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骨髓细胞形态学检查实验课
骨髓形态学检查
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第十四页，共四十五页。
1、原始粒细胞（0-2%）
原始粒细胞I型：
大小：10～20 um，圆或不规则圆
形； 胞浆：量少，染均匀透明或不透明的淡
蓝或深蓝色，无颗粒； 胞核：大，圆或椭圆，位于中央或稍偏
位，占细胞3∕5～4∕5； 染色质：呈细砂粒状均匀平坦，如一层
细砂，核膜薄，不明显，淡紫 红色；
骨髓血细胞检查适应症
患者多次检查外周血有异常 患者有原因未明的肝、脾、淋巴结肿大 查明恶性肿瘤有无转移 对血液病进行诊断、鉴别诊断和疗效观察
骨髓形态学检查
1
第一页，共四十五页。
骨髓血细胞检查禁忌症
1.凝血因子严重缺乏的出血性疾病，如血友病 。
2.穿刺部位有炎症或畸形。 3.晚期妊娠的孕妇。
骨髓形态学检查
➢ 染色质：呈深紫红色块状；
➢ 胞浆：多，因含特异性颗粒不同，被分为中性分叶核粒细胞，嗜 酸性分叶核粒细胞和嗜碱性分叶核粒细胞。
骨髓形态学检查
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第二十二页，共四十五页。
骨髓形态学检查
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第二十三页，共四十五页。
粒细胞鉴别要点
➢ 原始粒细胞I型无颗粒，II型有少数颗粒，核仁清楚，染色质细颗
粒状； ➢ 出现较大嗜天青颗粒和淡染区，则为早幼粒细胞； ➢ 出现特异性颗粒，核仁消失，则为中幼粒细胞；
2
第二页，共四十五页。
实验内容
➢ 1.判断骨髓增生程度（低倍镜） ➢ 2.巨核细胞计数（低倍镜） ➢ 3.有核细胞分类（油镜）** ➢ 4.填写实验报告**
骨髓形态学检查
3
第三页，共四十五页。
☆ 骨髓有核细胞增生程度
增生程度
➢ 增生极度活跃
正常骨髓形态学检查
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淋巴细胞
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5 单核细胞系统
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26
原始单核细胞
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幼稚单核细胞
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28
4 浆细胞系统
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29
浆细胞
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30
巨核细胞
编辑版
31
巨核细胞
编辑版
32
产版巨核细胞
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33
组织嗜碱细胞
编辑版
34
非造血细胞团
编辑版
35
正常组织细胞
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36
谢谢！
编辑版
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9
（3）红系增生活跃：占有核细胞20%左右
原始红细胞<1% 早幼红细胞<5% 中幼红细胞10%左右 晚幼红细胞10%左右 成熟红细胞形态基本正常 （4）淋巴细胞约占20%左右,儿童可达40%以上 （5）单核细胞<4% （6）浆细胞（plasma cell）< 2% （7）全片巨核细胞约为7～35个，多为产板型巨核 （8）可见少量骨髓特有的非造血细胞：内皮细胞、吞噬细 胞、组织嗜碱细胞等
骨髓形态学检查
北京同仁医院 检验科 许晓风
编辑版
1
骨髓细胞形态学检查的注意事项
（1）骨髓取材、涂片、染色良好时，才能准确进行形如血友病
（3）书写骨髓申请单时，需提供患者主要临床症状、外周血 细胞检查情况，肝、脾、淋巴结肿大情况及其它相关检 查等，便于骨髓形态检查报告结论更具体
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2
1、取髂骨,其次胸骨. 2、量:0.2-0.3ML 3、制片:迅速推片3-5张，头、体、尾分明，较薄，易
骨髓细胞形态学检查
