1 细胞大小的测量
医学-细胞制片与观察和细胞大小测量
实验一 细胞的制片与观察和细胞大小的测量
[作业思考] 1、绘人口腔黏膜上皮细胞结构图，注明各部
分(包括线粒体)名称。 2、根据实验结果判断，你的制片中口腔黏膜
细胞是活细胞还是死细胞？为什么？ 3、将目镜测微尺校正结果填入表，为什么换
用不同倍数目镜或物镜时，须重新校正目尺？
实验一 细胞的制片与观察和细胞大小的测量
[材料用品] 人口腔粘膜细胞、大鼠、鸡血涂片标本、
显微镜、镜台测微尺、目镜测微尺、无菌 牙签、解剖器具、染色缸、染色架、载玻 片、盖玻片、滴管、吸水纸、0.9％生理盐 水、0.1％碘液、0.02％詹纳斯绿、醋酸洋 红染液、甲基绿-派洛宁染液、卡渃氏固定 液、丙酮、二甲苯、中性树胶、蒸馏水、 水
胞，勿将深部细胞刮下。 ➢ 涂片 材料均匀分散，细胞不重叠，以易于观察。 ➢ 加盖玻片 镊子夹住盖玻片的一侧，将另一侧首先
接触载玻片和溶液，然后慢慢放下盖玻片，避免产 生气泡。 2、口腔黏膜细胞活体染色显示线粒体 ➢ 涂布口腔黏膜细胞后即刻染色，以保证活细胞染色。
实验一 细胞的制片与观察和细胞大小的测量
本、显微镜、解剖器具、蜡盘、载玻片、 盖玻片、烧杯、染色缸、大头针、棉花、 0.65％生理盐水、1％硝酸银溶液、甘油、 香柏油、0.1％亚甲基蓝、甲醇、吉姆萨染 色液、蒸馏水、乙醚
实验二 动物组织的制片及观察
[操作要点] 1、制作蛙肠系膜平铺片（铺片法） ➢ 完好地剪取肠系膜并平铺于载玻片上是本实验成
功的关键。当用眼科剪剪取肠系膜时，应用镊子 夹住剪开的膜的边缘，防止膜皱缩成团。用镊子 将膜放置于载玻片上后，再用解剖针将膜铺平。 ➢ 载（盖）玻片洁净。 2、制作蝗虫骨骼肌装片（分离法） 用解剖针分离肌丝时越细越好。
细胞形态观察及大小测量
细胞形态观察及大小测量
一、实验目的
1. 了解动、植物细胞的一般形态结构特点
2. 掌握显微测量的基本方法
二、实验原理
任何动、植物细胞都具有特定的形态结构，对其进行固定和染色等处理，便可以在显微镜下分辨清楚，然后借用目镜测微尺和镜台测微尺，便可测量大小。
三、实验用品
器具：显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、目镜测微尺、镜台测微尺
材料：H.E染色标本：小白鼠肝细胞、睾丸组织细胞
I.H染色标本：洋葱根尖细胞
新鲜材料：洋葱、紫鸭趾草
四、实验方法步骤
（一）细胞形态观察
1. 投影各种形态的细胞
2. 观察小白鼠肝细胞
3. 观察睾丸组织细胞
4. 观察紫鸭趾草叶片表皮细胞及气孔保卫细胞
5. 观察洋葱表皮细胞
（二）细胞大小测量
1. 目镜测微尺的校正
2. 细胞大小测量
① 选取一肝细胞，测细胞及核的大小（直径）
② 选取一曲细精管，测精原细胞，初级精母细胞和次级精母细胞的大小及核的大小（直径）
③ 选一洋葱表皮细胞，测细胞大小（长X宽）及核的大小（直径）
④ 测紫鸭趾草表皮细胞的大小（长X宽）及核的大小（直径）。
实验四细胞计数和大小测量
采用更精确的测量工具、对多个角度和维度进行测量等方法可以 提高测量的准确性。
细胞形态观察结果分析
观察误差来源
观察误差可能来源于观察者主观判断、染色 效果不佳等因素。
观察内容
观察细胞的形态、结构、染色质分布等特征。
观察准确性提高方法
采用标准化染色方法、提高显微镜分辨率等 方法可以提高观察的准确性。
02
实验原理
细胞计数原理
显微镜直接计数法
通过显微镜观察，直接数出样品中全部细胞的数量。这种方法适用于数量较少的细胞，但对于数量较多的细胞， 由于观察视野有限，容易造成计数不准确。
血球计数板法
利用血球计数板在显微镜下直接计数细胞数量。血球计数板是一种特制的载玻片，上面有划分好的网格区域，每 个区域有一个小的计数室。将待测样品滴加到计数室中，然后在显微镜下观察并计数。这种方法能够快速准确地 计数大量细胞。
细胞形态观察
选择观察工具
选择适当的观察工具，如 显微镜、电子显微镜等。
观察方法
采用适当的观察方法，如 光学显微镜观察或电子显 微镜观察，对细胞形态进 行观察。
形态特征描述
根据观察结果描述细胞的 形态特征，如形状、大小、 染色质结构等。
04
实验结果分析
细胞计数结果分析
细胞计数原理
通过在显微镜下观察细胞，并使用计数器对视野中的细胞进行计 数，以获得细法
利用光学显微镜观察细胞的形态特征，如细胞的形状、大小、边缘、胞质、核 等结构。通过观察这些特征，可以对细胞的类型和功能进行初步判断。
