高效毛细管电泳法测定吲哚乙酸氧化酶的活力
吲哚乙酸IAA检测方法及氧化酶活性的测定
吲哚乙酸IAA检测方法及氧化酶活性的测定吲哚乙酸IAA检测方法及氧化酶活性的测定一、原理1、吲哚乙酸产品概述:吲哚乙酸可占植物体内吲哚乙酸的50-90%，可能是生长素在植物组织中的一种储藏形式，它们经水解可以产生游离吲哚乙酸。
吲哚乙酸可刺激形成层细胞分裂;吲哚乙酸刺激枝的细胞伸长、抑制根细胞生长;促进木质部、韧皮部细胞分化，促进插条发根、调节愈伤组织的形态建成。
吲哚乙酸在器官和整株水平上，吲哚乙酸从幼苗到果实成熟都起作用。
吲哚乙酸控制幼苗中胚轴伸长的可逆性红光抑制;当吲哚乙酸转移至枝条下侧即产生枝条的向地性;当吲哚乙酸转移至枝条的背光侧即产生枝条的向光性;吲哚乙酸造成顶端优势;延缓叶片衰老;施于叶片的生长素抑制脱落，而施于离层近轴端的生长素促进脱落;吲哚乙酸促进开花，诱导单性果实的发育，延迟果实成熟。
2、试验原理:吲哚乙酸在吲哚乙酸氧化酶的作用下，被氧化破坏失去活性。
植物体内吲哚乙酸氧化酶活力的大小，对调节体内吲哚乙酸的水平，起着重要的作用，而影响植物的生长。
酶活力的大小可以其破坏吲哚乙酸的速度表示之。
吲哚乙酸的含量可用比色法测定。
二、准备仪器及药品T6新悦型分光光度计离心机恒温水浴锅天平研钵试管移液管烧杯20mmol/L磷酸缓冲液，pH6.0(见附表2)。
1mmol/L2，4—二氯酚:称取二氯酚16.3mg用蒸馏水配制成100ml。
1mmol/L氯化锰:称取MnCl?4HO 19.8mg用蒸馏水配制成100ml。
221mmol/L吲哚乙酸:称取IAA 17.5mg用少量乙醇溶解，然后将其倒于盛有约90ml蒸馏水的容量瓶中(100ml)，稀释至刻度。
吲哚乙酸试剂A或B(任备其中之一):试剂A:15ml 0.5mol/L FeCl3，300ml浓硫酸(比重为1.84)，500ml蒸馏水，使用前混合之即成，避光保存。
用时1ml样品中加入试剂4ml。
试剂B:10ml 0.5mol/L FeCl3,500ml 35%过氯酸，使用前混合之即成，避光保存。
毛细管电泳—紫外检测法测定-文档资料
第一章 绪论
本章节主要分三个部分进行阐述： 一是中草药有效成分分析方法的发展； 二是毛细管电泳在黄酮类化合物分析中 的应用； 三是本实验的研究任务
1.1中草药有效成分分析方法的发展
中药有效成分研究的发展是随着 中药事业的不断发展,随着相关学科 的不断发展而经历一个由简单到复 杂,由主观到客观,由浅显到深入、 全面综合的过程。
二是毛细管细泳在细细化合物分析中的细用细展而细细一由细细到细细表111998年和2000细物分析细志细表定量细定细文细细表高效毛细管细泳法高效毛细管细泳法hpce是粒子以细细细细细力在毛细管中按其细细下子的平均细泳速度或分配系不同细行高效快速分的一细细泳表12cecze溶细在自由溶液中的用于细细细物细的分分析适合于中性物细的分离可用于cge溶细分子大小适用于生物大分子的分析如蛋白细寡聚核rnadnapcr细物分析citp溶细在细细梯度下的分布差异移细界面常用于分如有机酸cief等细点差如蛋白细细细等cec细渗流细细的色细分离机制同hplc12毛细管细泳在细细化合物分析中的细用11细细化合物基本细不同的细细化合物具有不同的生物活性
毛细管电泳法分离黄酮类化合物的进展 在黄酮类化合物的分析中,常用的是CZE
和MECC ,CITP很少用。
MECC 法
朱加虹利用胶束电动毛细管色谱法分离银杏叶提取物 中的黄酮类化合物芦丁和槲皮素,研究了有关的测定条 件。 Shufang Wang等用熔融石英毛细管(70.0 cm ×7μm I.D) ,0.2molH3PO4 ,0.2 mol SDS ,乙腈,2-丙醇为缓 冲溶液,检测波长254 nm ,用MECC 测定EP-imedium brevicornum Maxim中的黄酮类物。 邓永智等利用胶束毛细管色谱法将中药银杏浸膏中槲 皮素、山萘素、异鼠李素3 种黄酮分离,以SDS 作表面 活性剂, 25mol/ L 硼砂/ 25mol/ L 磷酸二氢钾/ 1 %(V/ V) 甲醇作运行液。
