输血前免疫血液学检查---疑难配血
输血科疑难交叉配血试验标准操作规程
输血科疑难交叉配血试验标准操作规程1.目的为规范疑难交叉配血试验操作，保证临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。
2.适用范围适用于医疗机构输血科对临床疑难交叉配血受血者，主要是对红细胞ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性及自身免疫性溶血性贫血(AlHA)患者的交叉配血试验。
3.职责医疗机构输血科技术人员负责疑难交叉配血试验。
4.原理本规程中疑难交叉配血是指受血者ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性或受血者是自身免疫性溶血性贫血患者等情况下的交叉配血试验。
配血前需确定受血者的ABO血型或红细胞不规则抗体的特异性,选择ABO血型相容的红细胞或红细胞不规则抗体对应抗原阴性的红细胞进行交叉配血试验。
5.所需设备和试剂普通离心机，血型血清学专用离心机，水浴震荡仪，普通显微镜等。
6.检测环境条件室温应控制在18-27°C,湿度应保持30%-70%°7.步骤与方法7.1交叉配血前受血者ABO血型鉴定不确定者执行《ABO疑难血型鉴定标准操作规程》，确定ABO血型后，再选择ABO血型相同或相容的献血者血液进行交叉配血试验。
7.2红细胞不规则抗体筛选阳性时7.2.1随机与库存血中多袋血液进行交叉配血试验，选择交叉配血相合的血液输注。
7.2.2我院库存血中无相合的血液时，应立即联系临床医生说明情况：①上述实际情况；②应送市血液中心进行“疑难配血”，会产生费用，存在配血不成功的可能：③详细告知家属，决定是否送市血液中心。
7.2.3家属同意后，由医生填写“免疫学申请单”，并抽取血样EDTA抗凝血5-10ml,送输血科。
7.2.4输血科联系血液中心，并送血样。
7.3冷型自身抗体或冷型AIHA患者交叉配血试验：执行7.2.2-7.2.4程序8.交叉配血结果判定主侧、次侧交叉配血均无溶血、无凝集，表示配血相合。
对于AlHA患者，已经排除同种抗体的存在，而所有交叉配血又都不相和时，可选择凝集强度弱于自身凝集的血液输注。
《临床输血学检验技术》2第三章 红细胞血型检测
放散试验
• 通过改变物理条件把结合到红细胞膜上的 抗体解离下来
• 获得红细胞上致敏的抗体（自身抗体）用 于自身吸收
• 获得没有抗体吸附的红细胞，用于血型鉴 定和交叉配血
放散试验
• 试验方法：热放散技术、乙醚放散技术、 磷酸氯喹放散技术、冻融放散技术、柠檬 酸放散技术、氯仿/三氯乙烯放散技术、二 甲苯放散技术
• 灵敏度高，可检出IgM和IgG类抗体
实验方法
• 两步：红细胞去电荷、红细胞复电荷 • 无抗体致敏的红细胞可在试验过程中产生
可逆的非特异性凝集，抗体致敏的红细胞 产生的凝集则不可逆 • 试剂：低离子介质、凝聚胺溶液、重悬液
第五节 抗人球蛋白试验技术
重点提示
• 实验原理 • 实验方法 • 临床应用
适用范围
多用于抗球蛋白试验、ABO血型正/反定 型、交叉配血及其他血型系统抗原检测。 •中性胶 不含抗体，相当于试管的作用 •特异性胶 含特异性抗体，如抗-A、抗-B， 可进行AB抗原检测 •抗球蛋白胶 含抗球蛋白，可进行IgG类抗体 的检测
优点
操作简便、结果准确、灵敏度高、便于 保存、节约标本、标准化、使用安全
临床应用
•鉴定存在于红细胞上的弱抗原，分离、鉴定 混合抗体、鉴定新生儿溶血病和免疫性输血 反应的抗体等 •IgM抗体检测时应使用冷吸收、热放散 •IgG抗体检测时应在37℃吸收、乙醚放散
第八节 凝集抑制试验
重点ห้องสมุดไป่ตู้示
• 凝集抑制试验概念 • 唾液中可溶性ABH血型物质的检测 • P1、I等血型抗原凝集抑制试验
