组织线粒体分离试剂盒
细胞线粒体分离试剂盒经验
细胞线粒体分离试剂盒经验细胞线粒体是细胞内的一个重要器官，负责细胞内能量的生产和调控。
由于其结构特殊且与细胞核分离，为了研究线粒体的功能和机制，科学家们开发了一种称为细胞线粒体分离试剂盒的工具。
本文将介绍细胞线粒体分离试剂盒的使用经验，为科研工作者提供参考。
细胞线粒体分离试剂盒的选择非常重要。
市面上有多种品牌的试剂盒可供选择，但不同试剂盒的分离效果和操作方法可能有所不同。
因此，在选择试剂盒时，需要根据具体实验需求和文献研究，选择适合的试剂盒。
准备工作要做好。
在使用细胞线粒体分离试剂盒前，需要准备好所需的实验材料和设备。
常用的实验材料包括培养细胞、培养基、缓冲液等，而设备则包括离心机、显微镜、离心管等。
确保实验材料和设备的质量和干净程度对于细胞线粒体的分离至关重要。
然后，按照试剂盒说明书进行操作。
不同的试剂盒可能有不同的操作步骤，因此在使用前，务必仔细阅读试剂盒的说明书，并按照说明书的要求进行操作。
一般来说，分离线粒体的步骤包括细胞收集、细胞破碎、离心分离等。
在操作过程中，要注意操作的细节，严格控制温度和时间，以获得较好的分离效果。
要注意细胞线粒体的保存和处理。
细胞线粒体是一种易于受到氧化损伤的器官，因此在分离后，应尽快进行后续实验或储存。
常用的线粒体保存方法包括冷冻保存和低温保存。
在保存过程中，需要保持样品的完整性和纯度，避免细胞线粒体的损伤和污染。
对实验结果进行分析和解读。
细胞线粒体分离试剂盒的最终目的是获得纯净的线粒体样品，以进行后续的功能研究。
因此，在分离后，需要对线粒体样品进行质量检测和功能分析，如线粒体呼吸链活性、ATP产量等。
通过对实验结果的分析和解读，可以进一步揭示细胞线粒体的功能和机制。
细胞线粒体分离试剂盒是一种用于研究细胞线粒体的重要工具。
在使用试剂盒时，科研工作者需要选择适合的试剂盒，做好实验准备工作，按照说明书进行操作，并注意样品的保存和处理。
最后，对实验结果进行分析和解读，可以进一步深入了解细胞线粒体的功能和机制。
GENMED线粒体功能詹纳斯绿B染色试剂盒产品说明书范文(中文版)
GENMED线粒体功能詹纳斯绿B染色试剂盒产品说明书范文(中文版)GMS10015v.A主要用途GENMED线粒体功能詹纳斯绿B染色试剂是一种旨在通过一种毒性较小的碱性染料特异性地使具有活性功能的线粒体呈现蓝绿色，从而判断线粒体功能的完整性的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种线粒体（动物、人体、植物、昆虫等）制备物的功能检测。
产品严格无菌，即到即用，活体检测，操作简捷，性能稳定。
技术背景线粒体是细胞中重要的细胞器，其主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。
线粒体大量存在于代谢旺盛的细胞中，如动物的心肌、肝、肾等器官和组织的细胞中。
大量制备线粒体就是从这些器官组织中提取，或从组织培养细胞中提取。
在光学显微镜下线粒体呈现为颗粒状、棒状或弯曲细线。
詹纳斯绿B（JanugreenB），是一种毒性较小的碱性染料。
它可以对活细胞进行直接染色，在细胞质内可以看到被染成蓝绿色的线状或颗粒小体的线粒体。
线粒体所以能显示出蓝绿色，是由于线粒体中具有细胞色素氧化酶系统，它是染料始终处于氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中的染料被还原呈无色。
产品内容毫升毫升毫升份保存方式保存在－20℃冰箱里；GENMED染色液(ReagentB)，避免光照；有效保证6月用户自备毫升离心管：用于线粒体染色的容器光学显微镜：用于线粒体染色观察分析实验步骤实验开始前，将℃冰箱里的试剂盒中的GENMED染色液（ReagentB）置于冰槽里融化，并放在暗室里。
然后进行下列操作。
一、纯化线粒体染色1．从纯化的线粒体样品中移出至微升（含细胞中提取的线粒体）到新的预冷的毫升离心管，置于冰槽里（注意：线粒体须均匀分布，没有聚集成团）2．加入等量微升的GENMED染色液（ReagentB），轻柔混匀3．放进暗室里，在室温下孵育1分钟4．即刻移取微升到载玻片上，放上盖玻片5．在光学显微镜油镜下进行观察：功能完整的线粒体呈现蓝绿色圆形或椭圆形颗粒（注意：可见蓝绿色渐渐变淡现象）6．篮绿色强度显著减弱或呈现无色，表明线粒体细胞色素氧化酶系统功能不全或功能丧失二、活体细胞染色1．将待测细胞（某细胞）移入到1.5毫升离心管2．放进微型台式离心机离心1分钟，速度为500g（或2000RPM；例如eppendorf5415）3．小心抽去上清液4．加入微升GENMED清理液（ReagentC）或GENMED保存液（ReagentA）5．加入微升GENMED染色液（ReagentB），充分混匀6．放进暗室里，在冰槽里孵育分钟7．即刻移取微升到载玻片上，放上盖玻片8．在光学显微镜油镜下进行观察：功能完整的线粒体呈现蓝绿色线状或颗粒小体9．篮绿色强度显著减弱或呈现无色，表明线粒体细胞色素氧化酶系统功能不全或功能丧失注意事项1．本产品为20次（活体细胞）或400次（纯化线粒体）操作2．所有操作均须无菌状态下进行3．线粒体样品操作须在低温下进行，且操作快速4．操作时，须戴手套5．建议染色完成后，即刻进行显微镜观察分析6．孵育时，须避免光照7．本公司提供系列线粒体试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能长期稳定2．本产品经鉴定显色清晰使用承诺友情提醒IFITDOESN’TWORK，RECHECKYOURE某PERIMENTTOSEEWHATYOUDIDWRONG。
组织线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书
组织线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书主要用途组织线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Rhod-2，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定组织线粒体中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种组织（动物、人体等）内线粒体钙离子的浓度检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。
