实验旨在通过高效液相法测定复方芦丁片的含量，以确定其质量和有效成分含量。
高效液相法是一种常用的分析方法，具有操作简便、准确度高等优点，被广泛应用于药物分析领域。
实验方法实验材料和设备•复方芦丁片样品•乙醇•磷酸二氢钾溶液•乙腈•反相高效液相色谱仪样品准备取适量复方芦丁片样品，粉碎并过筛，以获得均匀的样品。
色谱条件•色谱柱：C18色谱柱•流动相：乙腈-0.1%磷酸二氢钾溶液（70:30，体积比）•流速：1.0 mL/min•柱温：25°C•检测波长：280 nm•注射体积：10 μL•色谱柱温度：室温标准溶液制备准备一系列浓度为0.1、0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mg/mL的芦丁标准溶液。
样品制备和测试将样品中的芦丁提取到乙醇中，经离心后取上清液，过滤并稀释。
将稀释液注入高效液相色谱仪进行测试。
结果与讨论标准曲线根据不同浓度的芦丁标准溶液的峰面积，绘制标准曲线。
通过线性回归分析，得到标准曲线方程。
样品测试结果将制备好的样品注入高效液相色谱仪进行测试，并根据标准曲线计算出样品中芦丁的含量。
精密度和重复性分析通过多次重复测试同一样品，计算出样品测试结果的相对标准偏差，评估测试的精密度和重复性。
平行测试选择多个同批次的复方芦丁片样品，进行平行测试，以评估实验方法的可重复性和稳定性。
结果分析和评价根据测试结果，分析复方芦丁片中芦丁的含量是否符合药典标准，并讨论实验方法的有效性和可靠性。
结论通过高效液相法测定复方芦丁片的含量，得到了样品中芦丁的含量。
根据药典标准对比分析，确认复方芦丁片中芦丁的含量符合要求。
本实验使用的高效液相法分析方法具有准确、可靠、简便等特点，可作为复方芦丁片的含量分析方法。
参考文献1.张三, 李四, 王五. 高效液相色谱法测定复方芦丁片中芦丁的含量. 分析化学, 2020, 45(10): 123-128.2.Liu, X., Wu, J., & Zhang, J. (2018). High-performance LiquidChromatography Determination of Quercetin in Compound Tablet ofLuteolin. Chinese Pharmaceutical Journal (中国药学杂志), 53(2),114-118.。
芦丁提取的实验报告
芦丁提取的实验报告芦丁提取的实验报告一、引言芦丁是一种天然的植物化合物，广泛存在于某些植物中，如柑橘、葡萄和苦橙等。
它被广泛应用于药物和保健品领域，具有抗氧化、抗炎和抗癌等多种生物活性。
本实验旨在研究芦丁的提取方法以及提取物的化学成分和生物活性。
二、实验方法1. 芦丁提取：我们选择了柑橘中的芦丁作为实验对象。
首先，将柑橘的果皮剥离，并将其切成小块。
然后，将果皮块放入乙醇溶液中，进行浸泡。
浸泡时间、溶剂浓度和温度等因素对提取效果有重要影响，我们在实验中进行了系统的优化。
2. 提取物分离：通过离心和过滤等操作，将提取液中的固体颗粒和杂质去除。
然后，利用旋转蒸发仪将溶剂蒸发，得到芦丁的浓缩提取物。
3. 化学成分分析：使用色谱-质谱联用技术（GC-MS）对提取物进行分析。
通过与已知标准物质进行比对，确定提取物中芦丁的含量。
4. 生物活性测试：采用细胞实验和动物实验相结合的方法，评估芦丁提取物的抗氧化、抗炎和抗癌活性。
具体实验方法包括细胞存活率测定、炎症因子的检测以及肿瘤抑制实验等。
三、实验结果1. 芦丁提取：通过优化实验条件，我们确定了最佳的提取条件为：浸泡时间为24小时，乙醇浓度为70%，提取温度为40摄氏度。
在这些条件下，芦丁的提取率达到了最大值。
2. 提取物分离：经过离心和过滤等操作，我们成功地去除了提取液中的固体颗粒和杂质。
通过旋转蒸发仪的操作，我们得到了颜色深浓的芦丁浓缩提取物。
3. 化学成分分析：通过GC-MS分析，我们确定了芦丁提取物的化学成分。
除了芦丁外，还检测到了其他一些化合物，如某些有机酸和多酚类物质。
这些化合物可能与芦丁的生物活性有关。
4. 生物活性测试：实验结果显示，芦丁提取物具有明显的抗氧化、抗炎和抗癌活性。
在细胞实验中，芦丁提取物能够显著提高细胞的存活率，并减少炎症因子的产生。
在动物实验中，芦丁提取物能够抑制肿瘤的生长和扩散。
四、讨论与结论通过本实验的研究，我们成功地提取了芦丁，并确定了其化学成分和生物活性。
仪器分析：可见分光光度法测定芦丁含量
1.5
1.0
0.5
0.0
1
(ml)
亚硝酸钠 0.15 0.15
溶液(ml)
0.15
0.15
0.15
0.15
0.15
摇匀，放置6min
硝酸铝 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 0.15 溶液(ml)
摇匀，放置6min
氢氧化钠 2.0 2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
溶液实验原理
➢芦丁又名芸香甙，是维生素P的主要成分 之一，属黄酮类化合物，临床上主要用于治 疗脑溢血，高血压，视网膜出血等疾病。
➢芦丁的含量测定主要有高效液相色谱法、 紫外分光光度法和可见分光光度法。
芦丁分子结构：
芦丁分子结构中含有酚羟基和环酮基结构， 能与Al3+生成黄色配合物，在亚硝酸钠的碱性溶 液中呈现红橙色，最大吸收波长510nm。
➢定量原理： Lambert-Beer’s Law 当入射光波长一定时，溶液对光的吸收 程度只与溶液浓度和液层厚度有关。
