蔗糖酶的提取和固化

唐志远 08化生一班 0808106020

蔗糖酶的提取和固化

一：试实验目的

1， 了解酶的提取和初纯化法，掌握高速冷冻离心机的操作技术。 2， 了解固定化酶的原理和优缺点。掌握制备固定化酶的最基本方法。

二：实验原理

酵母中含有蔗糖酶，而蔗糖酶系胞内酶，提取胞内酶时，要破碎组织和细胞，然后用一定的溶剂提取，得到的材料称为细胞抽取液。材料不同破壁的方法不同。我们用的菌体细胞破壁法是自溶法。

固定化酶是用物理或化学的方法使酶固定。包括吸附法，包埋法，共价交联法等 三：试剂和器材 略。 四：实验步骤：

1， 蔗糖酶的提取 包括初提取A 液，细提取B 液。 2， 酶的固定化，主要用的是包埋法和共价交联法。 3， 固定化酶活力的测定。

（1） 制作葡萄糖的标准曲线。 （2） 酶活测定。

（3） 计算固定化酶的活力单位。 五：实验数据处理

葡萄糖标准曲线

-0.200.20.40.6

0.8葡萄糖的浓度 mg/ml

吸光度

2，酶活性的侧定

六：实验总结

本次试验主要是酶也得提取，其中在提取的过程中掌握如何使用离心机和注意事项，还有提取液的初提取和精细提取的方法。酶的固化中让我们了解了几种常用的酶固化的原理，以及操作方法和注意事项。最后是酶活性的测定基本上是测其吸光度，然后根据吸光度进行计算，并得出结论。