电子显微镜观察法
利用电子显微镜观察细胞的超微结构特征，如细胞器的形态、分布和数量等。 电子显微镜的分辨率更高，能够观察到更细微的结构特征。
试验1细胞大小测定
《细胞生物学》实验（养殖：1——3；生技、海科：1——6）实验一细胞器的分离、提取与测量【目的】掌握叶绿体分离的一般原理和方法，学习用测微尺测量细胞与细胞器大小的测定方法，并了解应用荧光显微镜方法观察叶绿体荧光现象。
【原理】叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器，能发生特有的能量转换。
利用低速离心机可以分离叶绿体，其分离在等渗溶液(0.35 mol／L氯化钠或0.4mol／L蔗糖溶液)中进行，目的是为了防止渗透压的改变引起叶绿体的损伤。
将匀浆液在1000r／min离心，去除其中的组织残渣和一些未被破碎的完整细胞，然后，3000 r／min离心，可获得沉淀的叶绿体(混有部分细胞核)。
在室温下进行分离要迅速。
用显微测微尺可以直接测量细胞大小，精确度较高。
显微测微尺分为物镜测微尺和目镜测微尺2种。
目镜测微尺是1块小玻璃圆片(可放人目镜内，其大小正好卡人目镜筒内)，在圆片正中央刻有1cm长的直线，直线上均匀分为100小格或50小格，每小格的长度，随目镜和物镜的放大倍数而变动。
物镜测微尺是一块特制的玻璃载片，载片中央刻有一条1mm长的直线，均匀地刻分为100个小格，每小格为1／100mm (为10μm)，用一小圆形玻璃盖片封盖着，物镜测微尺较目镜测微尺小格的间距精确，通过目镜测微尺测量细胞与细胞器的大小(小格数)，然后换以物镜测微尺校测小格数的精确数值，即为测量的细胞与细胞器大小结果。
某些物质在一定短波长的光(如紫外光)的照射下吸收光能进入激发态，从激发态回到基态时，就能在极短的时间内放射出比照射光波长更长的光(如可见光)，这种光就称为荧光。
若停止供能荧光现象立即停止。
有些生物体内的物质受激发光照射后，可直接发出荧光(称为自发荧光)，如叶绿素的火红色荧光。
有的生物材料本身不发荧光，但它吸收荧光染料后同样也能发出荧光(称为间接荧光)，如叶绿体吸附吖啶橙后可发橘红色荧光。
【材料】菠菜叶片。
【实验用品】1．试剂：蒸馏水，0.35 mol／L氯化钠溶液，0.01% 吖啶橙。
实验四 细胞计数和大小测量
细胞计数法是细胞培养的一项基本技术。 它是了解细胞生长状态、绘制生长曲线 等的重要手段。在动物细胞原代与传代 培养、细胞冷冻与复苏等众多技术中需 要细胞计数；植物细胞和微生物进行悬 浮培养也需测定细胞数目。
实验室中计数细胞常用电子细胞计数仪 和细胞计数板
细胞计数器
手持式细胞计数器 血细胞计数仪 细胞计数板
计数器样品台的功能示意图 。 当管闩F打开时，压力计储液槽R中的 水银被连接至P的小型真空泵抽吸， 所产生的压力差会在管闩F关闭后使 得水银柱J移动，使样品悬浮液E通过 带孔圆片A从样品槽流入样品管B中。 带孔圆片和样品管由介电材料制成， 其电阻率比悬浮介质的电阻率要大得 多。通过连接线H和I，电极C和D通 过小孔将电流连接起来，且将所产生 的信号脉冲送至放大器和脉冲计数器 （没有显示）。需要分析的样品的体 积由三个控制电极(K, L, M)测定，这 三个电极穿过了压力计管的管壁；当 流动的水银造成K和L之间有电接触时 ，脉冲计数器启动，而当水银与M接 触时会使计数器停止工作（M与L之 间的距离经过了校准）。只有当悬浮 液以恒速流过小孔时才会对细胞进行 计数，这样使得可测定细胞的浓度， 因为悬浮液体积等于电极L和M之间 的水银的体积。第二个管闩G只在下 列情况下打开，即用清洁的悬浮介质 通过O来填充或冲洗样品管时。观察 小孔的显微镜没有显示。
1mm
红
在血球计数板上，刻有一些符号和 数字其含义是：
XB-K-25为计数板的型号和规格，表示 此计数板分25个中格； 0.1mm为盖上盖玻片后计数室的高； 1/400mm2表示计数室面积是1mm2 ，分400个小格，每小格面积是1/400 mm2。
中间大方格有25 个中方格，每个 中方格有16个小 方格 四角的每个大方 格有16个中方格
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目得了解目镜测微尺与镜台测微尺得构造与使用原理,掌握微生物细胞大小得测定方法. 二、实验原理微生物细胞得大小就是微生物重要得形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小得工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺（图－1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍm长度刻成50等分，或把10 mｍ长度刻成1０0等分。
