水中总磷的测定方案

水中总磷的测定方案

（碱性过硫酸钾消解法）

1原理

在中性条件下用碱性过硫酸钾使试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。

2仪器设备和试剂

仪器设备：离心机、高压蒸汽灭菌锅、分光光度计、具塞比色管（50mL）、移液枪、枪头（1mL、5mL）、容量瓶（250mL）。

注：所有玻璃器皿均应用稀盐酸或稀硝酸浸泡

试剂：（1）浓硫酸（ρ≈1.84g/cm2，分析纯）

（2）硫酸1+1（体积比浓硫酸：水=1:1）

（3）50g/L碱性过硫酸钾溶液：称取50g过硫酸钾K2S2O8溶解于800mL水中，称取氢氧化钠20g溶于上述溶液中，混匀，定容至1000mL。

（4）100g/L抗坏血酸：溶解10g抗坏血酸（C6H8O6）于水中，并稀释至100mL。（此溶液贮于棕色试剂瓶中，置于4℃下保存可稳定几周。如不变色可长期使用。）（5）钼酸盐溶液：A、溶解13g钼酸铵于100mL水中。B、溶解0.35g酒石酸锑钾于100mL水中。C、量取150mL浓硫酸溶解于150mL水中。不断搅拌，将A溶液缓缓倒入C 溶液中，加B溶液并且混匀。（此溶液贮存于棕色试剂瓶中，置于4℃下可保存二个月。）（6）磷标准贮备溶液：准确称取在105℃烘箱中烘干的KH2PO4（分析纯）0.2195g，溶解在400mL水中，加浓H2SO45mL（加H2SO4防长霉菌，可使溶液长期保存），转入1L 容量瓶中，加水至刻度。此溶液为50μg/mL P标准溶液。（此溶液在玻璃瓶中可贮存至少六个月）

（7）磷标准溶液：将10mL磷标准贮备溶液转移至250mL容量瓶中，用水稀释至标线并混匀，即为2μg/mL P标准溶液（此溶液不宜久存）。

3操作

（1）待测液的制备

A、用移液枪移取经离心后的水样10mL于50ml具塞比色管中，加入10mL碱性过硫酸钾溶

液，再加水至约30mL，摇匀。

B 、将具塞比色管的玻璃塞轻轻盖好（玻璃塞最好不要盖紧），用报纸和线把具塞比色管固定于大烧杯中，置于高压蒸汽灭菌锅中加热，待压力达到1.1kg/cm 2，相应温度达到120℃时保持30min 后停止加热。待压力表读数为零的时候取出放冷，然后用水稀释至标线。

C 、在样品消解的同时做一个空白试验，即所用试剂同上，用蒸馏水代替水样，同样消解得空白消解液。

（2）测定

A 、向定容后的消解液中加入1mL 抗坏血酸溶液，混匀，30s 后加2mL 钼酸盐充分混匀。

B 、15min 后，在700nm 波长下进行比色。以水作参比测定吸光度，扣除空白试验的吸光度。

注：如显色时室温低于13℃，可在20～30℃水浴上显色15min 即可。

（3）标准曲线

A 、准确吸取2μg/mL P 标准溶液 0，0.5，1.0，3.0，5.0，10.0，15.0mL ，分别注入50mL 具塞比色管中，加水至20mL ，加入10mL 碱性过硫酸钾溶液，置于高压蒸汽灭菌锅中加热消解，最后取出放冷，用水稀释至标线。

B 、向定容后的消解液中加入1mL 抗坏血酸溶液，混匀，30s 后加2mL 钼酸盐充分混匀。

C 、15min 后，在700nm 波长下进行比色。以水作参比测定吸光度，扣除空白试验的吸光度。各管比色液磷浓度分别为0，0.02，0.04，0.12，0.2，0.4，0.6μg/mL 。

（4）计算

水中总磷含量（μg/mL ）=ρ×——— 式中：ρ——待测液中磷的质量浓度（μg/mL ）

V1——吸取水样体积（mL ）

V2——显色溶液体积（mL ） V1

V2