结果判读
• 阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管出 现凝集为阳性，不出现凝集判定为阴性。
• 阳性对照管不凝集或（和）阴性对照管出现凝集， 试验失败。分析原因，重新试验。
输血前检测管理制度
输血前检测管理制度为确保我院患者输血治疗的及时和安全，依据《医疗机构临床用血管理办法》、《临床输血技术规范》和《医院临床输血管理制度》，制定符合我院的输血前检测管理制度。
凡新入院患者，除确定住院期间不输血外，必须提前进行输血前各项相关检查，包括血型（ABO、RhD系统）鉴定、不规则抗体筛查、输血前传染性指标检查及血常规，出血病人根据病情做凝血检查。
1血常规检查结果作为是输血前评估及选择输血成份的客观依据。
2输血前检查血型（ABO、RhD系统）鉴定、不规则抗体筛查的标本和备血标本不能同时抽取（急诊用血除外）。
目的：2.1杜绝各种原因（如抽错标本等）导致的血型差错、提高输血安全性（备血标本血型检测结果与输血前血型检测结果核对及时发现错误）。
2.2保证Rh（D）阴性等稀有血型及时预约（中心血站Rh阴性等稀有血型的血制品库存很少或无）。
2.3不规则抗体筛查阳性时血站或输血科有时间给患者筛选出交叉配血相符的血制剂，留存给该患者使用。
3输血前传染病检查（乙肝五项、丙肝抗体、梅毒抗体、艾滋病抗体），并将结果填写到输血治疗同意书及输血申请单上。
门诊病人每次输血都应进行输血前传染病检查。
急诊用血先留取受血者血样，用血后及时将检查结果记录输血治疗同意书并存入病历。
输血前感染筛查不能以快速检测结果为准。
病人拒绝做检查的，在“输血治疗知情同意书”上亲笔写“拒绝做输血前检查，一切后果自负”并签字，以防日后发生医疗纠纷。
4输血科接收到输血申请单和患者血样本后，进行输血前相容性检测。
检测项目包括ＡＢＯ正反定型、ＲｈＤ定型、交叉配血试验。
交叉配血必须采用能检查不完全抗体的实验方法（凝聚胺法或抗人球蛋白法）。
5每次交叉配血前必须复查患者备血标本和献血者的血型，费用由患者承担。
前后血型结果不一致者，不得使用该备血标本进行交叉配血试验，立即通知相关科室负责人，必须重新抽血标本复查血型，并记录在《输血科复查血型与初检血型不符记录表》。
疑难血型鉴定与疑难配血
患者为新生儿，出生后出现黄疸，需要进行换血治疗。在交叉配血过程中，发现与父母血型不符，常 规血型鉴定无法确定。经过特殊血型抗体检测及基因分型等辅助检测，最终确定该患者为Kidd阴性和 Duffy阴性等稀有血型。
疑难配血的案例
案例一
患者为老年男性，因消化道出血需要输血。在交叉配血过程中，发现与常规交叉配血不符，无法进行输血。经过 进一步检查，发现患者血清中存在抗筛检抗体，导致交叉配血困难。经过特殊处理和配血尝试，最终成功完成输 血。
技术和设备限制
由于技术和设备的限制，一些偏远地区和基层医疗机构可能无法开展疑难血型鉴定和疑难配血工作。这给这些地区的患者带来了很大的困难和挑战。
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Alpern, R.J., & Mollison, J.G. (1977). Prevalence of ABO blood group incompatibility between mother
Li, M., Li, Y., Zhang, Q., et al. (2019). Evaluation of a novel blood group genotyping assay using next-generation sequencing. Translational Medicine, 24(5), 307-314.
