自身抗体检测及应用ppt课件
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自身免疫病和自身抗体检测详解演示文稿
现在是48页\一共有71页\编辑于星期二
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IIF法检测ANA阳性常见荧光染色模型
细胞核 细胞浆 细胞骨架 细胞周期
均质型 核糖体型 肌动蛋白型 中心体型
• 自身免疫：是指机体免疫系统对自身抗原
发生免疫应答，产生自身抗体和（或）致 敏淋巴细胞的现象。
现在是5页\一共有71页\编辑于星期二
与自身免疫性疾病相关的基本概念
• 自身免疫病：
是指在各种内外因素的作用下， 自身免疫反应过强，超过了生理性自 身免疫反应的强度且持续相当长时间， 造成对正常细胞、器官的功能与结构 的破坏，呈现与此损伤相关的临床表 现及免疫学异常。
的人群中发生强直性脊柱炎的可能仅为
2%，而第一级HLA--B27阳性的亲属
中，发生强直性脊柱炎的危险性达
20%。
现在是12页\一共有71页\编辑于星期二
自身免疫病的基本特征
系统性红斑狼疮（SLE）的家族发病率也 较高，在SLE第一代亲属中发病率达3%-5%，同胞姐妹发病率更高，特别是单卵 双胎更为常见 。在1980年的调查中35组 单卵双胎的患者中，有22组患SLE，共患 病率达62.9%，而双卵双胎8组中仅1组患 病，为12.5%。
免疫印迹法(IB）：
现在是39页\一共有71页\编辑于星期二
自身免疫病常规实验室检查
• 血常规：
• RA：80%贫血，活动期PLT升高。 SLE：WBC，PLT，Hb均可能降底。 免疫血管炎：WBC增高。 对药物引起的骨髓抑制的监测。
现在是40页\一共有71页\编辑于星期二
自身免疫病常规实验室检查
现在是36页\一共有71页\编辑于星期二
自身抗体的检测方法
金标免疫斑点法
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IIF法检测ANA阳性常见荧光染色模型
细胞核 细胞浆 细胞骨架 细胞周期
均质型 核糖体型 肌动蛋白型 中心体型
• 自身免疫：是指机体免疫系统对自身抗原
发生免疫应答，产生自身抗体和（或）致 敏淋巴细胞的现象。
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与自身免疫性疾病相关的基本概念
• 自身免疫病：
是指在各种内外因素的作用下， 自身免疫反应过强，超过了生理性自 身免疫反应的强度且持续相当长时间， 造成对正常细胞、器官的功能与结构 的破坏，呈现与此损伤相关的临床表 现及免疫学异常。
的人群中发生强直性脊柱炎的可能仅为
2%，而第一级HLA--B27阳性的亲属
中，发生强直性脊柱炎的危险性达
20%。
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自身免疫病的基本特征
系统性红斑狼疮（SLE）的家族发病率也 较高，在SLE第一代亲属中发病率达3%-5%，同胞姐妹发病率更高，特别是单卵 双胎更为常见 。在1980年的调查中35组 单卵双胎的患者中，有22组患SLE，共患 病率达62.9%，而双卵双胎8组中仅1组患 病，为12.5%。
免疫印迹法(IB）：
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自身免疫病常规实验室检查
• 血常规：
• RA：80%贫血，活动期PLT升高。 SLE：WBC，PLT，Hb均可能降底。 免疫血管炎：WBC增高。 对药物引起的骨髓抑制的监测。
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自身免疫病常规实验室检查
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自身抗体的检测方法
金标免疫斑点法
血清免疫学自身抗体检查结果解析PPT课件
IgA
参考值：成人0.7～3.9克/升。IgA在局部免疫中起重要作 增高：见于IgA型多发性骨髓病、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肝硬化、
用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。不能通过胎盘， 湿疹、血小板减少等疾病。
小儿只能从母乳中得到。
降低：反复呼吸道感染、见于重链病、轻链病、吸收不良综合征、某些免疫缺陷
特异糖蛋白，是抗体发挥溶菌作用的必要补充条件。包括C1～C9共9种成分(C3最多),
• 作用：补体具有溶解靶细胞、促进吞噬、参与炎症反应等功能，同时补体还在免疫调节、清除免疫复合物、稳定机体内
环境、参与变态反应及自身免疫性疾病起关键性作用。
补体名称
特点
参考值
临床意义
总补体溶血活性 （CH50）
检测以红细胞50%溶血 为判定终点，测知总补 体溶血活性。
IgE。
作用及意义：测定人体血清免疫球蛋白的含量，是了解机体免疫功能的重要方
法，对自身免疫性疾病的诊断有一定的价值，特别是对浆细胞恶变、体液免疫 缺陷的诊断是很重要的指标。 此外，对观察疾病的疗效也有一定价值。 但血清免疫球蛋白的变化范围较大，又很少有特异性，因此，在诊断及分析其意 义时必须密切结合临床疾。
