致病性微生物的实验诊断学基础

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致病性微生物的实验诊断学基础
•病 毒 学 检 诊
• 基本方法：
鸡胚
• 病毒培养与分离
动物
•
细胞
• 细胞阳性的判断
•
尿液中抗原阳性
•
鸡胚
绒毛尿囊膜的病变
•
死亡
•
动物
发病与死亡
•
培养液PH变化
•
细胞
干扰试验
•
CPE
• 鉴定病毒
加标准血清后的中和试验
•
含抗原材料的抗原性检测
• 电子显微镜病毒检测
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2020/12/17
致病性微生物的实验诊断学基础
血尿便痰唾咽脑腺局
肝脾肺肠淋骨脑
• 病种
液洗脊穿部
巴髓
•
液液液穿
结
•
刺
• ——————————————————————————————————
• 斑疹伤寒 ++
+
• 鼠疫 +
++
++ +
++ ++ + ++ ++
• 霍乱
++
+
• 炭 疽 ++ +
++
++ ++ ++ ++ ++ +
• 布 病 ++ +
➢抗体:基本结构、特点、功能、类别等 ； ➢ 补体:概念、组成、功能
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致病性微生物的实验诊断学基础
•血清学诊断基础知识（2）
•抗原、抗体结合原理
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致病性微生物的实验诊断学基础
•血清学诊断基础知识（3）
• • 抗原、抗体反应特点
➢ 特异性 ➢ 阶段性 ➢ 比例性 ➢ 可逆性
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致病性微生物的实验诊断学基础
•采样注意事项：
➢时间性 ➢针对性 ➢防护与消毒 ➢无菌操作 ➢标记 ➢昆虫、动物标本
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致病性微生物的实验诊断学基础
•临 床 与 尸 解 取 材 参 考 表
•
病人取样
解剖取样
•
————————————————————————————
• 待诊
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致病性微生物的实验诊断学基础
•二、常见病毒性传染病的实验诊断 学
• 基础
•法定病毒性传染病种类：
（甲类传染病）
乙类传染病：病毒性肝炎、艾滋病、脊髓灰质炎、麻疹、
流行性出血质热、狂犬病、流行性乙型脑炎。
丙类传染病：流行性感冒、流行性腮腺炎、风疹骊、急性出血 性
结膜炎。
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致病性微生物的实验诊断学基础
•非污染材料检验程序
•非污染样品
•保存一部 分(以备再查
)
•血清学 •检查
•镜 检
•细菌培养
•动 物
• •
• • • •
• •
•G •
• •
•G
•
•
•查Ag
•查Ab 色 染
免
色
疫
及
荧
非
光
染
镜
鉴镜
检
定检
分 菌
血 清 学
检
验
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染 色 及 其
Hale Waihona Puke Baidu
免 疫 荧 光
他
染
色
染 色 及
免 光疫
荧
镜 检
鉴 定
原
查 抗
查 抗 体
其
他
染
色
致病性微生物的实验诊断学基础
•被污染材料检验程序
•污染样品
•保存一部 分(以备再查
)
•上清或滤过液 (病毒)
•样品处理
•沉淀物或滤阻物 •(经一定稀释)
•接种 •小鼠 •︹ •查肉 毒毒
素
•︺
•接种 幼猫
•︹查 葡萄 球菌 肠毒 素︺
•乳鼠 .鸡胚 .组织 培养 ︹病 毒、 立克 次体 等︺
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致病性微生物的实验诊断学基础
•血清学诊断基础知识（4）
• • 抗原、抗体反应影响因素
➢ Ag ➢ Ab ➢ 电解质 ➢ 温度 ➢ pH
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致病性微生物的实验诊断学基础
•血清学诊断基本方法：
➢ 玻片凝集试验 ➢ 试管凝集试验 ➢ 抗球蛋白凝集试验 ➢ 补体结合试验 ➢ ELISA试验 ➢ 琼脂扩散试验 ➢ 免疫荧光试验
•细菌 培养
•查抗原
•CFT •协同 SAT •反向 HAT
•HAIT •等
•镜检
•G染 •IF
色及
T
其它 •查
染色 •抗
•原
•动物
•查 •分 抗 体 •菌