法等。
临床考虑
在解决疑难配血问题时，临床医 生需要考虑患者的具体情况，如 病情、失血量、输血需求等，以
决定最合适的输血方案。
疑难配血的应用
交叉配血的应用
交叉配血是确认患者与供体血 液是否相容的重要步骤，对于 疑难配血患者，交叉配血的难 度会增大，但仍需尽可能进行
输血前免疫血液学检查
受血者、献血者ABO、Rh血型鉴定
弱D型血型 定义：作为供血者，弱D型归类为RH阳
性，作为 受血者，弱D型归类为RH阴性。
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不规则抗体的筛查和鉴定
ABO以外的血型抗体 1)发现有临床意义的不规则抗体，在37℃ 中有反应的抗体 2)避免一些可能的情况而造成病情的延误。
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不规则抗体的筛查和鉴定
• 让受血者的血清与已知血型的试剂红细胞 即筛选细胞其反应
• 方法：盐水试验法、白蛋白介质法、低离 子强度介质法（liss)、凝聚胺法 （polybrene)、凝胶法、酶技术、抗球蛋 白试验等
• 抗筛阳性，应做抗体鉴定。
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交叉配合试验
受血者与献血者血液之间是否有想对应的抗原、 抗体存在。
主侧：受血者血清+供血者红细胞 次侧：供血者血浆+受血者红细胞 方法：盐水介质法，凝聚胺法，其他1.患者的病史和标本等检查、核对及处理
2.受血者、献血者ABO、Rh血型鉴定
3.不规则抗体的筛查和鉴定 4.交叉配合试验 5.报告和发血
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患者的病史和标本等检查、核对及处理
1.病史资料和信息 输血史
2.标本要求 1) 防止血样的稀释和溶血 2) 不超过2天，反复输血的受血者抽取新的标本 输血后标本保存于2-8℃，至少一周
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受血者、献血者ABO、Rh血型鉴定
1) A、B抗原的抗原性最强，D抗原次之 2) 2/3的D抗原阴性的人，接受了D抗原阳 性血液后产生抗D抗体
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受血者、献血者ABO、Rh血型鉴定
• ABO血型鉴定 试管法 正、反定型
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受血者、献血者ABO、Rh血型鉴定
RH（D）定型 IgG抗D和 IgM抗D的定型试剂 RH阴性确认 三种不同批号的IgG抗D试剂
临床输血前免疫血液学检查
临床输血前免疫血液学检查————————————————————————————————作者: ————————————————————————————————日期:ﻩ临床输血前免疫血液学检查一、输血前检查的目的和要求输血前检查的目的是选择与患者血型配合的各种血液成分,使之能在患者体内有效地存活,无不良反应,从而达到安全、有效输血的目的。
二、输血前检查的内容输血前检查的内容包括如下几个方面：１.患者的病史和标本等的检查、核对及处理。
2.受血者、献血者AＢO和Rh血型鉴定。
３.不规则抗体的筛选和鉴定。
4.交叉配合试验。
5．血小板输注前的抗体检查和配合试验。
6.交叉配血结果的报告和发血。
