分子生物学总体复习提纲
分子生物学考试复习提纲
分子生物学考试复习提纲一．名词解释（1）Ori and ARS；（2）Promoter；（3） -independent termination （4）SD sequence and Kozak sequence；（5）Operator and Operon；（6）Enhancer and silencer；（7）cis-acting element and trans-acting factor；（8）Open reading frame (ORF)；（9）Gene；（10）DNA denaturation, Hyperchromatic effect, DNA Melting temperature (Tm); (11) RNA splicing, intron and exon; (12) RNAi; (13)polymerase chain reaction (PCR); (14) Southern blot, Northern blot, Western blot;二．简答和问答题1．RNA的种类和功能2．DNA半保留和半不连续复制3．端粒酶的工作原理4．原核DNA复制过程中遗传信息的保真机制5*．原核和真核复制，mRNA转录，蛋白翻译，基因表达调控的异同6．PCR与细胞内DNA复制的异同7．Southern blot, Northern blot, Western blot三种分子生物学技术差异8．复制，转录，翻译，调控中的各种保守序列及其功能9．乳糖操纵子和色氨酸操纵子(包括的衰减子)的工作原理三．分析题1．SDS-PAGE和双向电泳的原理2．顺式作用元件工作的原理3．DNA序列与蛋白功能（表型）非线形关系4．PCR的原理，包括它的特异性5．Western blot的原理，包括二抗工作的原理6．DNA变性中的增色效应与OD值测DNA含量的关系7．衰减子工作的必要条件。
分子生物学 复习提纲
分子生物学复习提纲免责声明：本资料仅供临床医学10级学习交流使用，基本覆盖上课重点。
由于课程的特殊性，特列成专题形式，个专题中重复部分在相应专题中都会覆盖。
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第一讲基因表达调控（转录水平的调节是基因表达调控的关键）分子生物学：是以生物大分子为研究对象，从分子水平去研究并解释一切生物学现象并在分子水平上改造和利用生物的一门新兴科学。
基因：编码RNA或蛋白质的全部核苷酸序列，包括结构基因和调控基因。
基因组：细胞或生物体中一套完整单倍体的遗传物质的总和，包括所有的基因和基因间区。
结构基因：编码RNA或蛋白质的核苷酸序列。
（原核：多顺反子、无内含子；真核：单顺反子、有内含子）转录单位：从启动子到转录终止子之间的DNA节段。
基因表达：是指DNA携带的遗传信息通过转录传递给RNA，mRNA通过翻译将基因的遗传信息在细胞内得以表达，合成具有生物功能的各种蛋白质的过程。
基因表达调控：是指对基因组中某一基因或一些功能相近的基因表达开启、关闭和表达强度的直接调节。
遗传密码：mRNA上按5’到3’方向排列的每三个核苷酸称遗传密码。
内含子：DNA或RNA中的非编码序列。
外显子：DNA或RNA中的编码序列。
多顺反子：一个结构基因转录产生一条mRNA ,编码几条功能相关的多肽链。
单顺反子：一个结构基因转录产生一条mRNA ,编码一条多肽链的生成。
启动子：是转录开始时RNA聚合酶识别、结合并开始转录起始所需的一段DNA序列。
终止子：提供转录终止信号的一段DNA序列。
增强子：能加强其上游或下游基因转录的DNA序列。
SD序列：mRNA5’端在起始密码子AUG 上游3～11bP处，含A-G 短序列，容易与16S r RNA3’-端含U-C 序列互补配对，称为SD 序列，它对mRNA与核糖体的有效结合并翻译至关重要。
开放阅读框ORF：始于起始密码子并终于终止密码子的一串密码子所组成的核苷酸序列。
临床分子生物学检验复习提纲
临床分子生物学检验复习提纲临床分子生物学是现代医学中非常重要的一个领域，它涉及到了分子生物学和临床医学的结合，以及各种分子生物学技术在临床诊断和治疗中的应用。
以下是一个临床分子生物学检验的复习提纲，希望能够帮助你更好地准备考试。
