细胞化学
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利用免疫学原理的染色方法
大分子物质具有免疫原性可制备特异抗
体。用各种标记物如荧光素、辣根过氧 化物酶和胶体金等标记该抗体,利用免 疫学抗原抗体反应原理,用标记抗体显 示相应抗原。
利用物理学原理进行的染色
脂溶染色法:借苏丹染料溶于脂类而使脂类显色。 荧光分析:借某些物质可被紫外线激发产生可见荧 光而被显示。也可用荧光染色法将特定的荧光染料 对细胞中的化学成分染色,在荧光显微镜下对这些 成分进行直接观察。 放射自显影技术:用放射性核素标记化合物,使其 在细胞中参与代谢,将带有标记的代谢产物通过放 射自显影技术显示出来,借以探测物质代谢途径和 细胞增殖周期。
化学原理进行的染ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ方法
金属沉淀法:利用酶催化反应形成的分解产物与金属化 合物反应,最终生成有色沉淀,借此辨认所要检查的酶 的活性。 偶氮偶联法:用人工合成的酶底物在酶的作用下产生分 解产物,后者与重氮盐结合形成不溶性的偶氮色素。 Schiff反应法:游离的醛基可使Schiff试剂中的无色品红变 为紫红色产物,这种反应通常用于显示多糖类(PAS反应) 和脱氧核糖核酸(Feulgen反应) 联苯胺法:过氧化物酶分解 H2O2 产生氧,后者再将无色 联苯胺氧化成联苯胺蓝,进而变成棕色化合物。 四唑盐显示脱氢酶
学物质有高度特异性和高度灵敏性; 反应所生成的产物要在原位沉淀、显色明 显、不溶、不扩散,并在重复实验中结果 一致。
染色的作用
由于正常的生物组织是无色透明的,因此无法在光镜下进行 观察。因此必须要对样品进行染色。 染色剂可以渗透到组织的间隙中,细胞中的蛋白质等成份可 以吸附不同的色素粒子;染色剂中的阳离子和阴离子可分别 与细胞中的酸性、碱性物质相结合。染色就是根据这些原理, 利用染色剂与细胞内含物的物理作用与化学作用,将细胞和 组织染成各种不同的颜色。 由于染色剂的化学性质不同,以及固定材料时所用的固定剂 不同,染色剂对被染色的组织有一定的选择性,从而使某些 部位染色很清楚,而另一些部位可能完全不着色。例如,有 些染色剂可染细胞核,有些染色剂可染细胞质。
细胞化学(cytochemistry)
细胞化学是在保持细胞原有形态结构 的基础上,利用已知的化学反应原位显示 细胞内的某种化学成分,然后通过显微镜 进行定性、定位、定量研究的科学。
细胞化学技术要求
保持样品的形态结构不发生改变; 保存细胞内生前化学成分及酶的活性; 显示成分的化学反应必须对将被显示的化