三血液分析仪检查PPT课件
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血液分析仪检验ppt课件
1．电阻抗法 即库尔特原理（图3-1）。电阻抗 法是三分群血液分析仪的核心技术，可准确测出细胞 （或类似颗粒）的大小和数量。
电阻抗法还与其他 检测原理组合应用于 五分类血液分析仪中。
图3-1 电阻抗法细胞计数原理
例如，电阻抗法红细胞 计数和血小板计数是在相应 通道内进行计数，并根据二 者体积不同，采用浮动界标 法进行区分（图3-2）。
电导性特别有助 于鉴别体积相同、但 内部结构 不同的细胞 （或相似体积的颗粒。
图3-4 射频电流检测原理
（二）光（化）学检测原理 1．激光散射法 将稀释、染色（化学染色或核酸
荧光染色）、球形化的细胞悬液注入鞘液流中央，单个 细胞沿着悬液和鞘液流 两股液流整齐排列，以 恒定流速定向通过石英 毛细管，即流体动力学 聚焦技术（图3-5） 。
第一节 血液分析仪的检测原理
现代血液分析仪综合应用了电学和光（化）学两 大原理，用以测定血液有形成分（细胞）和细胞内容 物（血红蛋白）。
电学检测原理包括电阻抗法和射频电导法； 光（化）学检测原理包括激光散射法和分光光度 法。 激光散射法检测的对象有2类：染色的和非染色的 细胞核、胞质颗粒等成分。
一、电学检测原理
第三章 血液分析仪检验
自动血液分析仪（AHA）[血细胞计数仪（blood cell counter）] ,是临床检验最常用的筛检仪器之一 。
传统的显微镜血细胞计数或分类方法: 速度慢、误差大、影响因素多，且难以满足临床 大量标本检测需求。 AHA可进行：
①全血细胞计数及其相关参数的计算。②白细胞分类。③血细胞计 数和分类的扩展功能，包括：有核红细胞计数、网织红细胞计数及其相关 参数检测；幼稚粒细胞、未成熟粒细胞、造血干细胞计数；未成熟血小板 比率；淋巴细胞亚型计数；细胞免疫表型检测等。
电阻抗法还与其他 检测原理组合应用于 五分类血液分析仪中。
图3-1 电阻抗法细胞计数原理
例如，电阻抗法红细胞 计数和血小板计数是在相应 通道内进行计数，并根据二 者体积不同，采用浮动界标 法进行区分（图3-2）。
电导性特别有助 于鉴别体积相同、但 内部结构 不同的细胞 （或相似体积的颗粒。
图3-4 射频电流检测原理
（二）光（化）学检测原理 1．激光散射法 将稀释、染色（化学染色或核酸
荧光染色）、球形化的细胞悬液注入鞘液流中央，单个 细胞沿着悬液和鞘液流 两股液流整齐排列，以 恒定流速定向通过石英 毛细管，即流体动力学 聚焦技术（图3-5） 。
第一节 血液分析仪的检测原理
现代血液分析仪综合应用了电学和光（化）学两 大原理，用以测定血液有形成分（细胞）和细胞内容 物（血红蛋白）。
电学检测原理包括电阻抗法和射频电导法； 光（化）学检测原理包括激光散射法和分光光度 法。 激光散射法检测的对象有2类：染色的和非染色的 细胞核、胞质颗粒等成分。
一、电学检测原理
第三章 血液分析仪检验
自动血液分析仪（AHA）[血细胞计数仪（blood cell counter）] ,是临床检验最常用的筛检仪器之一 。
传统的显微镜血细胞计数或分类方法: 速度慢、误差大、影响因素多，且难以满足临床 大量标本检测需求。 AHA可进行：
①全血细胞计数及其相关参数的计算。②白细胞分类。③血细胞计 数和分类的扩展功能，包括：有核红细胞计数、网织红细胞计数及其相关 参数检测；幼稚粒细胞、未成熟粒细胞、造血干细胞计数；未成熟血小板 比率；淋巴细胞亚型计数；细胞免疫表型检测等。
血液常规检查PPT课件.ppt
血液分析仪法 最新血液分析仪，采用流式 细胞法也可对Ret作分类计数，并提供与 网织红细胞相关的多个参数：
LFR、MFR、HFR 网织红细胞成熟指数（reticulocyte maturity
index， RMI）RMI=（MFR+HFR）/LFR×100
网织红细胞计数的临床意义
clinical significance of reticulocyte count
（9） 缗钱状红细 胞(rouleaux formation)：见于 血浆中纤维蛋白原 和免疫球蛋白增高 性等疾病。
（ 10 ） 裂 红 细 胞 (schistocyte) ： 红 细 胞 碎片（cell fragments），有各种形态 如刺形(burr)、盔形(helmet)等。见于 弥漫性血管内凝血、微血管病性溶血性 贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血、巨 幼细胞性贫血、严重烧伤。正常人＜2%。
<32
缺
四 、 红 细 胞 沉 降 率 （ erythrocyte