一、分子生物学基础知识复习1.DNA结构和功能-核苷酸的组成和结构-DNA链的方向性-DNA的雙螺旋结构-DNA复制的过程2.RNA结构和功能-mRNA、tRNA和rRNA的结构和功能-转录和翻译的过程3.基因组和染色体-基因组的组成和结构-染色体结构和功能-遗传密码子表4.基因表达调控-转录调控的机制-翻译调控的机制-转录后调控的机制5.基因突变和遗传变异-突变的类型和机制-染色体缺失、重复和易位等遗传变异二、临床分子生物学技术复习1.PCR技术-PCR的原理和步骤-PCR引物设计和优化-PCR产物的检测和分析2.DNA测序技术- Sanger测序法的原理和步骤-高通量测序技术的原理和应用3.基因组学研究技术-基因芯片技术的原理和应用-下一代测序技术在基因组学研究中的应用4.基因突变检测技术-PCR-RFLP分析-聚合酶链反应单链构象多态性分析-测序检测技术在基因突变检测中的应用5.基因表达分析技术-实时荧光定量PCR- Northern blotting-基因芯片技术在基因表达分析中的应用三、临床分子诊断和治疗复习1.临床遗传病的分子诊断-基因突变检测在临床遗传病诊断中的应用-基因芯片技术在临床遗传病诊断中的应用-高通量测序技术在临床遗传病诊断中的应用2.分子病理学的应用-分子病理学技术在肿瘤诊断中的应用-微卫星不稳定性的检测和分析-液体活检技术在肿瘤诊断中的应用3.分子靶向治疗技术-靶向药物的分子设计原理-靶向药物的应用和限制-基因突变检测在靶向治疗中的应用4.群体遗传学和个体化医疗-群体遗传学研究的意义和方法-个体化医疗的概念和发展-药物基因组学在个体化医疗中的应用。
分子复习总提纲汇总
分子生物学复习第一章绪论1.分子生物学的概念（广义）在分子水平上研究生命现象。
即（狭义）在核酸与蛋白质水平上研究基因的复制，基因的表达（包括RNA转录、蛋白质翻译），基因表达的调控以及基因的突变与交换的分子机制。
2.DNA的双螺旋结构是由沃森和克里克发现的，PCR技术是由生物化学博士Mullis发现。
3.分子生物学在哪些方面具有广泛的应用？动物克隆、人类基因组工程、亲子鉴定、转基因产品、物种鉴定、疫苗和癌症检测4.分子生物学的发展简史？（一）分子生物学萌芽阶段（经典遗传学阶段）：1868年孟德尔遗传定律的发现——1910摩尔根的染色体学说；（二）分子生物学理论形成阶段：1941年比德尔和塔特姆的“一个基因一个酶”——1965年“乳糖操纵子学说”（三）分子生物学的发展阶段：20世纪70年代的遗传工程。
（四）现代分子生物学阶段：基因组测序等5.请简要介绍证明DNA是遗传物质的两个经典实验（1）Oswald Avery(美国)：肺炎链球菌转化实验（1944年）发现转化要素（DNA）是主要的遗传物质。
第一次发现遗传物质是DNA，而不是蛋白质。
（2）美国Alfred Hershey（赫尔希）发现噬菌体感染细菌时，其DNA进入了细菌体内。
1969 年赫尔希获得了诺贝尔生理学和医学奖。
第二章基因概念的演变与发展1.经典基因的概念性状由遗传因子控制→遗传因子在染色体上→遗传因子是DNA→一个基因一个酶→基因是顺反子。
基因是产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列，是一个具有特定功能的、完整的、不可分割的最小遗传单位即顺反子。
【经典的基因概念】基因是彼此孤立地、呈线性排列在染色体上的遗传实体。
→【负剂量效应、位置效应】染色体上的基因不是孤立的，基因的表达受染色体状态的影响（斯特蒂文特A．H．Sturtevant，1925）。
→【等位基因、复等位基因、拟等位基因】紧密连锁，控制同一性状的非等位基因称为拟等位基因（P19）。
生物分子学复习提纲
分子生物学复习提纲（附考试原题）一、了解基因工程的主要研究成就。
（一）植物基因工程当前已鉴定和克隆化的植物基因有数百种，重组植物的野外试验已达千余宗。
与农业中的除草剂、抗昆虫、抗病（抗真菌、抗病毒）、抗不良环境因素、提高产量的光合作用、以及提高蛋白质有关。
（二）动物基因工程最突出——转基因动物及其发展。
1983年美国将生长激素基因注入小鼠受精卵——超级鼠。
缺点在于其盲目性。
外源性DNA引入受体细胞后可随机地插入受体细胞基因组中的任意位置，容易导致内源性有利基因的破坏和识货或激活有害基因。
表达水平难以预料。
目标：提高基因正常转化的效率，实现基因的定位整合。
（三）基因工程多肽药物与疫苗多肽药物：人胰岛素、人生长激素、干扰素、白细胞介素、组织血纤维蛋白溶酶原激活剂、肿瘤坏死因子、集落刺激因子……疫苗：细菌疫苗：麻风杆菌、百日咳杆菌、淋球菌……病毒疫苗：乙肝、甲肝、带疱、巨细胞病毒……寄生虫疫苗：疟原虫、利什曼虫、血吸虫……（四）基因诊断与基因治疗原指遗传性疾病的诊断，主要利用DNA探针（单链DNA小片段用核素、酶、荧光分子或化学催化剂等标记，之后同被检测的DNA中的同源互补杂交，从而检出所要查明的DNA）技术。
如诊断镰贫、地贫，也可诊断传染性疾病如结核。