测量时，将其放在接目镜中得隔板上（此处正好与物镜放大得中间像重叠)来测量经显微镜放大后得细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合得放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示得长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上得镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表得相对长度.镜台测微尺（图２0-2）就是中央部分刻有精确等分线得载玻片，一般将ｌmm等分为10０格，每格长l0μm(即０、0ｌmm）,就是专门用来校正目镜测微尺得.校正时,将镜台测微尺放在载物台上，图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜得两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数得放大而放大，因此从镜台测微尺上得到得读数就就是细胞得真实大小，所以用镜台测微尺得已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表得长度,然后移去镜台测微尺，换上待测标本片,用校正好得目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1.活材料：酿酒酵母（Sacchaｒomyces ｃerｅvisｉae)、枯草杆菌（Bacｃiｌlｕｓｓubｔili ｓ)染色标本片。
2。
器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法１．目镜测微尺得校正把目镜得上透镜旋下，将目镜测微尺得刻度朝下轻轻地装入目镜得隔板上，把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上.先用低倍镜观察，对准焦距，视野中瞧清镜台测微尺得刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺得刻度平行,移动推动器,使两尺重叠，再使两尺得“0”刻度完全重合,定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合得刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺得格数与镜台测微尺得格数.因为镜台测微尺得刻度每格长ｌ0μｍ,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表得长度.例如目镜测微尺5小方格正好与镜台测微尺5小方格重叠,已知镜台测微尺每小方格为l0μm，则目镜测微尺上每小方格长度为=5×10μｍ/5＝10μm用同法分别校正在高倍镜下与油镜下目镜测微尺每小方格所代表得长度。
实验二细胞大小的显微测量
3.记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。 按下式计算出目镜测微尺每格的长度（μm）：
例如：目镜测微尺20小格等于镜台测微尺3小格，已 知镜台测微尺每格10μm ，则3小格的宽度为3×10 ＝ 30μm，那么相应地在目镜测微尺上每小格大小 为：
4 .从显微镜载物台上取下镜台测微尺，换上细胞 装片，测量并计算细胞大小，计算平均值。
※：当更换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须重新校正 目镜测微尺每一格所代表的长度。
【实验报告与作业】
1、分别求出使用10X倍镜，40X倍镜时目镜测 微尺每格代表的长度。 2、测量10个细胞及细胞核的大小并记录：
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 范围
编号
细胞 直径
均 值