sedimentation rate，ESR，简称血沉）
手工法：指离体抗凝血静置 后，红细胞在单位时间内沉 降的速度。
血沉过程一般分为3期： 缗钱状红细胞形成期：一般要经过数 分钟至10min 快速沉降期：形成缗钱状红细胞以等 速下降，约40min 细胞堆积期：又称缓慢沉积期或挤紧 期，此时红细胞堆积在试管底部。
肾上腺皮质功能亢进（库欣病），可能与 皮质激素刺激骨髓使红细胞生成偏高有 关、药物肾上腺素、糖皮质激素、雄激 素等。
(3）相对性红细胞增多
（三）网织红细胞（reticulocyte, Ret，RET）计数
网织红细胞reticuBiblioteka ocyteMiller窥盘
LFR、MFR、HFR 网织红细胞成熟指数（reticulocyte maturity
index， RMI）RMI=（MFR+HFR）/LFR×100
网织红细胞计数的临床意义
clinical significance of reticulocyte count
（9） 缗钱状红细 胞(rouleaux formation)：见于 血浆中纤维蛋白原 和免疫球蛋白增高 性等疾病。
（ 10 ） 裂 红 细 胞 (schistocyte) ： 红 细 胞 碎片（cell fragments），有各种形态 如刺形(burr)、盔形(helmet)等。见于 弥漫性血管内凝血、微血管病性溶血性 贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血、巨 幼细胞性贫血、严重烧伤。正常人＜2%。
<32
缺
四 、 红 细 胞 沉 降 率 （ erythrocyte
sedimentation rate，ESR，简称血沉）
手工法：指离体抗凝血静置 后，红细胞在单位时间内沉 降的速度。
血沉过程一般分为3期： 缗钱状红细胞形成期：一般要经过数 分钟至10min 快速沉降期：形成缗钱状红细胞以等 速下降，约40min 细胞堆积期：又称缓慢沉积期或挤紧 期，此时红细胞堆积在试管底部。
肾上腺皮质功能亢进（库欣病），可能与 皮质激素刺激骨髓使红细胞生成偏高有 关、药物肾上腺素、糖皮质激素、雄激 素等。
(3）相对性红细胞增多
（三）网织红细胞（reticulocyte, Ret，RET）计数
网织红细胞reticuBiblioteka ocyteMiller窥盘
血细胞分析仪测定原理与参数解析ppt课件
射频电导法结合其他检测原理一起
应用于血细胞分析仪中。
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射频电流检测原理
9
三、激光散色法流式细胞术检测原理
➢ 将经试剂稀释、染
色、球形化的细胞（或
其他颗粒）悬液注入鞘
液流中央，单个细胞随
悬液和鞘流液两股液流
整齐排列，以恒定流速
定向通过石英毛细管。
鞘流技术
1.检测光；2.细胞流；3.前鞘流；
血细胞分析仪测定原理与参数解析
➢太航医院检验科 ➢乔军军
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1
➢简 介
➢血细胞分析仪检测原理
➢血细胞分析仪检测参数原理
➢检测参数（报警）
➢临床应用
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2
➢简 介
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3
➢ 自动血细胞分析仪,早年称血细胞技术
仪，已是目前国内外临床检验最常用的筛检 仪器之一。
➢
20世纪50年代初，美国W.H.Coulter
光检测器
接受来自各种角度的散射光或吸收光信号，并转换成相应 特征的电信号
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13
➢血细胞分析仪检测参数原理
一、白细胞系列参数检测原理
二、成熟红细胞系列参数检测原理
三、血小板系列参数检测原理
四、血红蛋白浓度测定检测原理
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14
一、白细胞系列参数检测原理
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15
1、流式细胞术、电阻抗、射频和特殊细胞染色法 检测通道：
➢ “精度高、速度快、易操作、功能强”
是血细胞分析仪的强劲优势，还可和血涂 片制备和染色仪进行组合，由后者完成血 细胞分析仪检测后的形态学复检。
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5
