蛋白质溶解度

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分析结果计算
15/75=x/1.5g=0.3gx ps%=0.3g原样中粗蛋白含量/原样中粗蛋 白含量×100%
注意事项
不同样品的粒度应相同。 不同样品在氢氧化钾溶液中的搅拌时间应 一致 。
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试剂
a) 氢氧化钾(分析纯),无水硫酸钾、五 水硫酸铜、氢氧化钠、硼酸、甲基红、溴甲 酚绿、硫酸铵; b) 浓硫酸、盐酸(分析纯)、95%乙醇、 蒸馏水。
仪器和设备
a) 感量为0.0001 g分析天平; b) 磁力搅拌器; c) 离心机; d) 样品粉碎机; e) 60目分析筛; f) 电炉; g) 100 mL或250 mL凯氏烧瓶; h) 凯氏蒸馏装置; i) 250 mL锥形瓶; j) 1000 mL容量瓶; k) 微量滴定管。
试样处理
称取试样1.5 g(准确至0.0002 g)置于 250 mL烧杯中,准确移入 0.042 M氢氧化 钾溶液75 mL,磁力搅拌20 min,然后将 试样转移至离心管中,以2700 r/min的速 度离心10 min。
测定
吸取上清液 15 mL, 放入消化管中, 按照 GB/T 6432-1994凯氏定氮法测定试样中 可溶性蛋白质的含量。同时,按照GB/T 6432-1994凯氏定氮法测定试样中粗蛋白 质的含量。
蛋白质溶解度
在一定的氢氧化钾溶液中溶解的蛋白 质质量占试样中总蛋白质量的百分数。 NSI 通常采用氮溶解指数(NSI)和蛋白 通常采用氮溶解指数(NSI)和蛋白 质分散指数((PDI)来表示。 质分散指数((PDI)来表示。
原理
用一定浓度的氢氧化钾溶液提取试样中的可 溶性蛋白质,在催化剂作用下用浓硫酸将提 取液中可溶性蛋白质的氮转化为硫酸铵。加 出试样中可溶性蛋白质含量; 同时,测定原始试样中粗蛋白质含量,计算 出试样的蛋白溶解度。
分析步骤
1 0.042 M氢氧化钾溶液 氢氧化钾溶液 称取2.360 g氢氧化钾,加水溶解后,转移至 氢氧化钾, 容量瓶中, 称取 氢氧化钾 加水溶解后,转移至1000 mL容量瓶中,用水定 容量瓶中 容至刻度。 容至刻度。 2 混合催化剂 称取6 硫酸钾和 硫酸钾和0.4 g硫酸铜,磨碎混匀。 硫酸铜, 称取 g硫酸钾和 硫酸铜 磨碎混匀。 3 氢氧化钠溶液 称取400 g氢氧化钠,加水溶解后,转移至 氢氧化钠, 容量瓶中, 称取 氢氧化钠 加水溶解后,转移至1000 mL容量瓶中,用水定容 容量瓶中 至刻度。 至刻度。 4 硼酸溶液 称取20 g硼酸,加水溶解后,转移至 硼酸, 容量瓶中, 称取 硼酸 加水溶解后,转移至1000 mL容量瓶中,用水定容至刻 容量瓶中 度。 5 0.1M盐酸标准溶液 盐酸标准溶液 量取8.3 mL浓盐酸,注入 浓盐酸, 水中混匀, 量取 浓盐酸 注入1000 mL水中混匀,按GB 601-88要求进行 水中混匀 要求进行 标定即可。 标定即可。 6 混合指示剂 称取1 甲基红和 甲基红和5 溴甲酚绿 加入乙醇溶解后,转移至1000 mL容量 溴甲酚绿, 称取 g甲基红和 g溴甲酚绿,加入乙醇溶解后,转移至 容量 瓶中,用乙醇定容至刻度。 瓶中,用乙醇定容至刻度。
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