例如：目镜测微尺在显微镜下经过校正，当使用高倍 镜时，每格相当于1.5 μm。如果测量细胞的长度相 当于目镜测微尺的两格，则细胞真实长度应为1.5 μm×2 = 3.0 μm。一般测定细胞大小时，通常测量 10个细胞左右，用最大和最小的数值来表示细胞大小 的范围。例如长为3—5μm，宽为1—2μm，则其大小 为l—2×3—5μm。
实验二
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
细胞大小的显微测量
【实验目的】
学会使用显微测微尺，掌握显微测量细胞的方法。
【实验用品】
1、材料 ： 血涂片 2、器材 ： 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺
【实验原理】
测微尺分目镜测微尺和镜台测微 尺，两尺配合使用。 (1)目镜测微尺：
(2)镜台测微尺：
（1）目镜测微尺:是一个放在目镜像平面上的 玻璃圆片。圆片中央刻有一条直线，此线被分 为若干格，每格代表一定的长度，但所代表的 的真实具体长度随不同物镜的放大倍数而异。 因此，用前必须标定校准，以确定目镜测微尺 每小格所代表的相对长度。
实验一 细胞的形态观察及其大小测量
实验一细胞的形态观察及其大小测量一、实验目的1. 观察细胞形态。
2. 掌握细胞大小的测量方法。
二、实验原理细胞是生命的基本单位，是生物体内最基本的形态结构。
由于其极小的体积，需要借助显微镜来观察。
在显微镜下，细胞呈透明圆形或长方形结构，包括细胞核和细胞质两部分。
细胞大小的测量是衡量细胞形态大小的一种方法，一般使用显微镜和标尺等工具进行测量。
三、实验器材和试剂1. 显微镜：10×、40×、100×梯形物镜、10×和16×目镜。
2. 小片玻片。
3. 缺口玻璃滴管。
4. 普通培养皿。
5. 滴定管。
6. 甲醛：10%浓度。
四、实验步骤1. 取用甲醛液将到手的细胞样本处理，使其纤维化、固定，并保持在透明的状态。
2. 将处理均匀的细胞悬液滴于小片玻片上。
在表面打一个平口，倒入水或细胞培养液。
3. 轻轻地将另一片小片玻片斜放在溶液上，使其尽量靠近悬液表面，并且使两片玻璃片之间尽量少的包含气泡。
4. 用载物架夹住两片玻璃片，置于显微镜镜头下面，用低倍物镜先扫描一遍细胞涂片下方，保证顶点在物镜的中央，并移动至最佳观察位置。
5. 同时调整镜片高低位，目镜内外的距离，使物镜滚轮表面接触到目镜。
6. 在目镜中调整微动盘，让细胞涂片视野平滑，移动目镜板，看到悬浮细胞。
7. 分别使用不同倍数的物镜对细胞的形态进行观察。
一般来说，使用10×的物镜可以清楚地观察到细胞核和周围细胞质的形态，而使用40×和100×的物镜则可更详细地观察到细胞内部结构和细节部位。
8. 用计数尺、标尺等工具对已观察到的细胞大小进行测量。
9. 完成实验后，将玻片倒掉，用纯净水或极其减量的甲醛显微镜氧化置换去甲醛。
再用纯净水进行冲洗。
五、实验要点1. 操作时要谨慎，避免对显微镜等仪器进行过度推拉等操作。
2. 使用时需注意玻璃片的干净和平整。
3. 需要防止玻璃片之间捏入气泡。
4. 细胞涂片的厚度应适当，过厚则不便进行观察，过薄则会付着小颗粒和杂质，影响观察效果。
实验六、微生物细胞的大小测量和显微计数目
10
计数规则：
1）要求每小格内约有5－10个菌体为宜；
2）选计数室四个角的中方格和中央的一个中方格进行计数；
3）当细胞位于方格的线上时，一般只数上方和右边线上的细胞；
4）酵母出芽，又未脱离母体的，只有当芽体大小达到母细胞的
一半时，即作为两个菌体计算；
操作要点：
•血球计数室要清洁。
•观察时光线不宜过强，否则难以找到计数室。
操作要点： • 观察时光线不宜过强，否则难以找到镜台测微尺的刻度。 • 换高倍镜和油镜校正时，防止接物镜压坏镜台测微尺和损坏 镜头。
2、显微直接计数
1）血球计数室的观察和清洗 取血球计数板置于载物台上→ 观察熟悉计数室的中 方格和小方格 → 取下血球计数板→用自来水冲洗计 数室后，再用无水乙醇将血球计数室冲洗干净→ 置 干燥箱干燥 。
精选ppt课件
9
2）样品中酵母菌细胞的直接计数：
取干净血球计数板→ 在计数室上方盖上盖玻片→ 用无 菌吸管，吸取摇匀的酵母菌稀释液→ 在盖玻片边缘沾 一下，让菌液沿缝隙靠毛细管渗透作用进入计数室→ 静置5min → 低倍镜或高倍镜计算每个中方格内的细 胞数→ 完毕后清洗血细胞计数板→ 冲洗、干燥
精选ppt课件
2
二、基本原理
1、微生物细胞大小的测量