多聚酶链反应PCR是一种体外扩增特异性DNA片段的技术。
基因治疗一般指将正常外源基因导入生物体靶细胞内以弥补所缺失的基因、关闭或降低异常表达的基因，以达到治疗遗传性疾病的目的。
方法普片采用逆转录病毒作为载体的基因导入法。
作为载体的逆转录病毒已缺失功能蛋白基因。
目前研究多属于单基因缺陷引起的遗传疾病基因治疗，如血友病，贫血等。
肿瘤和传染病也在研究。
（五）环境检测与净化环境监测：可用基因探针或PCR技术检测水中微生物。
环境净化：重组质粒导入细菌，降解有机物、农药等——超级菌；促进酶工业进步，提升经济效益等。
*二、掌握分子生物学的中心法则。
*三、掌握核酸的基本组成成分、基本性质。
分子生物学复习提纲
分子生物学复习提纲分子生物学复习提纲一、重组DNA技术1、基本概念1)DNA克隆：获得DNA相同副本或拷贝的过程。
2)基因工程：实现基因克隆所用的方法及相关的工作称基因工程，又称重组工艺学。
3)限制性核酸内切酶：是一类能识别双链DNA分子中的某些特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。
4)DNA载体：携带目的基因，实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。
5)DNA体外重组：在DNA连接酶的催化作用下，将外源DNA分子（目的基因）与载体DNA分子连接成一个重组分子的过程。
6)粘性末端：在双链DNA分子的末端，有一条链的3’或5’端比另一条链的3’或5’端要长，这样的双链DNA分子的末端称为粘性末端。
7)基因组DNA文库：存在于转化细胞内由克隆载体所携带的所有基因组DNA的集合。
2、重组DNA技术的基本过程1)分2)切3)接4)转5)筛6)表达3、重组DNA技术中常用工具酶有哪些？各有什么特点和作用。
限制性核酸内切酶：识别特异序列，切割DNA。
DNA连接酶：催化DNA中相邻的5´磷酸基和3´羟基末端之间形成磷酸二酯键，使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接。
DNA聚合酶：以DNA为模板合成双链DNA分子。
4、作为基因工程载体所需具备的基本条件：1)能自主复制2)有多个单一酶切位点，称为多克隆位点（MCS），利于外源DNA分子插入3)具有两个以上的选择性遗传标记，便于重组体的筛选和鉴定4)分子量小，以容纳较大的外源DNA5)拷贝数高6)具有较高的遗传稳定性人工染色体载体包含的调控元件7、人工接头有什么特点？有什么用途？人工接头特点：有限制性核酸内切酶的酶切位点人工接头用途：在平末端上形成粘性末端8、宿主细胞应具备的条件1)处于感受态2)对载体无严格限制3)限制酶和重组酶缺陷4)不对外源DNA进行修饰5)能表达重组体所提供表型特征9、原核表达体系有什么特点？其优点：简单、迅速、经济、适合大规模生产。
分子生物学复习提纲
分子生物学一、名词解释1. 中心法则是指遗传信息从DNA传递给RNA,再从RNA传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译的过程。
也可以从DNA传递给DNA,即完成DNA的复制过程。
2. 半保留复制是亲代的两条链解开，每条链作为新链的模板，从而形成两个子代DNA分子，每一个子代DNA分子包含一条亲代链和一条新合成的链。
3. 重组除了被复制之外，细胞DNA还能发生重排，产生具有不同架设甚至新基因的新分子。
这一性质被泛称为重组。
4. 突变DNA序列中可遗传的改变称为突变。
5. 等位基因同源染色体含有以相同顺序出现的相同基因，这些基因不一定完全相同，他们在序列和功能上可能有少许差异，这些基因被称为等位基因6. 同源染色体在二倍体生物中对等的染色体叫做同源体或同源染色体。
二、选择题1. RNA聚合酶核心酶α、β和β’ 亚基一起构成了RNA聚合酶核心。
2. 碱基比例计算①双链DNA分子中,两互补碱基相等；任意两个不互补碱基之和恒等,各占碱基总数的50%,且不互补碱基之和的比值等于1．②双链DNA分子中A+T/G+C等于其中任何一条链的A+T/G+C③双链DNA分子中,互补的两条链中A+G/T+C互为倒数.即两不互补碱基之和的比值等于另一互补链中这一比值的倒数.④双链的DNA分子中,A+T占整个DNA分子碱基总数的百分比等于其中任何一条链中A+T 占该链碱基总数的比例3. PCR程序设定长的引物，非常容易引起发夹结构，或者其他互补情况，最后形成二聚体，引物CG含量到55%会稳定很多。
PCR聚合酶链式反应，用于体外扩增所需要的目的片段。
①DNA一般为双链。
