体外放射配基结合分析及临床应用

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检验核医学：体外标记分析技术的临床应用

91
12
13.2
ER-、PR+
10
3
30.0
ER+、PR-
125
37
29.6
ER+、PR+
118
89
75.4
__________________________________________________
ＥＲ和ＰＲ与乳腺癌化疗效果的关系(136例)
__________________________________________________
2. 血浆皮质醇(PTF) 3. 尿游离皮质醇(UFF)
四、垂体性腺轴功能测定指标
1. 促黄体生成素(LH) 2. 促卵泡生成激素(FSH) 3. 催乳素(PRL) 4. 孕酮(P) 5. 雌二醇(E2) 6. .雌三醇(E3) 7. 人绒毛膜促性腺激素(HCG) 8. 人绒毛膜促性腺激素－β亚单位(β-HCG) 9. 人胎盘催乳素(HPL)
受体状态
治疗例数
有效例数有效率%
__________________________________________________
ER+
25
3
12.0
PR+
8
0
0
ER-
45
34
75.6
PR-
34
22
64.7
ER-、PR-
24
21
87.5
__________________________________________________
受体在医学研究中的应用--受体与疾病
疾病时受体的变化受体数目的变化受体亲和力的变化受体特异性的变化受体的自身抗体受体-效应器偶联机理异常

实验核医学-体外分析技术

实验核医学
Experimental nuclear medicine
体外分析技术
In Vitro Radioassay
主讲人/制作人：
体外分析技术
In Vitro Radioassay
一、体外放射分析技术二、非放射免疫分析技术三、临床应用
结束
体外放射分析
一、体外放射分析的概念和分类
二、放射免疫分析（RIA) 1、基本原理 2、必备条件 3、质量控制
放射免疫分析Radioimmunoassay（RIA)
一、基本原理：
放射免疫分析是竞争性体外放射分析原理的代表。在体外，以放射性核素标记抗原和非标记抗原，同时与适量的特异性抗体发生的竞争性免疫结合抑制反应。
*Ag + Ab + Ag
*Ag-Ab + *Ag
Ag-Ab十Ag
RIA操作步骤：
1、加样 2、温浴反应 3、分离B/F 4、放射性测量 5、绘制标准曲线，查找待测物浓度
b值稳定，r＞0.99。
4．ED25、ED50及ED75 指标准曲线的结合率在25％、50％及75％时对应的抗原浓度值，
它反映标准曲线的稳定性，有助于批间结果的比较。
5．反应误差关系(RER) 是评价RIA整批误差的综合指标，RER应＜0.04。
6．质控图
WHO要求在一次实验中，有下列情况之一者，其结果应予舍弃：
质量控制包括监测各重要环节的质量、测定误差和结果的可靠性。
（一）、质量控制
1．最高结合率(B0％) 指不加非标记抗原时标记抗原与抗体的结合率，一般要求在30～50％。
2．非特异性结合率(NSB％) 指不加抗体时标记抗原与非特异性物质的结合率，一般要求＜5～10％。

体外放射分析【40页】

者为竞争性，后者为饱和分析。
以酶与底物间的酶促反应为基础的分析方法
主要有两类方法
放射酶分析法：以酶为结合剂，测量配体的含量；
酶的放射化学测定：以放射性标记的底物为配体，测定酶的活性。
竞争性蛋白质结合分析
基本技术
标准品
质的要求与待测配体属同类物质与待测配体有同等的活性和亲和能力纯度高，不含其它杂质、稳定性好
半对数坐标系制图法
制图方法简便，但易导致主观误差。
B/F (%)
Log X
质量控制
Bo％、NSB％、ED50、RER、CV、精密度图、质控样品等。
主要方法
放射免疫分析、免疫放射分析、放射受体分析、受体放射分析、蛋白质竞争结合分析等。
其中以放射免疫分析和免疫放射分的测量，而且可用于具有生物活性的小分子物质的检测，如血药浓度测定等。
基本原理
竞争性结合分析放射免疫分析是体外放射分析最有代表性的一
反应原理
Ligand + Receptor + L*
L.R L*.R
受体放射分析
受体放射分析(receptor radioassay) 是以分析受体的数量和性质为目的一定量受体只能与一定量的标记配体（受体激
动剂和阻断剂）结合，受体具有一定的饱和度根据复合物的最大放射性及所用标记配体的比
已知Ag浓度
非竞争性分析
免疫放射分析是典型的非竞争性体外放射分析。它应用标记抗体作为示踪剂，在反应系统中加入过量的标记抗体、待测物（或标准品）进行全量反应，未结合的标记抗体通过加入免疫吸附剂而去掉，因此，溶液中放射性与待测物的浓度呈正相关。
基本类型
以抗原抗体间的免疫反应为基础的分析技术