(一）受血者的病史和标本等检查、核对及处理1.病史资料和信息受血者的有关资料,包括受血：者姓名、年龄、性别、床号、种族、临床诊断、输血史、药物史、妊娠史,特别是以往输血反应的记录等等,有助于解决有可能出现的血清学问题。
2.标本的要求要求不超过３天的期限,反复输血的受血者更应注意抽取新的标本作配血试验,避免因回忆反应而产生的抗体漏检。
如果患者使用肝素治疗,则应用鱼精蛋白,使标本凝结。
如果患者使用右旋糖酐等治疗，应注意将红细胞作洗涤。
（二）受血者和供血者ＡBO和Rh定型1.ＡＢO定型最适的反应温度为4℃，但在室温反应良好,所以常规的ＡBＯ定型试验仅在室温进行。
(1）定型方法:正、反定型的试管离心方法目前仍被认为是最可信赖的ABO定型方法。
１)定型试剂:有些AＢO血型诊断试剂是以人的血清汇聚而制成的，但必须具备以下条件:第一，高效价(1:128）的ＩgM抗A或抗Ｂ。
第二，具较好的亲和性并不含冷凝集素。
第三,必需具有检测A2，Ａ2B血型的能力。
第四，血清必须通过HIＶ，HＣＶ,HBV等检查或经病毒灭活。
另外一些ABO定型试剂是由来自培养细胞株的单克隆抗体所制成。
2）ＡBO亚型的鉴定:ABＯ亚型的鉴定通常使用下列试剂:抗A、抗B、抗Ａ1、抗Ｈ、抗AIＡ1红细胞、Ａ２红细胞、B型红细胞和O型红细胞。
疑难血型鉴定与疑难配血
型的血液。经过进一步检查，发现患者对常规的血液成敏治疗。
04
疑难血型鉴定与疑难配血的 展望
提高疑难血型鉴定和配血的准确性和效率
开发新型检测系统
利用先进的生物技术，开发高灵敏度和特异性的检测系统，用 于准确鉴定疑难血型。
优化现有检测方法
改进和优化现有的血型检测方法，提高其准确性和可重复性， 减少人为误差。
详细描述采血过程中需要注意的事 项和标本的处理方法。
血型鉴定
介绍在疑难配血中进行血型鉴定的 方法和注意事项。
交叉配血
阐述交叉配血试验的目的、方法和 注意事项，包括盐水介质交叉配血 和非盐水介质交叉配血。
特殊情况处理
介绍在配血过程中遇到特殊情况的 处理方法，如抗体减弱或缺乏、交 叉配血不合等情况。
配血的注意事项
亲子鉴定
03
在亲子鉴定中，血型鉴定也是常用的方法之一，可以辅助判断
亲子关系。
02
疑难配血
配血的基础知识
血型的分类
介绍ABO血型系统和Rh血型系 统的基本概念和分类。
配血的目的
阐述输血前需要进行配血试验 的原因和目的。
配血的基本流程
简要介绍配血试验的基本流程 和注意事项。
疑难配血的方法和步骤
标本采集与处理
案例一
患者为Rh阴性血，但在交叉配血时发现存在抗-D抗体，导致无法进行交叉配血。经过进 一步检测，发现患者存在变异型D抗原，常规的Rh血型检测方法无法识别，需要采用特殊 的检测方法才能确认。
案例二
患者为B型血，但经过血型血清学检测发现存在抗-B抗体，导致无法进行交叉配血。经过 进一步检查，发现患者存在B型亚型（B3或Bx），常规的B型血型检测方法无法识别，需 要采用特殊的检测方法才能确认。
意外抗体的鉴定在疑难配血中的重要作用
意外抗体的鉴定在疑难配血中的重要作用摘要：目的鉴定输血患者血清中的意外抗体，提高交叉配血相合率和临床输血安全性。
方法用盐水介质直接离心法、LISS／Coomba卡、经典抗人球方法对870份抗体筛选阳性的血液样本进行抗体鉴定。
结果488份血清中仅有特异性同种抗体，主要为Rh系统抗体300份（61.5%）。
MNS系统抗体104份（21.3%），其中抗-E抗体占Rh系统抗体的73%；382份血清中仅有自身抗体或同时存在同种抗体。
结论抗体鉴定能提高临床配血的相合率，保障输血及时、安全、有效。