➢ 现代血细胞分析仪的功能有:1.全血细
常用实验室检查血液PPT课件
1. 标本采集法 皮肤采血或静脉采血。 2. 参考值 (100～300) ×109/ L
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THANK YOU
2019/8/15
（二）红细胞比容测定 红细胞比容（Hct)是测定红细胞在全血
中所占体积的百分比，红细胞比容的多少主要 与红细胞数量及其大小有关。 1. 参考值 成年男性：0.40～0.50L/L，平均0.45L/L； 成年女性：0.35～0.45L/L，平均0.40L/L。
2. 临床意义
由于外周血中白细胞的组成以中性粒细胞 为主，故白细胞的增多或减少通常与中性粒细 胞的增多或减少有着密切的关系和相同意义。
（1）中性粒细胞( neutrophil, N ) 中 性粒细胞具有活跃的变形运动和吞噬杀菌 能力，在机体防御与抵抗病原菌侵袭过程 中起重要作用。
1）中性粒细胞增多
①生理性增多：见于新生儿、妊娠及 分娩时、寒冷、酷热、饱餐、剧烈运动后 等，多为一过性。
1）相对性红细胞增多：常因血浆中水分 丢失，使血液中有形成分相对增加所致。如 连续呕吐、频繁腹泻、多汗、多尿、大面积 烧伤等。
2）绝对性红细胞增多：常因各种生理、病 理原因引起的缺氧所致，生理性见于胎儿、 新生儿、高原生活、剧烈的体力活动；病理 性见于严重的肺气肿、肺源性心脏病和某些 先天性心脏病、真性红细胞增多症等。
2）病理性减少：可由造血原料不足、造 血功能障碍或红细胞丢失、破坏过多等原 因引起。见于缺铁性贫血、再生障碍性贫 血、溶血性贫血和失血性贫血等。
3）其他疾病：慢性炎症性疾病、霍奇金 病、器官衰竭等。
（2）红细胞与血红蛋白增多：是指单位容 积血液中红细胞数与血红蛋白含量高于参考 值高限。
第一章 血液检验
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（二）红细胞比容测定 红细胞比容（Hct)是测定红细胞在全血
中所占体积的百分比，红细胞比容的多少主要 与红细胞数量及其大小有关。 1. 参考值 成年男性：0.40～0.50L/L，平均0.45L/L； 成年女性：0.35～0.45L/L，平均0.40L/L。
2. 临床意义
由于外周血中白细胞的组成以中性粒细胞 为主，故白细胞的增多或减少通常与中性粒细 胞的增多或减少有着密切的关系和相同意义。
（1）中性粒细胞( neutrophil, N ) 中 性粒细胞具有活跃的变形运动和吞噬杀菌 能力，在机体防御与抵抗病原菌侵袭过程 中起重要作用。
1）中性粒细胞增多
①生理性增多：见于新生儿、妊娠及 分娩时、寒冷、酷热、饱餐、剧烈运动后 等，多为一过性。
1）相对性红细胞增多：常因血浆中水分 丢失，使血液中有形成分相对增加所致。如 连续呕吐、频繁腹泻、多汗、多尿、大面积 烧伤等。
2）绝对性红细胞增多：常因各种生理、病 理原因引起的缺氧所致，生理性见于胎儿、 新生儿、高原生活、剧烈的体力活动；病理 性见于严重的肺气肿、肺源性心脏病和某些 先天性心脏病、真性红细胞增多症等。
2）病理性减少：可由造血原料不足、造 血功能障碍或红细胞丢失、破坏过多等原 因引起。见于缺铁性贫血、再生障碍性贫 血、溶血性贫血和失血性贫血等。
3）其他疾病：慢性炎症性疾病、霍奇金 病、器官衰竭等。
（2）红细胞与血红蛋白增多：是指单位容 积血液中红细胞数与血红蛋白含量高于参考 值高限。
第一章 血液检验
血气分析仪使用ppt课件
成PCO2。
（4）PO2电极
是一种克拉克电极（Clark electrode），由铂
（阴极）、银/氯化银（阳极）组成，装在一有机玻璃套内，内部充满
PO2电极缓冲液，套前端覆盖一层能选择性渗透O2的膜，成分是聚丙 烯或聚乙烯或聚氟乙烯。PO2电极原理与极谱分析原理相同，以氧化 还原为依据。当外加电压达一定值时，O2在阴极表面被还原产生电流， 发生极化现象，标本的氧离子渗过膜扩散到阴极表面，发生去极化作
PCO2代表酸碱平衡失调的呼吸因素，其改变可直接引 起pH的变化。PaCO2 代表肺泡通气功能： 1.判断呼吸衰 竭类型与程度的指标；2.呼吸性酸碱平衡失调的指标；3. 代谢性酸碱失调的代偿反应。
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7．二氧化碳总量（TCO2） 【参考范围】
动脉血：23～27mmol/L，均值25mmol/L；静脉血： 24～29mmol/L，均值27mmol/L。
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7