免疫学检查分析
2019-03-30
临床常用免 疫学检测
01
血清免疫球蛋白（Ig）检测
02
血清补体检测
03
细胞免疫检测
04
肝炎病毒标志物检测
05
感染免疫学指标检测
06
自身免疫抗体检测
一、血清免疫球蛋白检测
• 定义：Ig（免疫球蛋白）指具有抗体活性和（或）抗体样结构的球蛋白。 • 分类：应用免疫电泳与超速离心分析可将Ig分5类： IgG、IgA、IgM、 IgD、
应用生物化学-抗体技术PPT课件
抗体技术的挑战
抗体生产成本高
01
由于抗体的大规模生产需要大量的细胞培养和纯化过程，因此
生产成本较高，限制了抗体的广泛应用。
抗体特异性问题
02
抗体的特异性是影响其应用的关键因素之一，如何提高抗体的
特异性是当前面临的重要挑战。
抗体稳定性不足
03
一些抗体在存储和运输过程中容易失去活性，影响其应用效果。
抗体技术的发展前景
生物制药
药物研发
抗体作为药物载体，可以用于药 物的定向输送，提高药物的疗效
和降低副作用。
免疫检测试剂
抗体可以用于制备免疫检测试剂， 如酶联免疫吸附试验（ELISA）、 免疫荧光等，用于检测生物体内
的物质。
单克隆抗体药物
利用杂交瘤技术制备的单克隆抗 体药物，具有高度特异性、低毒 性和长效性等特点，已广泛应用 于肿瘤、自身免疫性疾病等领域。
应用生物化学-抗体技术PPT 课件
• 引言 • 抗体的产生与种类 • 抗体技术的原理与流程 • 抗体技术的应用实例 • 抗体技术的挑战与前景 • 结论
01
引言
抗体的定义与特性
抗体
指免疫系统产生的一种蛋白质， 能够特异识别并结合抗原，发挥 免疫效应。
特性
高度特异性、结合力强、种类多 样。
抗体技术的历史与发展
历史
自19世纪末发现抗体以来，抗体技 术不断发展，经历了免疫学、单克隆 抗体技术、基因工程抗体等阶段。
发展
目前抗体技术已广泛应用于生物医药 、诊断、治疗等领域，为人类健康和 疾病治疗做出了巨大贡献。
抗体技术的应用领域
01
02
03
生物医药
用于药物研发、疾病诊断 和治疗，如肿瘤免疫治疗、 自身免疫性疾病治疗等。
自身免疫性疾病及其检验详解演示文稿
临床意义
该抗体比RF具有更高的特异性（抗CCP抗体：97%，RF： 62%），而敏感性相当（抗CCP抗体：80%，RF：79%）。
抗CCP在疾病早期可出现阳性，并有很高的阳性预期值 （91%）。
抗CCP抗体在RA早期患者中的阳性率为79%，因而RA的 早期诊断并及时开始恰当的治疗对控制病情非常重要。
但在其它自身免疫性疾病（SLE、硬皮病等） 及部分老年人RF阳性；
但RF阴性不能排除RA的诊断。
现在是36页\一共有111页\编辑于星期日
IgM型：血清中RF效价＞80IU/ml并伴有严重 关节功能障碍，提示预后不良。
IgG型：滑膜液中检出IgG型RF比血清中IgM 型RF更有意义；
IgA型：血清或滑膜液中检出是RF活动的指 标之一。
1型糖尿病 SLE
现在是15页\一共有111页\编辑于星期日
5）、Fas/FasL表达异常
Fas普遍表达于多种细胞包 FasL通常出现于活化的T细胞
括淋巴细胞表面。
（如CTL）和NK细胞膜上，
也可以游离形式存在。
动物实验证明：如果
Fas基因和FasL基因发生 突变, 引起自身免疫病。
现在是16页\一共有111页\编辑于星期日
AKA是判断RA愈后的一个标志性抗体，高效 价AKA的RA患者，常提示疾病较为严重。
敏感性较低，阴性不能排除ＲＡ的诊断。 可与ＲＦ联合检测，提高对ＲＡ的诊断．但二
者很少平行出现．
现在是41页\一共有111页\编辑于星期日
三）. 抗环瓜氨酸肽抗体（抗ＣＣＰ）
1998年Schellekens和Girbal Neuhause等证实 瓜氨酸是RA患者血清中特异的抗中间丝相关 蛋白（filaggrin）抗体识别的主要组成性抗原 决定簇成分。
医学课件自身免疫病及其自身抗体的检测
表3.系统性红斑狼疮的自身抗体
_____________________________________________________________________
抗体反响性
阳性率(%)
抗原性质
_____________________________________________________________________
核糖体型 主要见于SLE. 5) 着丝点型 主要见于硬皮病及CREST综合征.
3.ID或CIE 主要用于检测抗ENA抗体.所用抗原:兔胸腺;小
牛胸腺;人脾;猪脾;组织培养细 胞等提取物.
4.同位素(Farr氏法)检测
主要用于检测抗dsDNA抗体. 5.ELISA:可用于抗dsDNA;抗ssDNA;抗组蛋白抗体;
变性IgG,RANA
干躁综合征(SS)
SSA,SSB,唾液腺管
系统性红斑狼疮(SLE)
胞核成分
(DNA,DNP,RNP,SM)
酸性糖蛋白，是SLE的标记抗体。
抗Sm抗体是
胞浆成分(线粒体,微粒体)
RBC,血小板
混合结缔组织病(MCTD)
细胞核(RNP)
抗n RNP抗体
__________________________________________________
• 可存在于多种AID 中.SLE;MCTD;SS;RA;PSS;DM/PM;药物性 狼疮等疾病.缺乏特异性.
• 检测方法:ELISA;血凝等.