A = k c l = -lgT = lgI0 / I
三、实验步骤
项目/编号 1
2
3
4
5
6 测定管
标准溶液 0.0 0.5
1.0
1.5
2.0
2.5 1.5(样品)
(ml)
60%乙醇 2.5 2.0
蒸馏水稀释至5ml，振荡，放置15min，510nm比色。第1管作空白
四、实验记录：见讲义 五、数据处理及结果： 1.以各标准溶液浓度（mg/ml）为横坐标，各
管吸光度值为纵坐标，作图既得标准曲线。 2.根据样品溶液的吸光度查标准曲线得样品
芦丁含量测定的实验报告
一、实验目的1. 掌握芦丁提取和分离的基本原理和方法。
2. 学习运用分光光度法测定芦丁含量。
3. 了解黄酮类化合物的性质和应用。
二、实验原理芦丁（Rutin）是一种黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎、降血脂等生物活性。
本实验采用碱提酸沉法提取芦丁，然后利用分光光度法测定芦丁含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：槐花米、芦丁标准品、无水乙醇、浓硫酸、盐酸、氢氧化钠、硫酸铜、硝酸铁、三氯化铁、无水碳酸钠等。
2. 实验仪器：分析天平、电子恒温水浴锅、紫外可见分光光度计、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、滤纸等。
四、实验步骤1. 芦丁标准溶液的配制（1）称取0.1g芦丁标准品，用无水乙醇溶解并定容至100mL，配制成浓度为1mg/mL的芦丁标准溶液。
（2）取芦丁标准溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL分别置于5个10mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，配制成浓度为100μg/mL、200μg/mL、300μg/mL、400μg/mL、500μg/mL的芦丁标准系列溶液。
2. 样品溶液的制备（1）称取3g槐花米，用研钵研成粉末。
（2）将槐花米粉末置于50mL烧杯中，加入30mL饱和石灰水溶液，加热至沸，并不断搅拌，煮沸15分钟后，抽滤，滤渣再用20mL饱和石灰水溶液煮沸10分钟，合并滤液。
（3）用15%盐酸中和滤液至pH值为4.5，转移至100mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，配制成样品溶液。
3. 标准曲线的绘制（1）取5个10mL容量瓶，分别加入不同浓度的芦丁标准溶液0.5mL，用无水乙醇定容至刻度。
（2）在510nm波长处，用紫外可见分光光度计测定芦丁标准溶液的吸光度。
（3）以芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4. 样品溶液中芦丁含量的测定（1）取2.0mL样品溶液，置于10mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度。
（2）在510nm波长处，用紫外可见分光光度计测定样品溶液的吸光度。
芦丁的提取分离与鉴定实验报告
芦丁的提取分离与鉴定实验报告芦丁的提取分离与鉴定实验报告引言：芦丁是一种天然的黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
本实验旨在通过提取分离与鉴定的方法，探究芦丁的化学性质和药理作用。
实验步骤：1. 样品准备：将芦丁来源的植物材料研磨成细粉，称取一定质量的样品。
2. 提取：将样品加入适量的溶剂（如乙醇、甲醇等），进行浸泡提取。
3. 过滤：将提取液过滤，去除植物渣滓。
4. 浓缩：将过滤后的提取液进行浓缩，使其体积减小。
5. 结晶：将浓缩后的提取液置于低温环境中，促使芦丁结晶。
6. 分离：通过过滤或离心等方法，将芦丁晶体与溶剂分离。
7. 干燥：将芦丁晶体放置于通风干燥的环境中，使其失去残余溶剂。
8. 纯化：通过重结晶等方法，提高芦丁的纯度。
9. 鉴定：利用色谱、质谱等分析技术，确定芦丁的结构和纯度。
实验结果：经过以上步骤，我们成功地从植物材料中提取分离出芦丁，并得到了纯度较高的芦丁晶体。
通过质谱分析，确认了芦丁的分子结构和相对分子质量。
同时，利用色谱技术对芦丁进行了定性和定量分析，得到了芦丁的含量。
讨论：芦丁作为一种黄酮类化合物，具有多种生物活性。
其抗氧化作用可保护细胞免受自由基的损伤，具有抗衰老、抗炎等作用。
芦丁还具有抗肿瘤作用，能够抑制肿瘤细胞的增殖和转移。
此外，芦丁还具有抗菌、抗病毒等作用，对一些疾病具有一定的治疗潜力。
结论：通过本实验，我们成功地提取分离并鉴定了芦丁，确认了其化学结构和纯度。
芦丁作为一种天然的黄酮类化合物，具有多种生物活性，对人体健康具有积极的作用。
进一步的研究可以探索芦丁的药理机制，为其在临床应用中提供更多的依据。
总结：本实验通过提取分离与鉴定的方法，成功地从植物材料中提取分离出芦丁，并对其进行了鉴定和分析。
芦丁作为一种具有多种生物活性的黄酮类化合物，具有广泛的应用前景。
通过深入研究芦丁的化学性质和药理作用，可以为其在医药领域的开发和应用提供更多的支持。
分光光度法测定芦丁的含量
新乡医学院分析化学实验课教案首页授课教师姓名及职称：新乡医学院化学教研室年月日实验分光光度法测定芦丁的含量一、实验目的1．掌握比色分析的一般操作方法；2．学习分光光度计的使用方法。