体外放射配体结合分析

实
验
AFP放射免疫（快速法）测定
AFP放射免疫（快速法）测定
实验报告
姓名学号期、班级实验名称实验原理实验方法（步骤）实验结果讨论*
AFP放射免疫（快速法）测定
加样
100 μl 100 125 μI-AFP l 抗体 AFP 缓冲液
100μl AFP 10ng/ml
100μl AFP 25ng/ml
单克隆抗体涂被固相载体，形成固相
抗体，通常为试管底部；试管内加入标准品或待测样品，形成固相抗原抗体复合物加入放射性核素标记的单克隆抗体，形成固相抗体-抗原-*抗体复合物剩余的标记单克隆抗体则留于液相中，通过洗管洗去测量试管中的放射性计数，经标准曲线就可查出待测物含量
反应式
*Ag+ Ab + Ag *Ag-Ab+ *Ag
限量
Ag-Ab + Ag
Ag: 待测抗原 *Ag: 标记抗原 Ab: 抗体 Ag-Ab: 抗原抗体复合物 *Ag-Ab: 标记抗原抗体复合物
放射免疫分析技术原理示意
标准曲线
基本试剂
标准抗原
标记抗原
即标准品，与待测物具有相同的化学结构、免疫学活性，是RIA的示综剂， 125I，纯度高，合适的比活性，标记后抗原免疫活性不受破坏特异性高，滴度高，亲和力大
固相-Ab1+Ag （待测）固相-Ab1-Ag +*Ab2
固相-Ab1-Ag -*Ab2+*Ab2
基本特点
标记物为抗体，不影响抗原的免疫活性使用的是单克隆抗体，特异性明显提高单克隆抗体为大分子物质，碘化标记抗体比
抗原容易，产物比较稳定
检测灵敏度较RIA高，且检测范围扩大操作更为简便、快速抗体用量大，成本较高仅适用于蛋白质类大分子物质的检测