技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。
其中99％的钙以氟磷灰石钙（calcium fluorophosphate apatite）形式存在于骨组织中。
非骨组织钙成分主要存在于细胞内。
钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexed calcium）和离子钙（ionized calcium）。
钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscular excitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。
在细胞内，钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。
其中线粒体钙离子在调节线粒体代谢、保持线粒体的ATP产量达到细胞需求，维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。
线粒体钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flame photometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求，以及需要线粒体纯化。
Rhod-2，罗丹明123（rhodamine 123）的衍生产物，一种与钙离子结合产生荧光，同时其正电荷特性，特异性地聚集在线粒体里，由此用于测定线粒体内钙离子水平。
在荧光分光光度仪下，激发波长550nm，散发波长590nm，来定量测定线粒体的钙浓度。
线粒体dna分离试剂盒原理
线粒体dna分离试剂盒原理全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：线粒体DNA（mtDNA）是细胞内的一种特殊DNA，主要存在于细胞的线粒体中。
它是由母亲遗传给子代的，与细胞核DNA有着不同的特征和功能。
线粒体DNA在细胞的能量产生过程中起到关键作用，因此对其进行研究对于理解细胞功能和疾病的发生具有重要意义。
为了研究线粒体DNA，需要将其从细胞中分离出来。
而线粒体DNA分离试剂盒就是为了这个目的而设计的。
它包含了借助化学试剂和特殊操作步骤将线粒体DNA从细胞中提取出来的各种试剂和工具。
线粒体DNA分离试剂盒的原理主要可以分为以下几个步骤：第一步：细胞裂解细胞裂解是线粒体DNA分离过程中的第一步。
通过加入裂解缓冲液和蛋白酶，使细胞膜和细胞核膜失去完整性，从而释放出细胞内的线粒体和线粒体DNA。
第二步：线粒体分离在细胞裂解后，线粒体需要从细胞中分离出来。
这一步通常需要使用离心过程，通过调节不同离心速度和时间来沉淀线粒体，从而与其他细胞器分离。
第三步：DNA提取在成功分离出纯净的线粒体后，就需要进行DNA提取。
通过加入相应的试剂和离心操作，将线粒体DNA从线粒体中提取出来。
这一步需要注意避免DNA的降解和污染。
第四步：DNA纯化提取出的线粒体DNA可能还含有其他杂质，需要进行纯化操作。
通过加入适当的试剂和离心操作，将线粒体DNA纯化成较纯的形式，以便后续的实验操作。
线粒体DNA分离试剂盒的原理就是通过上述步骤将线粒体DNA 从细胞中提取出来，并经过分离、提取和纯化等操作得到纯净的线粒体DNA样品，以供进一步的实验研究。
线粒体DNA在人类疾病的研究中具有重要的应用价值。
许多遗传性疾病和退行性疾病都与线粒体DNA的突变和功能异常有关，因此通过研究线粒体DNA可以更好地理解这些疾病的发生机制，并为临床诊断和治疗提供新的思路和方法。
总的来说，线粒体DNA分离试剂盒的原理是通过一系列化学试剂和操作步骤将线粒体DNA从细胞中提取出来并进行纯化，为线粒体DNA的研究提供了重要的技术支持和工具。
全血线粒体DNA萃取试剂盒产品说明书中文版
全血线粒体DNA萃取试剂盒产品说明书（中文版）主要用途全血线粒体DNA萃取试剂是一种旨在通过化学溶解纯化血白细胞、物理或化学破膜及离心处理获得线粒体，然后进一步生物酶处理以获得高质量的线粒体DNA的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种动物血细胞中的线粒体核酸成分处理。
用于后续的杂交、克隆、酶切、PCR 分析等。
产品即到即用，操作简易，性能稳定，无核酶污染，萃取纯度和产量皆高。
技术背景线粒体细胞器的研究是现代细胞生物学的最重要的课题之一。
线粒体成为生物衰老、古生物、细胞凋亡、肿瘤、HIV、老年痴呆症、糖尿病、肌肉疾病等研究的主要对象。
线粒体DNA的分离和定量以及突变分析是研究中必不可少的。
产品内容溶血液（Reagent A）毫升清理液（Reagent B）毫升裂解液（Reagent C）毫升净化液（Reagent D）毫升强化液（Reagent E）毫升保存液（Reagent F）毫升破膜液（Reagent G）毫升去干扰液（Reagent H）微升酶解液（Reagent I）微升萃取液（Reagent J）毫升浓缩液（Reagent K）毫升助沉液（Reagent L）微升沉淀液（Reagent M）毫升纯化液（Reagent N）毫升缓冲液（Reagent O）毫升产品说明书1份保存方式保存净化液（Reagent D）、去干扰液（Reagent H）、酶解液（Reagent I）、萃取液（Reagent J）和助沉液（Reagent L）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于核酸操作的容器15毫升锥形离心管：用于线粒体初步制备的容器50毫升锥形离心管：用于血细胞处理的容器涡旋震荡仪：用于混匀4℃微型台式离心机：用于沉淀细胞和核酸4℃超速离心机：用于分离细胞器成分DOUNCE匀浆器：用于裂解细胞58℃恒温水槽：用于孵育反应物实验步骤一、白细胞分离实验开始前，室温预热血溶液（Reagent A），同时4℃预冷清理液（Reagent B）。