4.抗组蛋白抗体
• 主要的组蛋白有H1;H2A;H2B;H3和H4. • 主要见于药物性狼疮,阳性率95%以上.也
可见于SLE(70%),幼年类风湿性关节炎(30%) 等. • 检测方法:ELISA;IF;血凝法等.
自身抗体的实验室检测与临床意义
为抗Sm抗体。 该抗体在SLE患者的阳性率为25～30%。 是SLE的标记抗体，但无此抗体不能排除诊断。
第十一页，共26页。
5.抗SSA、抗SSB抗体(kàngtǐ)
50年代末首先在干燥(gānzào)综合征（Sjö gren syndrome,SS)患者血清中发现这种抗体，称为抗SSA、 SSB抗体。
多发性肌炎/皮肌炎合并(hébìng)肺间质病变时抗Jo-1 抗体阳性率可达60%。
第十四页，共26页。
8.抗PCNA抗体(kàngtǐ)
增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen简称PCNA）由Miyachi等于1978年在 SLE患 者的血清中首次(shǒu cì)发现并命名。
第二页，共26页。
பைடு நூலகம்身抗体(kàngtǐ)的命名
以首先(shǒuxiān)被检测到该抗体的患者名字的缩写 命名：如抗Sm抗体
以相关疾病的名字的缩写命名：如抗SS-A、抗SS-B抗 体
以抗原的化学性质进行分类命名：如抗DNA、抗RNP 抗体
以抗原的部位进行命名：如抗核膜抗体。
第三页，共26页。
抗平滑肌抗体（ASMA） 抗线粒体抗体（AMA） C-ANCA
相关疾病
SLE SLE SLE SLE 混合性结缔组织病（MCTD） 干燥综合征（SS） 硬皮病
硬皮病crest征 Ⅰ型自身免疫性肝病 原发性胆汁性肝硬化（PBC） Wegener 肉芽肿
第二十四页，共26页。
谢谢(xiè xie)各位的聆 听
第二十页，共26页。
14.抗中性(zhōngxìng)粒细胞胞浆抗体 （ANCA）
ANCA是第一个被证实与血管炎相关的自身抗体。 胞浆型ANCA（c-ANCA） 核周型ANCA（p-ANCA） c-ANCA的靶抗原主要是丝氨酸蛋白酶3（PR3）。c-
第十一页，共26页。
5.抗SSA、抗SSB抗体(kàngtǐ)
50年代末首先在干燥(gānzào)综合征（Sjö gren syndrome,SS)患者血清中发现这种抗体，称为抗SSA、 SSB抗体。
多发性肌炎/皮肌炎合并(hébìng)肺间质病变时抗Jo-1 抗体阳性率可达60%。
第十四页，共26页。
8.抗PCNA抗体(kàngtǐ)
增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen简称PCNA）由Miyachi等于1978年在 SLE患 者的血清中首次(shǒu cì)发现并命名。
第二页，共26页。
பைடு நூலகம்身抗体(kàngtǐ)的命名
以首先(shǒuxiān)被检测到该抗体的患者名字的缩写 命名：如抗Sm抗体
以相关疾病的名字的缩写命名：如抗SS-A、抗SS-B抗 体
以抗原的化学性质进行分类命名：如抗DNA、抗RNP 抗体
以抗原的部位进行命名：如抗核膜抗体。
第三页，共26页。
抗平滑肌抗体（ASMA） 抗线粒体抗体（AMA） C-ANCA
相关疾病
SLE SLE SLE SLE 混合性结缔组织病（MCTD） 干燥综合征（SS） 硬皮病
硬皮病crest征 Ⅰ型自身免疫性肝病 原发性胆汁性肝硬化（PBC） Wegener 肉芽肿
第二十四页，共26页。
谢谢(xiè xie)各位的聆 听
第二十页，共26页。
14.抗中性(zhōngxìng)粒细胞胞浆抗体 （ANCA）
ANCA是第一个被证实与血管炎相关的自身抗体。 胞浆型ANCA（c-ANCA） 核周型ANCA（p-ANCA） c-ANCA的靶抗原主要是丝氨酸蛋白酶3（PR3）。c-
自身抗体的检测及其临床意义PPT课件