首先，我们需要把它进行解链，从而产生两条单链，让引物结合上去。
达到复制的目的。
一开始我们设置的高温，刚好能够使得DNA双链解体。
约94~98℃，用3到5min即可。
此反应中我们用的TAQ酶，嗜热杆菌中提取的DNA聚合酶，也是高温启动的，初始的高温适合其开始在体系中的活性，但是约15分钟的高温会导致其半衰期，从而失去活性，使得反应效率降低，所以高温的时间不宜过长。
分子生物学复习题纲
下列关于 DNA 复制的说法不正确的有（ A ）。 按 3′ → 5′方向进行 需要 4 种 dNTP 的参与 需要 DNA 连接酶的作用 涉及 RNA 引物的形成 有关滚环复制不正确是（ B ） 可以使复制子大量扩增 产生的复制子总是双链环状 是噬菌体 DNA 在细菌中最通常的一种复制方式 复制子中编码切口蛋白的基因的表达是自动调节的
2．一个复制子是（ ）。 A．细胞分裂期间复制产物被分离之后的 DNA 片段 B．复制的 DNA 片段和在此过程中所需的酶和蛋白质 C．任何自发复制的 DNA 序列（它与复制起点相连） D．任何给定的复制机制的产物（如单环） E．复制起点和复制叉之间的 DNA 片段
13．一个复制子是（ C ）。 A．细胞分裂期间复制产物被分离之后的 DNA 片段 B．复制的 DNA 片段和在此过程中所需的酶和蛋白质 C．任何自发复制的 DNA 序列（它与复制起点相连） D．任何给定的复制机制的产物（如单环） E．复制起点和复制叉之间的 DNA 片段 14．下述特征不是所有（原核生物、真核生物和病毒）复制起始位点都共有的是（ B ）。 A．起始位点是包括多个短重复序列的独特 DNA 片段 B．起始位点是形成稳定二级结构的回文序列 C．多聚体 DNA 结合蛋白专一性识别这些短的重复序列 D．起始位点旁侧序列是 A-T 丰富的，能使 DNA 螺旋解开
在DNA修复过程中除了需要DNA聚合酶外，还需要DNA连接酶
3
，其作用是将DNA中相邻的碱基链接起来，原核生物DNA聚合酶
4
具有两种外切酶活性，分别从5’→3’和3’→5’降解DNA
5
DNA聚合酶Ⅱ和Ⅲ只有3’→5’外切酶活性。
6
DNA修复包括三个步骤： DNA修复核酸酶 对 DNA链上不正
分子生物学-复习提纲-02.DNA复制
■ 复制的起始需要 起始原点识别复合物(ORC) 参与。
■ 复制叉的移动速度慢得多。
■ 在真核细胞中主要有5种DNA聚合酶，聚合酶α、β、γ、δ和ε
均以dNTP为底物，需Mg2＋激活，聚合时必须有模板链和具有3'-OH末端的引物链。
–DNA聚合酶α 引物合成
–DNA聚合酶β DNA损伤的修复
■ 线性DNA双链的复制：复制叉生长方式有：单一起点的单向、双向；多个起点的双向
■ 环状、多个起始点的双向复制
–环状双向复制 θ结构
–多个起始点的双向复制
━原核生物和真核生物DNA的复制特点
★原核生物DNA的复制——大肠杆菌为例
双链环状DNA分子、中间产物θ结构、双向、复制叉在距起始点180°处会合
━复制子：一般把生物体的复制单位称为复制子。
■ 细菌、病毒和线粒体的DNA分子——单个复制子
■ 真核生物基因组——多个复制起点、多个复制子
★复制起点为固定的序列，这个固定的序列被参与复制起始的特殊蛋白质所识别。
★复制叉以DNA分子上某一特定顺序为起点，向两个方向等生长前进。
━复制的几种主要方式
–DNA聚合酶δ 先导链和滞后链的合成
–DNA聚合酶ε 补全去掉RNA引物后的缺口。
★原核与真核DNA复制特点比较
真核 原核
DNA聚合酶 无外切酶活性 有
引物切除 RNA酶 DNA聚合酶I
起始位点 多个 1个
■ 起始 RNA引物
– 起始复合体与4×9bp结合
– 在Ⅱ型拓扑异构酶的作用下，3×13bp 区域松弛
– DNA解旋酶作用下，发生解链
– 单链结合蛋白覆盖复制泡，以免断裂和再复性
分子生物学复习提纲
分子生物学复习提纲1 绪论P1 现代生物学研究的目标生物学发展的四个重大事件：创世说与进化论、细胞学说、经典生物化学和遗传学、DNA的发现P4 现代生物学的两大支柱？遗传学研究目标；生物化学研究目标生物化学的双重使命P6 噬菌体侵染细菌的过程P8 分子生物学是什么的科学？P11 分子生物学的3条基本原理分子生物学研究的四个方面：DNA重组技术；基因表达调控研究；结构分子生物学；基因组、功能基因组研究2 染色体与DNA核酸的单位，碱基的种类，糖的种类，化学键。