2）气体混合器供气方式（内配气方式）：是将空 气压缩机产生的压缩空气和气瓶送来的纯CO2气体 用仪器本身的气体混合器产生定标气体的。产生的 气体也要经湿化器饱和湿化后，再送到测量室中， 对PCO2和PO2电极进行定标。
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8
（2）液路系统：有两种功能：一是提供pH电极系 统定标用的两种缓冲液；二是自动将定标和测量 后停留在测量毛细管中的液体冲洗干净。通常有 四个分别盛放缓冲液Ⅰ、缓冲液Ⅱ、冲洗液和废 液的瓶子。有的仪器还配有专门的清洁液。血气 分析仪一般均采用蠕动泵抽吸液体。电磁阀用来 控制液体的通断。转换装置则在微机控制下，让 不同液体按预先设置的程序进入测量室。
套头部为co透气膜成分是聚四氟乙烯或硅橡胶膜可选择性透过co分子让其溶解水化解离至平衡从而增加h浓度使ph下降并被测定结果换算成pco电极是一种克拉克电极clarkelectrode由铂阴极银氯化银阳极组成装在一有机玻璃套内内部充满po电极原理与极谱分析原理相同以氧化还原为依据
血细胞分析仪校准课件
携带污染率是指不同浓度样品间连续测定的相互影响。
谢谢！
仪器主要由机械系统、电学系统、检测系统及控制系统等组成。
6.3 检定项目
首次检定和后续检定： 1.通用技术要求 2.空白值 3.携带污染率 4.示值误差 5.重复性
6.4 检定方法 检查。 6.4.2 检定前准备 根据血细胞标准物质证书要求,将其在检定室内进行温度平 衡。参照仪器说明书对仪器进行预热,各开关和旋钮进行预 调。仪器自检正常,并按日常程序进行标定。对于有模式选 择功能的仪器,将其设定为全血测量模式。仪器应使用原厂 或可证明有效性的试剂。 6.4.3 空白值的检定 取适量的仪器空白稀释液,置于清洁量杯中,连续测量4次。 舍去第1次测量值,记录其余3次测量结果的最大值,即为 RBC、WBC、PLT、HGB的空白值。
血细胞分析仪 检定
血细胞分析仪介绍
血细胞分析仪可以测量人 体血液中的 红细胞计数 (RBC)、 白细胞计数 (WBC)、 血小板计数 (PLT)、 血红蛋白浓度 (HGB)等, 主要应用于医院及科研等 部门的血液检验。 又叫血液细胞分析仪、血 球仪、血球计数仪等。
仪器中血细胞计数的测量方法有电阻抗法、激光散射法、荧光染色法等。较为广 泛采用的是电阻抗法,利用宝石小孔作为传感器,当传感器吸取定量的血细胞样品液后, 便将血细胞数转换成对应的电脉冲数。电脉冲经放大、电压甄别和整形后,通过测定电 脉冲数就确定了血细胞计数。血红蛋白浓度的测量一般采用比色原理,利用光电元件作 为传感器,由传感器将血红蛋白浓度的变化转换成对应电压信号的变化,电压信号经放 大运算后,通过测量电压变化的大小确定血红蛋白的浓度。
血细胞分析仪培训PPT课件
临床应用价值
一、诊断临床疾病 WBC HGB和RBC PLT 二、常规检查 判断身体的健康情况和免疫能力
临床应用
血细胞参数的临床意义
红细胞计数： 1. 生理变异：随年龄和性别不同有差异。 新生婴儿、位处高原、情绪激动可使红细胞增加。 2. 病理意义：先天性心脏病、慢性肺疾患、慢性一氧化碳中毒、高原病等慢性缺氧可刺激红细胞生成引起红细胞增加。严重呕吐、腹泻等引起脱水时，血液浓缩，红细胞相对增多。反之，慢急性失血缺乏造血原料，骨髓造血障碍等引起的贫血时，红细胞数减少。 白细胞计数： 1. 生理变异：随年龄不同时间不同，季节不同，变异较大。早上低、下午高，饭前较饭后低，冬季较夏季高，激烈运动及体力劳动都可使白细胞数增多。 2.病理意义：急性化脓性感染，如脓肿、扁桃体炎、肺炎、阑尾炎 、脑膜炎、败血症等白细胞数增多。外烧伤，手术后，尿毒症等也会增高。 障碍性贫血，部分急性白血病等造血干细胞疾病，某些传染性疾病如伤寒、黑热病、流感、传染性肝炎等白细胞数减少。
血细胞分析原理 血小板分析原理
阻抗法
电阻阻抗法计数原理
血细胞分析仪是利用小孔换能装置实现的,是一个用阻抗法计数的核心部件---阻抗法测试传感器（见下页示意图），管内充满导电液体，两电极接上恒流电源，中部为一小孔，小孔孔径与细胞成比列，在负压的作用下，细胞通过小孔瞬间，排开等体积的电解液，使电解液的等效电阻瞬间变大，这个变大的电阻在恒流源作用下引起一个等比例增大的电压。细胞离开小孔电解液的等效电阻又恢复正常，直到下一个细胞到达小孔，这样细胞连续的通过小孔，就在电极两端产生一连串的电压脉冲。脉冲的个数与通过小孔的细胞数相当，脉冲的幅度与细胞的体积成正比。将这些脉冲经过整形、放大，计算、储存、处理，就得到了细胞分类、计数的原始数据。
一、诊断临床疾病 WBC HGB和RBC PLT 二、常规检查 判断身体的健康情况和免疫能力
临床应用
血细胞参数的临床意义