普利莱基因技术有限公司线粒体 胞浆制备试剂盒C1260说明书
线粒体/胞浆制备试剂盒C1260描述：线粒体/胞浆制备试剂盒(Mitochondria Isolation Kit)用于从组织或培养细胞中分离线粒体和细胞胞浆成分。
加入分离溶液，匀浆破碎组织细胞，经过数次800g和12000g离心，在60分钟内即可分离出完整的线粒体和胞浆成分。
制备的线粒体具有很高的生物学活性，可进行各种功能研究如酶学测定，更可用于Western Blot、2D-胶、线粒体蛋白或DNA提取、蛋白质组学等研究。
严格按照说明操作，总是能制备获得高纯度线粒体。
一篇方法学研究论文发现，用普利莱试剂盒制备线粒体的得率、活性、纯度优于蔗糖密度梯度离心法和Invotrogen/Pierce线粒体提取试剂盒方法。
适用：从组织、培养细胞制备高纯度线粒体，同时分离细胞胞浆成分。
组成：Mito Solution 100 ml for 50 次制备200 ml for 100 次制备储存：−20 ºC 12个月有效操作步骤：以下所有操作均在4 ºC进行1.组织匀浆：100~200 mg新鲜组织如肝、脑、肾、心肌等，剪为0.5cm2碎块放入小容量玻璃匀浆器内。
估计组织块总体积。
加入1.5 ml冰预冷的Mito Solution。
用间隙严紧的研杵上下研磨组织20次。
培养细胞匀浆：800 × g 5 min离心收集细胞。
单次提取需2-5 × 107个细胞。
加入1.5 ml冰预冷Mito Solution 重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，用间隙严密的研杵研磨细胞30次。
2.将匀浆液转移到离心管中，800 × g ，4 ºC离心5 min。
（胞核、膜碎片、未裂解细胞等在管底，弃去）3.收集上清液并转移到新的离心管。
再次800 × g 离心5 min at 4 ºC，弃沉淀。
4.将上清液转移到新的离心管。
10,000 × g 离心10 min 4 ºC。
线粒体dna分离试剂盒原理
线粒体dna分离试剂盒原理全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：线粒体DNA分离试剂盒原理是通过一系列化学反应和物理方法将细胞中的线粒体成功分离出来，进而提取其中的DNA。
线粒体DNA是细胞中的一个重要组成部分，它负责细胞能量代谢的调控，对细胞的正常功能发挥起着至关重要的作用。
分离线粒体DNA对于研究细胞的功能及疾病的发生机制具有重要意义。
线粒体DNA分离试剂盒原理主要包括以下几个步骤：细胞溶解。
在进行线粒体DNA的分离之前，首先需要将细胞溶解，使得线粒体能够从细胞内部被释放出来。
通常使用含有细胞膜破裂酶的缓冲液进行细胞溶解，破坏细胞膜结构，释放出细胞内的线粒体。
线粒体富集。
在细胞溶解后，线粒体和其他细胞器混合在一起，需要通过质量差异将线粒体富集起来。
这一步可以利用超速离心对细胞提取物进行离心分离，线粒体在特定离心速度下沉降速度比较快，因此可以富集到下沉的沉淀物中。
然后，DNA提取。
在线粒体获得富集后，接下来需要进行DNA的提取。
通过添加蛋白酶、盐溶液等进行线粒体膜的破裂，释放出线粒体内的DNA。
然后使用乙醇沉淀法或硅胶柱法将DNA分离出来，并通过离心将DNA沉淀下来。
纯化和检测。
分离出的线粒体DNA往往还会存在一定程度的杂质，需要进行纯化处理。
通过特定的柱式层析或凝胶电泳等方法进行DNA 的纯化，去除掉余留的蛋白质、RNA等杂质。
通过比色法或荧光定量等方法检测DNA的浓度和纯度，以确保获得的线粒体DNA能够用于后续的实验研究或分析。
线粒体DNA分离试剂盒原理是通过一系列化学反应和物理方法将细胞中的线粒体成功分离出来，提取其中的DNA，并进行纯化和检测，为后续的研究工作提供可靠的实验材料。
通过这一技术手段，研究人员可以更加深入地了解细胞内线粒体的功能及其在疾病发生中的作用，为疾病的诊断和治疗提供更多的理论依据。
【2000字】第二篇示例：线粒体DNA（mitochondrial DNA，简称mtDNA）是线粒体内含有的一种特殊的DNA，其具有独特的特性和功能。
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)
仅供科研版本号：161213 线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)【产品组成】【保存条件】-20℃,避光,12个月【产品概述】JC-1是一种检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential) 的理想荧光探针。
在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质(matrix)中，形成聚合物，产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-1丌能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体，产生绿色荧光。
这样就可以通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化，常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。
通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，这种转变也可作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
JC-1单体的最大激发波长为514nm，最大发射波长为529nm。
JC-1聚合物(J-aggregates)的最大激发波长为585nm，最大发射波长为590nm。
实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的装置即可。