小淋巴细胞：呈圆形或椭圆形，直径6～10um。胞核圆形或椭圆形，或有切迹，核着边，染色质粗糙致密呈大块状，染深紫红色。胞质量极少，仅在核的一侧见到少量淡蓝色胞质，有时几乎不见而似裸核，一般无颗粒。
3、淋巴细胞系统 原淋（Lymphoblast） 幼淋（prolymphocyte） 淋巴（lymphocyte） 大淋巴细胞 小淋巴细胞
嗜酸性杆状核粒细胞：细胞呈圆形，直径10～15um。胞核狭长，弯曲呈带状，两端钝圆。核染色质粗糙呈块状，染深紫红色。胞质中含特异性嗜酸性颗粒
嗜酸性分叶核粒细胞：胞体直径11～16um。胞核多分为近似对称的两叶。胞质中充满密集粗大、大小均匀的桔红色嗜酸性颗粒。
嗜碱性中幼粒细胞：胞体直径10~15um。胞核与上述细胞相似，但轮廓不清，染色质结构模糊。胞质内含数量不多、大小不一但较粗大、分布散乱的紫黑色特异性嗜碱性颗粒，颗粒也可覆盖在细胞核上。
骨髓穿刺的适应证 骨髓穿刺的禁忌证 骨髓穿刺检查的临床意义 骨髓穿刺部位的选择、注意事项
复习内容
禁忌症
严重出血倾向者
适应证
血液系统疾病的诊断、分型、疗效观察及预后判断 某些感染性疾病的辅助诊断 判断恶性疾病的骨髓转移 协助诊断某些代谢性疾病
骨髓细胞形态学检查的 注意事项
某些疾病骨髓中的病理变化呈局灶性改变，一次穿刺只能反映穿刺部位的骨髓功能或病理状况，不能反映骨髓的全面状况。
Obvious proliferation
10:1
Leukemia, hyperplastic anemia
Active proliferation
20:1
Normal BM, some anemia
Hypoplasia
50:1
some hypoplastic anemia
3、淋巴细胞系统 原淋（Lymphoblast） 幼淋（prolymphocyte） 淋巴（lymphocyte） 大淋巴细胞 小淋巴细胞
嗜酸性杆状核粒细胞：细胞呈圆形，直径10～15um。胞核狭长，弯曲呈带状，两端钝圆。核染色质粗糙呈块状，染深紫红色。胞质中含特异性嗜酸性颗粒
嗜酸性分叶核粒细胞：胞体直径11～16um。胞核多分为近似对称的两叶。胞质中充满密集粗大、大小均匀的桔红色嗜酸性颗粒。
嗜碱性中幼粒细胞：胞体直径10~15um。胞核与上述细胞相似，但轮廓不清，染色质结构模糊。胞质内含数量不多、大小不一但较粗大、分布散乱的紫黑色特异性嗜碱性颗粒，颗粒也可覆盖在细胞核上。
骨髓穿刺的适应证 骨髓穿刺的禁忌证 骨髓穿刺检查的临床意义 骨髓穿刺部位的选择、注意事项
复习内容
禁忌症
严重出血倾向者
适应证
血液系统疾病的诊断、分型、疗效观察及预后判断 某些感染性疾病的辅助诊断 判断恶性疾病的骨髓转移 协助诊断某些代谢性疾病
骨髓细胞形态学检查的 注意事项
某些疾病骨髓中的病理变化呈局灶性改变，一次穿刺只能反映穿刺部位的骨髓功能或病理状况，不能反映骨髓的全面状况。
Obvious proliferation
10:1
Leukemia, hyperplastic anemia
Active proliferation
20:1
Normal BM, some anemia
Hypoplasia
50:1
some hypoplastic anemia
骨髓细胞形态学-正常血细胞形态
骨髓细胞形态学-正常血细胞形态关键字：骨髓细胞形态学骨髓细胞形态学－正常血细胞形态1．正常血细胞形态学（Wright染色）（1）粒细胞系统形态1）原始粒细胞胞体直径10～18μm，圆形或类椭圆形。
胞核较大，约占细胞的2/3以上,核染色质呈细粒状，排列均匀，无浓集，核膜较模糊。
核仁2～5个，较小，清楚。
胞质量少，呈透明天蓝色，绕于核周，无颗粒。
2）早幼粒细胞胞体直径12～20μm，圆或椭圆形。
胞核大，核染色质较原粒粗糙，核仁可见或消失。
胞质量较多，呈淡蓝、蓝或深蓝色，浆内含紫红色非特异性的天青胺蓝颗粒。
3）中幼粒细胞①中性中幼粒细胞胞体直径10～18μm，圆形。
胞核椭圆形或一侧开始扁平，占细胞的2/3～1/2，染色质聚集成索块状，核仁消失。
胞质量多，内含中等量、大小较一致的特异的中性颗粒。
②嗜酸性中幼粒细胞胞体直径15～20μm，胞核与中性中幼粒细胞相似。
胞质内充满粗大、均匀、排列紧密、桔红色的特异的嗜酸性颗粒。
③嗜碱性中幼粒细胞胞体直径10～15μm。
胞核椭圆形，轮廓不清楚，核染色质较模糊。
胞质内及核上含有数量不多、排列零乱、大小不等的紫黑色特异的嗜碱性颗粒。
4）晚幼粒细胞①中性晚幼粒细胞胞体直径10～16μm，呈圆形，胞核明显凹陷，但其凹陷程度一般不超过核假设直径的一半。
核染色质粗糙，排列更紧密。
胞质量多，染浅红色，充满中性颗粒。
②嗜酸性晚幼粒细胞胞体直径10～16μm，胞核在中央或偏一侧，呈肾形或椭圆形。
胞质充满着嗜酸性颗粒。
③嗜碱性晚幼粒细胞胞体直径10～14μm。
胞核固缩呈肾形，轮廓模糊。