图2-1，2-1P19 一段话P22 染色体特征；真核细胞染色体构成：蛋白质；DNA；染色质和核小体P29 真核生物基因组的结构特点P30 原核生物基因组：结构、转录单元、重叠（有三种情况）P32 DNA一级结构；DNA二级结构；P36 DNA的高级结构，第一段话P38 半保留复制；复制的起点、方向和速度P40 复制的几种主要方式P44 原核生物DNA复制的特点P48 整合生物DNA复制的特点P51 DNA的修复P56 转座子、种类和结构特征P62 转座作用的特征，转座的种类3 生物信息的传递（上）P66 第二与第三段P67----P95都很重要，全部看。
P99 RNA的编辑，第二段P101 RNA编辑生物学意义；RNA的在编码P102 RNA的化学修饰；核酶P104 核酶种类和特点4 生物信息的传递（下）P107----P147都很重要，全部看。
5 分子生物学研究方法P155----p166重要。
P170 基因文库构建第一段P172本页全看P176 基因文库筛选方法有哪些P178 什么是SNP，分为哪三类P182 基因克隆技术第一段P187 蛋白质组学，第一段P188 双向电泳技术依赖蛋白质什么特性，做什么用的？7 基因的表达与调控（上）P231----P244，都很重要，全部看P246----P249 色氨酸操纵子8 基因的表达与调控（下）P280 最后一句话P281 一段话P282----P296，全部看P298 增强子特性9 疾病与人类健康P338 癌，肿瘤医学研究的三项成就；癌基因分类；P351 人类免疫缺陷病毒：病毒颗粒的形态结构和传播；P355 HIV的复制过程62 感染及致病机制P364 乙型肝炎病毒：病毒粒子结构；P368 HBV的复制过程自己学习人禽流感病毒。
生物选修1复习提纲
生物选修1复习提纲
第一部分分子生物学
1.什么是分子生物学
分子生物学(molecular biology)是一门研究物质基础和生物活动的学科，它结合了分子、细胞、发育、遗传、生理学等多种学科，关注生物体的分子基础，深入研究生物的构成，解释生物的形成和演变，并从分子水平上探讨生物活动的机制。
2.分子生物学研究的内容
(1)生物体内细胞外环境及其相互作用;
(2)胞内有机物的形成及其恒定性的维持;
(3)细胞内的遗传物质的组成、功能及其调控;
(4)细胞外环境中的遗传物质的变化;
(5)细胞增殖、分化及其调控机制;
(6)细胞及组织的生长及发育机制;
(7)细胞通讯及其系统机制；
(8)分子发育生物学的研究等。
3.分子生物学的研究方法
(1)克隆技术：克隆是通过原核或真核细胞复制获得一株全一样的复制体，是分子生物学研究领域常用的技术方法，可用于研究遗传物质、蛋白质及生物活性物质的合成、功能及其调控机制等。
(2)同源比对技术：同源比对是指将两个不同的基因序列，通过以比较两个序列内部序列相似度来发现其中的差异，从而鉴定基因功能及其调控机制等。
(3)转基因技术：转基因技术是指将一个物种的基因植入另一物种的细胞内，使另一物种的细胞可以合成它自身原有不具的蛋白质。
分子生物学与基因工程复习提纲
分子生物学与基因工程复习提纲第一章绪论1、分子生物学简史理论上的三大发现生物的遗传物质是DNADNA双螺旋模型遗传信息的传递方式技术上的三大发现基因操作的工具酶的发现载体的应用逆转录酶的发现2、证明遗传物质是DNA的三大经典实验肺炎双球菌转化实验噬菌体感染实验病毒重建实验3、1953年，Watson/Crick 提出了DNA双螺旋结构模型。
4、遗传信息的传递方式的发现1961 年Monod 和Jacob 提出了操纵子学说；1964 年Nirenberg 等提出了“三联体密码说”；Crick 提出了遗传信息流向和表达的中心法则。
5、限制性核酸内切酶的定义、特点以及在基因工程中的意义；DNA连接酶6、克隆载体和表达载体第二章染色体与DNA1、核酸、核苷酸、核苷、碱基、嘌呤、嘧啶、DNA、RNA、磷酸二酯键2、染色体、核小体、组蛋白、非组蛋白3、基因组大小与C值矛盾、重复序列4、真核基因组结构的特点；与原核基因组的差异5、DNA双螺旋结构的要点、氢键、碱基堆集力、A、B、Z型结构6、超螺旋结构、正/负超螺旋7、DNA复制、半保留复制、半不连续复制、冈崎片段、拓扑异构酶、Klenow片段8、真核生物DNA复制的特点9、转座、转座子、转座子的分类和共同特点、转座的遗传效应第三章RNA合成1、转录、转录泡、有义链、反义链、RNA聚合酶2、启动子、终止子、增强子、依赖ρ因子的终止、不依赖ρ因子的终止3、原核生物转录的过程4、真核生物mRNA转录后的加工5、真核生物成熟mRNA的结构特点第四章蛋白质的合成1、遗传密码、密码子、反密码子、密码子偏好性、简并性2、起始密码子：AUG 终止密码子：UAA、UAG、UGA3、错义突变、无义突变、同义突变、移码突变4、tRNA的结构：两个关键部位3ˊ端CCA：接受氨基酸，形成氨酰-tRNA；与mRNA的结合部位—反密码子。