检验核医学体外标记分析技术的临床应用

检验核医学体外标记分析技术的临床应用核医学是一门应用核物理学原理和方法，以放射性药剂内摄影和定量测定为特征的医学科学。

体外标记分析技术是核医学的重要组成部分，广泛应用于临床诊断、治疗和研究领域。

本文将探讨核医学体外标记分析技术在临床应用中的重要作用和发展趋势。

一、核医学体外标记分析技术简介核医学体外标记分析技术是通过将放射性标记剂与特定的生物分子结合，在体外对其进行标记分析的一种技术。

这种技术可以通过测定放射性标记剂的浓度，推断出被标记生物分子的性质、数量和分布情况。

常见的核医学体外标记分析技术包括放射性免疫分析、放射性核素标记的DNA检测和靶向药物放射性标记等。

二、核医学体外标记分析技术在临床应用中的重要作用1. 诊断疾病核医学体外标记分析技术在临床诊断中发挥着重要作用。

例如，放射性免疫分析可以通过测定血液中特定抗体的浓度，帮助医生判断免疫系统功能的异常和疾病的发展情况。

靶向药物放射性标记则可以帮助医生评估肿瘤靶向治疗的疗效。

2. 治疗疾病除了诊断，核医学体外标记分析技术还可以用于治疗疾病。

例如，放射性核素标记的DNA检测技术可以用于癌症治疗中的调控基因表达和药物敏感性，从而实现个体化治疗的目标。

3. 研究疾病机制核医学体外标记分析技术在研究疾病机制方面具有重要的应用价值。

通过标记分析生物分子的性质和数量变化，可以揭示疾病的发生发展机制，并为新药研发提供重要数据支持。

三、核医学体外标记分析技术的发展趋势1. 多模态标记分析技术随着医学影像学和分子生物学的发展，多模态标记分析技术成为核医学的发展趋势之一。

多模态标记分析技术通过将不同类型的标记剂结合，可以同时获得多个不同层次的信息，提高诊断的准确性和灵敏度。

2. 分子靶向标记技术分子靶向标记技术是核医学体外标记分析技术的另一个发展方向。

该技术通过标记分析特定靶点的生物分子，可以实现对特定靶点的有效检测和定量测定，为个体化诊疗提供重要依据。

3. 自动化分析系统为了提高标记分析技术的效率和准确性，自动化分析系统逐渐应用于核医学体外标记分析技术中。

体外放射分析

四. 放射免疫分析的质量控制一般包括以下几个方面：一般包括以下几个方面：最高结合率(B0 (B0％ 1．最高结合率(B0％)指不加非标记抗原时标记抗原与抗体的结合率，一般要求在30 50％。 30～抗体的结合率，一般要求在30～50％。非特异性结合率(NSB (NSB％ 2．非特异性结合率(NSB％)指不加抗体时标记抗原与非特异性物质的结合率，一般要求＜ 10％。特异性物质的结合率，一般要求＜5～10％。截距a 斜率b 3．标准曲线直线回归的参数截距a、斜率b和相关系数是标准曲线的主要质控指标，要求a 值稳定， 0.99。 r是标准曲线的主要质控指标，要求a、b值稳定，r＞0.99。 ED25、ED50及指标准曲线的结合率在25％、50 25％、 4．ED25、ED50及ED75 指标准曲线的结合率在25％、50 75％时对应的抗原浓度值，它反映标准曲线的稳定性，％及75％时对应的抗原浓度值，它反映标准曲线的稳定性，有助于批间结果的比较。有助于批间结果的比较。反应误差关系(RER)是评价RIA整批误差的综合指标， (RER)是评价RIA整批误差的综合指标 5．反应误差关系(RER)是评价RIA整批误差的综合指标， RER应 0.04。 RER应＜0.04。连续测定10批以上高、 10批以上高 6．质控图连续测定10批以上高、中、低三种已知浓度的质控血清(QCS)，求出各自的均数±标准差(X±SD)，并画的质控血清(QCS)，求出各自的均数±标准差(X±SD)， (QCS) (X 出质控图，以后每次进行RIA时均要同时测定此高、 RIA时均要同时测定此高出质控图，以后每次进行RIA时均要同时测定此高、中、低 QCS，将测得值标在图上。WHO要求在一次实验中要求在一次实验中， QCS，将测得值标在图上。WHO要求在一次实验中，有下列情况之一者，其结果应予舍弃：三种QCS中有一个测定值＞ QCS中有一个测定值况之一者，其结果应予舍弃：①三种QCS中有一个测定值＞ 3SD；三种QCS中在同一方向上有二种＞2SD②三种QCS QCS中在同一方向上有二种 QCS均在 3SD；②三种QCS中在同一方向上有二种＞2SD②三种QCS均在方向＞1SD。同-方向＞1SD。

【核医学】体外放射分析技术

三、放射测量
• 直接检测技术灵敏度通常较低 • 采用示踪技术进行间接测量 • 37Bq/10-15g，提高比活度可提高灵敏度 • 放射性原子标记到配体或结合剂分子 • 何种核素？何种射线？
非放射定量技术
• 化学发光技术 • 时间分辨荧光分析技术 • 电化学发光技术 • 酶定量技术：灵敏度差。
• 受体放射分析 (receptor radioassay) ：检测受体本身数量及其他参数。
• 放射受体分析(radioreceptor assay）：测受体抗体：如TRAb。
• 四、酶活性放射分析、放射酶促分析 • 五、蛋白结合分析
第三节临床应用
• 一、内分泌系统疾病 • 甲状腺、肾上腺、性腺、垂体、下丘脑 • 二、肿瘤标志物 • 三、神经系统、循环系统、消化系统、泌
• [L]+ [L*]+[B] [LB] +[L*B]
• 2、非竞争结合
•结合在试管或包被珠上
• Sp.Ab1+Ag Sp.Ab1.Ag
• Sp.Ab1.Ag +Ab2* Sp.Ab1.Ag.Ab2*+Ab2*
优点
• 竞争结合： • 节约结合剂用量 • 非竞争结合： • 灵敏度高，试验周期更短，误差更小。
logistic拟合法
3、两类分析系统的比较
标记对象抗体方法学反应动力学标准曲线 NSB影响误差批间比较
RIA
IRMA
抗原
抗体
多克隆，量少单克隆，量大
竞争
非竞争
复杂，不稳定简单，稳定性好
负相关，量程窄正相关，量程较宽
高剂量段
低剂量端
较大
较小
可比性强
可比性差