微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也 是分类鉴定的依据之一。微生物大小的测定，需要 在显微镜下，借助特殊测量工具――测微尺（包括 镜台测微尺和目镜测微尺）。
测微尺原理：镜台测微尺是中央部分刻有精确等 分线的载玻片，一般是将1mm等分为100格，每格长 0.01mm(即10μm)。镜台测微尺并不直接用来测量细 胞的大小，而是用于校正目镜测微尺每格的相对长 度，然后再用目镜测微尺测量微生物细胞的大小。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目的了解目镜测微尺与镜台测微尺的构造与使用原理,掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、实验原理微生物细胞的大小就是微生物重要的形态特征之一,由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺(图-1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10 mm长度刻成100等分。
测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。
镜台测微尺(图20-2)就是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm等分为100格,每格长l0μm(即0、0lmm),就是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时,将镜台测微尺放在载物台上,图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜的两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1.活材料:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草杆菌(Baccillus subtilis)染色标本片。
2.器材:显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法1.目镜测微尺的校正把目镜的上透镜旋下,将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。
先用低倍镜观察,对准焦距,视野中瞧清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“0”刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数与镜台测微尺的格数。
实验二 细胞大小的观察——测微尺的使用
（二）、细胞形态观察和细胞大小的测量
1.兔不同组织细胞永久制片 观察期细胞间隙、细胞形状、细胞核及核仁形状与数目、 细胞质的形态结构等。 2.蚕豆根尖的永久制片 观察蚕豆更见纵切面概况，注意生点与生长成熟区细胞 的异同。 3.大肠杆菌标本示范，注意细胞形状、大小及核物质等情况。
5.求核质比NP 核质比的计算=Vn(核体积)/Vc(细胞体)_Vn(核体） 注：椭圆体积 V = 4/π3ab2 圆球体积 V = 4/3π 长 方 形 V = a· b· c （1）兔肾细胞的永久制片求NP值 （2）洋葱内表皮细胞。用0.5%蕃红染色5分钟观 察，求NP值。
5. 计算目测微尺的实际刻度值X（mm） X=n·a/m 6. 校对后卸下台微尺进行细胞形态、大小观测。
注意：如果物镜倍数改变，需要 注意：如果物镜倍数改变， 进行从新校对。 进行从新校对。
台微尺和目微尺的校对示范
4.细胞大小的测量 ： 对于圆形、椭圆形或正方形细胞，他们的直径、 长、宽可以用目微尺进行测量，对于长方形的细胞来 说，算出体积要有一厚度的问题，它是不能用目微尺 测量的，而需要用显微镜调焦轮上的标尺。具体方法 如下： 1）将微调“0”刻度与基部镜臂上刻度对准。 2）转动粗调看清细胞的伤上端面或下端面；然后顺 时针或逆时针转微调看清细胞下端面或上端面，记下 微调转过的刻度数L,则厚度为：h = L · b 注：b为微调每转一刻度，物镜垂直下降的距离，已 给出。