线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)(Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1)是一种以JC-1为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测，CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。
该试剂盒仅用于科研领域，丌宜用于临床诊断或其他用途。
【使用方法】1、配制JC-1染色工作液：取适量JC-1 Stain (200×)，按照每50μl JC-1 Stain (200×)加入8ml ddH2O的比例稀释JC-1，剧烈Vortex充分溶解并混匀JC-1。
然后再加入2ml JC-1 Buffer(5×)，混匀后即为JC-1染色工作液。
6孔板每孔所需JC-1染色工作液的量为1ml，其它培养器皿的JC-1染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每0.5～1.0×106细胞需0.5ml JC-1染色工作液。
线粒体dna分离试剂盒原理
线粒体dna分离试剂盒原理
线粒体DNA（mtDNA）分离试剂盒是一种用于从细胞提取中分离纯化线粒体DNA的工具。
线粒体是细胞的能量产生中心，其DNA在许多生物学研究中具有重要作用。
分离线粒体DNA的原理基于细胞裂解、质粒DNA和细胞核DNA的去除，从而提取纯化的线粒体DNA。
该试剂盒通常包含以下主要组分：
1. 细胞裂解缓冲液：含有特殊成分，能够破坏细胞膜，释放细胞质和线粒体。
2. 离心管：用于离心样本，分离纯化的线粒体DNA。
3. 膜过滤器：对细胞裂解液进行过滤，去除细胞碎片和其他杂质。
4. 乙醇：用于沉淀线粒体DNA。
线粒体DNA分离试剂盒的操作步骤如下：
1. 将待分离线粒体DNA的细胞样本收集并进行离心，去除培养介质。
2. 加入适量的细胞裂解缓冲液，将样本溶解，并破坏细胞膜，释放线粒体。
3. 通过离心步骤进行细胞碎片和大颗粒物质的去除。
将细胞裂解液转移到膜过
滤器中，离心滤去杂质。
4. 丢弃上清液，保留细胞裂解液中的纯化线粒体。
5. 加入乙醇，使线粒体DNA沉淀。
6. 进行离心步骤以沉淀线粒体DNA。
7. 弃上清液并使用适量的缓冲液洗涤线粒体DNA的沉淀物。
8. 最后，将纯化的线粒体DNA溶于适当的溶剂中，以备后续分子生物学研究
使用。
线粒体DNA分离试剂盒利用细胞裂解和离心技术，可以高效地提取纯化的线
粒体DNA，且能够去除细胞核DNA和其他污染物质。
这种纯化的线粒体DNA可
以用于许多应用，包括线粒体功能研究、群体遗传学、线粒体疾病相关研究等。
线粒体分离和线粒体酶提取试剂盒说明书
货号: QS3307 规格：50管/48样线粒体分离和线粒体酶提取试剂盒说明书分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：线粒体是半自主性细胞器，不仅是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷（ATP）的主要场所，为细胞的活动提供能量，而且在许多生命活动中具有重要调控作用。
因此，准确和全面分离保持正常活性的线粒体已经成为许多研究的前提。
测定原理：利用专门试剂温和匀浆组织和细胞，再采用差速离心法从匀浆中分离完整线粒体；利用专门试剂，配合超声波破碎线粒体，可以得到保持活性的线粒体酶。
自备实验用品及仪器：超声波破碎仪、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：试剂一：50mL×1瓶，-20℃保存；试剂二：10mL×1瓶，-20℃保存；试剂三：10mL×1瓶，-20℃保存；试剂四：1mL×1支，-20℃保存；提取步骤：①准确称取约0.1g组织或收集约500万细胞，加入1mL试剂一和10uL 试剂四，用冰浴匀浆器或研钵研磨。
② 4 ℃ 600 g离心5min。
③弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，4 ℃ 11000 g离心10min。
④上清液即胞浆提取物，可用于研究线粒体蛋白向胞浆的释放。
⑤沉淀为完整线粒体。
含有完整的内膜和外膜，并具有线粒体的生理功能。
可用于线粒体的生理功能等方面的研究。
⑥在沉淀中加入200uL试剂二和2uL 试剂四，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3秒，间隔10秒，重复30次），可用于线粒体酶活性测定。
⑦在沉淀中加入200uL试剂三和2uL 试剂四，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3秒，间隔10秒，重复30次），可用于线粒体蛋白浓度测定。
注意事项：1、分离线粒体和提取线粒体蛋白质的所有步骤均需在冰上或4℃进行，所用溶液需冰浴或4℃预冷。
2、通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取600g和11,000g，如果希望纯度更高，但对线粒体的得率要求不高，前后两次离心速度可以采用1000g和3500g。
胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒使用说明
胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒使用说明产品编号：C7610包装规格：50Assays产品组成:胞质提取Buffer55mL线粒体溶解Buffer5mL蛋白酶抑制剂60μL磷酸酶抑制剂300μLDTT60μL产品简介胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒提供独特的组份可以提取动物细胞及组织中的胞质蛋白和线粒体蛋白。
该方法先将完整的有活性的线粒体和胞质蛋白分离，再处理后获得高纯度的有活性胞质蛋白和变性的线粒体蛋白，不需要超速度离心，方法简单，可靠，快速。
可用于1D，2D电泳，Western Blot，Elisa等蛋白质实验。
提取的完整线粒体也可以经过活性溶解液处理，再用于免疫共沉淀，凋亡，细胞信号传导，能量代谢等生理学研究，或进行线粒体DNA提取，用于基因组学后续研究。