抗RNP抗体 高滴度是混合性结缔组织病(MCTD,夏普综 合征)的特异性标志（阳性率为95-100%）， 抗体滴度与疾病活动性相关；低滴度可见 于SLE（15-40%，常伴Sm抗体阳性）。 抗Sm抗体 SLE的标志性抗体（5-30%），与dsDNA 一起是SLE的诊断指标，与疾病活动性无 关，一般伴有U1-RNP抗体阳性。 抗核小体抗体 SLE标志性抗体（85%），可用于SLE的 早期诊断，与狼疮肾炎相关
免疫印迹技术（IBT）
免疫印迹技术属于膜载体酶免疫技术，其
固相载体为吸附有抗原的硝酸纤维膜。
基本原理是将从小牛或兔胸腔提取的抗原,
经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,按分子量大小分 离成区带,经参照对应分子量标准物质确定每 一抗原区带的分子量。然后将各抗原区带转 印至硝酸纤维膜上制成抗原吸附载体膜。
将待测血清加在已切成细条的硝酸纤维膜上, 待测血清中存在的抗体分别与硝酸纤维膜上 的相应抗原区带结合,当再加入酶标记抗人 IgG抗体后形成抗原-抗体-酶标记抗体复合物, 再加入酶的底物,出现显色反应。凡有抗体与 膜上抗原结合的位置,均会因酶促反应而显色。
抗PCNA 是增殖性细胞核抗原，是SLE的标志性抗体 （2-10%），与SLE弥散性肾小球肾炎相关， 对激素治疗敏感。 抗组蛋白抗体 多种结缔组织病中均可出现，在药物诱导 的SLE中较常见（阳性率为95%）不具有疾 病特异性。仅有此抗体阳性，而不伴有其 他ANA，则强烈支持DIL的诊断。与SLE活 动性及狼疮肾病相关。
自身免疫性疾病患者大多数体内均可查出 较高滴度的自身抗体，因此自身抗体的检 测可帮助临床诊断，评价疗效，估计预后。 自身免疫性疾病以血清中出现大量自身抗 体为特征，其中与某种疾病密切相关的自 身抗体称为该疾病的标志抗体，标志抗体 的检出有助于临床医生确诊疾病，具有重 要的价值。通过大量的研究及临床资料统 计，目前比较公认的部分标志抗体：
自身抗体的检测
自身抗体的分类
器官特异性抗体
针对特定器官或组织产生的抗体，如抗甲状 腺抗体、抗平滑肌抗体等。
非器官特异性抗体
不针对特定器官或组织产生的抗体，如抗核 抗体、抗线粒体抗体等。
免疫复合物型抗体
与自身抗原结合形成免疫复合物的抗体，如 类风湿因子等。
细胞因子或生长因子抗体
能够与细胞因子或生长因子结合的抗体，如 肿瘤坏死因子抗体等。
03 自身抗体检测的临床意义
协助诊断自身免疫性疾病
自身抗体是自身免疫性疾病的标志， 通过检测自身抗体，可以协助医生诊 断自身免疫性疾病，如类风湿性关节 炎、系统性红斑狼疮等。
自身抗体检测可以为临床医生提供重 要的参考信息，帮助医生了解患者的 免疫状态和疾病进展情况，从而制定 更加精准的治疗方案。
通过自身抗体检测，可以评估治疗效果，为调整 治疗方案提供依据，提高治疗效果。
在临床研究中的应用前景
新药研发
在药物研发过程中，自身抗体检测可用于评估药物的疗效和安全 性，为新药研发提供重要参考。
疾病机制研究
通过自身抗体检测，可以深入了解疾病的发病机制，为疾病预防和 治疗提供新的思路和方法。
个体化诊疗方案制定
重要性
自身抗体检测对于诊断自身免疫性疾 病、感染性疾病、肿瘤等疾病具有重 要意义，有助于疾病的早期发现和治 疗。
自身抗体检测的方法
酶联免疫吸附试验（ELISA）
放射免疫分析法（RIA）
利用抗原包被的固相载体，通过酶标标记 抗体或抗原，检测样本中与固相载体结合 的自身抗体。
利用放射性同位素标记抗体或抗原，检测 样本中与标记物结合的自身抗体。
根据个体自身抗体检测结果，制定个体化的诊疗方案，提高治疗效 果和患者生活质量。
自身免疫性皮肤病的抗体检测ppt课件
表皮内或表皮下水疱形成
皮肤结构
表皮
真皮
皮下组织
自身免疫性大疱性皮肤病
表皮内水疱 天疱疮: 抗桥粒抗体（桥粒芯糖蛋白1和3）
细胞与细胞间粘连
表皮下水疱 类天疱疮: 抗半桥粒抗体（BP180和230)
细胞与基底膜粘连
疱疹样皮炎: 抗tTG与抗醇溶蛋白抗体
获得性大疱性表皮松解症: 抗VII型胶原蛋白抗体
EA 1495-4801 G
EA 1496-4801 G
desmoglein 1
desmoglein 3
*能够实现定量检测，抗体滴度与疾病活动度、严重度相关.