高效液相色谱-电化学检测法测定人尿液中的5-羟基吲哚乙酸和高香草酸
关键 词
反相高效液相色谱法 ， 电化学检测 。 人尿 ，－ ５羟基吲哚 乙酸 ， 高香草酸
１ 前言
尿 液 中儿 茶酚胺 和 ５羟基色胺 （－ Ｔ 的 酸性 － ５ ） Ｈ 代谢 产物 的测定 常用溶 剂提取法［或小柱［ ４ １ ］ ２］ 进行 样 品预处理 ， 费时且成本高 。Ｅｒｄ等［报道了直接 ｌ ｏ ５ ］ 测定稀释 人尿 液 中的 ５ Ｉ Ａ。本文 探讨 了同时测 － Ａ Ｈ 定人 尿 液 中 ５ Ｉ Ａ 和 Ｈ Ａ 的色谱 条 件 ， － Ａ Ｈ Ｖ 用该 方 法测定 了正 常人和接 触锰 人群组 １ 小 时尿液 中的 ２
２ 实验部分
２１ 仪 器和试剂 ．
Ｗａｅｓ ６ ０ Ａ 泵 ， Ｋ 进 样 阀 ， Ｃ ４ ／ ７ ｔｒ Ｍ ０ ０ Ｕ６ Ｌ －Ｂ １
型 电化学 检测器 （ｉ ｎｌ ｉ ｌ ｔ ＩＣ ） Ｂｏ ａ ｔａＳ ｓ ｍ ａ ｙ ｃ ｙ ｅ Ｎ 及岛津 ＣＲ Ａ 数据 处 理 仪。５ Ｉ Ａ 为 Ｆｕａ产品 ， Ｖ －３ － Ａ Ｈ ｌ ｋ Ｈ Ａ 为 Ｅ Ｍｅｃ 品， ． ｒｋ产 其余 为 国产 分析 纯试 剂 ， 为超 水
３ １９ ２： ５ ０
＊ 本文为祝贺卢佩章先生七十华诞而作 本文收稿 日期 ：９５ ５ ５日 １９ 年 月
１％则 Ｎ ２ Ｈ Ａ 重叠 ； 甲醇浓度增至 １ ％， ０ Ｐ与 Ｖ 若 ４ 则 Ｎ ２ ｔ 降低 而与 ５Ｈ Ａ Ｐ的 Ｒ － Ｉ Ａ重叠 。 综 合上述 各种 因素 ， 最后选择 了含 １ ％甲醇 的 ２ ０ １ ｏ／ Ｎ Ｈ Ｐ ４ 冲液 （Ｈ ． ０含 ０１ ｍ ｌ ．ｍ ｌ Ｌ ａ Ｏ 缓 ｐ ４２ ， ．ｍ ｏ／ Ｌ Ｔ －Ｎ ┪ Ｅ Ａ ２ ａ 为流动 相 ， 作电位 ０６Ｖ。图 ２为 Ｄ 工 ．５ 标 准样品色谱 图， ３ 图 为尿液色谱 图。
毛细管电泳中常用的检测方法
毛细管电泳中常用的检测方法毛细管电泳中常用的检测方法毛细管电泳(C E ) 以其高效、快速的分离, 成为一种令人瞩目的分析手段。
为了便于热量散失和进行柱上检$lJ , 采用了极小内径的毛细管(≤50 umi.d.) , 这样允许进样量就很小(10 一9 g )。
如此小的进样量要求有高灵敏的检测方法, 才能进行定性、定量分析。
紫外吸收法：一般, 常用于C E 的检测器是市售的紫外和荧光检测器。
当采用紫外一可见吸收法时, 石英毛细管壁的内涂层常常用有机溶剂溶解或灼烧而刮去, 使出现一个“小窗口” , 作为柱上检测的流通池。
内径很小的毛细管使得流通池的长度也相应很小, 检测灵敏度相当有限, 尤其在生物样品分析中常常需要先行样品预富集然后再检测, 以提高灵敏度。
在使用长方形徽面的毛细管进行电泳分离分析时,柱上检测的光学流通池长度明显增大, 使检测灵敏度提高7 1 5 倍。
采用高能量的光源, 如氨灯、激光等, 可较大地提高检测灵敏度, 但费用较高, 又因可供选择使用的人射光波长范围较窄, 限制了它的应用。
荧光检测法：荧光检测的灵敏度比紫外吸收法高几个数量级。
对于有适当的激发荧光和发射荧光的供试品, 采用激光诱导荧光检测法和光电倍增管, 可使检测灵敏度大大提高, 而对于绝大多数无自然荧光的化合物, 则必须进行柱前或柱后衍生化, 才能进行荧光检测。
间接检测法：对供试品进行衍生化的操作繁琐, 且易引入误差, 对于被测浓度极低的生物样品更是如此。
于是, 间接检测法应运而生。
间接检测就是在电泳缓冲液中加入具有检测响应的检测剂, 如发色团、荧光物质等, 作为本底响应,以产生基线信号。