红细胞计数： 1. 生理变异：随年龄和性别不同有差异。 新生婴儿、位处高原、情绪激动可使红细胞增加。 2. 病理意义：先天性心脏病、慢性肺疾患、慢性一氧化碳中毒、高原病等慢性缺氧可刺激红细胞生成引起红细胞增加。严重呕吐、腹泻等引起脱水时，血液浓缩，红细胞相对增多。反之，慢急性失血缺乏造血原料，骨髓造血障碍等引起的贫血时，红细胞数减少。 白细胞计数： 1. 生理变异：随年龄不同时间不同，季节不同，变异较大。早上低、下午高，饭前较饭后低，冬季较夏季高，激烈运动及体力劳动都可使白细胞数增多。 2.病理意义：急性化脓性感染，如脓肿、扁桃体炎、肺炎、阑尾炎 、脑膜炎、败血症等白细胞数增多。外烧伤，手术后，尿毒症等也会增高。 障碍性贫血，部分急性白血病等造血干细胞疾病，某些传染性疾病如伤寒、黑热病、流感、传染性肝炎等白细胞数减少。
血细胞分析原理 血小板分析原理
阻抗法
电阻阻抗法计数原理
血细胞分析仪是利用小孔换能装置实现的,是一个用阻抗法计数的核心部件---阻抗法测试传感器（见下页示意图），管内充满导电液体，两电极接上恒流电源，中部为一小孔，小孔孔径与细胞成比列，在负压的作用下，细胞通过小孔瞬间，排开等体积的电解液，使电解液的等效电阻瞬间变大，这个变大的电阻在恒流源作用下引起一个等比例增大的电压。细胞离开小孔电解液的等效电阻又恢复正常，直到下一个细胞到达小孔，这样细胞连续的通过小孔，就在电极两端产生一连串的电压脉冲。脉冲的个数与通过小孔的细胞数相当，脉冲的幅度与细胞的体积成正比。将这些脉冲经过整形、放大，计算、储存、处理，就得到了细胞分类、计数的原始数据。
血细胞及血液分析仪基础PPT课件
群落分界不清，有/无分类数据
单一群落浓集/区域扩展
警示B、E以及 白细胞信息 幼稚细胞增多 警示杂乱
警示原始/ 幼稚细胞
警示成熟血 细胞/异淋↑
血小板大多增高
贫血伴有血小板减少
RBC/PLT正常或略低
（伴有幼红细胞）
显微镜确认细胞类别/数量多寡
显微镜观察
骨髓增殖肿瘤 重度核左移？
恶性血液病 溶血危象
血细胞及血液分析仪基础
——图形和警示的分析与处理
1
引言
• 血细胞分析最基本的实验室检查方法就是血 常规检测，而做血常规用到的最基本的仪器是 血细胞分析仪。今天要和大家一起探讨的是用 血细胞分析仪做出来的血常规结果如何进行血 细胞分析。临床医生习惯看的是数据，而我们 检验人员主要分析的不是那些数据，而是附在 报告上的图形和警示。
28
血涂片观察和分类
白细胞分类
(n=200)
中性杆状核
1%
中性分叶核
68.5%
淋巴细胞
23.5%
单核细胞
4%
嗜酸粒细胞
2%
嗜碱粒细胞
1%
血涂片镜检 分析
镜下可见红细胞 内出现明显的疟 原虫环状体、配 子体、裂殖体等
29
三、白细胞图形和警示
临床信息
患者，女，23岁，于半 月前发现双下肢散在瘀 斑，伴牙龈出血。无鼻 出血，无发热；有头晕、 乏力；近两次月经量偏 多。以”出血原因待查” 而到本院就诊。
2%
嗜碱粒细胞
0%
血涂片镜检 分析
镜下可见白细胞及 血小板形态无明显 异常的变化，红细 胞出现明显的聚集 现象
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工作流程
红细胞图形
图形 典型
血常规血细胞分析仪直方图ppt课件
桑葚状。 • PH对红细胞的影响： • 酸性尿中，红细胞膜脂质内层面积增加，体积变小。碱性
红细胞 吞噬细胞
白细胞
.
上皮细胞
33
1.红细胞
• 未染色的正常红细胞为双凹圆盘状，淡黄色，直径大约 7～8μm
• 渗透压对红细胞的影响： • 低渗透压尿中红细胞胀大，使血红蛋白溢出，仅留下细胞
膜，成为大小不等的空环形或面包圈样，称为影红细胞。 • 高渗透压尿中红细胞皱缩，体积变小，似锯齿形、棘形或
.
24
.
25
尿液分析的内容
➢ 尿液理学检查 ➢ 化学检查 ➢ 显微镜形态学检查
.
26
一、尿液的理学检查
☺包括对尿量、颜色、透明度、比密、气味、 （酸碱度）、渗透量、电导率等物理指标 进行分析检验。
.
27
二 尿液的常规化学检查
☺尿液干化学检验项目主要有：pH、比密、 蛋白质、葡萄糖、酮体、胆红素、尿胆原、 亚硝酸盐、红细胞（潜血）、白细胞（粒 细胞酯酶）；维生素C。
.
28
干化学检查和镜检
• 已经有很多研究和文献证明，尿干化学检查中的红 细胞和白细胞项目，不能取代尿液有形成分的检查， 尿液干化学检查的所有内容也都是过筛性检查内容， 并不能取代显微镜检查内容；而显微镜检查也不能 取代化学检查。
• 在某些情况下干化学检查与湿化学检查的敏感性、 特异性和应用价值也有不同。
– 尽可能同一体位（血红蛋白、血细胞比容、红 细胞计数于站位时增加）、一定时间和近似生 理条件下采血
.