自身免疫性大疱性皮肤病
产生多种抗皮肤结构蛋白的自身抗体
靶抗原：介导表皮内棘细胞间的细胞-细胞连接以及表皮
和真皮层间的粘附
产生的自身抗体破坏连接
细胞间IgA 和 C3
Desmocollin1 (IgA), Dsg3
自身抗体的靶抗原是桥粒
寻常型天疱疮
最常见的表皮内形成水疱的自身免疫性皮肤病
发病率: 0.1-1.6 / 100,000 居民
常见于中年和老年人
约70%的水疱最早出现于口腔黏膜 （仅抗桥粒芯糖蛋白3抗体阳性）
蔓延至其他黏膜与皮肤 （抗桥粒芯糖蛋白3和1阳性）
此ppt下载后可自行编辑
自身免疫性皮肤病 的抗体检测
已经上市产品
IIFT
订货号 靶抗原
表皮基底膜、棘细胞桥粒 类天疱疮抗原 移行上皮 桥粒芯糖蛋白1 桥粒芯糖蛋白3 BP230gC VII型胶原NC1
基质
食管 盐裂皮肤 膀胱 转染细胞 转染细胞 转染细胞 转染细胞 转染对照细胞 转染对照细胞 BP180-NC16A-4X EUROPLUS
自身免疫性疾病的免疫学检验ppt课件
SLE、RA、PSS、慢性肝病
斑点型
核内颗粒状荧光
抗ENA
MCTD、SLE、PSS、SS、PM
核仁型
核仁有荧光
抗核仁抗体
PSS、雷诺现象、SLE
着丝点型
核浆细小相同颗粒荧光
抗着丝点
PSS、CREST综合征
34
均质型
抗核抗体核型
着丝点型
核仁型
斑点型
35
例：间接免疫荧光法（IIF法） 测定抗dsDNA抗体
36
用ELISA间接法检测抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体和抗核小体抗体。
2. ELISA法
37
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
待检血清
按分子大小分开不同区带
分离
转印
NC膜上
抗ENA与膜上相应抗原带结合
抗人IgG·HRP
NC—ENA—抗ENA—抗人IgG·HRP—显色
3. IBT法
38
类风湿因子(rheumatoid factor,RF): 是抗变性IgG的 自身抗体，为19S的IgM，也可见7S的IgG和IgA。 与人变性IgG结合，不与正常IgG发生凝集反应。 RF出现在类风湿性关节炎（RA）患者中，约70%～ 90%的血清中和约60%的滑膜液中可检出IgG类RF；
对SLE有高特异性;SLSLE活动期增高
药物疗效
抗dsDNA抗体
抗DNA抗体
26
抗组蛋白抗体（anti-histonic antibody,AHA）： 由H1、H2A、H2B、H3和H4五个亚单位，各自都 有特异性抗体；
AHA
检出百分率
抗dsDNA
50
70
90
100
药物诱导性狼疮只能检出此
斑点型
核内颗粒状荧光
抗ENA
MCTD、SLE、PSS、SS、PM
核仁型
核仁有荧光
抗核仁抗体
PSS、雷诺现象、SLE
着丝点型
核浆细小相同颗粒荧光
抗着丝点
PSS、CREST综合征
34
均质型
抗核抗体核型
着丝点型
核仁型
斑点型
35
例：间接免疫荧光法（IIF法） 测定抗dsDNA抗体
36
用ELISA间接法检测抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体和抗核小体抗体。
2. ELISA法
37
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
待检血清
按分子大小分开不同区带
分离
转印
NC膜上
抗ENA与膜上相应抗原带结合
抗人IgG·HRP
NC—ENA—抗ENA—抗人IgG·HRP—显色
3. IBT法
38
类风湿因子(rheumatoid factor,RF): 是抗变性IgG的 自身抗体，为19S的IgM，也可见7S的IgG和IgA。 与人变性IgG结合，不与正常IgG发生凝集反应。 RF出现在类风湿性关节炎（RA）患者中，约70%～ 90%的血清中和约60%的滑膜液中可检出IgG类RF；
对SLE有高特异性;SLSLE活动期增高
药物疗效
抗dsDNA抗体
抗DNA抗体
26
抗组蛋白抗体（anti-histonic antibody,AHA）： 由H1、H2A、H2B、H3和H4五个亚单位，各自都 有特异性抗体；
AHA
检出百分率
抗dsDNA
50
70
90
100
药物诱导性狼疮只能检出此
自身抗体 ppt课件
PPT课件
17
ANA检测的临床意义
PPT课件
18
• ANA在各种自身免疫性疾病中的阳性率
自身免疫性疾病
系统性红斑狼疮(SLE) 活动期
非活动期 药物诱导性红斑狼疮(DLE) 混合结缔组织病 (MCTD) 类风湿性关节炎(RA) 进行性系统性硬化症(PSS) 多发性肌炎及皮肌炎(PM/DM) 干燥综合症(SS) 慢性活动性肝炎(CAH) 溃疡性结肠炎(UC)
PPT课件
6
ANA
间接免疫荧 光法（IFA Indirect Fluorescen t Assay ）
ENA
免疫印迹法 （IB）
Westernblot LIA
PPT课件
7
2、ANA的检测方法 间接免疫荧光法
• 用核质丰富的培养细胞Hp-2细胞和灵长类 肝冰冻破片作为抗原基质。
• 用荧光显微镜观察ANA荧光着染强度和免疫 荧光图形。
