小鼠酒精性脂肪肝模型的建立

小鼠酒精性脂肪肝模型的建立

发表时间：2011-11-23T10:28:36.130Z 来源：《中外健康文摘》2011年第30期供稿作者：张劲松1 (通讯作者) 吴铁2 邹丽宜2 [导读] 酒精及高脂饮食对对小鼠一般情况及体重的影响每天观察小鼠的一般症状，进食变化等。

张劲松1 (通讯作者) 吴铁2 邹丽宜2

（1广东医学院实验动物中心 523808;2广东医学院药理教研室 523808）【中图分类号】R575【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）30-0096-03 【摘要】目的探讨建立小鼠酒精性脂肪肝动物模型的方法。方法 80只雄性昆明小鼠随机分成4组：NS组每天灌胃生理盐水和普通饲料喂养，HM组、MM组和LM组采用每天按照5g.Kg-1.d-1对小鼠灌胃浓度为 60%（V/V）、30%（V/V）和10%（V/V）的乙醇的方法，连续6周，观察其肝脏病理改变、血液等指标的变化。结果造模6周后，模型组小鼠肝脏重量明显升高，与正常组比较有显著性差异；病理表现为广泛的脂肪变性，血清甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶（AST）、总胆固醇(CH)升高，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）显著降低，与正常组比较差异有显著意义 (P<0.05)；透明质酸（HA）变化不大（P>0.05）。结论本造模方法与人类酒精性脂肪肝病变类似，方法简单易行，实验周期短，模型稳定可靠。【关键词】酒精性脂肪肝动物模型高脂饲料小鼠Establishment of alcoholic fatty liver model with alcohol and fat emulsion in mice 【Abstract】 AIM: Tostudy the Establishment of alcoholic fatty liver model with alcohol in mice.METHODS: Eighty male mice were randomlydivided into 4groups with 20 rats pergroup: NSgroup(intragastric infusion ofsaline，5ml/kg，fed with commondiet)),hMgroup,mmgroup and LMgroup (intragastric infusion of alcohol by 60%V/V， 30%V/V or 10%V/V，5ml/kg.All mice weresacrificed at the end of the 6th week.The pathologic of the liver and the biochemistry index of plasma were observed.RESULTS:severe fattydeposition was appeared.serum TG，CH，ALT and AST ofhMgroup and LMgroup werehigher than NSgroup(P<0.05).CONCLUTION： The lesion of the alcoholic fatty liver model in mice issimilar to that inhumans.The experiment is verysimple and the experiment cycle isshort and the 【Key words】alcoholic fatty liver animal model mice 1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 动物 2月龄清洁级昆明种小鼠80只，雄性，体重（22±4）g，由广东医学院实验动物中心提供（广东省动物质量合格证编号：A2010068 ）。饲养室内温度保持在24℃～26℃，湿度维持在50%～60%，专室饲养，专人负责。

1.1.2 药品、仪器与试剂 100%分析纯乙醇（广州化学试剂二厂，批号：2007061201）；丙氨酸氨基转移酶（ALT/GPT）测试盒，天冬氨酸氨基转氨酶（AST/GOT）和透明质酸（HA）测试盒均购于南京建成生物工程研究所，总胆固醇（TC）试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）试剂盒、甘油三酯(TG)试剂盒购于北京中生生物技术股份有限公司， LEICA QWIN图象分析仪（德国莱卡）；UV-3010紫外分光光度计(日本岛津)；梅特勒－托利多AE240电子天平（梅特勒－托利多仪器公司上海分公司）。

1.2 方法 80只小鼠随机分为4组，分别为正常对照组（NS组）、高剂量模型组（HM组）、中剂量模型组（MM组）和低剂量模型组（LM组），每组20只。所有小鼠均于晚上10点后禁食不禁水，次日NS组每天灌喂生理盐水，HM组、MM组和LM组分别予60%（V/V）、30%（V/V）和10%（V/V）乙醇水按照5g.Kg-1.d-1灌胃，每天1次，连续6周，于第6周末禁食12小时后进行取材检测相应的指标。

1.3 观察指标及测定方法

1.3.1 酒精及高脂饮食对对小鼠一般情况及体重的影响每天观察小鼠的一般症状，进食变化等。

1.3.2 酒精对小鼠血清学指标的影响采用摘眼球取血后，分离血浆检测TC、 TG、HDL-C、BG（血糖）、AST、ALT和透明质酸HA 水平。

1.3.3 酒精对小鼠肝脏指数的影响抽血后，剪开右心房，尽量放出余血，迅速取出肝脏，在4℃预冷的生理盐水灌洗后，用滤纸吸干水分，迅速用电子天平称量肝脏的重量，计算肝脏指数。

1.3.4 酒精对小鼠肝脏形态组织学的影响称重后的肝脏迅速置于冰上，在肝左叶取10mm×10mm大小肝组织行石蜡包埋切片及HE染色作病理检查，剩余肝组织分别切成小块，置于-70℃冰箱中待测肝组织MDA含量和CAT与SOD活性。

1.4 统计学处理实验结果均以表示，应用SPSS11.0软件包进行统计分析，参数资料采用One-Way ANOVA检验，非参数资料采用Ridit 分析。

2 结果

2.1 酒精对小鼠一般情况及体重的影响

实验过程中每天观察动物的进食量和饮水量，每周称量体重，称重前禁食10-12小时。由表1可知，前两周动物的体重没有明显的变化，而实验4周后，模型组的体重明显比NS组增加（P<0.05）,但第六周开始，HM组的体重明显下降。提示酒精可使小鼠的体重明显增加。

表1 酒精对小鼠体重的影响（x-±s，g）

Compared with NS: a:P<0.05。