3
血细胞分析仪
血细胞分析仪实质上是指
对一定体积内血细胞数量及异
质性进行分析的仪器，包括血
细胞计数与分类、血红蛋白测
红细胞 吞噬细胞
白细胞
.
上皮细胞
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1.红细胞
• 未染色的正常红细胞为双凹圆盘状，淡黄色，直径大约 7～8μm
• 渗透压对红细胞的影响： • 低渗透压尿中红细胞胀大，使血红蛋白溢出，仅留下细胞
膜，成为大小不等的空环形或面包圈样，称为影红细胞。 • 高渗透压尿中红细胞皱缩，体积变小，似锯齿形、棘形或
.
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尿液分析的内容
➢ 尿液理学检查 ➢ 化学检查 ➢ 显微镜形态学检查
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一、尿液的理学检查
☺包括对尿量、颜色、透明度、比密、气味、 （酸碱度）、渗透量、电导率等物理指标 进行分析检验。
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二 尿液的常规化学检查
☺尿液干化学检验项目主要有：pH、比密、 蛋白质、葡萄糖、酮体、胆红素、尿胆原、 亚硝酸盐、红细胞（潜血）、白细胞（粒 细胞酯酶）；维生素C。
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干化学检查和镜检
• 已经有很多研究和文献证明，尿干化学检查中的红 细胞和白细胞项目，不能取代尿液有形成分的检查， 尿液干化学检查的所有内容也都是过筛性检查内容， 并不能取代显微镜检查内容；而显微镜检查也不能 取代化学检查。
• 在某些情况下干化学检查与湿化学检查的敏感性、 特异性和应用价值也有不同。
– 尽可能同一体位（血红蛋白、血细胞比容、红 细胞计数于站位时增加）、一定时间和近似生 理条件下采血
.
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血细胞分析仪
血细胞分析仪实质上是指
对一定体积内血细胞数量及异
质性进行分析的仪器，包括血
细胞计数与分类、血红蛋白测
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电子血细胞计数仪。还产生了血红蛋白仪。
3、20世纪70年代 检测血小板的仪器Baker-810 4、20世纪80年代，可打印WBC、RBC、PLT
体积分布直方图。 5、20世纪90年代，白细胞分类的开发（二分
类、三分类）；将网织红细胞检测技术用于 血细胞分析仪；生产了血液学全自动系统。 6、现在，白细胞五分类，仪器组合化
3. 甄别 利用甄别器根据阈值调节器提供的 参考电平，将低于参考电平的假讯号（细 胞碎片，杂质微粒）去掉。
4. 整形 通过整形器作用，将脉冲讯号波形 修整成一致标准的平顶波，才能触发电路
5 计数 血细胞的脉冲信号，经过放大、甄 别、整形后，送入计数系统，得出计数结 果。
电阻抗分析仪的主要应用 原理，并与光学检测原理组合应用于五分 类血液分析仪中。
用高频电磁探针渗入细胞膜脂质可测定细胞 的导电性，提供细胞内部化学成分、细胞核 和细胞质、颗粒成分等特征信息。
四、分光光度法
Lambert-Beer定律：A=lg(I0 / I) A:吸光度，或称光密度；I0：单色入射光强度；
I ：透过光强度
分光光度法仪器的组成：单色光源、检测池和 比色容器、光检测器。
2、鞘流 维持颗粒于液流中央，顺序、单个、 恒速向前流动，即流体动力学聚焦。
3、细胞悬液 被检测细胞（颗粒）的悬 液，由气压导入流动池。
4、光检测器 接受来自各种角度的散射 光或吸收光信号，并转换成相应特征的 电信号
三、射频电导法
射频（radio frequency, RF) 指射频电流， 是每秒变化大于10 000次的高频交流电磁波。 高频电流能通过细胞壁。
通常把标本流的流速控制在10m/s以内，就 能保持标本流处于稳流状态。
外面包被有高速流动的鞘液，实现标本与 鞘液稳定的同轴流动状态。
同时利用液流聚焦原理，使标本流直径变 小，通常只有10～20μm，避免细胞多个 重叠进入检测区。
激光散射法系统基本组成
1、光源 气体（氦－氖）激光或固体（半导 体）激光（单色光）；钨光源（多色光）。
当有一个细胞通过小孔时，由于电阻增 加，于瞬间引起电压变化——通过脉冲。
细胞体积越大，脉冲振幅越高；细胞数 量越多，脉冲数量也越多。
脉冲信号经过下列步骤，得出细胞计数 结果：
1. 放大 由于血细胞通过微孔时产生的脉冲 信号微弱，必须通过放大器将讯号放大。
