第三章 人工抗体的制备经典.ppt

单克隆性 高度同质 高，与特定 决定簇 结合
较差 简单 不常见 大多数没有
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二、单抗与多抗的比较
特性
适用的血清学实验
供应量 有效抗体含量
（mg/mL）
无关Ig含量 （mg/mL）
其他血清蛋白
多抗
适用大多数 抗体纯度才高
有限 0.1~1.0
10~15
有
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单抗
需适当选择 产生高纯度抗体
嵌合抗体多为 “鼠-
人”类型。
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二、重构抗体：
将鼠抗体超变区基因嵌入人抗体Fab骨架区编 码基因中，再将此DNA片段与人Ig恒定区基因相连， 转染杂交瘤细胞，并表达嵌合的V区抗体。
三、单链抗体：
是将 Ig 的 H 链和 L 链的 V 区基因相 连，转染大肠杆菌表达的抗体分子，又称单链 FV分子。
特点：高特异性、高均一性
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二、单抗与多抗的比较
特性
对免疫原的要求
抗体产生细胞 同质性 特异性
稳定性 标准化 交叉反应 沉淀反应
多抗
免疫原纯度高， 抗体纯度才高
多克隆性 高度异质 较高，与抗原上 多种决定簇结合
较好 较难 很常见
有
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单抗
不纯的抗原即可 产生高纯度抗体
无限 悬浮培养：0.01~0.05 中空纤维：1.0~5.0 小鼠腹水： 1.0~5.0 体外培养液：无 小鼠腹水： 0.5~1.0
体外培养：少量 牛血清白蛋白
小鼠腹水：少量杂蛋白
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三、建立B细胞杂交瘤与单克隆抗体生 产基本过程
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四、单克隆抗体的优势
高度均一性： 纯度很高的均一性抗体
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四、其他基因工程抗体：
如:Ig相关分子：将抗体分子部分片段连接到与抗体 无关的序列上得到。
噬菌体抗体：将已知特异性的抗体分子的所有V 区基因在噬菌体中构建基因库，用噬菌体感染细菌， 模拟免疫选择过程，使具有相应特异性的重链和轻 链可变区在噬菌体表面呈现出来。
五、全套抗体基因库
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第四节 催化抗体
一、概念： 是具有催化活性的免疫球蛋白，也叫抗体
酶。具有抗体的高度选择性和酶的高效催化 性。
优点： 具有抗体的高
度选择性和酶的高 效催化性。
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二、催化抗体的制备：
如：细胞融合法、基因工程抗体技术、引入辅 助因子法等。
三、催化抗体的应用：
高度专一性： 只对抗原分子上某一抗原决定簇起反应。
大量产生及稳定性： 杂交瘤细胞能在体内外无限繁殖之传代。
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五、单克隆抗体的应用
（一）在血清学技术方面。
（二）在免疫学基础研究方面。
（三）在肿瘤治疗方面。如生物导弹。
（四）在抗原纯化方面。
（五）用于制备抗独特型抗体疫苗。
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第三章 抗体的人工制备
人工抗体有四类： 多克隆抗体 单克隆抗体 基因工程抗体 催化抗体
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第一节 多克隆抗体
一、概念： 采用传统免疫方法，将抗原物质经
不同途径注入动物体内，数次免疫后采 血，分离血清，由此获得抗血清即为多 克隆抗体。简称多抗。
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二、多克隆抗体用途
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第三节 基因工程抗体
一、概念： 利用基因工程技术制备的抗体分子，称
为基因工程抗体。这是分子水平的抗体。
优势：去除或减少 无关结构，保留或 增加天然抗体特异 性和生物学活性。
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基本制备过程：
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一、嵌合抗体：
是指在同一抗体分 子中含有不同种属来 源抗体分子片段的抗 体。
如：在抗肿瘤方面的应用。在戒毒上也有 重要应用价值。
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Байду номын сангаас
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1.用于抗原物质的鉴别、定位、分析和提纯。 2.作为疾病的诊断、检疫试剂。 3.作为人和动物的某些疾病的治疗制剂。
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三、多克隆抗体制备过程
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第二节 单克隆抗体
一、概念： 是指由一个B细胞分化增殖的子代细胞
（浆细胞）产生的针对单一抗原决定簇的抗 体，简称单抗。