碘标记血管紧张素Ⅰ放射免疫分析药盒说明书

【药品

名称】

碘标记血管紧张素I放射免疫分析药盒

【概述】肾素-血管紧张素系统在机体的血压、水、电解质平衡的调节上起着重要作用。因此血浆肾素活性(PRA)和血管紧张素Ⅱ(AⅡ)浓度的测定已经成为原发性和继发性高血压的诊断及研究的重要指标。血浆肾素活性(PRA)的测定是以血管紧张素I(AI)产生的速率来表示的，血管紧张素I(AI)是由肾素作用于血管紧张素原而生成的10肽，它被血管紧张素转换酶降解成血管紧张素Ⅱ。血管紧张素I正常生理浓度下无生物活性。PRA、AⅡ二者测定均采用酶抑制剂来阻断转换酶和血管紧张素酶的活性，以达到准确测定PRA和AⅡ的目的。该项指标的测定，可作为判断肾素活性和对多种高血压及肾脏疾病诊断、分型的依据。

【测定原理】本试剂盒采用匀相竞争放射免疫分析方法，测定人血浆中AI的含量。先将校准品(或样品)、标记物和抗体按操作程序依次加入试管中，使标记抗原和抗原与限量抗体发生竞争性结合，待反映平衡后，加入分离剂，离心沉淀，使游离抗原与抗原抗体复合物分离，测量沉淀中放射性强度。随AI含量增加，放射性强度减少。

【试剂组成和配制方法】1.校准品 7瓶(冻干品) 每瓶用 ml缓冲液溶解，浓度分别为:0，0.19，0.38，0.75，1.5，3.0，6.0ng/ml 2.125I —AI 1-2瓶(红色冻干品) 每瓶用5.5ml缓冲液溶解，3.5μCi/μg 3.抗体 1瓶(蓝色冻干品) 使用前用 ml缓冲液溶解(如不填写100T 10ml溶解) 4.缓冲液 1瓶(液体) 5.分离试剂 1瓶(悬浮液) 使用前充分摇匀。 6.8-羟基喹啉 1瓶(液体) 7.二巯基丙醇 1瓶(液体) 8.EDTA-Na21瓶(液体) 9.保温液 1瓶(液体) 10.质控血清 2瓶(冻干品) 使用前用0.5ml缓冲液溶解

【样本要求】1.酶抑制剂的配制:按取血5ml计每支采血管加入50ulEDTA-NA2(如果晶粒析出，可温热溶解)50ul8-羟基喹啉和25ul二巯基丙醇，混匀，备用或2-8℃储存可用一周。 2.标本采集:按常规取静脉血5ml，迅速注入放在冰水浴冷却的酶抑制抗凝试管中，摇匀，立即放回冰水浴中冷却，待离心时取出。1000rpm离心5分钟(最好4℃离心机)，分离取出血浆，此操作应该在15分钟内完成，血浆备检或-25℃保存，可用2个月。 3.标本处理:测定前将冰冻的血浆标本在流动的冰水浴中快速融化，快速取双份标本，每份分别加入10ul保温液。作对照管的一份标本放在冰水浴中，作为测定管的一份标本放在37℃水浴中温育1小时，取样后放入冰水浴中。

【适用

仪器】

GC-2010γ放射免疫计数器、DMF-96型多管放射免疫计数器、γ放射免疫单管分析仪等。

【操作方法】将圆底聚苯乙烯试管编号(按复管操作)，按下表程序操作: AI加样测定程序表单位:μl 试剂NSB管S0-S6校准管对照管样品管生理盐水100 100 100 100

缓冲液200 ―――

校准品―100 ――

待测血浆标本――100 100

125I―AI 100 100 100 100

AI抗血清―100 100 100

混匀，4℃放置15小时以上，任取3管测量，作为总放射性T(cpm)。

分离试剂1000 1000 1000 1000

充分混匀，4℃放置15分钟

3500 rpm离心(离心力1500g)15分钟，立即吸去上清液，测各管沉淀的放射性计数(cpm)。

【数据

处理】以B/B0%为纵坐标，以校准品浓度为横坐标，在Logit-Log坐标纸上绘制校准曲线，根据样品B/B0%，从校准曲线上查出样品的含量，目前多用于自动γ计数仪预先编制的程序直接给出有关参数、校准曲线及样品浓度。

【质量

控制】

对质控血清的测定结果在允许范围内。

【方法

的局限

性】

本药盒仅用于血浆样本的测定，对其它体液样本测定的可靠性尚未得到充分的实验确认。

【对实

验结果

的解

释】

本药盒的检测结果不是临床适应症的唯一确认指标，其临床意义需结合其它检测指标及临床表现具体分析判断。

【有效

期】

2-8℃避光保存效期30天。

【注意事项】1.使用本药盒的实验室应具有“放射性同位素使用许可证”，使用过程中产生的放射性废物应按国家有关规定处理。 2.本药盒内不同批号的试剂不能混用，同一批号的试剂可混合均匀后使用。 3.各试剂必须摇匀后使用，使用前应平衡到室温(15-28℃)。 4.离心后吸弃上清液时注意不要损失沉淀。 5.标记物和校准品溶解使用后应该冰冻保存。

【包装

规格】

100T/盒