5-核苷酸酶的检测和临床意义
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5‘-NT要释放入血必须要经肝胆系统内 的高浓度胆汁酸去垢处理
三.检测方法
钼蓝比色法 化学发光法 酶法 偶联速率法
四.实验原理
5′-核苷酸酶(5′-NT)催化5′-次黄 嘌呤核苷酸水解生成次黄苷和氨,次黄 苷在嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)作用下生 成次黄嘌呤,次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶 (XOD)作用下生成尿酸和过氧化氢 (H2O2),H2O2与4-氨基安替比林(4AA)和TOOS在过氧化物酶(POD)作用下 生成醌亚氨化合物,通过测定相应波长 处吸光度变化值得出样本中5′-NT活性。
5‘-核苷酸酶Biblioteka Baidu5-NT)的检测 和临床意义
一.定义
5‘-核苷酸酶全称5’-核糖核苷酸磷酸 水解酶(5‘-Nucleoticlase, 5’-NU或 5‘-NT)。5’-核苷酸酶(5‘-NT)是一 种对底物特异性不高的水解酶,可作用 于多种核苷酸。主要参与核酸的分解代 谢。能特异性的催化核苷5’-核苷酸酶 和次黄嘌呤核苷酸。
⒊ 特异性高,能协助判断碱性磷酸酶( ALP)增设是肝胆系统疾病,还是骨髓系 统疾病(如骨癌、骨肉瘤、骨转移癌、 佝偻病等)。ALP在肝胆系统疾病和骨骼 系统疾病时均可增高。除5-NT除肝胆系 统疾病增高外,骨骼系统疾病一般均不 升高。
⒋ 有助于鉴别诊断肝细胞性黄疸和阻塞 性黄疸。后者5-NT明显高于前者。
五.标本的采集及保存
1.细胞培养物:离心后收集上清液,并 将标本保存于-20℃。 2.血清:室温放置2小时内或2 - 8 ℃ 24H,1000 x g离心20分钟。 3.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂, 标本采集后30分钟内于1000 x g离心15 分钟。 4.2 - 8 ℃可放置24小时, -20℃可放 置一星期,但应避免反复冻融。 标本溶血会影响最后检测结果,因此溶 血标本不宜进行此项检测。
⒌ 5-NT已作为肝功能常规项目检查进入 临床,将能使临床医生更全面地了解患 者肝脏情况,提高其临床应用价值。
谢谢
5‘-NT在人体的运动,细胞生长发育, 纤维蛋白合成,提高表皮或内皮屏障功 能,神经传递及淋巴细胞的再循环及黏 附,免疫应答等方面均发挥重要的作用。
二.来源和去路
广泛分布在肝、胆、胰、肠、心、脑、 肺、肾、垂体、甲状腺、前列腺、睾丸 等脏器和组织中,定位在细胞膜上,肝 胆系统是血清中5’-核苷酸酶的主要来 源。在肝内主要存在于胆小管和窦状间 隙内。
六.参考范围
速率法:正常成人血清5’-NT酶活性为 :0-11 U/L
钼蓝双色法:健康成年人5’-NT活性为 2-17 U/L,儿童稍低。60岁以上老人的 均值约为青壮年的2倍。
七.临床意义
⒈ 5-NT活性增高常见于原发性和转移性 肝癌、胆道癌、胰腺癌、胆道阻塞、胆 管炎、急、慢性肝炎、肝硬化、药物性 肝损伤。其活性增高可达2~6倍,且与 病情严重程度呈正相关。 ⒉ 5-NT是诊断肝肿瘤非常灵敏的酶学指 标。在病变早期,当肝功能、肝扫描和 有关肝病检查阴性时本酶活性已明显增 高。对于AFP阴性病例,其与AFP互补诊 断肝癌的阳性率可达94%。