胞质内及核上含有少量、分布不匀的嗜碱性颗粒。
5）杆状核粒细胞①中性杆状核粒细胞胞体直径10～15μm，圆形。
胞核凹陷程度超过核假设直径的一半，核径最窄处大于最宽处1／3以上，形态弯曲成带状，核染色质粗糙呈块状，核两端钝圆染深紫红色。
胞质充满中性颗粒。
②嗜酸性杆状核粒细胞胞体直径11～16μm，圆形。
胞核与中性杆状粒细胞相似。
正常骨髓形态学检查
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2
1、取髂骨,其次胸骨. 2、量:0.2-0.3ML 3、制片:迅速推片3-5张，头、体、尾分明，较薄，易
于观察。 4、涂片进行瑞氏染色
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3
1.低倍镜观察骨髓细胞涂片：增生程度、巨核 细胞数量、异常细胞团、寄生虫等。
骨髓增生程度： 极度活跃 明显活跃 活跃 低下 极度低下
1：1 1：10 1：20 1：50 1：300
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组织嗜碱细胞
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非造血细胞团
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正常组织细胞
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谢谢！
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原始淋巴细胞
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原始 幼稚淋巴细胞
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淋巴细胞
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5 单核细胞系统
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原始单核细胞
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幼稚单核细胞
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4 浆细胞系统
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浆细胞
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巨核细胞
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产版巨核细胞
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（3）红系增生活跃：占有核细胞20%左右
原始红细胞<1% 早幼红细胞<5% 中幼红细胞10%左右 晚幼红细胞10%左右 成熟红细胞形态基本正常 （4）淋巴细胞约占20%左右,儿童可达40%以上 （5）单核细胞<4% （6）浆细胞（plasma cell）< 2% （7）全片巨核细胞约为7～35个，多为产板型巨核 （8）可见少量骨髓特有的非造血细胞：内皮细胞、吞噬细 胞、组织嗜碱细胞等
骨髓细胞形态学检查
第23页，共85页。
NAP
【原理】 【结果】 NAP主要存在于成熟粒细胞胞浆中，
其他血细胞均为阴性反应。 【正常参考值】
阳性率：平均为10％～40％ ，以“十” 阳性反应为主。
积分值：阳性积分值40 ～ 80（分）。
第24页，共85页。
【临床意义】
➢ 慢性粒细胞性白血病与类白血病反应的鉴别：CML时NAP活性
第4页，共85页。
血细胞发育、演变规律图
第5页，共85页。
原始→幼稚（红系和粒系：早幼、中幼和晚幼）→成熟
胞体：大→小（巨核细胞：小→大,且不规则）
胞核：大 小：大→小（红细胞核消失，巨核细胞：小→大）
形 状：圆→不规则 染色质：细致稀疏→粗糙致密，浅→深 核 仁：多→少→无 ，清晰→模糊→消失
第17页，共85页。
（五）单核细胞系统monocytes
增多 • 急性单核细胞性白血病 • 急性粒单细胞性白血病 • 骨髓增生异常综合征 • 感染性疾病 • 自身免疫性疾病 • 恶性肿瘤
第18页，共85页。
（六）浆细胞系统plasmacytes
增多 • 多发性骨髓瘤 • 浆细胞白血病 • 巨球蛋白血症 • 反应性浆细胞增多：慢性炎症，感染，肿瘤，