供试品进样后, 供试品离子与反电荷的检测剂离子形成离子对, 或置换了检测剂的同电荷离子, 分别产生正峰和负峰,使基线信号发生改变而被检测。
在间接荧光法中, 被分析物能吸收荧光辐射或使本底荧光淬灭, 本底信号因此降低或消失而进行检测。
这种方法要求供试品必须能吸收荧光或淬灭荧光。
高效毛细管电泳法分离测定5种水溶性维生素_柯月娇
Journal of Fujian University of TCM February 2014，24（1）
27
高效毛细管电泳法分离测定 5 种水溶性维生素
柯月娇，黄桂华，张苏娜，李 琦
（福 建 中 医 药 大 学 药 学 院 ，福 建 福 州 350122）
28
福建中医药大学学报
第 24 卷
信 号 强 度 ／ mV
信 号 强 度 ／ mV
保 留 时 间 ／ min 注 ：1. 维 生 素 B1；2. 烟 酰 胺 ；3. 维 生 素 B2；
4. 维 生 素 B6；5. 维 生 素 C。 图 2 标 准 品 265 nm 处 电 泳 谱 图
保 留 时 间 ／ min 注 ：1. 维 生 素 B1；2. 烟 酰 胺 ；3. 维 生 素 B2；4. 维 生 素 B6。 图 4 复 合 维 生 素 B 片 265 nm 处 电 泳 谱 图
离态水溶性维生素［J］. 南昌大学学报，2006，30（3）：258-261. ［4］ 刘 雄 ，吴 蓉 ，高 建 德. 毛 细 管 电 泳 技 术 在 中 药 研 究 中 的 应 用
［J］. 光 明 中 医 ，2009，24（3）：577-578. ［5］ 卢 佳 ，孙 成 均 ，叶 利 明 ，等. HPCE 测 定 保 健 品 及 中 药 中 的 多
信 号 强 度 ／ mV
信 号 强 度 ／ mV
保 留 时 间 ／ min 注 ：1. 维 生 素 B1；2. 烟 酰 胺 ；3. 维 生 素 B2；4. 维 生 素 B6。
图 3 复 合 维 生 素 B 片 200 nm 处 电 泳 谱 图
吲哚乙酸氧化酶检测试剂盒（IAA比色法）
吲哚乙酸氧化酶检测试剂盒（IAA比色法）吲哚乙酸氧化酶检测试剂盒(IAA比色法)简介：植物体内生长素的种类很多，其中吲哚乙酸(IAA)是植物体内普遍存在的一种生长素，植物体内IAA的含量，对于植物的生长、发育、衰老、脱落等均有重要意义。
植物体内存在吲哚乙酸氧化酶(Indoleacetic acid oxida-se)，该酶是植物体内一种氧化分解吲哚乙酸的酶，吲哚乙酸氧化酶能够氧化IAA使其失去活性，从而调节体内IAA的水平，影响植物的生长。
Leagene吲哚乙酸氧化酶检测试剂盒(IAA比色法)检测原理是吲哚乙酸在吲哚乙酸氧化酶作用下形成吲哚醛，使体系中吲哚乙酸含量减少，剩余的吲哚乙酸在无机酸存在下与FeCl3作用生成红色螯合物，吲哚乙酸氧化酶活性的大小可以用其破坏吲哚乙酸的速度表示。
通过比色法(分光光度计)测定吸光度，根据对照与待测样品中吲哚乙酸含量的差值，计算出吲哚乙酸氧化酶活性水平。
该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中吲哚乙酸氧化酶活性，尤其适用于定量测定植物样本吲哚乙酸氧化酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、恒温箱或水浴锅2、研钵或匀浆器3、离心管或试管4、低温离心机5、浓硫酸6、比色杯7、分光光度计操作步骤(仅供参考)：编号名称TE051350TStorage试剂(A):IAA标准(200μg/ml)25ml4℃避光试剂(B):IAA Lysis buffer250ml RT试剂(C):IAA Assay buffer60ml4℃避光使用说明书1份1、准备样品：①植物样品：将大豆或绿豆等种子置于30℃中避光萌发3-4天，选取生长一致的幼苗，除去子叶和根，留下胚轴作为材料。