体外放射分析(检验)-检验核医学

一体外放射分析的概述
（一）特异性结合
1、抗原与抗体 2、配体与受体 3、底物与酶 4、激素与血浆结合球蛋白
（二）结合反应动力学规律
[L]+[B]=[LB]
1、竞争性结合分析 [L]+[*L]+[B]=[LB]+[*LB]
2、非竞争性结合分析
Sp.Ab1+Ag=SpAb1.Ag+*Ab2=Sp.Ab1. Ag.*Ab2+*Ab2
滴度：
结合50%标记抗原时血清的稀释度
单克隆抗体
特点：
特异性高抗体成分专一可反复制备
制备：
1、免疫小鼠，制备脾细胞悬液
2、选择培养，用HAT培养基筛选杂交瘤细胞
3、检测抗体 4、克隆化
（三）分离方法
1、分离方法的要求
1、使结合部分与游离部分尽可能完全分开 2、分得的成分便于作放射性操作 3、分离效果不受外界干扰因素影响 4、操作简便、分离迅速、重复性好 5、试剂来源广泛、价廉易得
（Radio Receptor Assay, RRA）
[L]+[*L]+[B]=[LB]+[*LB]
（一）放射免疫分析原理
*Ag+Ag+Ab =(*Ag—Ab)+(Ag—Ab)+*Ag + Ag
0
条件：
Max
Min
放射
性计
数
1、 *Ag定量、足量
2、 Ab限量 *Ag>Ab
Ag与*Ag-Ab成反比！
体外放射分析指在体外实验条件下，以特
异结合反应为基础，以放射性测量为手段，对生物活性物质进行超微量分析的总称。
特点：灵敏度高、特异性强、精密度好、

放射性配体与受体结合分析实验(RBA)方法

药理室讲座
放射性配体与受体结合分析实验（RBA）方法
刘星华 2011-5-13
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内容
实验定义与原理实验材料与仪器实验方法 Scatchard方程与作图（饱和与竞争实验） RBA的安全问题实验举例
整理ppt
实验定义与原理
定义放射性配基与受体结合分析简称为受体放射分析
整理ppt
实验仪器
组织匀浆机 IKA，T10B S25
漩涡混合器 WH-2
整理ppt
低温高速离心机凯达，TGL20M
超低温冰箱海尔
整理ppt
数显恒温水浴锅金燕，HH-S26S
制冰机 GELIN 型号IMS-50 automatic
ice flakes
整理ppt
电热恒温水温箱
整理ppt
实验材料与仪器
整理ppt
实验材料
动物组织（皮层、海马、纹状体等）仪器（组织匀浆机、旋涡混合器、低温高
速离心机、电热恒温水温箱、-80℃冰箱、制冰机、抽虑瓶、液闪仪等）材料（ 2ml/6ml分离管、10ul/200ul/1ml枪头、微纤维滤纸等）药品（放射性配基、各种非标计化合物等）
整理ppt
RBA的分类
RBA用放射性核素来标记配基，与相应的受体进行特异性结合反应，可对受体的性质进行定性和定量的分析。 1、定性RBA：是通过反应的量效关系的变化来判断受体的类型，单位点或多位点结合式，及受体与配体结合的特点，反应的可逆性、协作性等。 2、定量RBA：是在已知配体与受体反应性质的基础上，通过结合反应，给出一定量的组织或细胞中能与该放射性配体结合的受体数及结合的平衡解离常数或结合位点数（最大结合容量）。
（1）总结合管：100ul膜受体 + 200ul缓冲液 + 10 ul 放射性配体（2）非特异管：100ul膜受体 + 100ul缓冲液 + 100ul非标记配体 + 10 ul 放射性配体（3）受试物管：100ul膜受体 + 100ul缓冲液 + 100ul药物溶液 + 10 ul 放射性配体