急性淋巴细胞白血病时，原始及幼稚淋巴细胞常
呈阳性反应，阳性物质呈粗颗粒或块状； 急性单核细胞白血病时，原始及幼稚单核细胞多
呈强阳性反应，阳性物质呈均匀弥漫或细颗
粒状。
第29页，共85页。
鉴别某些细胞类型：
（1）不典型的巨核细胞与李-斯（Reed-sternberg）细胞的鉴别： 前者呈阳性反应，后者一般为阴性或弱阳性反应。
见到环状铁粒幼细胞。
第34页，共85页。
ACP
NAP
【原理】 【结果】 NAP主要存在于成熟粒细胞胞浆中，
其他血细胞均为阴性反应。 【正常参考值】
阳性率：平均为10％～40％ ，以“十” 阳性反应为主。
积分值：阳性积分值40 ～ 80（分）。
第24页，共85页。
【临床意义】
➢ 慢性粒细胞性白血病与类白血病反应的鉴别：CML时NAP活性
第4页，共85页。
血细胞发育、演变规律图
第5页，共85页。
原始→幼稚（红系和粒系：早幼、中幼和晚幼）→成熟
胞体：大→小（巨核细胞：小→大,且不规则）
胞核：大 小：大→小（红细胞核消失，巨核细胞：小→大）
形 状：圆→不规则 染色质：细致稀疏→粗糙致密，浅→深 核 仁：多→少→无 ，清晰→模糊→消失
第17页，共85页。
（五）单核细胞系统monocytes
增多 • 急性单核细胞性白血病 • 急性粒单细胞性白血病 • 骨髓增生异常综合征 • 感染性疾病 • 自身免疫性疾病 • 恶性肿瘤
第18页，共85页。
（六）浆细胞系统plasmacytes
增多 • 多发性骨髓瘤 • 浆细胞白血病 • 巨球蛋白血症 • 反应性浆细胞增多：慢性炎症，感染，肿瘤，
急性淋巴细胞白血病时，原始及幼稚淋巴细胞常
呈阳性反应，阳性物质呈粗颗粒或块状； 急性单核细胞白血病时，原始及幼稚单核细胞多
呈强阳性反应，阳性物质呈均匀弥漫或细颗
粒状。
第29页，共85页。
鉴别某些细胞类型：
（1）不典型的巨核细胞与李-斯（Reed-sternberg）细胞的鉴别： 前者呈阳性反应，后者一般为阴性或弱阳性反应。
见到环状铁粒幼细胞。
第34页，共85页。
ACP
正常骨髓形态学检查
？
粒系各阶段细胞示意图 箭
头 所 指 结 构 是 什 么 ？
原粒
箭
头
所
指
结
构
是
什
么
？
早幼粒
箭
头
所
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结
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是
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？
中性中幼粒
箭
头
所
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结
构
是
什
么
？
中性中幼粒
箭
头
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结
构
是
什
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？
中性晚幼粒
箭
头
所
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结
构
是
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么
？
红系示意图
箭
头
所
指
结
构
是
什
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？
幼稚
构
是
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？
幼稚红细胞
箭
头
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结
构
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么
？
是
什
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晚幼红
箭
头
所
指
结
构
是
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么
？
淋巴系示意图
箭
头
所
指
结
构
是
什
么
？
原始淋巴细胞
箭
头
所
指
结
构
是
什
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？
原始 幼稚淋巴细胞
箭
头
所
指
结
构
是
什
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？
淋巴细胞
箭
头
所
指
结
构
是