本试剂盒可以每次从1×107个培养细胞或200mg组织中提取所需要的蛋白质，可以使用50次。
产品特点1.整个实验过程大约只需要1小时左右。
2.可以从50×107个培养细胞或50×200mg组织中提取所需要的蛋白质或活性线粒体。
3.活性线粒体的提取量高，高效线粒体溶解Buffer提取的蛋白质，可以用于线粒体蛋白质组学研究。
4.不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
运输和保存条件常温下运输，收到后将线粒体溶解Buffer、DTT和蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂于-20℃保存，胞质提取Buffer于2-8℃保存，保质期1年。
操作步骤1.收集不少于1×107细胞，用冷PBS（pH7.4）洗涤细胞两次，每次3000rpm（800g）离心5min；组织样本（200mg）尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织，于冰上剪碎，再用冷PBS（pH7.4）洗涤三次。
2.在上述细胞或组织样本中加入1mL胞质提取Buffer（使用前每mL胞质提取Buffer加入1μL蛋白酶抑制剂，5μL磷酸酶抑制剂和1μL DTT），置玻璃匀浆器冰上均质30～50次，置于冰上冷却。
线粒体膜电位检测试剂盒（JC-10）使用说明
线粒体膜电位检测试剂盒（JC-10）使用说明线粒体膜电位检测试剂盒（JC-10）使用说明产品货号：CA1310产品规格：100T产品内容：产品名称包装JC-10（200×）100μL/管，共5管超纯90mLJC-10染缓冲液（5×）80mLCCCP20μL保存条件：-20℃避光保存，尽量避免反复冻融，有效期一年。
超纯水和JC-10染色缓冲液（5×）也可4℃保存。
产品简介：线粒体膜电位检测试剂盒（JC-10）是一种以JC-10为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测。
JC-10是一种广泛用于检测线粒体膜电位Ψm△的理想荧光探针。
可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。
在线粒体膜电位较高时，JC-10聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-10不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-10为单体，可以产生绿色荧光。
这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。
常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。
通过JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-10从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的指标。
JC-10单体的最大激发波长为515nm，最大发射波长为529nm；JC-10聚合物的最大激发波长为585nm，最大发射波长为590nm。
实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
本试剂盒提供了CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。
对于六孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100个样品；对于12孔中的样品，本试剂盒共可以检测200个样品。
操作步骤：1、JC-10染色工作液的配制：六孔板每孔所需JC-10染色工作液的量为1mL，其他培养器皿的JC-10染色工作液的用量以此类推；对于细胞悬液每50～100万细胞需0.5mL JC-10染色工作液。
线粒体提取方法
线粒体提取试剂盒产品组成：产品组成 BB-3601-1 BB-3601-2规格 50T 100T线粒体提取液A 20ml 40ml线粒体提取液B 20ml 40ml线粒体保存液 20ml 40ml产品简介：本试剂盒可用于各种动物细胞和实体软、硬组织样本的线粒体提取。
不能用于冷冻样品的线粒体提取。
细胞线粒体提取：1.取1-2×107个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞；2.用冷PBS洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3.加入400μl冷的试剂A，置冰上10分钟。
4.用Dounce匀浆器匀浆30-40下，然后在4℃，500×g条件下离心5分钟。
5.快速将上清吸入另一预冷的干净离心管。
6.在4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。
7.在沉淀中加入400μl冷的试剂B，混匀。
8.在4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。
9.弃上清，沉淀用线粒体保存液重悬。
10.即得到线粒体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。
组织线粒体提取：a)取50-100mg新鲜动物组织样本，用PBS洗涤干净。
b)用剪刀尽可能剪碎，用冷PBS洗涤两次。
c)加入400μl冷的试剂A，置冰上10分钟。
d)用Dounce匀浆器匀浆30-40下，然后在4℃，500×g条件下离心5分钟。
e)快速将上清吸入另一预冷的干净离心管。
f)在4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。
g)在沉淀中加入400μl冷的试剂B，混匀。
h)在4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。
i)弃上清，沉淀用线粒体保存液重悬。
j)即得到线粒体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。