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1. 镜台标准推动器上的从横游标： 一些较高级的显微镜都有该装置，它可 以用来测量被测物体的长度和位置，由标尺 和副标尺组成。 2. 微调焦轮的标尺： 使在调上下厚度时，微调焦轮读出的数 值，一般有100个刻度，每一刻度为1—2 µm。
实验探究细胞大小
细胞大小与功能
不同功能的细胞具有不同的最佳大小，例如，神经元的大 小与其突起的长度和复杂性有关，而白细胞的大小则与其 在体内迁移和吞噬功能有关。
学习如何测量细胞大小
01
使用显微镜观察细胞
通过显微镜观察细胞，可以直观地了解细胞的大小和形态。
[请在此处插入参考文献1]
01
03 02
THANKS
感谢观看
血细胞计数板
选择适当的血细胞计数板，确保 计数室的网格清晰可见。
对血细胞进行染色
选择适当的染色剂
常用的染色剂有瑞氏染色、姬姆萨染 色等，根据实验需求选择合适的染色 剂。
染色过程
将染色剂滴加在血细胞计数板上，确 保染色均匀，等待染色完成后再进行 下一步操作。
使用显微镜观察并计数细胞
观察
将染色后的血细胞计数板放在显微镜下，调整焦距，观察并 计数每个网格内的细胞数量。
02
CATALOGUE
实验材料
显微镜
01
用于观察细胞样本，以便计数和 测量细胞大小。
02
确保显微镜性能良好，能够清晰 地观察细胞形态。
血细胞计数板
一种特制的载玻片，上面有规定数量 的网格，用于计数细胞。
确保计数板清洁无污渍，以便准确计 数。
盖玻片
用于覆盖计数板上的细胞样本，保持样本稳定。 选择无气泡、无划痕的盖玻片。
实验探究细胞大小
目录
• 实验目的 • 实验材料 • 实验步骤 • 实验结果与数据分析 • 结论 • 参考文献
01
CATALOGUE
实验目的
理解细胞大小的重要性
细胞大小影响细胞代谢
实验一 细胞的显微测量
实验一 细胞大小的显微测量
【实验目的】
1、学会使用测微尺，掌握显微测量细胞的方法。
【实验用品】
1、材料 ： 鸡血细胞。 2、器材 ： 配有目镜测微尺的显微镜、镜台测微尺、血球计 数板、胶头滴管、载玻片、盖玻片、吸水纸
【实验原理】
测微尺分目镜测微尺和镜台测微尺，两尺配合使用。 目镜测微尺：是一个放在目镜像平面上的玻璃圆尺的格数 目镜测微尺的格数
X 10
（5）从显微镜载物台上取下镜台测微尺，换上鸡血细胞制片 ，测量细胞、细胞核的长短径。
【实验报告和作业】
1、分别求使用低倍镜(10X)，高倍镜(40X) 时目镜测微尺每格代表的长度。
2、计算本实验中鸡血细胞的大小及核质比。
用于计算细胞、细胞核体积的公式： 圆 形 V=4/3πr ³(r为半径) 椭圆形 V=4/3πab2 (a、b为长、短半径) 核质比 N／D=Vn／(Vc—Vn)(Vn为核的体积， Vc是细胞质的体积)
圆片中央刻有一条直线，此线被分为 若干格，每格代表的长度随不同物镜 的放大倍数而异。因此，用前必须测定。 镜台测微尺：是在一个载片中央封固的尺，长1毫米 (1000μm)，被分为100格，每格长度是10um
【实验步骤】
一、细胞的显微（大小）测量
1、测微尺的使用方法
（1）目镜内已经装有目镜测微尺。目镜可以旋转。
（2）将镜台测微尺有刻度一面朝上放在载物台上夹好， 使测微尺刻度位于视野中央。10倍物镜下调焦至 看清镜台测微尺的刻度。
（3）小心移动镜台测微尺和旋转目镜测微尺，使两尺左边 的“0”点直线重合，然后由左向右找出两尺另一次重合 的直线。
（4）记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。 按下式计算目镜测微尺每格的长度（μm）：
实验五 显微测微尺使用与细胞大小的测量
实验二显微测微尺使用与细胞大小的测量2011.03.16班级：姓名：一、实验目的学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定细胞大小的方法。
二、实验原理通常的目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分、把10 mm 长度刻成100等分或将1mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
通常的镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上，由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验用品显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、固定装片等。