5、SD序列、反SD序列6、蛋白质合成过程（翻译的过程）7、蛋白质转运的机制、信号肽第五章基因表达调控1、基因组、管家基因、组成性表达、可诱导基因（奢侈基因）、诱导、阻遏2、操纵子、顺势作用元件、反式作用因子3、原核生物基因调控模型乳糖操纵子调控的机制：阻遏蛋白负调控以及CAP正调控色氨酸操纵子调控的机制：反馈抑制和衰减子调控4、RNA干扰、小干扰RNA（siRNA）、微小RNA (miRNA)第六章基因工程的酶学基础1、限制性内切酶、DNA连接酶、DNA聚合酶和反转录酶、DNA修饰酶、外切核酸酶、单链内切核酸酶、RNA酶2、回文序列、II型限制性内切酶、粘性末端、同工酶、同尾酶、同裂酶3、TaqDNA聚合酶的特点以及在PCR中的应用第七章基因工程载体1、载体、克隆载体、表达载体2、质粒、噬菌体、柯斯质粒、酵母人工染色体、细菌人工染色体3、标记基因（报告基因）、插入失活、α-互补、蓝白斑筛选4、质粒作为基因工程载体的优点5、碱变性抽提法提取质粒的原理6、穿梭载体第八章基因操作的主要技术原理1、提取核酸的一般程序2、碱变性法提取质粒DNA的步骤3、核酸浓度与纯度测定的方法：紫外吸收4、核酸电泳：琼脂糖电泳、脉冲场凝胶电泳第九章目的基因的获取1、PCR的原理和步骤2、基因组文库、cDNA文库、鸟枪法、DNA化学合成第十章基因工程的操作过程1、表达载体的结构特征2、将目的基因导入受体：植物：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法动物：显微注射法微生物：化学转化法、电转化法3、重组子筛选：双抗生素法、蓝白斑筛选4、重组子鉴定：核酸分子杂交法裂解细菌电泳鉴定分子大小限制性内切酶法PCR法基因产物检测法序列分析5、Northern杂交、Southern杂交、Western Blot、Elisa（酶联免疫吸附）第十一章基因工程的应用1、植物基因工程2、动物基因工程3、基因工程药物4、基因治疗5、基因工程与环保第十二章基因工程及其产品安全性管理1、基因工程产品对人类健康的影响2、基因工程产品对生态系统的影响3、基因工程生态安全性评价的指标复习题：简答题：1、分子生物学历史上，具有重要意义的理论上和技术上的三大发现分别是什么？2、什么叫转座子？列举转座子的类型及其共同特点。
(完整)分子生物学复习纲要
第一章分子生物学发展简史一．名词解释分子生物学：分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能，并从分子水平上阐述蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系及其基因表达调控的机理的学科。
基因组：是某个特定物种细胞内全部DNA分子的总和二．论述题1写出分子生物学事件简表并简单叙述3个重要事件2。
简述现代分子生物学的建立和发展阶段①遗传信息传递中心法则的建立②对蛋白质结构与功能的进一步认识③DNA双螺旋发现三．填空题1。
DNA重组技术的具体内容就是采用人工手段将不同来源的含某种特定基因的DNA片段进行重组，以达到改变生物基因类型和获得特定基因产物的目的的一种高科学技术。
2. Buchner兄弟19世纪末提出酶,脲酶的提纯和结晶证明酶的本质是蛋白质3。
Watson和Crick提出了ＤＮＡ双螺旋模型4。
Morgan发现了连锁遗传规律5.Avery证明了DNA是遗传学信息的载体6。
Oswald Avery确定DNA是遗传物质7。
Thomas Roderick在1986年提出基因组学8.Cohen和Berg开创了基因工程9 基因组学是指对所有基因进行基因组作图（包括遗传图谱、物理图谱、转录本图谱 ) ，核苷酸序列分析，基因定位和基因功能分析的一门科学.10 生物信息学是指应用信息科学的理论、方法和技术，管理、分析和利用生物分子数据的学科。
四．缩略词DNFB 二硝基氟苯 PCD 细胞程序性死亡 RT 逆转录酶RE 限制性内切酶 DNA 脱氧核糖核酸第二章遗传物质的分子本质一：名词解释核酸的变性：是指核酸受到加热、极端的pH或离子强度的降低等因素或特殊的化学试剂的作用，其双螺旋区的氢键断裂，变成单链的过程,其中并不涉及共价键断裂.复性：当去除变性因素是，解开的互补单链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象称为复性。