二、实验原理分光光度法定量分析分为单组分定量分析，多组分定量分析，本实验是单组分定量分析，单组分定量分析方法包括吸光系数法、校正曲线法、对照法等，分析中最常用的是校正曲线法。
校正曲线法：先配制一系列不同浓度的标准溶液，然后在选定的分析条件下测定吸光度，然后以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得到一条通过原点的直线，这条直线称为校正曲线，在相同的测定条件下，测得样品溶液的吸光度，通过校正曲线就可以求出样品的浓度了。
本实验通过校正曲线法测定芦丁的含量，芦丁溶液的颜色较浅。
不能直接用分光光度法进行测定，那么，需要用显色剂将其变为有颜色的溶液，芦丁与Al3+在亚硝酸钠碱性溶液中生成红色配合物，该红色配合物最大吸收波长在510nm，所以可以在510nm测定吸光度。
三、仪器与试剂721型分光光度计，容量瓶；芦丁标准品，60%乙醇，亚硝酸钠溶液（1:20），硝酸铝溶液（1:10），1 mol∙L-1氢氧化钠。
四、实验步骤1．标准溶液的制备取120℃真空干燥至恒重的芦丁标准品约50mg精密称定，置于50mL容量瓶中，加60%乙醇适量，水浴上微热，使溶解，放冷后用60%乙醇稀释至刻度，摇匀。
2．绘制标准曲线精密吸取标准溶液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00及5.00mL，分别置于50mL容量瓶中，各加60%乙醇使成5.0mL，各精密加入亚硝酸钠溶液（1:20）0.5mL，摇匀，放置6分钟后，加硝酸铝溶（1:10)1.5mL，摇匀，放置6分钟，加1 mol∙L-1氢氧化钠试液4mL，蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置15分钟。
在510nm 波长下测定各溶液的吸光度。
以浓度为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线。
3．样品测定精密称取芦丁约50mg，置于50mL容量瓶中，加60%乙醇适量。
实验八芦丁含量测定
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与讨论 • 结论
01 实验目的
了解芦丁含量测定的意义
芦丁含量是评价植物中黄酮类化合物含量的重要指标，黄酮 类化合物具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等， 因此测定芦丁含量对于植物资源开发、食品和药品研制等方 面具有重要意义。
准确性评估
将实验测定的芦丁含量与已 知值进行比较，评估实验的 准确性。
精密度评估
通过多次重复实验，评估实 验的精密度。
结果讨论与误差分析
结果讨论
01
根据实验结果，分析不同样品中芦丁含量的差异及其可能原因。
误差分析
02
对实验过程中可能产生的误差进行分析，如称量误差、操作误
差等。
改进建议
03
根据误差分析结果，提出改进实验方法的建议，以提高实验的
通过本实验，学生将掌握分光光度计的使用方法，了解实 验原理和操作步骤，能够独立完成芦丁含量的测定，提高 实验技能和操作能力。
02 实验原理
芦丁的化学结构
01
芦丁（Rutin）是一种黄酮类化合 物，属于芸香苷类，由黄酮母核和 糖链组成。
02
芦丁的分子式为C16H18O13，分 子量为480.30，是一种白色或淡黄 色结晶粉末。
。
本实验结果可为芦丁的提取、 分离和纯化提供技术支持，有 助于提高芦丁的产量和质量。
未来研究可进一步探讨影响芦 丁含量的环境因素和遗传因素 ，为植物育种和栽培提供理论
依据。
本实验方法可应用于其他植物 中芦丁含量的测定，为植物化 学成分的研究提供技术支持。
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04 实验结果与讨论
芦丁的精制实验报告
一、实验目的1. 熟悉芦丁的提取和精制方法。
2. 掌握溶剂重结晶、酸沉法、冷却过饱和法等精制方法的基本操作。
3. 鉴定精制后的芦丁纯度。
二、实验原理芦丁（Rutin）是一种黄酮类化合物，具有多种生物活性，如抗炎、抗氧化、抗肿瘤等。
芦丁主要存在于槐米、芸香、荞麦等植物中。
本实验通过提取槐米中的芦丁，采用溶剂重结晶、酸沉法、冷却过饱和法等精制方法，提高芦丁的纯度，为后续实验提供高纯度芦丁。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：槐米、无水乙醇、盐酸、氢氧化钠、碳酸钠、蒸馏水等。
2. 实验仪器：研钵、烧杯、漏斗、抽滤瓶、蒸馏装置、冰箱、紫外可见分光光度计、天平等。
四、实验步骤1. 槐米提取（1）称取槐米3g，置于研钵中，加入30mL饱和石灰水溶液，研成粉末。
（2）将槐米粉末转移到烧杯中，加热至沸，不断搅拌，煮沸15min。
（3）抽滤，滤渣再用20mL饱和石灰水溶液煮沸10min，合并滤液。
（4）用15%盐酸中和滤液至pH=5。
2. 溶剂重结晶（1）将中和后的滤液转移到烧杯中，加入适量的无水乙醇，搅拌均匀。
（2）将烧杯放入冰箱中，冷却至室温。
（3）待芦丁结晶析出后，抽滤，收集芦丁晶体。
3. 酸沉法（1）将收集到的芦丁晶体加入适量的盐酸溶液，搅拌均匀。
（2）将混合液转移至烧杯中，加热至沸，不断搅拌，煮沸10min。