四、实验步骤l、目镜测微尺的校正将目镜测微尺装入目镜的隔板上，使刻度朝下（已安装到位）。
把镜台测微尺置于载物台上，使刻度朝上，并对准光源。
先用低倍镜找到镜台测微尺的刻度，改用高倍镜观察，当看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使目镜测微尺的“0”点与镜台测微尺的某一刻度重合，然后，仔细寻找两尺第2个完全重合的刻度。
计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。
因为镜台测微尺的刻度每格长10μm，所以由下列公式就可以算出所校正的目镜测微尺每格所代表的长度。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目的了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造和使用原理，掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、实验原理微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺（图-1）是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。
镜台测微尺（图20-2）是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上，图1目镜测微尺图2镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1．活材料：酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、枯草杆菌(Baccillussubtilis)染色标本片。
2．器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法1．目镜测微尺的校正把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。
先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使两尺重叠，再使两尺的“0”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。
实验1微生物细胞大小测定及显微镜直接计数法
• 定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的 刻度，计数两重合刻度之间目镜测微尺的 格数和镜台测微尺的格数。因为镜台测微 尺的刻度每格长l0μm，所以由下列公式可 以算出目镜测微尺每格所代表的长度。
• 例如目镜测微尺5小格正好与镜台测微尺5小 格重叠，已知镜台测微尺每小格为l0μm，则 目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/5＝ 10μm。 • 用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测 微尺每小格所代表的长度。
• 计数区由400个小方格组成。
• 每个大方格边长为1mm，其面积为lmm2，盖上盖玻 片后，盖载玻片间的高度为0.1mm，所以每个计 数区的体积为0.1mm3。
• 使用血球计数板计数时，通常测定五个中方格的 微生物数量，求其平均值，再乘以25或16，就得 到一个大方格的总菌数，然后再换算成1毫升菌 液中微生物的数量。 • 因此：每ml菌悬液中含有细胞数= 每个中方格中 细胞平均数（N）×系数（K）×菌液稀释倍数 （d）
• 血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上 有4条槽而构成3个平台。中间较宽的平台，被一 短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个计数 区。 • 计数区的刻度有两种： • 一种是计数区（大方格）分为16个中方格，而每 个中方格又分成25个小方格； • 另一种是一个计数区分成25个中方格，而每个中 方格又分成16个小方格。