取胚轴，称重，按每100mg加入适量预冷的IAA Lysis buffer的比例，冰浴情况下充分匀浆或研磨。
离心,留取上清液即为吲哚乙酸氧化酶粗提液。
短期4℃保存待用。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，保存，用于吲哚乙酸氧化酶的检测。
高效毛细管电泳技术
2.1 电渗现象
当固体与液体接触时，固体表面带一种电荷，则 因静电引力使其周围液体带有相反电荷，在液-固界 面形成双电层，二者之间存在电位差。 当液体两端施加电压时， 就会发生液体相对于固体 表面的移动，这种液体相 对于固体表面的移动的现 象叫电渗现象。
EOF
2.2 HPCE中的电渗现象
石英毛细管柱，内充液pH>3时，石英毛细管壁上 的硅醇基(-SiOH）电离成-SiO-（负电荷）,与之接 触的缓冲液带正电，形成了双电层。在高电场的作 用下，带正电荷的溶液表面及扩散层向阴极移动， 故将引起柱中的溶液整体向负极移动，速度ν 电渗流。
四、毛细管电泳的特点
4.1 毛细管电泳优点
4.2 毛细管电泳缺点
4.1 毛细管电泳优点
1.高效 效率在105～106片/m间，毛细管凝胶电泳 （CGE）效率可达107片/m以上； 2.快速 几十秒至十几分钟完成分离； 3.微量 进样所需的体积可小到1µl，消耗体积在1～ 50nl间； 4.多模式 可根据需要选用不同的分离模式，且仅需 一台仪器； 5.样品对象广 从无机离子到整个细胞，具有“万能” 分析功能或潜力； 6.经济 实验消耗不过几毫升缓冲溶液； 7.自动 CE是目前自动化程度最高的分离方法； 8.洁净 通常使用水溶液，对人对环境无害；
3.4 食品检测
近年来，非法使用添加剂的现象比较多，包括 苏丹红、瘦肉精、三聚氰胺等，CE同样可以应用这 些物质的检测: (1)邓光辉用毛细管电泳安培检测法检出了辣椒粉 样品中的苏丹红 I 号。 (2)张辰凌等以 20 mmol/L 乳酸溶液为背景电解质 ，用毛细管电泳-电容耦合非接触电导法检测了牛 奶中的三聚氰胺的含量。 (3)管月清等采用毛细管电泳-电化学检测法同时测 定了肉制品中盐酸克伦特罗与沙丁胺醇的含量。
实验26吲哚乙酸含量与吲哚乙酸氧化酶活性的测定
实验26吲哚乙酸含量与吲哚乙酸氧化酶活性的测定植物体内生长素的种类很多，其中吲哚乙酸（ 1AA ）是植物体内普遍存在的一种生长素。
于不同的生育期测定不同器官中 IAA 的含量以及 IAA 氧化酶的活性，对于研究植物的生长、发育、衰老、脱落等均有重要意义。
Ⅰ 吲哚乙酸含量的测定一、原理1947 年，我国植物生理学家汤玉玮等发现，在无机酸存在下，吲哚乙酸能与 FeCl 3 作用，生成红色的鳌合物。
该物质在 530 nm 有最大吸收峰，由此引出 IAA 的比色定量测定，此法可测出μg 量级的 IAA 。
二、实验材料、试剂与仪器设备（一）实验材料玉米种子。
（二）试剂1. IAA 标准溶液：精确称取 IAA （ A.R. ） 10 mg ，先用少量乙醇溶解，后用蒸馏水定容至 100 mL （其浓度为 100 μg/mL ）作为贮备液；然后用贮备液配成 0 （空白）、 0.5 、 1.0 、 5.0 、10.0 、 15.0 、 20.0 、 25.0 μg/mL 的系列浓度标准溶液，作为工作液（现用现配）。
2. 试剂 A ：内含 0.5 mol/L FeCl 3 溶液 15 mL 、浓 H 2 SO 4 （比重 1.84 ） 300 mL 、蒸馏水 500 mL ，于使用前混合摇匀，避光保存， l mL 试液需加此试剂 4 mL 。
3. 试剂 B ：内含 0.5 mol/L FeCl 3 溶液 10 mL 、 35 ％高氯酸 500 mL ，于使用前混合摇匀，避光保存， l mL 试液应加此试剂 2 mL 。