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美天旎推出线粒体分离试剂盒
美天旎推出线粒体分离试剂盒
摘要：
美天旎的线粒体分离试剂盒是适用于人的。
它的独特之处在于，它是使用磁珠，也就是响当当的MACS技术来纯化的，纯度更高，更快速，2个小时之内就能从人的细胞或组织中分离到完整的线粒体。
说到线粒体分离，首先想到的肯定是差速离心，教科书上也是这样教的。
不过此法颇为麻烦，匀浆再加上一次又一次的离心，得率还不见得高。
要是有个试剂盒就好了，可惜现有的线粒体分离的试剂盒不多，最近，美天旎推出了一个高效分选线粒体的方法。
实验步骤：
1 裂解细胞。
2 用Anti-TOM22磁珠来标记线粒体外膜转位酶22（TOM22）。
3 将标记的细胞裂解液上样到MACS柱中，MACS柱置于MACS分选器中。
洗涤杂质，洗涤过程中磁性标记的线粒体保留在柱中。
4 将柱从分选器中移走，洗脱线粒体。
于是就得到了高纯、完整的线粒体。
此试剂盒与传统方法，比如差速离心或密度梯度离心相比，产量和纯度都更高。
纯化到的线粒体中不会带有其他细胞器的污染，如内质网或细胞核。
而且，MACS技术对细胞和细胞器特别温和，因此分离得到的线粒体保持了完整性，这样在下游的功能分析中能获得更可靠、重复性更好的数据。
Biovision线粒体DNA提取试剂盒
Biovision线粒体DNA提取试剂盒说明书一、简介线粒体是半自动细胞器，在细胞老化、凋亡、抗艾滋病毒药物及癌症过程中其作用。
线粒体DNA存在很高突变率，这些突变与与一些疾病相关，比如糖尿病、老年痴呆症和肌紊乱。
在研究线粒体DNA与疾病关系时要求线粒体DNA的提取和量化。
线粒体DNA提取试剂盒为从多种细胞及组织中提取高产量、高纯度无核DNA污染的线粒体DNA提供了一种方便的工具。
纯化的线粒体DNA可用于酶切、southern blotting、克隆、PCR分析和扩增。
二、试剂盒组成三、常规保存及试剂准备1、操作前阅读说明。
2、打开试剂盒后，酶B混合物存放于-70℃，其他试剂置于4℃。
3、用ddH2O稀释5×细胞质提取缓冲液至1×。
4、用273微升TE buffer溶解酶B冻干粉，混匀后迅速放于-70℃。
样品在-70℃条件下最多存放3个月。
5、确保所有操作一直在冰上进行。
四、线粒体DNA提取过程1、在4℃、600g条件下离心5分钟，收集细胞（5×107）。
2、用冰PBS溶液（未提供）洗涤细胞，在4℃、600g条件下离心5分钟，去上清。
3、用1ml 1×细胞质提取缓冲液重悬细胞。
4、冰上孵育10分钟。
5、用遇冷的组织匀浆机匀浆细胞。
操作过程中，使匀浆器置于冰上。
推荐50-100次的匀浆器；然而有效匀浆依赖细胞类型。
注：为检测匀浆质量，吸取2-3微升悬浮液于盖破片上，在显微镜下观察。
如果核周围有环说明仍是完整的。
如果70%-80%的核没有了环，则进行下一步。
否则，再进行30-50次匀浆，避免过度匀浆，因为会损伤线粒体膜，导致线粒体成分释放。
6、转移悬浮液至1.5ml离心管中，在4℃、700g条件下离心10分钟，该部去除了核和完整细胞。
7、吸取上清至1.5ml离心管中，在4℃、10000g条件下离心30分钟。
8、去上清。
9、用1ml 1×细胞质提取缓冲液重悬，在4℃、10000g条件下离心30分钟。
线粒体提取试剂盒说明书
线粒体提取试剂盒说明书货号：SM0020规格：50T/100T保存：四周内使用可2-8℃储存，长期保存请置于-20℃。
产品内容：组份SM0020-50T SM0020-100T Lysis Buffer50mL 100mL Mito-Wash Buffer25mL 50mL Store Buffer 5mL 10mL产品简介：线粒体提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。
适合于动物软组织（肝或脑组织）和硬组织（肌肉）以及培养细胞的线粒体的制备。
其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。
操作步骤（仅供参考）：1.样本处理a.组织匀浆：称取100~200mg 新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS 或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。
加入1.0mL 冰预冷的Lysis Buffer ，0℃冰浴上下研磨组织20次；b.培养细胞匀浆：消化细胞，PBS 洗涤，800g 离心5~10min 收集细胞，计数。
每次提取需要5×107个细胞，加入1.0mL 冰预冷的Lysis Buffer 重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨30~40次。
2.将组织或细胞匀浆物转移到离心管，4℃，1000g 离心5min 。
3.取上清，转移至新的离心管中，4℃，1000g 再次离心5min 。
4.取上清，转移至新的离心管中，4℃，12,000g 离心10min 。
离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。
将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底。
5.往线粒体沉淀中加入0.5mL Wash Buffer 重悬线粒体沉淀，4℃，1000g 离心5min 。
6.取上清，转移至新的离心管中，4℃，12,000g 离心10min 。
弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底。
7.用50-100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或-70℃保存。
碧云天 组织线粒体分离试剂盒
5. Zhang Z, Wang S, Qiu H, Duan C, Ding K, Wang Z.
Waltonitone induces human hepatocellular carcinoma cells apoptosis in vitro and in vivo.