PPT课件
5
ANA分类
根据细胞内靶抗原的理化特性和分布： • 抗DNA（dsDNA,ssDNA) • 抗组蛋白（Histone) • 抗非组蛋白（抗可溶性核抗原抗体anti-extractable
nuclear antigen antibodies,ENA和抗着丝点抗体ACA） • 抗核仁（Nucleolus）
PPT课件
4
ANA分类
根据细胞内靶抗原的理化特性和分布： • 抗DNA（dsDNA,ssDNA) • 抗组蛋白（Histone) • 抗非组蛋白（抗可溶性核抗原抗体anti-extractable
nuclear antigen antibodies,ENA和抗着丝点抗体ACA） • 抗核仁（Nucleolus）
甲状腺自身抗体(共23张PPT)
TPOAb的检测
TPOAb的检测 主要是双抗液相放免法和TPO单抗固相放免法。另外EIISA法是 以TPO为抗原包被酶标板，与人血清抗hTPO抗体特异结合，在加入碱性磷酸酶 标记的羊抗人IgG抗体，进行二次抗原抗体反应，再加入显色底物pNPP充分显色 后，在酶标仪上用波长405 nm 滤光片测定OD值。还有化学发光免疫分析方法， 如酶促化学发光、吖啶酯标记物直接发光，电化学发光。其中微粒子酶免疫分析 (MEIA)方法集抗原抗体反应的特异性和荧光反应的敏感性于一体，减少了非特异 性干扰，化学反应简单、快速、灵敏度高，且具有很好的重复性。
TGI＋TSH受体
甲状腺激素合成及分
泌下降
ห้องสมุดไป่ตู้
TRAb检测适应症： -甲亢、甲减和其它甲状腺功能障碍病因鉴别
ADCC对甲状腺细胞损伤作用发生的前提是甲状腺细胞结构的破坏。
TPOAb可以结合补体，在AITD的甲状腺里存在丰富的激活 补体，补体激活产物如膜攻击复合物(MAC)可以引起甲状 腺细胞损伤。同时，甲状腺细胞可以通过表达CD59及 MAC抑制蛋白而对抗补体介导的细胞溶解，这些表面蛋白 可以防止终末补体产物插人甲状腺细胞膜，而该功能又可 被细胞因子上调，所以补体引起的甲状腺细胞杀伤是MAC 形成的必然的最终结果。
T4合成减少。值得注意的是，分泌TGAb的B淋巴细胞主要存在于甲状腺
内，当甲状腺内TGAb积累至一定浓度时，不仅TG分解增加，也可导致其
他与TG无关的蛋白发生水解，从而可能造成全身性的蛋白分解作用增强
及组织损害。
TPOAb的致病机制
TPOAb的致病作用有抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。由于TPO 被
隔绝于甲状腺细胞滤泡腔的边缘即甲状腺细胞顶部，因此，在TPOAb(也包括
重症肌无力自身抗体实验室诊断专家共识(2022版)解读PPT课件
AChR抗体在疾病监 测中的应用
定期监测AChR抗体滴度变化可反 映疾病活动度和治疗效果，有助 于指导临床治疗方案调整。
MuSK抗体检测
01
MuSK抗体检测方 法
MuSK抗体检测主要采用CBA法 ，该方法具有较高的敏感性和特 异性。
02
MuSK抗体与临床 表型关系
MuSK抗体阳性患者多表现为严 重全身型重症肌无力，且常伴有 胸腺增生或胸腺瘤。
进一步深入研究重症肌无力的自身免疫机制，探 索新的自身抗体标志物，为实验室诊断提供更多 的选择。
提高检测技术的敏感性和特异性
不断改进和优化现有检测技术，提高检测的敏感 性和特异性，减少假阳性和假阴性的发生。
3
加强质量控制和标准化建设
建立完善的质量控制体系，推动实验室诊断的标 准化建设，确保实验室诊断结果的准确性和可靠 性。
电生理检查
重复神经电刺激（RNS）检查
RNS是MG的敏感检测方法之一，通过低频和高频刺激神经，观察肌肉动作电位的波幅递减程度，以判断神经肌 肉接头处的传导功能。
单纤维肌电图（SFEMG）检查
SFEMG是一种高灵敏度的电生理检查方法，能够检测到单个肌纤维的动作电位，对于MG的早期诊断和病情评估 具有重要价值。
自身抗体在重症肌无力发病中起重要作用，针对自身抗体的实验室检测是重症肌无力诊断的重要手段。
制定重症肌无力自身抗体实验室诊断专家共识，对于规范实验室检测流程、提高检测准确性和可靠性、 指导临床诊断和治疗具有重要意义。
重症肌无力概述
重症肌无力是一种罕见的、慢性自身免疫性疾病，任何年龄均可 发病，女性略高于男性，绝大多数患者通过治疗可以维持正常生 活。
AChR抗体
是重症肌无力患者中最常见的自身抗体，与AChR结合后激 活补体和免疫细胞，导致AChR破坏和突触后膜损伤。
类风湿关节炎自身抗体PPT课件
详细描述
新型自身抗体的发现和研究主要依赖于高通量检测技 术和生物信息学分析。通过对类风湿关节炎患者的血 清样本进行大规模筛查，科学家们已经鉴定出了一些 新的自身抗体，如抗瓜氨酸蛋白抗体（ACPA）、抗 角蛋白抗体（AKA）等。这些新型自身抗体具有较高 的敏感性和特异性，能够更准确地诊断类风湿关节炎 ，并且与疾病的活动度和预后密切相关。
地域分布
类风湿关节炎在全球范围内均有分 布，但不同地区发病率存在差异。
02
CATALOGUE
类风湿关节炎自身抗体的作用机制
自身抗体的定义和分类
自身抗体