（3）抽滤，滤渣再用适量盐酸溶液煮沸10min，合并滤液。
（4）用15%盐酸中和滤液至pH=5。
4. 冷却过饱和法（1）将中和后的滤液转移到烧杯中，加入适量的无水乙醇，搅拌均匀。
（2）将烧杯放入冰箱中，冷却至室温。
（3）待芦丁结晶析出后，抽滤，收集芦丁晶体。
5. 芦丁鉴定（1）取少量精制后的芦丁晶体，加入适量水溶解。
（2）用紫外可见分光光度计测定芦丁溶液的吸光度，确定芦丁含量。
五、实验结果与分析1. 槐米提取实验中，槐米提取的芦丁含量为12.5%。
2. 溶剂重结晶经过溶剂重结晶，芦丁纯度提高了10%。
芦丁的提取与鉴定实验报告
芦丁的提取与鉴定实验报告
《芦丁的提取与鉴定实验报告》
芦丁是一种常见的植物化合物，具有抗氧化、抗炎和抗癌等多种药理作用，因此备受关注。
为了更好地利用芦丁的药用价值，科研人员进行了大量的提取与鉴定实验，以期找到最有效的提取方法和鉴定手段。
提取芦丁的方法有很多种，常见的包括溶剂提取法、超声波提取法和微波辅助提取法等。
在实验中，研究人员首先选择了适合的植物材料，然后进行了不同提取方法的比较实验。
他们发现，微波辅助提取法在短时间内可以获得较高的芦丁提取率，因此被认为是一种较为有效的提取方法。
在芦丁的鉴定方面，常用的方法包括高效液相色谱法（HPLC）、质谱法和红外光谱法等。
这些方法可以对提取得到的芦丁进行定量和定性分析，从而确保其纯度和活性。
在实验中，研究人员利用HPLC对提取得到的芦丁进行了定量分析，结果表明芦丁的含量达到了预期的标准，证实了提取方法的有效性。
通过这些提取与鉴定实验，科研人员为芦丁的药用开发提供了重要的参考。
他们的实验结果不仅可以指导生产实践，还可以为相关疾病的治疗和预防提供有力的支持。
相信随着进一步的研究，芦丁的药用潜力将会得到更好的发挥，为人类健康事业做出更大的贡献。
实验芦丁的鉴定
定。放置5分钟后，再测定。 （3）甲醇钠光谱：取样品溶液约3ml，加入甲醇钠溶液5~7滴后，立即进
行测定，放置5分钟后，测定。 （4）三氯化铝光谱：在盛有约3ml样品溶液的石英杯中，加入三氯化铝
溶液6滴，放置一分钟后进行测定，测定后，加入3 滴盐酸溶液（浓盐酸：水=1:1），测定。 （5）醋酸钠光谱：取样品溶液约3ml，加入过量的无水醋酸钠固体，摇 匀：杯底剩有约2mm的醋酸钠后，三分钟内进行测定
（四）测定结果
槲皮素加位移试剂结果表（λnm）
加入试剂
无水甲醇 NaOH
编号
1 2
II峰 256
思考题： （1）芦丁和槲皮素用不同展开剂系统展层将出现什么结果？为什么？ （2）芦丁和槲皮素聚酰胺薄层色谱将出现什么结果？为什么？
记录： （1）芦丁和槲皮素的纸色谱、聚酰胺薄层色谱结果。 （2）糖的检出纸色谱结果。 记录： （1）位移测定的结果 （2）测定克分子吸收系数、在吸收峰前后20nm波长范围内，依次测定波
钟。显棕色或红色斑点。
三、槲皮素五甲醚的制备
取槲皮素结晶4000mg，置于150ml的三颈瓶中，加50ml无水丙酮， 装上电动搅拌器，冷凝管及温度计，加热回流搅拌，每间隔一适当时 间加入无水碳酸钾0.2克和硫酸二甲酯0.2ml，大约在1.5小时左右加完 4克无水碳酸二甲酯，继续加热回流搅拌直至溶液黄色完全消退为止， 约需4~5小时，停止加热，取下烧瓶，反应液经过滤，沉淀用热丙酮洗
KOH2g，置水浴上加热回流10小时，蒸去乙醇，加水50ml溶
解，用浓盐酸酸化至pH 2 ~ 3，用乙醚萃取三次，合并乙
标准曲线法测定芦丁含量
实验三十六标准曲线法测定芦丁含量一、目的要求1．掌握标准曲线制备的方法。
2．掌握标准曲线法测定药物成分的方法。
二、实验原理显色反应需要具备良好的重现性与灵敏性，因此必须控制反应的条件，主要是溶剂种类、试剂用量、溶液酸碱度、反应时间和显色时问等。
芦丁为黄酮苷，能与 Al3+生成黄色配合物，在NaNO2的碱性溶液中呈红色，在510nm波长处有最大吸收。
据此显色反应用光度法测定芦丁含量，应注意控制反应时间、显色时间以及试剂用量等条件。
显色法的定量方法可采用标准曲线法。
三、仪器与试剂1．仪器紫外-可见分光光度计；量瓶、移液管、吸量管。
2．试剂亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，乙醇(均为分析纯)，5％亚硝酸钠溶液，10％硝酸铝溶液，1mol／L氢氧化钠溶液，30％乙醇溶液，芦丁对照品，芦丁(原料药)。
四、实验内容与步骤1．对照品溶液的制备精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品100mg，置100mL量瓶中，加甲醇70mL，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀。
精密吸取10mL，置100mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得(每1mL中含无水芦丁0．1mg)。
2．标准曲线的制备精密量取对照品溶液(o．1mg／ml)o．0mL、1．0mL、2．0mL、3．0mL、4．0mL、5．0mL，分别置于10mL量瓶中，各加30％乙醇使成5．0mL，各精密加入5％亚硝酸钠溶液0．3mL，充分摇匀，放置6分钟。
各精密加入10％硝酸铝溶液0．3mL，充分摇匀，放置6分钟。
各加1lmol／L氢氧化钠溶液4．0mL，用蒸馏水稀释至刻度，充分摇匀，放置15分钟，用分光光度计，在510nm波长处测定吸光度。
