自身抗体检测及应用ppt课件

（nucheola r，N）
4.抗dsDNA的检测
常用间接免
疫荧光法检 测，常用的 抗原基质是 马疫锥虫或 绿蝇短膜虫。
（二）抗ENA抗体谱
不同的自身免疫病可产生不同的
抗ENA抗体。通过检测抗ENA抗体 的类型及其组合，可综合诊断自 身免疫病的类型。
1、检测方法
双向免疫扩散
对流免疫电泳
5.抗乙酰胆碱受体抗体
对重症肌无力的诊断有特异性。 可用ELISA检测。
是重症肌无力的标志性自身抗体，
6.抗骨骼肌抗体
与成年型重症肌无力有关。
7.抗胰岛细胞抗体
与I型糖尿病有关。
三、临床应用
1、检测项目的选择
2、检测方法的选择
3、自身抗体检测的质量控制
谢 谢 大 家
自身抗体的检测及应用
一、概述
自身免疫耐受。 自身免疫（autoimmunity） 自身抗体（autoantibody）或自身
致敏淋巴细胞 自身免疫性疾病
二、自身抗体的检测 （一）抗核抗体 （antinuclear antibody，ANA）
泛指抗各种细胞核成分（DNA， RNA，蛋白质和酶）的抗体。
（四）其他自身抗体
1.抗中性粒细胞胞质抗体 （anineutrophil cytoplasmic antibodies，ANCA）
以人中性粒细胞胞质为靶抗原， 与临床多种小血管炎性疾病有关。 分胞质型（cANCA）和核周型 （pANCA）。可用ELISA或间接免 疫荧光法测定。
2.抗心磷脂抗体（antiphospholipid antibody，APLA）
1、ANA的类型
（1）抗核蛋白抗体 （2）抗DNA抗体 抗双链DNA抗体（抗dsDNA） 抗单链DNA抗体（抗ssDNA）。 （3）抗ENA抗体 可提取性核抗原（extractable nuclear antigens，ENA）

2、ANA的检测方法 间接免疫荧光法
用小鼠肝切片或印片作为细胞核基质，
又称抗U1RNP抗体。 抗U1RNP抗体是诊断混合性结缔 组织病（ MCTD）的重要血清学 依据，是MCTD的诊断标准之一。
（3）抗SSA/Ro和抗SSB/La
这两种抗体是干燥综合症 （SS）患者最常见的两种自身抗 体
（4）抗J0
-1抗体 最常见于多发性肌炎（PM） 患者。
（5）抗Scl-70抗体
靶抗原是血浆中的磷脂结合蛋白。
APLA包括一组自身抗体，如抗心 磷脂抗体（ACLA），抗磷脂酸抗 体（APAA）和抗磷脂酰丝氨酸抗 体等。
3.抗平滑肌抗体（anti-smooth muscle antibody，ASMA）
是自身免疫性肝炎的血清学标志
性抗体。常用间接免疫荧光分析 检测。
4.抗角蛋白抗体（anti-keratin antibody，AKA） 主要见于类风湿性关节炎患者， 对于早期诊断RA有重要意义。可 用间接免疫荧光法检测。但敏感 性较低。与RF不平行。
还可用核质丰富的培养细胞如Hep-2，作 为抗原。 用荧光显微镜观察ANA荧光着染强度和免 疫荧光图形。 稀释待检血清可检测ANA效价。
3.常见的ANA图形及临床意义
均质型 （homogen eous，H）
Hale Waihona Puke Baidu
斑点型
（speckled， S）
核膜型
（membrano us，M）
核仁型
几乎仅出现在PSS（进行性 系统性硬皮病）患者体内，是 PSS的特征抗体
（三）类风湿因子 （rheumatoid factor，RF）
RF是以变性IgG为靶抗原的抗体，
它能与人或动物的变性IgG结合， 而不与正常IgG结合，RF主要出 现在类风湿关节炎患者。

RF的检测最常用IgG致敏的胶乳 颗粒凝集试验，或速度散射比浊 法，但只能检测IgM类的RF。IgG 类，IgA类和IgE类RF需ELISA等 方法检测。
斑点酶免疫技术
免疫印迹技术
免疫印迹技术（最常用）
先将ENA混合抗原作凝胶电泳，
分离开不同的区带，然后把这些 区带转印到硝酸纤维膜上，加入 待检血清，最后用酶标抗体使相 应的抗原带显色
2、抗ENA抗体的主要类型及 临床意义
（1）抗Sm抗体
抗Sm是SLE的特异性标志之一
（2）抗核RNP抗体（抗nRNP抗体）