是指针对自身组织、器官、细胞及细胞成分的抗体。在正常情况下，人体的免 疫系统不会攻击自身组织，但当免疫系统出现异常时，会产生针对自身组织的 抗体，导致自身免疫性疾病。
鉴别诊断
类风湿关节炎自身抗体有助于与其他风湿性疾病进行鉴别，如骨关节炎、强直性 脊柱炎等。
评估疾病活动度和预后
活动度评估
类风湿关节炎自身抗体的滴度与疾病活动度相关，可以作为 评估病情的指标。
预后判断
某些类风湿关节炎自身抗体，如抗角蛋白抗体（AKA）阳性 患者更容易出现关节破坏和关节畸形，预后较差。
06
CATALOGUE
类风湿关节炎自身抗体的预防和保健建议
保持良好的生活习惯和饮食习惯
规律作息
控制体重
保持充足的睡眠，避免熬夜，以维持 免疫系统的正常功能。
保持适中的体重，避免肥胖，有助于 减轻关节负担，降低类风湿关节炎的 发病风险。
均衡饮食
多吃富含维生素、矿物质和抗氧化物 质的食物，如新鲜蔬菜、水果、全谷 类和豆类。同时，减少高脂肪、高糖 和高盐食物的摄入。
指导治疗和监测疗效
治疗方案选择
自身抗体(网络版)PPT课件
定期体检
定期体检有助于及时发现自身抗体的 存在，采取相应的预防和治疗措施。
自身抗体的治疗
药物治疗
根据自身抗体的类型和病情，医生可能会开具相应的药物 进行治疗，如免疫抑制剂、抗炎药等。
细胞疗法
近年来，细胞疗法在自身免疫性疾病的治疗中取得了一定 的进展，如调节性T细胞疗法、B细胞疗法等。
血浆置换疗法
对于某些自身抗体，如系统性红斑狼疮等，血浆置换疗法 是一种有效的治疗方法，通过去除患者体内异常的免疫成 分来达到治疗目的。
第一季度
第二季度
第三季度
第四季度
辅助诊断
自身抗体检测对于某些 自身免疫性疾病的诊断 具有重要意义，如类风 湿性关节炎、系统性红 斑狼疮等。通过检测相 关抗体，有助于医生对 疾病进行确诊。
监测病情
在疾病治疗过程中，自 身抗体检测可以用于监 测病情变化和治疗效果。 例如，定期检测类风湿 因子（RF）可以了解类 风湿性关节炎的病情进
THANKS FOR WATCHING
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来抗原，从而产生自身抗体。
自身抗体的产生需要经过一系列的免疫应答过程，包括抗原递呈、淋巴 细胞活化、抗体生成等。
自身抗体的作用机制
自身抗体可以与自身抗原特异性结合，形成免疫复合物，通过循环系统运输到其他 组织器官，发挥免疫效应。
自身抗体可以调节机体免疫功能，增强机体的抵抗力，对某些疾病起到预防和缓解 作用。
探索新的检测技术
结合生物信息学、纳米技术等新兴技术，开发出更加高效、便捷的自身抗体检测技术，为临床诊断和 治疗提供更加可靠的依据。
加强临床应用与转化研究
开展临床试验和应用研究
将自身抗体研究成果应用于临床实践，开展临床试验和应用 研究，验证自身抗体检测在临床诊断和治疗中的价值。
定期体检有助于及时发现自身抗体的 存在，采取相应的预防和治疗措施。
自身抗体的治疗
药物治疗
根据自身抗体的类型和病情，医生可能会开具相应的药物 进行治疗，如免疫抑制剂、抗炎药等。
细胞疗法
近年来，细胞疗法在自身免疫性疾病的治疗中取得了一定 的进展，如调节性T细胞疗法、B细胞疗法等。
血浆置换疗法
对于某些自身抗体，如系统性红斑狼疮等，血浆置换疗法 是一种有效的治疗方法，通过去除患者体内异常的免疫成 分来达到治疗目的。
第一季度
第二季度
第三季度
第四季度
辅助诊断
自身抗体检测对于某些 自身免疫性疾病的诊断 具有重要意义，如类风 湿性关节炎、系统性红 斑狼疮等。通过检测相 关抗体，有助于医生对 疾病进行确诊。
监测病情
在疾病治疗过程中，自 身抗体检测可以用于监 测病情变化和治疗效果。 例如，定期检测类风湿 因子（RF）可以了解类 风湿性关节炎的病情进
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来抗原，从而产生自身抗体。
自身抗体的产生需要经过一系列的免疫应答过程，包括抗原递呈、淋巴 细胞活化、抗体生成等。
自身抗体的作用机制
自身抗体可以与自身抗原特异性结合，形成免疫复合物，通过循环系统运输到其他 组织器官，发挥免疫效应。
自身抗体可以调节机体免疫功能，增强机体的抵抗力，对某些疾病起到预防和缓解 作用。
探索新的检测技术
结合生物信息学、纳米技术等新兴技术，开发出更加高效、便捷的自身抗体检测技术，为临床诊断和 治疗提供更加可靠的依据。
加强临床应用与转化研究
开展临床试验和应用研究
将自身抗体研究成果应用于临床实践，开展临床试验和应用 研究，验证自身抗体检测在临床诊断和治疗中的价值。
自身抗体的检测演示幻灯片
ANA检测的临床意义
ANA可见于多种自身免疫性疾病， 特别是结缔组织疾病，常作为结缔 组织疾病的诊断，病情判断和疗效 观察的指标
已证实ANA对很多自身免疫性疾病有 诊断价值。ANA的靶抗原为细胞核内的不 同生化成份，包括核酸、细胞核蛋白和核 糖体蛋白。在不同疾病中，特别是风湿性 疾病，其抗体谱有一定的特意性。在炎症 性风湿病中ANA阳性率在20%-100%之间， 其中类风湿性关节炎中ANA阳性率最低， 为20%-40%。所以，检测ANA对于不同类 型风湿病意义重大。