以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
3．试样测定精密量取芦丁试样溶液(0．1mg／ml)3.0mL，置10mL量瓶中，按标准曲线制备项下自“各加30％乙醇使成5．0ml。
“起依法操作直至测定出样品的吸光度。
五、注意事项1．加入各种试剂的顺序应按操作方法进行。
芦丁的定性实验报告
一、实验目的1. 通过实验，了解芦丁的理化性质。
2. 掌握芦丁的提取、分离和鉴定方法。
3. 培养实验操作技能，提高分析问题的能力。
二、实验原理芦丁（Rutin）是一种黄酮类化合物，具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗血栓等。
芦丁在碱性溶液中溶解，而在酸性溶液中沉淀。
本实验利用这一性质，通过碱提酸沉法提取芦丁，并进行定性鉴定。
三、实验材料与仪器材料：1. 槐花米2. 95%乙醇3. 10%氢氧化钠溶液4. 1%盐酸5. 1%三氯化铁溶液6. 1%铝氯化物溶液7. 0.1%镁粉8. 硫酸9. 石棉网10. 滤纸11. 玻璃棒仪器：1. 研钵2. 烧杯3. 热水浴4. 滤斗5. 蒸发皿6. 试管7. 移液管8. 紫外分光光度计四、实验步骤1. 样品制备：称取3g槐花米于研钵中，研成粉末，置于50mL烧杯中。
2. 碱提：向烧杯中加入30mL饱和石灰水溶液，加热至沸，并不断搅拌，煮沸15分钟后，抽滤。
3. 酸沉：将滤渣用20mL饱和石灰水溶液煮沸10分钟，合并滤液。
用15%盐酸中和至pH值为4-5。
4. 沉淀：静置，待沉淀完全后，抽滤，收集沉淀。
5. 洗涤：用少量95%乙醇洗涤沉淀，直至洗液无色。
6. 干燥：将沉淀置于蒸发皿中，用石棉网烘干。
7. 溶解：将干燥后的沉淀溶解于少量95%乙醇中。
8. 鉴定：1. 镁粉-HCl反应：取少量溶液于试管中，加入镁粉和少量1%盐酸，若出现红色沉淀，则说明含有黄酮类化合物。
2. 三氯化铁反应：取少量溶液于试管中，加入1%三氯化铁溶液，若出现蓝色沉淀，则说明含有黄酮类化合物。
3. 铝氯化物反应：取少量溶液于试管中，加入1%铝氯化物溶液，若出现黄色沉淀，则说明含有黄酮类化合物。
4. 紫外分光光度法：取少量溶液于紫外分光光度计中，测定其在258nm处的吸光度值，与标准曲线比较，确定芦丁含量。
五、实验结果与分析1. 通过实验，成功提取并鉴定了槐花米中的芦丁。
2. 实验过程中，观察到红色沉淀、蓝色沉淀和黄色沉淀，说明槐花米中含有黄酮类化合物。
芦丁的纯化及其含量测定
芦丁的纯化及其含量测定一、本文概述本文旨在探讨芦丁的纯化过程以及含量的精确测定方法。
芦丁，作为一种具有广泛应用价值的化合物，其在医药、化妆品和食品工业等领域都有着重要的应用。
然而，芦丁的天然来源有限，且其提取物中常含有其他杂质，因此，对芦丁进行纯化并准确测定其含量就显得尤为重要。
本文将首先介绍芦丁的基本性质和应用领域，然后详细阐述芦丁的纯化过程，包括提取、分离和纯化等步骤，以及各步骤中需要注意的问题。
在此基础上，本文将介绍芦丁的含量测定方法，包括常用的光谱法、色谱法等，并对各种方法的优缺点进行比较和讨论。
通过本文的研究，我们期望能够为芦丁的纯化和含量测定提供一套有效、可行的方法，为芦丁的应用提供更为可靠的质量保证。
我们也期望通过本文的研究，能够推动芦丁提取和纯化技术的发展，为相关产业的发展提供技术支持。
二、芦丁的纯化方法芦丁的纯化是提取过程中的关键步骤，其目的在于从复杂的植物提取物中分离出高纯度的芦丁。
芦丁的纯化方法通常包括以下几个步骤：初步提取：通过溶剂提取法，如乙醇或甲醇浸泡含有芦丁的植物材料，以破坏细胞结构，释放芦丁。
此步骤后，可获得含有芦丁的粗提物。
分离：在初步提取的基础上，采用适当的分离技术，如液-液萃取、柱层析或薄层色谱等，以去除粗提物中的杂质，得到芦丁的富集物。
精制：为了进一步提高芦丁的纯度，可以采用重结晶、制备型高效液相色谱（HPLC）或薄层色谱的精制方法。
这些方法可以进一步去除富集物中的微量杂质，得到高纯度的芦丁。
干燥：将精制后的芦丁进行干燥处理，以去除残留的水分和溶剂，得到最终的芦丁纯化物。
在纯化过程中，需要注意操作条件的控制，如温度、pH值、溶剂选择等，以确保芦丁的稳定性和纯度。
纯化方法的选择和优化也需根据具体的植物来源、芦丁的含量和杂质成分等因素进行调整。
通过以上步骤，可以有效地纯化芦丁，为后续的含量测定和其他研究提供高质量的样品。
三、芦丁的含量测定方法芦丁的含量测定是评估其纯度以及确定其在药物制剂中的准确含量的重要步骤。
中芦丁含量的测定(精)
设计方案
色谱条件
固定相：ODS色谱柱 流动相：甲醇-1%冰醋酸溶液（40:60） 流速：1.0 ml/min 进样量：10µl 柱温：30℃ 检测波长：257nm
标准曲线的绘制 对照品溶液分别配制成梯度溶
液 进样 测定峰面积 以峰面积为纵坐 标，浓度为横坐标，做标准曲线。
中国药典
色谱条件
固定相：十八烷基硅烷键合硅胶填充柱 流动相：甲醇-1%冰醋酸溶液（32:68） 检测波长：257nm
对照品溶液的制备 精密称取在120℃减压干燥至
恒重的芦丁对照品适量 0.1mg的溶液 甲醇制成每1ml含
供试品溶液的制备 精密称取本品适量
锥形瓶中 超声处理 滤过 精密加入甲醇50ml 再称定重量
样品测定 供试品溶液
接进样 外标法测定
微孔滤膜过滤
直
仪器精密度 同一对照品溶液
Байду номын сангаас测定其峰面积 计算RSD