• 镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片， 一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即 0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的。校正时， 将镜台测微尺放在载物台上。 • 由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要 经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台 测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此 从镜台测微尺葡 萄球菌
大肠杆菌
微生物细胞的大小测定
目镜测微尺是一块可放在接目镜内的隔板 上的圆形小玻片，其中央刻有精确的刻度， 有等分50小格或100小格两种，每5小格间 有一长线相隔。由于所用接目镜放大倍数 和接物镜放大倍数的不同，目镜测微尺每 小格所代表的实际长度也就不同，因此， 目镜测微尺不能直接用来测量微生物的大 小，在使用前必须用镜台测微尺进行校正， 以求得在一定放大倍数的接目镜和接物镜 下该目镜测微尺每小格的相对值，然后才 可用来测量微生物的大小。
四、操作步骤
1、装目镜测微尺 2、校正目镜测微尺 （1）放镜台测微尺 将镜台测微尺刻度面朝上放在 显微镜载物台上。 （2）先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分 移至视野中央，调节焦距，当清晰的看到镜台测微尺 的刻度后，转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微 尺的刻度平行。利用移动器移动镜台测微尺，使两尺 在某一区域内两线完全重合，然后分别数出两重合线 之间镜台测微尺和目镜测微尺所占格数。用同样的方 法换成高倍镜和油镜进行校正，分别测出在高倍镜和 油镜下，两重合线之间两尺分别所占格数。
2、标定目镜测微尺时，一定要准确对正目镜 测微尺与镜台测微尺的重合线。
五、实验报告
1.将目镜测微尺校正结果填入表格中;
2.在高倍镜下测量酵母菌的大小,填入表格中;
3.思考题:为什么更换不同放大倍数的目镜和 物镜时必须重新用镜台测微尺对目镜测微尺 进行标定?
显微测微尺
（3）计算
由于已知镜台测微尺每格长10um，根据公式 目镜测微尺每格长度（um）=两条重合线间镜台测
微尺的格数×10/两重合线间目镜测微尺的格数
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物镜测微尺：是在一个物镜中央封固的尺，长1毫米 (1000μm)，被分为100格，每格长度是10微米。
Hale Waihona Puke 三、实验方法1、卸下目镜上的透镜，将目镜测微尺装入，再旋上目镜上的透
镜。旋转目镜，使目镜测微尺水平。
2、将物镜测微尺有刻度一面朝上放在载物台上夹好，使测微尺 刻度位于视野中央。调焦至看清物镜测微尺的刻度。 3、小心移动物镜测微尺，对齐目镜测微尺的“0”与物镜测微 尺的某段刻度线，然后仔细寻找目镜测微尺的“50”所对应 的物镜测微尺的刻度线，计数重合刻度之间物镜测微尺的格 数。（通过移动物镜测微尺，重复三次，求出平均格数）
第 一 次 测 量 第 二 次 测 量 第 三 次 测 量 平均格数 的格数 的格数 的格数 低倍镜 （10x10） 高倍镜 （10x40） 格值（um）
2、算出蛙血细胞的长径、短径。
蛙血细胞
长径 格数（格） 长度（um）
短径 格数（格） 长度（um）
低倍镜 （10x10）
高倍镜 （10x40）
三、实验方法
5、按下式计算目镜测微尺每格的长度（μ m）：
目镜测微尺每格的长度（μ m）
物镜测微尺的平均格数 50格（目镜测微尺的格数）
=
X 10
6、从显微镜载物台上取下物镜测微尺，换上细胞装
片，测量，并计算细胞大小。
【作业】 1、分别求出使用10X倍镜，40X倍镜时 目镜测微尺每格代表的长度。
实验一、细胞大小的测量
一、实验目的
学会目镜测微尺的使用 ，掌 握显微测量细胞大小的方法。
二、实验原理
测微尺分目镜测微尺和物镜测微尺，两尺配合使用。 目镜测微尺： 是一个放在目镜像平面上的玻璃圆 片。圆片中央刻有一条线段，此线 被分为50格，这些刻度没有绝对值， 用它测量标本的长度时，必须在显 微镜下，观察物镜测微尺进行标定， 才能代表其真实长度。