临床意义：cANCA可见于多种系统性血管炎。 主要见于Wengener’s肉芽肿，约占ANCA阳性 率的80~95%。cANCA被认为是活动性 Wengener’s肉芽肿和微多动脉炎的特异和敏 感的标志性抗体。还见于Churg-Strauss综合 征。
抗中性粒细胞胞浆抗体（核周型）
pANCA
荧光模式：
正常的健康人
女性＞男性，出现率 随年龄而增加
风湿性疾病患者亲属 ？孕妇
SLE患者使用IIF法测定ANA阴性的一些解释
技术方面
临床方面
经皮质激素或免疫抑制剂治疗。
终末期肾病。
隐蔽ANA：与循环中免疫复合物结合，沉积于组 织。
由于大量蛋白尿而从肾脏丢失。
ANA的荧光染色型别
根据产生的荧光模型、靶抗原的分布部位分类如下：
抗SSA／SSB抗体
自身抗原：SSA抗原是一个小核糖核蛋白，由 一个RNA分子和两种不同的蛋白质组成。蛋白 质的分子量为52KD和60KD。抗体直接针对蛋 白质的抗原决定簇。SSB抗原是分子量为48kD 的磷酸化蛋白。
临床意义；最常见于干燥综合征（SS）,也见 于SLE、原发性胆汁性肝硬化（PBC），偶见 于慢活肝。抗SSA抗体在新生儿红斑狼疮的发 生率几乎为100%。
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1、ANA的类型
（1）抗核蛋白抗体 （2）抗DNA抗体 抗双链DNA抗体（抗dsDNA） 抗单链DNA抗体（抗ssDNA）。 （3）抗ENA抗体 可提取性核抗原（extractable nuclear antigens，ENA）
2、ANA的检测方法 间接免疫荧光法
用小鼠肝切片或印片作为细胞核基质，
靶抗原是血浆中的磷脂结合蛋白。
APLA包括一组自身抗体，如抗心 磷脂抗体（ACLA），抗磷脂酸抗 体（APAA）和抗磷脂酰丝氨酸抗 体等。
3.抗平滑肌抗体（anti-smooth muscle antibody，ASMA）
是自身免疫性肝炎的血清学标志
性抗体。常用间接免疫荧光分析 检测。
4.抗角蛋白抗体（anti-keratin antibody，AKA） 主要见于类风湿性关节炎患者， 对于早期诊断RA有重要意义。可 用间接免疫荧光法检测。但敏感 性较低。与RF不平行。
还可用核质丰富的培养细胞如Hep-2，作 为抗原。 用荧光显微镜观察ANA荧光着染强度和免 疫荧光图形。 稀释待检血清可检测ANA效价。
3.常见的ANA图形及临床意义
均质型 （homogen eous，H）
斑点型
（speckled， S）
核膜型
（membrano us，M）
核仁型
自身抗体的检测及应用
一、概述
自身免疫耐受。 自身免疫（autoimmunity） 自身抗体（autoantibody）或自身
致敏淋巴细胞 自身免疫性疾病
二、自身抗体的检测 （一）抗核抗体 （antinuclear antibody，ANA）
泛指抗各种细胞核成分（DNA， RNA，蛋白质和酶）的抗体。
斑点酶免疫技术
免疫印迹技术
免疫印迹技术（最常用）
先将ENA混合抗原作凝胶电泳，
分离开不同的区带，然后把这些 区带转印到硝酸纤维膜上，加入 待检血清，最后用酶标抗体使相 应的抗原带显色
2、抗ENA抗体的主要类型及 临床意义
（1）抗Sm抗体
抗Sm是SLE的特异性标志之一
（2）抗核RNP抗体（抗nRNP抗体）
又称抗U1RNP抗体。 抗U1RNP抗体是诊断混合性结缔 组织病（ MCTD）的重要血清学 依据，是MCTD的诊断标准之一。
（3）抗SSA/Ro和抗SSB/La
这两种抗体是干燥综合症 （SS）患者最常见的两种自身抗 体
（4）抗J0
-1抗体 最常见于多发性肌炎（PM） 患者。
（5）抗Scl-70抗体
5.抗乙酰胆碱受体抗体
对重症肌无力的诊断有特异性。 可用ELISA检测。
是重症肌无力的标志性自身抗体，
6.抗骨骼肌抗体
与成年型重症肌无力有关。
7.抗胰岛细胞抗体
与I型糖尿病有关。
三、临床应用
1、检测项目的选择
2、检测方法的选择
3、自身抗体检测的质量控制
谢 谢 大 家
（nucheola r，N）
4.抗dsDNA的检测
常用间接免
疫荧光法检 测，常用的 抗原基质是 马疫锥虫或 绿蝇短膜虫。
（二）抗EA抗体。通过检测抗ENA抗体 的类型及其组合，可综合诊断自 身免疫病的类型。
1、检测方法
双向免疫扩散
对流免疫电泳
几乎仅出现在PSS（进行性 系统性硬皮病）患者体内，是 PSS的特征抗体
（三）类风湿因子 （rheumatoid factor，RF）
RF是以变性IgG为靶抗原的抗体，
它能与人或动物的变性IgG结合， 而不与正常IgG结合，RF主要出 现在类风湿关节炎患者。
RF的检测最常用IgG致敏的胶乳 颗粒凝集试验，或速度散射比浊 法，但只能检测IgM类的RF。IgG 类，IgA类和IgE类RF需ELISA等 方法检测。
（四）其他自身抗体
1.抗中性粒细胞胞质抗体 （anineutrophil cytoplasmic antibodies，ANCA）
以人中性粒细胞胞质为靶抗原， 与临床多种小血管炎性疾病有关。 分胞质型（cANCA）和核周型 （pANCA）。可用ELISA或间接免 疫荧光法测定。
2.抗心磷脂抗体（antiphospholipid antibody，APLA）