•细菌培养
•镜 •鉴 •检 •定
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致病性微生物的实验诊断学基础
•细菌病原学诊断检样处理
➢ 一般样品处理：包括洗脱、提取、浓缩和抗 杂菌等；
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致病性微生物的实验诊断学基础
•血 清 学 检 诊
•1、查抗体 •IgG ——早期及恢复期； •IgM——4周内； •IgA ——2～8周。
• 基本方法：
• • • • • • • • •
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血凝抑制试验 （例如流感、 麻疹等） 间接血凝抑制试验 对流电泳 琼脂扩散试验 补体结合试验 酶标抗体染色试验 ELISA试验 免疫萤光试验 中和试验等
致病性微生物的实验诊 断学基础
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2020/12/17
致病性微生物的实验诊断学基础
•一、常见细菌性传染病的病原学及 • 血清学诊断基础
•法定细菌性传染病种类：
➢甲类传染病：鼠疫、霍乱； ➢乙类传染病：细菌性痢疾、伤寒和副伤寒、淋
病、梅毒、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、 猩红热、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、炭疽、 流行性和地方性斑疹伤寒； ➢丙类传染病：肺结核、麻风病、感染性腹泻。
➢ 节肢动物标本处理
❖ 蚤类：制作标本时挤出前胃，涂片，分菌时可 用单体也可用群体，研碎后接种培养。
❖ 蜱：用消毒液浸洗后研磨，分菌。 ❖ 蝇：用选择性增菌液洗，培养洗液。 ❖ 蚊：对细菌性传染病意义不大，主要时对病毒
性传染病意义较大
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致病性微生物的实验诊断学基础
•病 原 鉴 定
➢ 菌属的确定 ➢ 细菌种型的确定
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致病性微生物的实验诊断学基础
•标本运送：
➢ 严格包装，外表消毒，编号，登记，贴标签，严防 容器破碎、滴漏，避免活标本逃逸等；
➢ 附送检单，填明名称、数量、地点、时间等 ；
➢ 专人护送，不要委托携带，尽快到达目的地 ；
➢ 妥善保存，运送途中避免高温、日光、过度震动等 。
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❖ 细菌染色
❖ 细菌生化反应试验
✓ 糖代谢试验 ✓ 有机酸、铵盐反应 ✓ 蛋白、氨基酸、含氮化合物 ✓ 呼吸酶类试验 ✓ 毒性酶类试验 ✓ 胆汁（胆盐）溶菌试验
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致病性微生物的实验诊断学基础
•血清学诊断基础知识（1）
• • 抗原、抗体和补体
➢ 抗原:完全Ag、半Ag、构成Ag条件，医学上主 要Ag类别、共同Ag与异嗜性Ag ；
致病性微生物的实验诊断学基础
• • • • • • • • • •
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•查 抗 原
基本方法： 血凝试验 间接血凝试验 血球吸附试验 琼脂扩散试验 对流电泳试验 免疫萤光试验 ELISA试验 中和试验 同位素
致病性微生物的实验诊断学基础
3rew
演讲完毕，谢谢听讲!
再见，see you again
致病性微生物的实验诊断学基础
•病 毒 病 的 诊 断
•临床诊断
•
血清学诊断
•实验室诊断 病毒学诊断
•
分子病毒学诊断
•病毒性疾病的确诊
• 临床诊断＋实验室诊断
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致病性微生物的实验诊断学基础
•采 样 标 本
血液 脑脊液 粪便 咽分泌物（咽拭子） 尿 疱疹液 结膜拭子 痰、鼻分泌物 尸检：脑、肝、肺、肾、心、胃、淋巴结等器官 活检：病变器官
+
++ ++
+
• 伤寒、副伤寒 ++ + ++
++
• 痢疾
++
• 肉毒毒素中毒 +
• 钩 体 病 ++ ++
• ———————————————————————————————————
•
注:++代表一定要取样，+代表亦应取样
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致病性微生物的实验诊断学基础
•样品保存：
➢冷藏保存 ➢保存液保存