体外放射分析

Log-Logist 作图法
• logit Y=a+b logit Y=ln(logX/ 1B/Bo ) a＝截距 b斜率为“-”值 • Y＝结合率 Y与X呈负相关 r为负值，接近1表示曲线质量好
• Logistic 法是log-logit的发展，但克服了loglogit的不足，也是目前认为较好的拟合方法。
• 半对数坐标系制图法制图方法简便，但易导致主观误差。 B/F (%) Log X
• 特异性抗体：亲和力大，滴度高，特异性强 • 标记抗原：纯度高；较高的比活度；放化纯度 >95%;保持免疫活性;标记稳定性好,无核素脱落 • 标准品:与被测物属同一种物质,具有相等的活性,高度纯化;定量要精确(国家标准;药盒标准; 质控标准) • B与F分离技术:完全又快速,非特异性结合低;不易受外界因素的干扰;价廉,操作简便,重复性好 (双抗法,沉淀法,双抗+PEG法,固相分离法,SPA 法,微孔滤膜法) • 放射性测量仪器: 计数器
Diluted multiple of Ab 50％的最大结合率为抗体工作浓度
放射免疫分析
• 基本原理：
放射免疫分析
• RIA竞争结合原理示意图：
Standard curve
• 如果采用系列已知浓度的标准品在相同条件下进行分析，测得各标准点的结合率(B/F)，以结合率对标准品量作图，可以得到一条标准曲线。通过这条标准曲线即可查得未知浓度的待测样品的含量。结合率 50%
体外放射分析
内容提要
• Part one: 体外放射分析技术 • Part two: 非放射免疫分析技术 • Part three: 临床应用
历史
• 1960年美国的Berson和Yalow 将核技术与免疫学技术相结合建立了放射免疫分析法，并首先用于测定血浆胰岛素浓度，由于该法对医学的巨大贡献，1977 年Yalow获得了Nobel奖。

检验核医学：体外放射分析

4.标记抗体浓度
增加标记抗体可缩短反应时间,扩大测量范围,但非特异性结合也二次洗涤
6.血清、电解质和其它溶质的非特异性效应
血清效应:指血清中的有关成份(如IgM或α2微球蛋白能非特异性抑制抗原抗体特异性结合的效应.反应温度越高,血清效应越明显.
的范围，则强烈提示本批实验有系统偏差，应当舍弃后重做。
特异性（specificity)
• 交叉反应的检测干扰物质抑制结合率50%所需浓度与待测物本身抑制50%所需浓度之比即为衡量交叉反应的参数
交叉反应率 [Y ]50 100% [Z ]50
•对cGMP的RIA, ATP无抑制作用，即交叉反应极小， cAMP抑制结合率50%所需浓度为cGMP的100倍，通常就说cAMP对该cGMP抗体的交叉反应为1:100.
方法1
“0”剂量点结合率的均值减去其二倍标准差所对应的剂量值.
方法2
“0”剂量点结合率降低10%后的结合率对应的剂量值为最小可测剂量,如反应参数采用 B/B0，则应以B/B0=90%时对应的剂量为最小可测量
测定10个或10个以上的“零” 标准管，求出各管的结合率（B/T%）和10个管结合率的均数和标准差，用均数减去两个标准差，求其相对应的浓度，即为最小检出值。
体外放射分析
竞争放射分析
*放射免疫分析 *放射受体分析竞争性蛋白结合分析
非竞争放射分析
免疫放射分析酶放射分析放射酶促分析 *非标记免疫分析技术
放射免疫分析
（Radioimmunoassay RIA）
以标记物与被测物及特异性结合试剂发生竞争结合反应，从而对被测
的极微量物质作定量分析。
RIA的特点：
• 灵敏度高可达10-9 ～１0-15g • 特异性强 • 应用范围广 • 操作简便

体外分析技术放射免疫分析

体外分析技术放射免疫分析体外分析技术是指在试管内进行反应从而测定某生物活性物质的超微量分析技术。

该类技术的特点是高灵敏度和高特异性，广泛用于临床和科学研究的很多领域。

应用最多的是：放射免疫分析、免疫放射分析、受体的放射配基结合分析及非放射性免疫分析。

一、原理放射免疫分析法(radioimmunoassay,RIA)的基本原理是，限量标记抗原［*Ag］和可变量的非标记待测抗原［Ag］与定量的特异抗体［Ab］发生竞争结合反应，通过测定复合物的放射性来计算出待测非标记抗原的量。

这一过程可用下式表示：*Λg+Λg+Ab< »［ΛgΛb］*+［ΛgΛb］上述式中，Ab的分子数少于*Ag,因此即使系统中没有Ag,仅有*Ag,当反应达到平衡时，绝大部分(因为是可逆反应，不会是100%)Ab将形成*AgAb复合物。

如果系统中加入Ag,则Ag与*Ag竞争结合Ab,形成AgAb,*AgAb将减少。

Ag越多则*AgAb越少。

实践和理论推导都证明，*AgAb和Ag呈二次方程的函数关系，如以Ag为横坐标，*AgAb(B)或*AgAb占加入总*Ag的％(B%)为纵坐标，是一条斜率逐步由大变小的下降曲线。