2. 2. 阈值调节 在一定范围内调节参考电平 的大小，使计数结果尽可能符合实际。
⑥计数系统 将整形后的血细胞脉冲信号显 示为不同类群的细胞数。
二、激光散射法
激光散射法应用了流式细胞术(flow cytometry, FCM) 检测原理。
流式细胞术检测原理：细胞通过激光束被照射 时，产生与细胞特征相应的各种角度的散射 光。对经信号检测器接收的散射光信息进行 综合分析，即可准确区分正常类型的细胞。
血细胞分析仪近年来的发展变化
1. 血常规检验多参数化 2. 多功能合成扩展 3. 检测速度的提高 4. 方法的改进和进展 5. 应用的方便性
血液分析仪优势 检测项目多 速度快 精度高 易操作
血液分析仪功能： ①全血细胞计数功 能。 ②白细胞分类功能。 ③扩展功能。
§2 检测原理
检测原理
电阻抗法 电学
流式细胞仪的技术特点
流式细胞仪在设计上采用了许多独特的技术， 比如液流系统、光路系统、信号测量和细胞 分选方面都有自己的技术特点。着重讲述液 流系统——鞘流原理。
雷诺系数 Re
Re＝d ρν/η d: 管子的直径 ρ：液体的密度 ν：液体的流速 η：液体的粘滞系数
Re<2300， 液流处于稳流状态 Re>2300， 液流处于湍流状态
分光光度法是所有类型的血细胞分析仪检测 Hb 的原理：被稀释的血液加入溶血剂后， 红细胞溶解，释放血红蛋白，后者与溶血剂 结合形成Hb衍生物，在特定波长（530～ 550nm）下比色，吸光度的变化与液体中 Hb含量成比例。
第三章 血液分析仪检查
目的要求
1、掌握：血液分析仪各项参数的缩写、参考 值、直方图概念。
2、熟悉：血液分析仪电临床应用、检测参数、 方法学平价、血细胞直方图正常形态特点及常 见异常形态、临床应用。
3、了解：血液分析仪的进展。
重点 : 1、血液分析仪测定的原理、方法 2、血液分析仪各参数临床意义
三分群血液分析仪基本组成
① 信号发生器 各种微粒通过检测小孔产生电 阻抗脉冲信号的检测源。
②放大器 将血细胞微弱脉冲信号放大以触发 电路系统。
③阈值调节器 调节能区分不同群细胞合适的 信号电平。
④甄别器 去除非参考电平的各种假信号以 提高计数的准确性。
⑤整形器 将不一致的脉冲波形信号调整为 标准的波形后触发计数电路系统。
半导体激光的流式细胞术
侧向荧光 （RNA/DNA含量）
侧向散射
（细胞内部结构，如 核的大小）
激光 （波长633nm）
前向散射光 （细胞大小）
低角度散射光（前向散射光）：反映细胞的 数量和表面体积大小。
高角度散射光（侧向散射光）：反映细胞的 内部颗粒、细胞核等复杂性。
激光散射法在区别体积相同而类型不同 的细胞特征时，比电阻抗法分群更加准 确。故激光散射法已成为现代五分类血 液分析仪的主要检测原理之一。
难点: 血液分析仪检验的质控
§1 血液分析仪的发展史
自动血液分析仪（automated hematology analyzer, AHA)，早年称血细胞计数仪（blood cell counter)，是目前国内外临床检验最常用的 筛检仪器之一。
1、传统采用手工方法 2、20世纪50年代，美国的Coulter设计了第一台
射频电导法
激光散射法 光学
分光光度法
一、电阻抗法
血细胞计数原理即库尔特原理（Coulter principle):根据血细胞非传导的性质，以 电解质溶液中悬浮的血细胞在通过计数 小孔时引起的电阻变化进行检测为基础， 进行血细胞计数和体积测定。
小孔管是电阻抗法细胞计数的一个重要组 成部分。检测期间，当电流接通后，位于 小孔两侧的电极产生稳定的电流。如果供 给的阻抗也是稳定的，则小孔的电压是不 变的。
3、20世纪70年代 检测血小板的仪器Baker-810 4、20世纪80年代，可打印WBC、RBC、PLT
体积分布直方图。 5、20世纪90年代，白细胞分类的开发（二分
类、三分类）；将网织红细胞检测技术用于 血细胞分析仪；生产了血液学全自动系统。 6、现在，白细胞五分类，仪器组合化
3. 甄别 利用甄别器根据阈值调节器提供的 参考电平，将低于参考电平的假讯号（细 胞碎片，杂质微粒）去掉。
4. 整形 通过整形器作用，将脉冲讯号波形 修整成一致标准的平顶波，才能触发电路
5 计数 血细胞的脉冲信号，经过放大、甄 别、整形后，送入计数系统，得出计数结 果。
电阻抗分析仪的主要应用 原理，并与光学检测原理组合应用于五分 类血液分析仪中。
用高频电磁探针渗入细胞膜脂质可测定细胞 的导电性，提供细胞内部化学成分、细胞核 和细胞质、颗粒成分等特征信息。
四、分光光度法
Lambert-Beer定律：A=lg(I0 / I) A:吸光度，或称光密度；I0：单色入射光强度；
I ：透过光强度
分光光度法仪器的组成：单色光源、检测池和 比色容器、光检测器。
