体外分析技术

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RIA的基本条件
• 特异性抗体 • 标记抗原 • 标准品 • 分离技术 • 放射性测量仪器
第二节 免疫放射分析法
（immunoradiometric assay,IRMA）
Ag + *Ab
Ag-*Ab + *Ab
（B） （F）
在体外, 利用 Ag与过量的*Ab的非 竞争性结合反应， 通过测定放射性复 合物的量来计算出 Ag 量。标记抗体， 抗体是过量的
IRMA与RIA工作原理的主要区别
RIA
IRMA
竞争性抗原抗体结合反应
非竞争性抗原抗体结合反应
采用标记抗原
采用标记抗体
三种主要反应试剂
二种主要反应试剂
所用抗体是限量的
所用抗体是过量的
*AgAb的量与待测Ag的量呈负相关 Ag*Ab的量与待测Ag的量呈正相关
反应到达平衡慢 低剂量区有不确定因素
反应到达平衡快 低剂量区无不确定因素
体外分析中心
标本保存间
放免室
放射性药品试剂盒
电化学发光分析
电化学发光分析
体外放射分析技术
定义
•是指在试管内进行反应从而测定 某些生物活性物质（如激素、蛋 白质、抗原、抗体、肿瘤标志物、 维生素、药物浓度）的超微量分 析技术的总称
体外放射分析技术优点
灵敏度高 特异性强 精密度好 准确度高 应用面广 方法简便
Ab
分离B、F
*Ag
B%=B/(B+F)
F%=F/(B+F)
R=B/F
Ag 1 2 3 4 5 6
浓度 25 50 100 200 400 800
B%
标准曲线
B1% B2% B3% B4% B5% B6% B%
Ab
分离B、F
*Ag
Ag 1 2 3 4 5 6 ？
25 50 100 200 400 Leabharlann Baidu00
RIA
+
+
或
IRMA +
0
1
1
IRMA和RIA低剂量区的不确定因素示意图
基本原理
*Ag + Ab
+
Ag
？
*Ag-Ab + *Ag
(B)
(F)
Ag-Ab + Ag
Ag= * Ag , AgAb=*AgAb Ag > *Ag , *AgAb (B) *Ag(F) Ag < *Ag , *AgAb (B) *Ag (F)
*Ag与Ag 免疫活性相同 *Ag＋Ag > Ab
B1% B2% B3% B4% B5% B6%
放射性竞争结 合分析
放射免疫分析 (RIA)
体外放射分析
体
放射性非竞争 免疫放射分析
外
结合分析
(IRMA)
分
析 技 术
体外非放射分析
酶免疫分析 (EIA)
电化学发光免疫分析 (CLIA)
荧光免疫分析 (FIA)
放射免疫分析法
Dr. Yalow
放射免疫分析法 （Radioimmunoassay) 在体外条件下, 利用Ag与定量 的*Ag对限量的特异性Ab的竞 争抑制结合反应，通过测定放 射性复合物的量来计算出Ag 量的一种超微量分析技术