如以游离的*Ag(F)或游离*Ag占加入总*Ag的％(F%)为纵坐标，则是一条斜率逐步由大变小的上升曲线。

也可以*AgAb∕*Ag的比值(R)为纵坐标，也是一条斜率逐步由大变小的上升曲线。

分析中，首先以不同量的已知标准品Ag和定量*Ag及限量Ab进行竞争结合反应，得到以B或B%、F或F%、或R为纵坐标的剂量效应曲线(也称标准曲线)，然后以未知样品测得的B或B%、F或F%、或R从曲线上查出相应的剂量。

二、试剂盒基本试剂试剂盒由国家批准的生产单位提供，提供R1A的主要试剂、操作方法、保存条件及保存期限。

使用者应按说明书的要求合理使用。

如果临床工作需要，使用者可以对试剂稀释度、操作步.骤等进行适当修改，但应当对改变了的方案进行精密度、准确度、灵敏度等考核，并作详细记录。

体外放射分析的临床应用

2
三、胃肠及胰腺激素掌握胃泌素、胰岛素、C肽、胰高血糖素、胆囊收缩素、胰多肽的概述、正常参考值和临床意义。四、其它肽类激素掌握生长激素、垂体促性腺激素、人绒毛膜促性腺激素、催乳素、人胎盘泌乳素、促肾上腺皮质激素、降钙素的概述、正常参考值和临床白质掌握肌红蛋白、铁蛋白、甲胎蛋白、β2微球蛋白、白蛋白、免疫球蛋白、β-血小板球蛋白、甲状腺素结合球蛋白、甲状腺球蛋白的概述，正常参考值和临床意义。二、抗体及病原体掌握抗甲状腺球蛋白抗体和抗甲状腺微粒抗体、甲状腺刺激抗体、抗DNA抗体、及乙肝的三个抗原抗体系统的概述、正常参考值和临床意义。
4
二、抗体及病原体掌握抗甲状腺球蛋白抗体和抗甲状腺微粒抗体、甲状腺刺激抗体、抗DNA抗体、及乙肝的三个抗原抗体系统的概述、正常参考值和临床意义。
5
二、肿瘤标志物掌握癌胚抗原及CA-125、CA19-9、PAP的概述、正常参考值和临床意义。三、其它活性物质掌握CAMP、CGMP、胆汁酸、心房利纳因子、前列腺素、血栓素β2 及肾素-血管紧张素的概述、正常参考值和临床意义。
第八章体外放射分析的临床应用
第一节激素类一、下丘脑-垂体-甲状腺轴激素 (一)掌握TT3、TT4、FT3、FT4的概述、正常参考值、临床意义。 (二)掌握TSH、TRH的概述、正常参考值和临床意义。二、类固醇激素掌握皮质醇、醛固酮、T、 R、E2、E3、皮质酮的概述、正常参考值和临床意义。
6

体外放射配基结合分析及临床应用

非标记配基高亲和力高浓度18受体显像配基基本要求半衰期适中发射正电子或单光子sa37tbqmmol动态显像时用生理数学模型可作受体密度的模拟定量分析192021222324受体在医学研究中的应用受体效应器偶联机理异常25受体理论在疾病研究中的应用寻找防治措施26344例乳腺癌内分泌治疗效果与erpr的关系受体状态治疗例数有效例数有效率erpr9112132erpr10300erpr12537296erpr1188975427er和pr与乳腺癌化疗效果的关系136例受体状态治疗例数有效例数有效率er25120prer4534756pr3422647erpr24218752832例乳腺癌er状态与激素治疗关系cytosolnuclear治疗例数反应例数无反应例数221829乳腺癌胞浆er不同水平与激素治疗的关系er含量fmolmgpro有效率1008131004530乳腺癌er状态与内分泌治疗效果的关系erertamoxifen326715nafoxidene71008stilboostrol912117dophrectomy2843274adrenalectomy152219androgens1028222glucocorticoids1532019hypophsectomy914112总有效率1282355457176431degenshein根据乳腺癌受体表达情况和癌转移情况提出如下治疗方案并得到临床广泛采用er腋下淋巴结无转移手术治疗外可不用内分泌治疗要作定期复查
放射配基 + 受体分子
分离配基受体复合物
分析受体数量和亲和力
RBA的分类