二：论述题1.化学断裂法基本原理是什么？碱基的修饰，碱基的脱落，戊糖—磷酸骨架被特异性切割，从而产生一组长度不同的DNA链降解产物，经聚丙烯凝胶电泳分离和放射自显影之后，可直接读出待测DNA片段的核苷酸序列.2.James Watson和Francis Crick于1953年提出的B型双螺旋，其主要内容是?(1）DNA由两条呈反平行的多聚核苷酸链组成，两条链相互缠绕形成右手双螺旋；(2）组成右手双螺旋的两条链是互补的，它们通过特殊的碱基对结合在一起，碱基配对规则是一条链上的A总是与另一条链的T，G总是和C以氢键配对.其中AT碱基对有二个氢键,GC碱基对有3个氢键;（3）碱基对位于双螺旋的内部,并垂直于暴露在外的脱氧核糖磷酸骨架。
现代分子生物学复习提纲
现代分子生物学复习提纲1.分子生物学的发展史（具体科学家）2.分子生物学是干什么的?3.染色体的组成4.原核与真核基因组的区别5.C值，C值谬论，C值反常现象6.Z-DNA7.DNA的结构（了解），高级结构（正超和负超螺旋）8.DNA复制的机理：半保留复制，特点：半不连续复制；复制叉，复制子（在原核和真核的区别）9.复制的几种方式（线性DNA和环状DNA-θ型，滚环型和D环型；各自属于哪类生物）10.线性DNA复制存在的问题-丢失11.DNA聚合酶（4种）及作用12.RNA引物酶（需了解）13.复制的影响因子及这些因子在复制中的作用14.DNA的修复（5种修复）15.转座子的概念，分类，还有Ac-Ds系统16.转座作用的遗传学效应（了解）17.编码链，有义链，无义链18.转录的3个1，R NA聚合酶在原核生物的组成成分与功能，2，RNA聚合酶与DNA聚合酶的异同点，3，三大酶的产物是什么19.原核启动子的结构特征，功能20.增强子的概念，作用1，原核生物mRNA的特征与真核生物mRNA的特征，2，基因家族的区分，结构和功能21.抗终止的作用22.加工：mRNA的剪接（剪切和连接），RNA的编辑，再编码与化学修饰，生物学意义23.核酶的概念，ⅠⅡ内含子的方式，有哪些是核酶。
RNA在生物进化中的地位（了解）24.遗传密码特性，S-D序列25.TRNA的L型二级结构，三级结构，tRNA的功能和种类26.核糖体的亚基构成，核心位点27.活化，起始，延伸，终止的参与因子及其作用28.蛋白质的加工包括那几个点，分子伴侣。
29.蛋白质转运机制：边翻译边转运30.基因工程（看课件），对象，（感受态的制备，DNA的转化概念），PCR，核酸凝胶电泳，基因组DNA文库的概念，31.（RNA的操作技术）围绕cDNA文库的构建32.SNP的标记，分子标记包括？33.DNA的变性（课件第2章），复性，分子杂交及其影响因素34.基因表达调控分为（永久性调控和适应性调控），基因表达调控表现在哪些方面（329页）35.操纵子的组成，概念，2大操纵系统（正，负调控），形式36.什么是弱化子37.转录后调控（8种，小标题）38.基因家族，分类，发育调控的家族有那些39.DNA甲基化与基因活性的影响40.真核基因转录机器的主要组成（了解），增强子，反式作用因子（举例说明，属于这两大类型？）41.乙酰化与去乙酰化的影响，42.DNA结构域，位置，5大类43.激素与热激蛋白对基因表达的影响，应答元件概念44.其他表达调控（加入到基因表达调控中），调整方式45.致癌基因与原癌基因，基因治疗与基因工程的区别46.人类基因组测序的科学意义。
分子生物学复习大纲
第二章有机体、染色体和基因1、定义Genome、C值、C值矛盾、Operon、Regulon、Promoter、Operator、Discontinuous gene、Gene family、基因簇、假基因、DNA变性、DNA复性、DNA杂交、DNA熔点、基因定位2、计算题（1）已知E. coli的基因组大小为4.2×106 bp，Cot1/2为4。
一个物种的基因组为21×106 bp，求该物种基因组的Cot1/2?（2）已知某真核生物基因组的中速复性组分的化学复杂长度为2×108 bp（占整个基因组的30%），其Cot1/2为2。
计算中速复性组分的动力学复杂长度和重复频率各是多少？（3）某条染色体上有三个基因a、b、c，通过双因子杂交试验确定AB与ab杂交时重组体出现的频率为10%，AC与ac杂交时重组体出现的频率为38%，BC与bc杂交时重组体出现的频率为35%，试推断这三个基因在染色体上的排列顺序以及它们之间的遗传图距。
3、其他知识点（1）原核生物大肠杆菌染色体上基因组织结构特点。
（2）影响Cot1/2值的因素有哪些？（3）真核生物DNA序列类型有哪些?（4）构成染色体的3要素是什么？（5）原核生物与真核生物基因组差异有哪些？（6）内元与外元的特点第三章DNA复制1、名词解释复制原点、连环分子、切刻平移、链的置换、模板转辙、引发酶、引发体、转录激活、共价延伸、复制体、复制元、复制元族2、DNA的复制方式有哪些？3、DNA复制叉处发生的反应有哪些？4、简述大肠杆菌复制原点的结构特征。