重复进样6次
讨论
芦丁易溶于甲醇，在水中微溶，降低流动相中甲醇 的含量将提高芦丁的分离效果，但同时也将延长保 留时间，实验中需根据实际情况调节流动相配比以 获得良好的分离效果。
芦丁在水溶液中呈酸性，为防止其水解，药典及许 多文献报道的流动相中都加入了无机酸，但含量较 高的酸容易对分析柱造成损伤。文献一的流动相中 仅用了甲醇和水，也获得了满意的效果。而文献方 案三认为加入乙酸可有效防止脱尾，实验中可根据 实际情况决定是否加酸。
参考文献
国家药典委员会，中华人民共和国药典(一部). 北京： 化学工业出版社，2005.1 邓富良，陈本美等. 高效液相色谱法测定槐米中的 芦丁含量[J]. 湖南医科大学学报，2000，25(6)： 598-599 梁南熙，彭永芳. 槐花中芦丁的高效液相色谱测定 [J]. 昆明师范高等专科学校学报，2002，24(4)： 51-52 李培凡，张颧慧等. RP-HPLC法测定不同产地槐米 中芦丁[J]. 中草药，2006，37(9)：1419-1420
化学实验芦丁实验报告
一、实验目的1. 学习植物中芦丁的提取方法。
2. 掌握分光光度法测定芦丁含量的原理和方法。
3. 了解芦丁的鉴定方法。
二、实验原理芦丁是一种黄酮类化合物，广泛存在于植物中，具有多种生物活性。
本实验采用醇提法提取芦丁，利用分光光度法测定芦丁含量，并通过对芦丁的鉴定，验证提取物的纯度。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：分光光度计、超声波清洗器、旋转蒸发仪、电子天平、研钵、漏斗、滤纸、容量瓶、移液管、比色皿等。
2. 试剂：芦丁标准品、芦丁提取液、无水乙醇、95%乙醇、硝酸铝、氢氧化钠、亚硝酸钠、硫酸铜、盐酸、硫酸、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 芦丁标准曲线的绘制（1）准确称取芦丁标准品10mg，用95%乙醇溶解，转移至100mL容量瓶中，加95%乙醇定容至刻度，得到浓度为100μg/mL的芦丁标准溶液。
（2）分别吸取0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL芦丁标准溶液于比色皿中，依次加入5mL 95%乙醇、0.5mL 5%硝酸铝溶液、0.1mL 1%氢氧化钠溶液，摇匀，静置6min。
（3）以试剂空白为参比，在510nm波长下测定吸光度。
（4）以芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 芦丁提取与测定（1）准确称取植物样品5g，用无水乙醇浸泡过夜，然后超声提取30min。
（2）过滤，滤液转移至旋转蒸发仪中，浓缩至近干。
（3）用95%乙醇溶解残渣，转移至100mL容量瓶中，加95%乙醇定容至刻度，得到芦丁提取液。
（4）准确吸取2.0mL芦丁提取液于比色皿中，依次加入5mL 95%乙醇、0.5mL 5%硝酸铝溶液、0.1mL 1%氢氧化钠溶液，摇匀，静置6min。
（5）以试剂空白为参比，在510nm波长下测定吸光度。
（6）根据标准曲线计算芦丁含量。
3. 芦丁的鉴定（1）取少量芦丁提取液，滴加少量硫酸铜溶液，观察颜色变化。
（2）取少量芦丁提取液，滴加少量盐酸，观察颜色变化。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制：以芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得到线性回归方程：y = 0.0043x + 0.0172，相关系数R² = 0.9988。
芦丁的提取与鉴定实验报告
芦丁的提取与鉴定实验报告芦丁的提取与鉴定实验报告一、引言芦丁是一种天然的植物化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，对芦丁的提取与鉴定具有重要的研究价值。
本实验旨在通过提取与鉴定芦丁的过程，探索其化学性质与活性成分。
二、实验材料与方法2.1 实验材料- 高效液相色谱仪（HPLC）设备- 芦丁标准品- 高纯度乙醇- 石油醚- 甲醇- 无水氯化钠2.2 实验方法1. 提取芦丁将鲜芦荟叶片切碎，加入石油醚中，用搅拌器搅拌30分钟。
然后将悬浮液过滤，并用石油醚洗涤固体残渣，重复此步骤3次。
最后，将洗涤后的固体残渣用乙醇进行提取，搅拌1小时，然后过滤。
2. 高效液相色谱鉴定将提取得到的芦丁溶液通过HPLC进行鉴定。
设置流动相为甲醇-水（70:30），流速为1.0 mL/min，检测波长为280 nm。
通过对比样品峰面积与标准品峰面积，计算出芦丁的含量。
三、实验结果与讨论通过HPLC鉴定，我们成功获得了芦丁的峰图，并计算出其含量为X mg/g。
这表明我们的提取方法能够有效地获得芦丁，并且鉴定结果准确可靠。
芦丁是一种黄色结晶性化合物，其化学结构为柚皮苷。
它在植物中主要存在于芦荟、柚子等植物中，具有丰富的药用价值。
芦丁的抗氧化活性使其具有抗衰老、抗炎症和抗肿瘤等多种生物活性。
因此，芦丁的提取与鉴定对于药物研发和保健品生产具有重要的意义。
在芦丁的提取过程中，我们选择了石油醚和乙醇进行提取。
石油醚是一种非极性溶剂，可以有效地提取植物中的脂溶性成分。
而乙醇则可以提取植物中的水溶性成分。
通过这两步的提取，我们能够全面地提取芦丁，并确保其纯度。
在鉴定芦丁的过程中，我们选择了HPLC作为分析方法。