试剂 A 与试剂 B 可任选一种（试剂 B 比试剂 A 灵敏）。
4. 0.1 mol/L NaOH 溶液。
5. 甲醇。
（三）仪器设备分光光度计，离心机，粉碎机，天平，水浴锅，移液管，大试管，烧杯。
三、实验步骤1. 标准曲线绘制取干洁大试管 8 支（ 0 ～ 7 号），依次加入 IAA 系列浓度工作液 2 mL ，分别加入试剂 B 4 mL （或试剂 A 8 mL ），于40 ℃温箱中暗保温 30 min （加速显色反应）；于 530 nm 下比色，以 OD 值为纵坐标，以 IAA 浓度（μg/mL ）为横坐标，绘出一条标准曲线。
毛细管区带电泳法分析不同来源血竭中龙血素 和龙血素
・ +"$・
色
谱ห้องสมุดไป่ตู้
第 !" 卷
$］ 血作痛、 臁 疮 久 不 收 口 等 症［ # ， 。血竭主要含黄酮
类、 芳香类、 皂苷类等化学成分， 其中 % !" 羟基 "$ ， %"二 甲氧基二氢查耳酮 （ 龙血素 # ，$%&’()’)* # ） 和 % !" 羟 基 "$ ， %， & " 三甲 氧 基 二 氢 查 耳 酮 （ 龙 血 素 + ，$%&’()"
血竭是一种名贵的中药材是一些植物如百合科剑叶龙血树等受到损伤后感染真菌等微生物后产生的一种代谢产物具有广泛的物理活性能活血散瘀定痛止血和敛疮生肌等可以用于跌打损伤瘀色谱第
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!"#$%&% ’()*$+, (- !"*(.+/(0*+1"2
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#$ ］ ,-./ 和 102/ 方法［ % ( ) ， 相比， 分析时间更短。
图 ! " （ "） 龙血素 # 和 （ $） 龙血素 % 的结构式 &’(! ! " )*+,’-". /012-021+/ 34（ " ）.321+’1’5 # "56（ $ ）.321+’1’5 %
’ ’ 电泳运 行 缓 冲 溶 液： 含 #" =（ @ 5 @ ， 下同） 乙 腈、 + = 乙二醇和 # = 正 丁 醇 的 $" 33%$ 5 . A; $ + % B , 缓 冲溶 液 （ 用 A;B, 溶 液 调 节 C, )* ). ） ， 使用前用 "* %+ ! 3 滤膜过滤。 ’ ’ 样品溶液： 将同一棵剑叶龙血树的树干和树叶 上天然形成的血竭以及在该树的树干上用不同真菌 人工诱导形成的血 竭 干 燥 后 粉 碎， 用甲醇水浴回流 约 . D， 然 后减压 蒸馏除 去溶 剂， 得到血 竭浸膏。 称 取干燥后的浸膏约 "* $ > ， 用甲醇超声溶解， 过滤， 滤 液用甲醇定容于 $+ 3. 容量瓶中， 得样品溶液， 于% ? 下保存备用。 ! ! $" 78)9 条件与方法 ’ ’ 电 泳 介 质 为 #* $ 节 配 制 的 电 泳 运 行 缓 冲 液， 分 离电压为 $" :E ， 柱温为 $+ ? ， 检测波长为 $## *3 ； 压力进样 为 ! %%, -; - +* " F 。 为了确 保重现 性， 毛 细管 柱 每 天 在 运 行 前 和 两 次 运 行 间 依 次 用 "* # 3%$ 5 . A;B, 溶液、 重蒸水和运行缓冲溶液分别冲 洗 !、 ! 和 % 3)* 。
高效毛细管电泳法测定有毒生物碱
高效毛细管电泳法测定有毒生物碱复旦大学药学院仲艳生物碱(alkaloids)是植物中一类重要的化学成分，大多具有生理活性，往往是许多药用植物的主要有效成分。
对于含有一些毒性较大的生物碱类的中草药，由于剂量不当或者炮制方法有误而导致中毒的情况时有发生。
目前国内外的文献报道主要集中于一种植物来源有毒生物碱的研究上，对于一次操作筛选包含几种植物来源的有毒生物碱的分析方法未见有报道。
