药动学实验
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0.5
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1 1 1 1 1
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1
血药浓度计算
样品管OD
= 标准管OD 标准管药物浓度 (μg/ ml) 样品管OD 标准管药物浓度 标准管OD 血药浓度 = 样品管药物浓度 30
样品管药物浓度 (μg/ ml)
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
样品管药物浓度 =
表1 磺胺类药物血药浓度测定的步骤
试管 时间 7.5% 血液 (min) 三氯 (ml) 醋酸 (ml) 0 0 2.7 2.7 0.2 0.2 充 分 摇 匀 0.1 后 标准液0.1 离 心 0.1 5 分 0.1 钟, 0.1 取 0.1 上 清 0.1 液 1.5 0.1
ml
蒸馏水 (ml)
第一章 药动学实验
实验一 磺胺类药物静脉给药后的药时曲线
【目的】了解磺胺类药物( sulfonamides ) 静脉一次给药后血浓随时间变化的规律。
【原理】
• Sulfonamides 能与某些试剂发生反应生成有 色物质,通过比色可以对sulfonamides血药浓 度进行定量分析 • Sulfonamides 在酸性环境下使其苯环上的氨 基 ( —NH2 ) 离 子 化 生 成 铵 类 化 合 物 ( — NH3+),与亚硝酸钠反应后,发生重氮化反 应生成重氮盐( —N = N+— )。该化合物在 碱性条件下与麝香草酚生成橙黄色化合物。 在 525nm 波 长 下 比 色 , 其 光 密 度 与 Sulfonamides浓度成正比
【方法与步骤】
麻醉(称重,iv 3%戊 巴比妥钠1.0 ml/kg) 动脉插管:夹住近 心端,结扎远心端 气管插管 分离颈总动脉 肝素化:iv 1000u/ml 肝素生理盐水,1 ml/kg
取空白血样:>0.4ml 给药: iv 20%SD 1.5ml/kg 比色 计时,取给药后各 时间点血样0.2ml 显色
0.5%亚硝 充 0.5% 酸钠(ml) 分 麝香 摇 草酚 (先) 匀 (ml) 0.5 0.5 1 1
光密 度
浓度 g/ml
空白 标准
1
3
2.7
2.7
0.2
0.2
0.5
0.5
1
1
5
15 30 45 60 90
2.7
2.7 2.7 2.7 2.7 2.7
0.2
0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
【动物】 2kg左右兔一只 【药品】 • 20%磺胺嘧啶(sulfadiazine,SD) • 7.5%三氯醋酸 • 0.1%SD标准液 • 0.5%亚硝酸钠 • 0.5%麝香草酚(用20%NaOH配制) • 1000u/ml肝素生理盐水 • 3%戊巴比妥钠 • 蒸馏水
【器材】
• • • • • • • 722分光光度计 离心机 电子秤 手术器械 动脉夹、尼龙插管(或玻璃插管、硅胶管) 兔手术台 注射器及针头、移液器、吸头、离心管、试管、 试管架 • 计算机
【结果与处理】
• 将所得数据填入表1中,并用计算机软件 绘制药物的药时曲线。
【注意事项】
• 麻醉药注射速度要慢 • 动脉插管时远心端一定结扎牢固;放血时动脉夹不 要离开血管;不能用镊子、止血钳夹血管 • 必须取空白血样,否则无法进行实验 • 注射药物一定要真正到达要注射的部位 • 每次取血前要先将插管中的残血放掉 • 每取一个血样必须更换吸头 • 将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀 • 实验顺序不能颠倒(空白血样,显色等) • 因时间较长,注意补麻药和检查血管通畅度
722分光光度计的使用方法
• 开机预热30min • 按‘模式’ 按钮‘透射比’ 放入空白 管(对应光孔处) • 打 开 盖 板 调 零 ( 0% ) , 合 上 盖 板 调 满 ( 100% ),如此三次。稳定后在合上盖板 状态下再次按‘模式’ ‘吸光度’ • 比色时由低高浓度进行,并且尽快完成