离心速度可以采用1000g和3500g。 ¾ 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. 准备溶液：室温融解试剂盒中的各种溶液，溶解后立即置于冰上并混匀。第一次使用时，把1.5ml PMSF(溶剂)加入到 PMSF(晶体)中，溶解并混匀，即得到1.5ml 100mM PMSF。配制好的100mM PMSF溶液-20℃保存。如果最终目的是制备 线粒体蛋白，根据样品数量，取适量相应的线粒体分离试剂备用，在线粒体分离试剂加入到组织样品中前数分钟内加入 PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。取适量线粒体裂解液备用，在线粒体裂解液加入到线粒体样品中前数分钟内加入 PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
包装清单：
产品编号
产品名称
包装
C3606-1
线粒体分离试剂A
60ml
C36ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ6-2
线粒体分离试剂B
60ml
C3606-3
胰酶消化液
50ml
C3606-4
线粒体储存液
3ml
C3606-5
线粒体裂解液
15ml
—
说明书
1份
保存条件：
-20℃保存，一年有效。其中胰酶消化液可以4℃保存。
注意事项：
¾ 试剂盒中的试剂对于不同的实验目的不必全部使用。 ¾ 如果用于制备蛋白样品，需自备PMSF，否则不必使用PMSF。PMSF(ST506)可以向碧云天订购。PMSF一定要在线粒体分
PH1592 线粒体DNA提取试剂盒实验操作手册
3. 取上清，加入一新的离心管中，4℃，1000× g 再次离心 5 min。 4．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 12,000 × g 离心 10 min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将 上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底； 5. 在线粒体沉淀中加入 0.5 mL Wash Buffer 重悬线粒体沉淀，4℃，1000× g 离心 5 min； 6．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 12,000 × g 离心 10 min。弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底； 7. 加入 100ul DNA 酶反应液重悬线粒体，吹打均匀后，再加入 10ul DNA 酶 I 溶液（见准备工作），混匀，37 度水浴 10min。 此步为消化线粒体表面吸付的核 DNA。4℃， 12,000 × g 离心 5 min。尽可能的弃上清，再加入 200ul TE 重悬线粒体沉 淀，离心，洗去残留的 DNA 酶。 8. 得到的沉淀，用 100ul TE 重悬线粒体沉淀。加入 200ul 线粒体裂解液，轻轻混匀（不可吹打），放置 2min 左右，不超 过 5min，再加入 150ul 蛋白沉淀液，迅速混匀。4℃，12,000 × g 离心 5 min。此步骤可进一步去除核 DNA。 9．取上清，加入一新的离心管中（可选用等体积的酚氯仿异戊醇 25:24:1 抽提一次，再用氯仿抽提一次，或者直接用氯仿 抽提两次，一般来说，此步可省，并不影响后续的 PCR），加入 0.6 倍体积的异丙醇（如无异丙醇，可加入 2.5 倍体积的乙 醇沉淀 DNA）及 10ul 核酸核酸助沉剂，混匀，-20℃沉淀半小时左右（此步可省），4℃， 12,000 × g 离心 10 min。 10. 弃上清，再加入 1ml 70%乙醇，4℃， 12,000 × g 离心 10 min。重复用 70%乙醇洗一次。 11. 弃上清后再次离心 1min 吸弃上清，开盖凉干约 5-10 分钟。 12．加入 20-30ul TE 缓冲液,轻弹管底，37 度水浴 5 分钟，线粒体 DNA 溶解。 13. 进行 DNA 电泳检测及-20 度保存，进行下步的实验。
组织线粒体提取
组织线粒体提取从动物组织中粗提线粒体一、实验目的：从动物组织中分离线粒体，以便线粒体功能分析实验。
二、实验准备Lysis buffer、匀浆器、离心管、解剖器具三、实验步骤：1．实验前一天小鼠禁食过夜。
线粒体提取前所有溶液要冰上预冷。
2．解剖小鼠（~30g），快速取出肝脏，去除胆囊，放入50ml 预冷的IBc烧杯中；3．预冷的IBc洗去多余的血液。
洗4-5次至IBc澄清。
4．冰上将肝脏剪碎5．倒掉清洗的IBc，加入新的5mlIBc，将上清转移至玻璃匀浆器6．以1,600 rpm冰上匀浆3-4次，组织与缓冲液比例1：5-1：10间7．匀浆液转移至50ml离心管，600g，离心10min 4 ℃8．小心将上清转移至新的离心管600g，离心10min 4 ℃9．小心将上清转移至新的离心管7000g，离心10min 4 ℃10．倒掉上清，加入5ml预冷的IBc，洗一次，不要用枪头重悬11．7000g，离心10min 4 ℃12．去除上清，重悬底部的含有线粒体的颗粒。
用玻璃棒搅松底部的沉淀，不加IBc，用弃去上清的少量缓冲液重悬。
用1ml移液管重悬避免出现气泡。