什
正常骨髓形态学检查
医院 检验科 许晓风
骨髓细胞形态学检查的注意事项
（1）骨髓取材、涂片、染色良好时，才能准确进行形态观察
（2）对有严重出血倾向的疾病，禁忌骨髓检查，如血友病
（3）书写骨髓申请单时，需提供患者主要临床症状、外周血 细胞检查情况，肝、脾、淋巴结肿大情况及其它相关检 查等，便于骨髓形态检查报告结论更具体
1、取髂骨,其次胸骨. 2、量:0.2-0.3ML 3、制片:迅速推片3-5张，头、体、尾分明，较薄，易
于观察。 4、涂片进行瑞氏染色
? 1.低倍镜观察骨髓细胞涂片：增生程度、巨核 细胞数量、异常细胞团、寄生虫等。
骨髓增生程度： 极度活跃 明显活跃 活跃 低下 极度低下
1：1 1：10 1：20 1：50 1：300
骨髓细胞形态学检查的注意事项
（1）骨髓取材、涂片、染色良好时，才能准确进行形态观察
（2）对有严重出血倾向的疾病，禁忌骨髓检查，如血友病
（3）书写骨髓申请单时，需提供患者主要临床症状、外周血 细胞检查情况，肝、脾、淋巴结肿大情况及其它相关检 查等，便于骨髓形态检查报告结论更具体
1、取髂骨,其次胸骨. 2、量:0.2-0.3ML 3、制片:迅速推片3-5张，头、体、尾分明，较薄，易
于观察。 4、涂片进行瑞氏染色
? 1.低倍镜观察骨髓细胞涂片：增生程度、巨核 细胞数量、异常细胞团、寄生虫等。
骨髓增生程度： 极度活跃 明显活跃 活跃 低下 极度低下
1：1 1：10 1：20 1：50 1：300
正常骨髓形态学检查
实验室安全操作规范
个人防护
实验人员需穿戴好实验服、手套、口罩等防护用 品，避免直接接触有害物质。
废弃物处理
实验过程中产生的废弃物需分类收集，按照相关 规定进行无害化处理。
实验室消毒
定期对实验室进行全面消毒，确保实验环境的清 洁卫生。
骨髓检查前准备事项
患者准备
向患者解释骨髓检查的目的、过程和注意事项，取得患者的配合 。
传统的骨髓涂片检查只能观察细 胞形态，无法了解骨髓组织结构 ，对某些血液病的诊断存在局限
性。
活检技术优势
骨髓活检可以弥补涂片检查的不 足，直接观察骨髓组织结构，提
高诊断的准确性。
综合应用
在实际临床工作中，骨髓活检和 涂片检查往往结合使用，相互补 充，以提高血液病诊断的准确性
和全面性。
06
实验室操作规范与注意事项
03
红细胞系统
原红细胞、早幼红细胞、中幼红细胞 和晚幼红细胞形态正常，各阶段细胞 比例协调。
05
04
巨核细胞系统
巨核细胞数量正常，形态规则，胞质 丰富，核分叶明显。
异常骨髓象识别及临床意义
骨髓增生程度异常
骨髓增生极度活跃、增生明显活跃或增生 减低等，可提示不同类型的血液病。
其他细胞异常
如出现异型淋巴细胞增多、单核细胞增多 等，可提示病毒感染、单核细胞增多症等 。
营养物质和代谢废物。
造血干细胞与造血微环境
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造血干细胞
是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞 ，可分化为各种血细胞。
造血微环境
由骨髓基质细胞、细胞外基质和各种细胞因子等 构成，为造血干细胞的增殖、分化和成熟提供适 宜的微环境。
造血干细胞与微环境的相互作用
骨髓细胞形态学检查
早幼粒<5%；
第十二页，编辑于星期日：十五点 五十九分。
骨髓各系细胞比例改变的临床意义
第十三页，编辑于星期日：十五点 五十九分。
（一）粒细胞系统granulocytes
（1）粒系细胞增多
• 各型粒细胞性白血病 • 急性炎症和感染性疾病 • 类白血病反应
（2）粒系细胞减少
• 再生障碍性贫血 • 粒细胞缺乏或减少症
POX
【原理】 【结果】强阳性：胞质中蓝黑色颗粒粗大而密集
弱阳性：胞质中蓝黑色颗粒细小而稀疏
阴 性: 胞质中无蓝黑色颗粒者 【正常参考值】 POX主要存在于粒细胞系统，原粒细胞为阴性,随细胞
的成熟反应越强，但嗜碱性粒细胞为阴性。 【临床意义】
阳性反应：急性粒细胞性白血病。
阴性反应：急性淋巴细胞性白血病。
第三十一页，编辑于星期日：十五点 五十九分。
细胞化学染色
急淋
急粒
过氧化物酶 （-） 分化差的原始细胞
（POX）
（-）~（+）
分化好的幼稚细胞
（+）~（++）
糖原染色 粗颗粒或块状 弥漫性淡红色
（PAS） （+）
（-）/（± ）
非特异酯酶 （-） NaF抑制不敏感
（NSE）
（-）~（+）
碱性磷酸酶 增加
积分值：阳性积分值40 ～ 80（分）。
第二十五页，编辑于星期日：十五点 五十九分。
【临床意义】
➢ 慢性粒细胞性白血病与类白血病反应的鉴别：CML时NAP活性明
显减低，类白血病反应NAP活性极度增高。
➢ 阵发性睡眠性血红蛋白尿与再生障碍性贫血的鉴别:前者NAP活性减
低，后者增高。