轮状病毒感染

分类 • 轮状病毒分为A、B、C、D、E、F6个群 • A群为典型轮状病毒，同胃肠炎关系最密切， 宿主包括人和各种动物。 • B群宿主为猪、牛、大鼠和人 • C群和E群为猪 • D群为鸡和火鸡 • F群为禽
培养特性 • 轮状病毒很难在细胞培养物上生长。A群的 某些毒株、B群与E群迄今尚未能适应细胞。 有时只能用易感动物分离、增殖病毒。 4~14日龄的小鼠是理想的动物模型，易感 性为95%。 • 常用来培养轮状病毒的细胞有MA-104、 AGMK、CV-1、HePG2、CaCO-2。其中 AGMK和MA-104主要用于分离轮状病毒。
轮状病毒感染
主讲：任丽娟
概述 • 轮状病毒（Rotavirus，简称RV）广泛存在 于各种动物体内，引起幼年动物轻微或无 临床症状感染，或导致腹泻并有不同程度 的死忙，是一种重要的潜在病原，并常与 其他病毒或致病性细菌混合感染。
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发现历史 • 1943年，雅各·莱特（Jacob Light）与荷瑞 西·赫德斯（Horace Hodes）证明了在感染 传染性腹泻的小孩身上有一种滤过性的病 媒，这个病媒也会造成家畜腹泻。 • 30年后，被保存下来的病媒样本证明此病 媒是轮状病毒。 • 1974年，汤玛斯·亨利·费留特（Thomas Henry Flewett）在通过电子显微镜观察过 这类病毒之后，建议将其命名为“轮状病 毒”（rotavirus）
结构
• RV属呼肠病毒科(Reoviridae)。病毒颗粒呈球形， 直径60～80nm，病毒核心含双股RNA，为其基 因组，由11个RNA节段组成。病毒核心被二十面 壳体包裹，形成双层核衣壳，内层核衣壳的壳粒 呈放射状排列，有如车轮状条幅，RV因此得名。
致病性
• 轮状病毒引起急性胃肠炎，主要传播途径为粪-口 传播。 • 轮状病毒可分为7个组（A～G），A～G轮状病毒 能引起人类和动物腹泻，D～G组只能引起动物腹 泻。A组轮状病毒感染最为常见，它是婴幼儿腹 泻的最重要的病原体。有60%以上婴幼儿急性胃 肠炎系由轮状病毒引起。在发展中国家是导致婴 幼儿死亡的主要原因之一，患者以6月至2岁婴幼 儿多见。温带地区秋冬季是疾病发生的主要季节。
• 易感动物： • 婴幼儿和各种幼龄动物(猪、牛、羊、 马、兔、猴、家禽等)，多见于1周内犊牛， 猪多发于8周龄内仔猪。 • 轮状病毒感染可以从人或一种动物传 给另一种动物，如人→仔猪、羔羊；牛犊 和鹿 →仔猪 • 季节：晚秋、冬季、早春多发
实验室诊断
电镜检查：腹泻24h内采集小肠内容物或粪便 超速离心处理后，电镜检查。 • 免疫荧光技术：小肠做冰冻切片或涂片进行 荧光抗体检查。 • ELISA：检测血清中抗体 • RT-PCR •
动物轮状病毒疫苗 • 目前，动物轮状病毒主要以减毒活疫苗为 主，猪轮状病毒疫苗种类有没过轮状病毒 弱毒苗、RV-TGEV二连弱毒苗和俄罗斯的 三联弱毒苗。我国轮状病毒疫苗临床应用 的有中国农科院哈尔滨兽医研究所研制的 RV-TGEV二联弱毒苗。
防治
• 发现患病动物，停止母乳。 • 补水，纠正酸碱平衡，给予葡萄糖盐水自由饮用 或静脉注射葡萄糖盐水和碳酸氢钠溶液。 • 使用收敛止泻剂对症治疗。 • 使用抗菌药物，防治继发感染。 • 免疫接种：妊娠母猪产前接种猪源弱毒疫苗，提 高初乳中IgA含量，初生仔猪可获得良好母源抗体； 新生仔猪接种猪轮状病毒感染和猪传染性胃肠炎 二联疫苗，30min后吃初乳。
培养特性-续 • 对理化因素抵抗力强，室温下存活7个月， 63℃30min灭活，能耐受超声振荡和脂溶 剂，可耐受乙醚、氯仿、去氧胆酸钠等有 机溶剂的处理，但0.01%碘、1%次氯酸钠、 70%酒精可使其灭活。
流行病学 • 传染源： • 患病的人、病畜和隐性患畜 • 传染途径： • 病毒存在于肠道中，随粪便排出体外， 污染饲料、饮水、垫草、土壤等，通过消 化道感染。
间接ELISA试验检测血清抗体水平
• 用PH9.6碳酸盐冲液稀释重组纯化VP6抗原成终浓度为 0.8µg/ml，包被96孔酶标板，100µl/孔，置4℃过夜 • PBST洗涤3次后用5%脱脂37℃封闭3h • PBST洗涤3次后，加入从1:100开始，2倍递增的免疫血清 100µl/孔，置37℃1h。 • PBST洗涤3次后加入1:4000稀释的酶标羊抗兔IgA， 100µl/孔，置37℃1h。 • PBST洗涤3次后，加入含OPD底物溶液，100µl/孔，避光 置于室温下作用10min • 2ml的H2SO4终止反应，酶标仪测定490nm波长的吸光值。