高效毛细管电泳(HPCE)[1-3]是近年来迅速发展起来的新的分析技术，与目前常用的气相色谱法(GC)，气质联用法(GC-MS)和高效液相色谱法(HPLC)等方法相比，具有高效、快速、低成本、易操作、样品量少等特点，近年来在医学、药学、生化等领域得到了较快的发展和广泛的应用。
在20世纪90年代，CE技术被引入司法领域，用来分离了包括海洛因在内的18种违禁和管制药品。
随着这一技术的推广应用，CE已成为毒物检测中的热点。
本研究以此为切入点，用毛细管区带电泳-紫外检测(CZE-UV)系统分析了检材中常见的几种有毒生物碱。
这一通用性的方法，大大提高未知毒物的分析速度，可作为有毒生物碱初筛的方法。
1 实验部分1.1仪器与药品Beckman P/ACE MDQ毛细管电泳仪(美国Beckman公司)；未涂层石英毛细管柱(75μm×50.2cm，有效分离长度为40cm，Beckman公司)；Oasis HLB柱(1mL/30mg，Waters公司)；旋涡混合器 XW-80A；电热恒温水浴锅。
样品：乌头碱(Aconitine)、次乌头碱(Hypaconitine)、新乌头碱(Mesaconitine)、高乌甲素(Lappaconitine)、雪上一枝蒿甲素(Bullatine A)、硫酸阿托品(Atropine Sulfate)、溴甲阿托品(Atropine Methobromide)、氢溴酸东莨菪碱(Scopolamine Hydrobromide)、氢溴酸山莨菪碱(Anisodamine Hydrobromide)、茶碱(Theophylline)、马钱子碱(Brucine)、士的宁(Strychnine)、硫酸奎宁(Quinine Sulfate)、氯喹(Chloroquine)。
药物分析实验：高效毛细管电泳分离检测苯磺酸氨氯地平对映体
六、数据
1、实验步骤 2、标准溶液的浓度以及对应的峰面积 3、样品测定的保留时间和峰面积（对照品和 供试品的色谱图） 4、计算过程及结果（包括分离度等） 5、实验思考题、心得等
2020/10/30
七、思考题
1、 高效毛细管电泳的特点？ 2、 采用高效毛细管电泳拆分手性药物与采用高效液相色谱 和气相色谱拆分手性药物有何优势？ 3、外标一点法和标准曲线法相比，优势和不足？可否用同 一浓度不同体积进样获得标准曲线？ 4、采用HP-β-CD作为手性选择剂拆分的化合物有哪些？ 利 用HP-β-CD作为手性拆分的优势？
6.129'
0.282'
-2 76
RS
1
2345 Nhomakorabea6
7
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12
13
min
-2 79
苯磺酸氨氯地平高效毛细管分离对映体图
五、注意事项
1、 运行缓冲液须先超声脱气； 2、 缓冲液及样品须经过0.45 μm微孔滤膜过滤； 3、仪器操作时一定要弹起电压启/停控制按钮，停止高压 输出后（此时电压电流都显示0），才可以取出毛细管的 进样端进样； 4、进样时间和进样高度控制准确。
1、配制44 mmol/L Citric acid + 30 mmol/L Tris(三羟甲基氨
基甲烷)+ 35mmol/L HP-β-CD为电泳运行液。 2、毛细管柱在使用前依次用 0.1 mol/L NaOH、超纯水和 电泳运行液各冲洗毛细管柱 5 min；
3、分离电压16 KV，进样10 S ，检测波长 λ 239 nm。
带电粒子的迁移速度=电泳和电渗流两种速度的矢量和 电泳：在电解质溶液中，位于电场中的带电离子在电场力的作用下， 以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象 电渗流：是指管内溶液在外力电场作用下整体朝一个方向运动的现象