5、原核生物线形DNA复制中如何解决末端隐缩问题？6、真核生物引发酶的特点是什么？7、试述SV40 DNA复制的过程。
第四章突变1、名词解释Mutation、诱发突变、转换、颠换、移框突变、同义突变、错义突变、无义突变、回复突变、抑制突变、抑制基因、增变基因、突变热点、离体定向诱变2、问答题（1）简述错义突变的基因内和基因间抑制突变的抑制机理。
分子生物学-复习提纲-04.RNA的转录1
RNA的转录启动子的选择、(通过启动子)、转录起始、转录的延伸和终止。
RNA聚合酶Ⅱ是真核细胞核中转录RNA的酶━启动子选择→转录起始复合物：– RNA聚合酶全酶识别启动子（σ亚基的帮助下），并可逆性结合形成封闭复合物（二元的）–伴随DNA 构象的变化，结合处双链被解，封闭复合物→开放复合物（强启动子为不可逆）–开放复合物与最初的两个核苷酸相结合，两个核苷酸之间形成磷酸二酯键，此时三元复合物形成——RNA聚合酶、DNA和新生RNA链。
–通过启动子：当新生RNA链达到9个以上核苷酸时，离开启动子，并释放σ因子，进人延伸期━转录的延伸→转录延伸复合物–聚合酶沿DNA链移动，靠近RNA链3’端的DNA不断解旋，游离核苷酸加到新生的RNA链上不断延伸，同时在5'端重新形成DNA双链，将新生RNA链挤出转录延伸复合物。
━转录的终止– RNA链延伸到转录终止位点，不再形成新的磷酸二酯键，转录泡瓦解，转录延伸复合物分离，RNA链释放，DNA恢复双链，同时RNA聚合酶掉落。
注：━转录起始——就是RNA链上第一个核苷酸键的产生。
━通过启动子的时间代表一个启动子的强弱━转录延伸复合物与转录起始复合物相比，极为稳定，可以长时间地与DNA模板相结合而不解离。
★真核生物的转录━起始复合物的分子量很大：RNA聚合酶、7种辅助因子，辅助因子包含多个亚基。
━转录调控因子：真核生物RNA聚合酶不能直接识别启动子区，需要转录调控因子(辅助蛋白质) 按特定顺序结合于启动子上，RNA聚合酶才能与之相结合并形成前起始复合物。
━转录和翻译的速度基本相等。
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• 基因家族的分类及其主要的表达调控模式 • 反式作用因子/转录因子的结构特征，各部分的结构特点。 • 调控蛋白DNA结合域的主要结构特征有哪些，并各举一例说明。 • 说出几种DNA聚合酶II的转录因子及其识别序列和DNA结合域的结
构特征。 • 真核生物转录前水平的基因调节主要有哪些方式？ • DNA甲基化对基因表达的调控机制 • iRNA的概念及其对基因表达的调控 • 比较真核生物和原核生物转录水平调控与翻译水平调控的异同点
第五章 原核生物表达调控
• 名词：操纵子，弱化子，降解物抑制作用， 魔斑核苷酸
• 简述代谢物对基因表达调控的两种方式 • 什么是操纵子学说？ • 简述乳糖操纵子的调控模型 • 当环境中没有色氨酸时，分别阐述阻遏蛋
白和弱化子是如何调控色氨酸操纵元的。
第六章 真核生物表达调控
• 名词解释：顺式作用元件，反式作用因子，启动子，增强子，基 因表达，看家基因，RNAi，SiRNA，miRNA
第一章 绪论
• 中心法则 • 分子生物学发展史中重要的事件？
第二章 基因、染色体和DNA
• 名词：半保留复制，半不连续复制，转座子 • 基因概念的发展和演变 • 原核生物和真核生物聚合酶 • DNA复制的过程 • DNA修复 • DNA转座
第三章 RNA转录
• 名词解释：编码链、模板链、剪接、剪接体、RNA编辑、 指导RNA、GT-AG规则、核酶、套索结构
关于考试
• 平时成绩占30％（含考勤和习题测试）， 理论考试占70％。
• 题型：名词解释8，选择题，填空题，是非 题，简答题5，分析题2
感谢大家的积 极配合与投入
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第四章 蛋白质翻译
• 名词解释：信号肽，分子伴侣，密码子简并性 • 简述遗传密码的特性及密码简并性的生物学意义。 • 写出几种终止密码子的序列和别名。 • 核糖体活性中心有哪些？ • 原核生物与真核生物蛋白质翻译起始的异同？ • 哪两类抗生素只能特异的作用于原核生物核糖体？哪些只作用
于真核生物核糖体？哪些在两者中都有作用？ • 什么是分子伴侣？分子伴侣有哪些重要功能？ • 什么是信号肽？它在序列组成上有哪些特点？有哪些功能？ • 简述叶绿体蛋白质的跨膜运输。 • 蛋白质有哪些翻译后的加工修饰？其机制和生物学功能是什么？ • 什么是核定位信号？其主要功能是什么？