HPLC是一种高效、准确的分析技术，可以对复杂的混合物进行分离和鉴定。
通过设置合适的流动相和检测波长，我们能够准确地测定芦丁的含量。
通过与标准品的对比，我们可以确定样品中芦丁的含量，并计算出其纯度。
本实验的结果表明，我们成功地提取和鉴定了芦丁，并得到了较高的纯度。
实验八芦丁含量测定20120425
可见分光光度法与紫外的区别：
1、光源不同，紫外用氢灯作光源，可见用钨灯 2、测定波长不同，紫外波长范围180～350nm 可见波长范围320～1000 3、可见需显色，紫外不需显色 可见分光光度测定中通常是被测物质与显色剂反应，生成 有色物质，然后测定其吸光度，进而求得被测物质的含量。
分光光度计测定物质含量的原理：
讲 解 提 纲
一、分光光度法的特点 二、可见分光光度法与紫外的区别 三、分光光度计测定物质含量的原理 四、工作曲线法测定芦丁含量 五、本次实验注意事项
六、仪器的操作
分光光度法的特点（包括紫外和可见）
分光光度法与其他测定方法比较有这样一些特点 1、首先，它的应用广泛，在国际上发表的有关分析的论文 总数中，分光光度法占28%，我国约占所发表论文总数的 33%。 2、灵敏度高，由于新的显色剂大量合成，并在应用研究方 面取得了重要进展，使得测定物质的灵敏度提高。 3、选择性好，目前有些元素只要控制适当的显色条件就可 以直接进行光度法测定。 4、准确度高，浓度测量的相对误差在1～3%范围 5、分析成本低，操作简便快速。
标准曲线：一份称样量，但是可以定量很宽
的线性范围；中间可能存在的误差---称样时 引入的误差 标准对照法：2份或者2份以上的称样量，只 能定量90-110%的含量，且不能存在较大的 截距
芦丁又名芸香甙，维生素P，属黄酮类化合物，
临床上主要用于治疗脑溢血，高血压，视网 膜出血等疾病。 芦丁的含量测定有高效液相色谱法，紫外分 光光度法和可见分光光度法。
二原理 结构中含有酚羟基和环酮 本实验利用黄酮甙与亚 基结构，可与某些金属盐 硝酸钠、硝酸铝反应在 试剂生成有色络合物，在 碱性时显红色的反应测 510nm波长处有吸收，用 定芦丁的含量。 可见分光光度计测其含量。
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分光光度计测定物质含量的原理： 分光光度计测定物质含量的原理： （紫外与可见基本相同） 均采用一个能产生多个波长的光源，通过系 列分光装置后产生特定波长的光源，光源透 过被测样品后，部分光源被吸收，计算样品 的吸光值，由比尔-朗白定律求得样品的浓度。
实验八 工作曲线法测定芦丁含量
可见分光光度法
一、实验目的 （1）掌握可见分光光度计的使用 （2）掌握光电比色的一般操作。 （3）学会用作图法及计算器回归 法求芦丁样品的浓度
芦丁的测定（标准曲线制备与芦丁测定一起完成） 芦丁的测定（标准曲线制备与芦丁测定一起完成）
精密移取芦丁标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml和样 品液3.0ml置10ml容量瓶中→各加30%乙醇使成5.0ml→各精 密加入亚硝酸钠溶液（1→20）0.3ml,摇匀，放置6分钟→各 加硝酸铝（1→20）0.3ml,摇匀，再放置6分钟。→各加氢氧 化钠试液4ml,用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置15分钟。 在510nm波长下测定各瓶溶液的吸收度（以第一瓶作空白） 以浓度为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线。测定样 品的浓度。
可见分光光度法与紫外的区别： 可见分光光度法与紫外的区别：
1、光源不同，紫外用氢灯作光源，可见用钨灯 2、测定波长不同，紫外波长范围180～350nm 可见波长范围320～1000 3、可见需显色，紫外不需显色 可见分光光度测定中通常是被测物质与显色剂反应，生成 有色物质，然后测定其吸光度，进而求得被测物质的含量。
四、思考题 相同厚度的各比色皿透光性不一 致时，为什么要在经过多次洗涤后 各皿透光率差异无改变下才使用校 正值？ 工作曲线法和标准对比法分别适 用何种情况？从本实验结果看，能 否用标准对比法？
仪器的操作
1、预热： 仪器开机后灯及电子部分需热平衡，故开机预热30分钟后才能进行测定工作 预热： 预热 2、调零： 调零： 调零 目的： 目的：校正基本读数标尺两端（配合100%T调节）进入正确测 试状态 调整时机： 调整时机：开机预热30分钟后，改变波长或测试一段时间，以及做高精 度测试之前 操作： 操作： 将拉杆拉出半格（或打开盖子）遮断光路，然后按“0%”键， 即能自 动调整零位 3、调整 调整100%： ： 调整 目的： 目的：校正基本读数标尺两端（配合调零）进入正确测试状态 调整时机：同上 调整时机 操作： 空白样品置入样品室光路中，盖下盖子（打开光门）然后按 操作 “100%T” 键，即能自动调整100%。 4、调波长：用↑、↓箭头调节波长，调至所需波长 调波长： 调波长
注意事项
移液管,容量瓶的正确使用 NaOH每吸一次可以放两个,比色杯不要甩 容量瓶易翻倒,注意放好 注意放的时间 NaNO2加0.3ml,不是0.03ml. 标准浓度看黑板,各浓度要计算 蒸馏水要加至刻度后摇(用滴管),容量瓶拿在手上看刻度 浓度的测定,以1号为空白,从低浓度至高浓度来测. 数据当场交,报告回去做.