13．转移至14ml离心管，置于冰上。
线粒体在1-3小时内用于实验，得到比较好的活性。
14．Bradford法测定线粒体浓度。
四、试剂配方Buffer for cell and mouse liver mitochondria isolation (IBc)：100 ml10 ml 0.1M Tris–MOPS1 ml 0.1M EGTA/Tris20 ml 1M sucrose100 ml ddH2O，pH 7.4储液：1 M sucrose：342.3 g sucrose1L ddH2OMix, 20 ml分装-20 C保存.0.1MTris/MOPS：12.1 g Tris；500ml ddH2O，MOPS 调pH 7.4，ddH2O 体积至1L保存于4C.0.1 M EGTA/Tris：38.1 g EGTA；500 ml ddH2O，Tris调pH 7.4 总体积至1L ，保存于4 C.五、注意事项1. 开始前将离心管预冷5min，所有步骤包括匀浆在4度冰上进行，降低磷脂酶和蛋白酶活性；2．最后重悬时，用玻璃棒搅松底部的沉淀。
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组织线粒体分离试剂盒
简介：
线粒体是细胞呼吸的主要场所，细胞活动所需的能量主要由在线粒体内进行的氧化所产生的能量来供应。
制备线粒体的关键是保持线粒体的完整性和纯度，可通过分级分离法获得，即先低俗出去细胞核以及细胞碎片，再进行高速梯度离心分离线粒体。
Leagene 组织线粒体分离试剂盒(Tissue Mitochondria Isolation Kit)是快速便捷分离动物组织中的线粒体的试剂盒，分离线粒体的同时可以获得去除线粒体的细胞浆蛋白，可用于分析细胞色素C 等线粒体蛋白向胞浆的释放，大部分获得的线粒体都含有完整的内膜和外膜，并具有线粒体的生理功能(如检测线粒体膜电位)，获得的蛋白可用于SDS-PAGE 、Western 、双向电泳等蛋白分析。
该试剂盒可用于从动物软组织(如脑、肝脏)和硬组织(心肌、骨骼肌)中提取线粒体，对于采用该试剂盒提取硬组织线粒体效果不佳者，建议采用Leagene 硬组织线粒体分离试剂盒。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
自备材料：
1、 低温离心机、匀浆器
2、 PBS
操作步骤(仅供参考)：
1、清洗：取新鲜组织(不宜采用冻存的组织)，迅速称重，用预冷的PBS 清洗1次，冰上剪成3mm 2大小的组织碎片。
2、匀浆裂解：加入Mitochondria Lysis buffer(如需获得细胞浆蛋白，应提前加入PMSF ，至PMSF 浓度为1×)，置于冰浴上Dounce 匀浆器中，匀浆10～20次。
不同组织或不同匀浆器所需的匀浆次数有所不同，需自行优化。
3、离心以去除细胞核、未破碎的细胞和大的膜碎片。
注：如需获得纯度更高的线粒体，可 编号 名称 CS0010 50T Storage 试剂(A): Mitochondria Lysis buffer 100ml -20℃ 试剂(B): Mitochondria Stock buffer 10ml -20℃ 试剂(C): Protein Stock buffer (5×) 10ml RT 试剂(D): PMSF(100×) 1.5ml
-20℃ 使用说明书 1份
以将此步骤的离心速度改为离心，其缺点是相同数量细胞的线粒体抽提得率会下降。
4、上清液转移至一干净离心管，离心。
注：如需获得纯度更高的线粒体，可以将此步骤的离心速度改为离心，其缺点是相同数量细胞的线粒体抽提得率会下降。
5、弃上清，沉淀为线粒体，如果希望获得去除线粒体的细胞浆蛋白，应在本步骤中收集上清，并且在收集上清时注意勿触及沉淀。
随后把收集的上清，离心，上清即为去除线粒体的细胞浆蛋白。
6、保存：弃上清，用适当缓冲液悬浮沉淀。
如果用于线粒体酶活性或功能的分析，线粒体沉淀应重悬于Mitochondria Stock buffer；如果用于线粒体蛋白的分析，获得的细胞浆蛋白应保存于1×Protein Stock buffer，即按细胞浆蛋白：Protein Stock buffer (5×)=1:4比例混合；如果用于双向电泳，应使用恰当的保存液。
注意事项：
1、试剂(如PMSF)对于不同实验不必全部使用，在实验条件成熟后可以不必使用。
2、如果不是用于制备线粒体蛋白，Mitochondria Lysis buffer不必加入PMSF。
如果用
于制备线粒体蛋白样品，Mitochondria Lysis buffer需添加PMSF。
PMSF一定要在试剂加入到样品中前1～2min内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
3、分离线粒体的所有步骤均需在冰上或4℃进行，所用溶液需冰浴或4℃预冷，全部操作
时间尽量控制在1h以内。
4、通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取1000g和12000g，如果希望纯度更高，
但对线粒体的得率要求不高，前后两次离心速度可用2000g和6000g。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
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