高效毛细管电泳法测定中药大黄及青海野生大黄茶中活性蒽醌类成分的含量
高效毛细管电泳法测定中药大黄及青海野生大黄茶中活性蒽醌类成分的含量郑文捷;陈兴国;贾伟【期刊名称】《中国中药杂志》【年(卷),期】2004(29)9【摘要】目的 :首次建立一种简单、快速且能同时分离测定中药大黄及青海野生大黄茶中 3种主要活性蒽醌成分含量的胶束毛细管电泳新方法。
方法 :熔融石英毛细管柱(75 μm× 5 0 .0cm ,有效长度 4 2 .4cm) ;缓冲体系15 .0mmol·L-1硼砂30 .0mmol·L-1SDS 10 %乙醇 ,pH 9.6 0 ,分离电压 2 0kV ;检测波长 2 5 4nm。
结果 :大黄素、芦荟大黄素和大黄酸的线性范围分别为 4～ 12 0 (r=0 .9921) ,10～ 2 0 0 (r=0 .9970 ) ,2～10 0mg·L-1(r=0 .9971)。
日内迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别为 0 .5 9%～ 0 .80 % ,1.30 %～ 3.2 2 % ,回收率范围为97.6 %～ 10 2 .3%。
结论 :方法简单、快速、准确、重现性好 ,可用于大黄药材和青海野生大黄茶的质量控制。
【总页数】4页(P870-873)【关键词】生大黄;中药;高效毛细管电泳法;含量;蒽醌类;活性;芦荟大黄素;野生;黄茶;青海【作者】郑文捷;陈兴国;贾伟【作者单位】上海交通大学药学院;兰州大学化学化工学院【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R259【相关文献】1.微柱高效液相色谱法测定虎杖及大黄样品中的大黄蒽醌类成分 [J], 郭思斌;刁红星;陈楚雄;陈壁芬2.青海野生大黄茶营养成分分析 [J], 熊辉岩;张晓峰;曹越3.UPLC法测定大黄䗪虫丸中5种蒽醌类活性成分的含量 [J], 卓辉;蓝梦柳;张海凤;钟玉环;许文;吴水生4.反相高效液相色谱法测定大黄药材五种蒽醌类成分的含量 [J], 许舜军;李鸿燕;曾元儿;江滨5.不同产地野生与栽培掌叶大黄中蒽醌类成分含量的比较 [J], 李磊;孙平;冯成强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效毛细管电泳法测定吲哚乙酸氧化酶的活力
时， 吲哚 乙酸 氧化酶 的活 力最 高。 关键 词 高效毛 细管 电泳 ； 吲哚 乙酸氧化 酶 ； 山石 斛 霍 中图分类 号 Ｑ ５ 文 献标识 码 Ａ ５４ 文 章编 号 ０ １—６ １２０ ）８ ００５ ０ ５７ ６ １（０ ８０— ３７ —２
Ｓｔ ｙ ｏ ｈｅＤｅ ｅ ｍ ｉ ｔｏ ｆＩ Ａ ｕｄ ｎｔ ｔ ｒ ｎａ ｉｎ ｏ Ａ Ｏｘｉ ｓ ｔｖ ｔ ｙ Ｈｉ ｒ ｏ ｍ ａｎ ｅＣａ ｌ ｒ ｅ ｔｏ ｄａ ｅＡｃｉｉｙｂ ｇｈＰｅ ｆ ｒ ｃ ｐｉｌ ｙＥｌｃｒ ｐｈｏ ｅ ｉ ａ ｒ ｓｓ
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高效毛细管电泳法测定加杨叶芦丁含量的动态变化
高效毛细管电泳法测定加杨叶芦丁含量的动态变化
毛细管电泳法是一种高效的分离和分析技术，已经被广泛应用于药物、化学品、生物制品等领域。
在药物研究中，毛细管电泳法可以用于测定药物中活性成分的含量，如加杨叶芦丁。
本文将介绍如何使用毛细管电泳法测定加杨叶芦丁的含量随时间的动态变化。
一、实验原理
毛细管电泳法是利用毛细管内的高电场力将被分离物在毛细管内进行带电运动的方法。
当一个混合物进入毛细管后，它们将根据它们的电荷、大小、形状等差异，以不同的速度通过毛细管，最终在检测器上完成分离。
加杨叶芦丁是一种黄酮类的活性成分，它具有较强的亲水性，因此可以通过毛细管电泳法进行分离。