要使得测定浓度准确 应当考虑影响测定准确的因素：
1 显色反应的完全程度（取决于）： 介质的pH 显色剂的用量 反应温度 反应时间
2 吸光度的物理测定条件
如何确定反应最佳条件
在建立方法时，需要通过实验确定最佳反应 条件，为此改变其中一个因素（例如介质的 pH值暂时固定其他因素，显色后测量相应溶 液的吸光值，通过吸光度-pH曲线确定反应的 酸度范围，其他几个影响因素的适宜值也可 以按这一方法分别确定。
芦丁的测定各试剂用量
编号 1 2 1.00 3 2.00 4 3.00 5 4.00 6 5.00 3.00 5.00 4.00 3.00 2.00 1.00 2.00 7
标准溶液(ml) 0 样品溶液(ml) 30%乙醇(ml) NaNO2(ml) Al(NO3)3(ml) NaOH(ml)
全部都加0.30ml,摇匀后放置6分钟
讲 解 提 纲
一、分光光度法的特点 二、可见分光光度法与紫外的区别 三、分光光度计测定物质含量的原理 四、工作曲线法测定芦丁含量 五、本次实验注意事项 六、仪器的操作
分光光度法的特点（包括紫外和可见） 分光光度法的特点（包括紫外和可见）
分光光度法与其他测定方法比较有这样一些特点 1、首先，它的应用广泛，在国际上发表的有关分析的论文 总数中，分光光度法占28%，我国约占所发表论文总数的 33%。 2、灵敏度高，由于新的显色剂大量合成，并在应用研究方 面取得了重要进展，使得测定物质的灵敏度提高。 3、选择性好，目前有些元素只要控制适当的显色条件就可 以直接进行光度法测定。 4、准确度高，浓度测量的相对误差在1～3%范围 5、分析成本低，操作简便快速。
全部都加0.30ml,摇匀后放置ห้องสมุดไป่ตู้分钟
全部都加4ml,摇匀后放置15分钟后在510nm条件下测定A
结果 1、列出浓度C与吸光度A对应表格 2、用作图法绘制芦丁工作标准曲线 3、用计算器回归求标准曲线方程A=()C+( ), 要求r=0.998以上 4、从图中读出芦丁的浓度,并计算瓶中芦丁样 品的浓度 5、计算器回归求芦丁样品的浓度并计算瓶中芦 丁样品的浓度。
芦丁又名芸香甙，维生素P，属黄酮类化合物， 临床上主要用于治疗脑溢血，高血压，视网 膜出血等疾病。 芦丁的含量测定有高效液相色谱法，紫外分 光光度法和可见分光光度法。
二、实验原理
黄酮类化合物的结构性质 结构中含有酚羟基和环酮 基结构，可与某些金属盐 试剂生成有色络合物，在 510nm波长处有吸收，用 可见分光光度计测其含量。 本实验利用什么原理 本实验利用黄酮甙与亚 硝酸钠、硝酸铝反应在 碱性时显红色的反应测 定芦丁的含量。
标准曲线：一份称样量，但是可以定量很宽 的线性范围；中间可能存在的误差---称样时 引入的误差 标准对照法：2份或者2份以上的称样量，只 能定量90-110%的含量，且不能存在较大的 截距
三、实验内容
仪器 光电分光比色计 使用方法见附件 比色皿的校核 将同样厚度的四个比色皿分别编号标记，都装空白溶 液，在所用波长（510nm）下比较各比色皿的透光率，应相同，若有显 著差异，应将比色皿重新洗涤后再装空白溶液测试，经洗涤可使透光率 的差异减小时，可通过多次洗涤使透光率一致。若经几次洗，仍然不一 致可如下校正：以透光率最大的比色皿为100%透光，测定其余各皿的透 光率，分别换算成吸收度作为各比色皿的校正值。测定溶液时，以上述 100%透光率的比色皿作空白，用其他各皿装溶液，测得吸收度值然后碱 去所用比色皿的校正值。