2、鞘流 维持颗粒于液流中央，顺序、单个、 恒速向前流动，即流体动力学聚焦。
3、细胞悬液 被检测细胞（颗粒）的悬 液，由气压导入流动池。
4、光检测器 接受来自各种角度的散射 光或吸收光信号，并转换成相应特征的 电信号
三、射频电导法
射频（radio frequency, RF) 指射频电流， 是每秒变化大于10 000次的高频交流电磁波。 高频电流能通过细胞壁。
通常把标本流的流速控制在10m/s以内，就 能保持标本流处于稳流状态。
外面包被有高速流动的鞘液，实现标本与 鞘液稳定的同轴流动状态。
同时利用液流聚焦原理，使标本流直径变 小，通常只有10～20μm，避免细胞多个 重叠进入检测区。
激光散射法系统基本组成
1、光源 气体（氦－氖）激光或固体（半导 体）激光（单色光）；钨光源（多色光）。
当有一个细胞通过小孔时，由于电阻增 加，于瞬间引起电压变化——通过脉冲。
细胞体积越大，脉冲振幅越高；细胞数 量越多，脉冲数量也越多。
脉冲信号经过下列步骤，得出细胞计数 结果：
1. 放大 由于血细胞通过微孔时产生的脉冲 信号微弱，必须通过放大器将讯号放大。
2. 2. 阈值调节 在一定范围内调节参考电平 的大小，使计数结果尽可能符合实际。
⑥计数系统 将整形后的血细胞脉冲信号显 示为不同类群的细胞数。
二、激光散射法
激光散射法应用了流式细胞术(flow cytometry, FCM) 检测原理。
流式细胞术检测原理：细胞通过激光束被照射 时，产生与细胞特征相应的各种角度的散射 光。对经信号检测器接收的散射光信息进行 综合分析，即可准确区分正常类型的细胞。
血细胞分析仪近年来的发展变化
1. 血常规检验多参数化 2. 多功能合成扩展 3. 检测速度的提高 4. 方法的改进和进展 5. 应用的方便性
血液分析仪优势 检测项目多 速度快 精度高 易操作
血液分析仪功能： ①全血细胞计数功 能。 ②白细胞分类功能。 ③扩展功能。
§2 检测原理
检测原理
电阻抗法 电学
流式细胞仪的技术特点
流式细胞仪在设计上采用了许多独特的技术， 比如液流系统、光路系统、信号测量和细胞 分选方面都有自己的技术特点。着重讲述液 流系统——鞘流原理。
雷诺系数 Re
Re＝d ρν/η d: 管子的直径 ρ：液体的密度 ν：液体的流速 η：液体的粘滞系数
Re<2300， 液流处于稳流状态 Re>2300， 液流处于湍流状态
分光光度法是所有类型的血细胞分析仪检测 Hb 的原理：被稀释的血液加入溶血剂后， 红细胞溶解，释放血红蛋白，后者与溶血剂 结合形成Hb衍生物，在特定波长（530～ 550nm）下比色，吸光度的变化与液体中 Hb含量成比例。
第三章 血液分析仪检查
目的要求
1、掌握：血液分析仪各项参数的缩写、参考 值、直方图概念。
2、熟悉：血液分析仪电临床应用、检测参数、 方法学平价、血细胞直方图正常形态特点及常 见异常形态、临床应用。
3、了解：血液分析仪的进展。
重点 : 1、血液分析仪测定的原理、方法 2、血液分析仪各参数临床意义
三分群血液分析仪基本组成
① 信号发生器 各种微粒通过检测小孔产生电 阻抗脉冲信号的检测源。
②放大器 将血细胞微弱脉冲信号放大以触发 电路系统。
③阈值调节器 调节能区分不同群细胞合适的 信号电平。
④甄别器 去除非参考电平的各种假信号以 提高计数的准确性。
⑤整形器 将不一致的脉冲波形信号调整为 标准的波形后触发计数电路系统。
半导体激光的流式细胞术
侧向荧光 （RNA/DNA含量）
侧向散射
（细胞内部结构，如 核的大小）
激光 （波长633nm）
前向散射光 （细胞大小）
低角度散射光（前向散射光）：反映细胞的 数量和表面体积大小。
高角度散射光（侧向散射光）：反映细胞的 内部颗粒、细胞核等复杂性。
激光散射法在区别体积相同而类型不同 的细胞特征时，比电阻抗法分群更加准 确。故激光散射法已成为现代五分类血 液分析仪的主要检测原理之一。
难点: 血液分析仪检验的质控
§1 血液分析仪的发展史
自动血液分析仪（automated hematology analyzer, AHA)，早年称血细胞计数仪（blood cell counter)，是目前国内外临床检验最常用的 筛检仪器之一。
1、传统采用手工方法 2、20世纪50年代，美国的Coulter设计了第一台
射频电导法
激光散射法 光学
分光光度法
一、电阻抗法
血细胞计数原理即库尔特原理（Coulter principle):根据血细胞非传导的性质，以 电解质溶液中悬浮的血细胞在通过计数 小孔时引起的电阻变化进行检测为基础， 进行血细胞计数和体积测定。
小孔管是电阻抗法细胞计数的一个重要组 成部分。检测期间，当电流接通后，位于 小孔两侧的电极产生稳定的电流。如果供 给的阻抗也是稳定的，则小孔的电压是不 变的。