二、实验步骤
1、样品制备
将加杨叶芦丁加入适量的甲醇中，制成1mg/mL的浓度溶液。
将该溶液置于磁力搅拌器上，通过超声波处理10分钟。
2、样品分离
将样品注入毛细管，设置分离条件。
例如：毛细管长度为
50cm，内径为75μm，分离电压为30kV，检测波长为210nm。
3、数据分析
根据毛细管电泳仪的数据生成荧光图谱，获取加杨叶芦丁的峰面积。
根据峰面积，推算加杨叶芦丁的含量。
三、实验结果
通过毛细管电泳法可以很好地分离加杨叶芦丁，并且可以对其含量进行准确测定。
例如，将样品进行连续测定多次，就可以得到其含量随时间的变化动态。
这对于研究该药物的动力学过程有重要意义。
四、实验结论
通过使用毛细管电泳法可以准确、高效地测定加杨叶芦丁的含量随时间的变化动态。
这为该药物的研究提供了重要支持，可以帮助科学家更好地理解该药物的动力学过程。
高效毛细管电泳法测定注射用水溶性维生素的含量
高效毛细管电泳法测定注射用水溶性维生素的含量施卉;邱利焱;金一;金龙宇【期刊名称】《中国医疗前沿》【年(卷),期】2007(000)019【摘要】目的采用高效毛细管电泳法(HPCE)的胶束毛细管色谱(MECC)模式分离和测定注射用水溶性维生素的含量.方法未涂层熔融石英毛细管67 cm(有效长度55 cm)×50 μm;运行缓冲液为50 mmol·L-1 SDS-50 mmol·L-1的硼酸钠溶液(pH 8.33);6.89 KPa×10 s压力进样;运行电压15.0 kV;检测波长214 nm;毛细管柱温25℃.结果注射用水溶性维生素中的九种成分分离完全,烟酰氨、维生素B6、D-生物素、核黄素磷酸钠、维生素B12、维生素C、泛酸钠、叶酸、维生素B1的线性范围分别为4.16～520.0 mg·L-1(r=0.999 1),0.40～50.0 mg·L-1(r=0.999 7),0.42-52.0 mg·L-1(r=0.999 3),0.40～50.0 mg·L-1(r=0.998 2),0.39-49.0 mg·L-1(r=0.999 6),8.00～1 000.0 mg·L-1(r=0.992 0),0.83-104.0 mg·L-1(r=0.999 5),0.42～53.0 mg·L-1(r=0.999 0),0.41～51.0 mg·L-1(r=0.999 8),n=5;精密度(RSD)分别为1.75%,1.04%,1.6%,2.84%,1.85%,3.26%,1.58%,2.5%,1.92%(n=5);最低检测质量浓度分别为0.60,0.16,0.24,0.23,0.21,0.45,0.41,0.20,0.18 mg·L-1.结论采用HPCE测定注射用水溶性维生素的方法简便、结果可靠.【总页数】4页(P1501-1504)【作者】施卉;邱利焱;金一;金龙宇【作者单位】浙江大学药学院药剂教研室,杭州,310030;浙江医学高等专科学校药学系,杭州,310053;浙江大学药学院药剂教研室,杭州,310030;浙江大学药学院药剂教研室,杭州,310030;浙江大学药学院药剂教研室,杭州,310030【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.高效毛细管电泳法测定注射用头孢他啶的含量 [J], 郭丹;陈娜娜;杨西晓;陈志良2.高效毛细管电泳法测定注射用头孢拉定的含量 [J], 郭丹;陈娜娜;晏媛;许重远;陈志良3.高效毛细管电泳法测定注射用头孢噻肟钠的含量 [J], 郭丹;陈娜娜;杨芳4.高效毛细管电泳法测定兽用注射用青霉素钾的含量 [J], 孟欢欢;何东旭;陈玎玎;祁克宗5.高效毛细管电泳法测定注射用头孢曲松钠的含量 [J], 郭丹;陈娜娜;陈英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。