定性RBA：通过反应的量效关系及某些参数的变化等来判断受体的类型、单位点或多位点系统、受体与配基相互作用的特点 (可逆或不可逆，受体间的合作作用 )。定量RBA：在已知反应性质的基础上，通过结合反应分析组织或细胞中受体数目（binding site,结合位点数）。

体外配体结合分析

放射免疫分析
一、原理 Ag+Ab + *Ag
AgAb+Ag
*Ag+*AgAb
二、必备条件
（一）抗体(结合剂）：高亲和力、高特异性、高滴度（二）标记抗原
125I,放化纯，长半衰期，标记后不改变抗原活性。（三）标准品
与被测物为同一物质，定量精确，放化纯高（四）B与F 分离技术（五）放射性测量仪
特点：
1 属于非竞争性抗原、抗体结合反应 2 抗原-抗体复合物的量与所加非标记抗
原的量呈正相关 3 在低剂量区不会有不确定因素 4 免疫放射分析法的非特异结合对低剂
量区结合影响大，对分离条件的要求非常严格
二、基本方法
（一）双抗体夹心法（二）标记第三抗体法（三）其他方法
三、RIA与IRMA的比较
体外配体结合分析
概述
20世纪60年代,Berson和yalow,放射免疫分析(RIA),诺贝尔奖. 20世纪70年代,Engvall和Wecman,酶标记免疫分析(EIA) 80年代时间分辨荧光免役分析(TRFIA) 化学发光免役分析(CLIA) 电化学发光免役分析(ECLIA) 微粒体发光免役分析(MLEIA)
摇均匀后，放置待其竞争结合反应达平衡后
2ml 2ml
2ml
2ml
2ml
测总射线（可以测2-3管求均值）
去除上清液测B；也可求出F 画出标准曲线
从标准曲线查出待测品的Ag含量
2ml
2ml
1. 配制一系列已知浓度的标准抗原Ag的反应管，并标明浓度；
2.分别向反应管中加入固定量的 *Ag、Ab；
3.经过一定时间的温育竞争结合反应；
RIA
IRMA
标记物原理抗体量标准曲线达到平衡的速度可测范围应用对象

体外放射分析的临床应用

体外放射分析的临床应用体外放射分析（in vitro radiolabeling）是一种利用放射性同位素标记化合物，并通过测量其放射性衰减来定量分析和测定化合物在生物体内的代谢和动力学特性的方法。

这种技术被广泛应用于医学和生物学领域，为临床诊断和治疗提供了重要的工具和指导。

本文将探讨体外放射分析在临床应用方面的重要性和发展。

体外放射分析技术是通过选择适当的放射性同位素对目标分子进行标记，然后通过计数器或放射性测量设备测量其放射性衰减，从而获得相关的代谢和动力学数据。

借助这项技术，医生和研究人员能够了解药物在体内的分布、转化和清除情况，从而为临床治疗提供科学的依据。

在临床应用方面，体外放射分析技术在药物研发、肿瘤诊断和治疗、心脑血管疾病研究等领域发挥着重要作用。

首先，该技术可以用于药物药代动力学研究，通过测量药物在体内的消除速率和分布情况，进一步优化药物剂量和给药方式，以提高治疗效果和减少不良反应。

其次，体外放射分析还可用于肿瘤标记和显像，通过选择适当的放射性同位素标记肿瘤特异性配体或药物，可以帮助医生准确评估肿瘤的位置、大小和代谢活性，从而为肿瘤的诊断和治疗提供重要信息。

此外，体外放射分析还可以用于心脑血管疾病研究，包括心脏灌注显像、脑血流量测定等，为相关疾病的诊断、治疗和病情监测提供有力支持。

与传统的临床检测方法相比，体外放射分析技术具有一定的优势和特点。

首先，放射性同位素标记物具有极高的灵敏度和特异性，可以在较低浓度下进行检测，从而实现对生物体内微量物质的准确分析。

其次，该技术具有实时动态监测的能力，能够对药物和其他生物分子在生物体内的时空分布情况进行连续观察，揭示其代谢途径和作用机制，为仿真仿真仿真量给药提供重要参考。

此外，由于体外放射分析使用的是放射性同位素标记，其测量结果更具客观性和可比性，能够为临床研究和临床治疗提供科学依据。

尽管体外放射分析技术在临床应用领域具有广阔的前景，但仍然面临一些挑战和限制。