关键词：意外抗体；自身抗体；抗体鉴定；交叉配血一、材料与方法1.样本来源：本组血液样本870份，均为鸡西市各医院送检到我室进行疑难配血且抗体筛选阳性的血液样本。
2.仪器与试剂：筛选细胞、谱细胞、抗人球蛋白试剂（anti—IgG）、抗-C、抗-c、抗-D、抗-E、抗-e、抗-M、抗-N、抗-S、抗-s、抗-Pl、抗-Lea、抗-Leb、抗-Jka、抗-Jkb、抗-Fya、抗-Fyb。
由美国immucor公司提供。
LISS／Coombs 卡由达亚美公司提供；日本久保田KA-2200型离心机、血型配血微量定型系统（Di-aMedID-Incubator37SⅠ，ID-Centifuge12SⅡ）、SB-HW-Ⅳ型电热恒温水温箱（北京市医疗设备厂）。
3.方法：采用盐水介质离心法鉴定患者的IgM抗体，采用LISS/Coombs卡、经典抗人球法检测患者的IgG抗体。
二、结果1.意外抗体分布本组488份血清中仅有同种抗体，382份血清中仅有自身抗体或同时存在同种抗体。
仅有同种抗体的488份样本中，抗体特异性为Rh系统抗体300份，占61.5%；MNS系统抗体104份，占21.3%；Lewis系统抗体30份，占6.15%；Kidd系统抗体18份，占3.69%；Duffy系统抗体6份，占1.23%；P系统抗体4份，占0.82%；Ii系统抗体2份，占0.41%；其他24份标本中含有2个或2个以上系统的抗体占4.92%。
输血前评估内容
输血前评估内容输血前评估是指在进行输血治疗之前，对患者进行全面的评估，以确保输血过程的安全性和有效性。
本文将详细介绍输血前评估的内容和要求。
1. 患者个人信息：首先，需要记录患者的个人信息，包括姓名、年龄、性别、住院号等。
这些信息有助于确认患者的身份，并避免输血错误。
2. 输血适应症评估：接下来，需要评估患者是否符合输血的适应症。
输血适应症包括贫血、失血、凝血功能障碍等情况。
评估患者的临床症状、体征和实验室检查结果，判断是否需要进行输血治疗。
3. 输血风险评估：在进行输血前，需要评估患者的输血风险。
这包括评估患者的过敏史、输血反应史、免疫相关疾病史等。
通过了解患者的过往病史，可以预测患者在输血过程中可能浮现的不良反应，并采取相应的预防措施。
4. 输血血液学检查：在输血前，需要进行一系列的血液学检查，以评估患者的血液状况。
这包括血红蛋白水平、血小板计数、凝血功能等指标的检测。
通过这些检查结果，可以确定患者是否需要输血以及输血的血液成份和量。
5. 输血血型鉴定和配型：输血前需要进行患者的血型鉴定和配型。
这是为了确保输血过程中的血液相容性。
通过检测患者的ABO血型和Rh血型，可以选择合适的血液成份进行输血。
6. 输血前的血制品筛查：在输血前，需要对输血血制品进行筛查，以确保血制品的质量和安全性。
这包括对输血血液的传染性疾病进行筛查，如乙肝病毒、丙肝病毒、艾滋病病毒等。
同时，还需要检查输血血制品的保存条件和有效期限。
7. 输血前的兼容性试验：在确定患者的血型和血制品的血型相符后，还需要进行兼容性试验。
这是为了检测患者的血清中是否存在与输血血液中的抗原相对应的抗体。
通过兼容性试验，可以避免输血过程中发生血型不合的不良反应。
8. 输血前的知情允许：在进行输血前，需要向患者或者其家属充分说明输血的目的、过程、风险和可能的并发症，并取得其知情允许。
这是为了保护患者的权益和安全，确保患者对输血治疗有清晰的认识和理解。
疑难配血三步分析法
疑难配血三步分析法一、主侧配血不能相容的原因主侧配血是患者血清+供者红细胞，主侧配血（抗球蛋白试验、AHG）不相容的原因有：（一）患者血清的原因（1）针对供者红细胞的同种抗体；（2）自身抗体；（3）冷凝集素；（4）血清（浆）蛋白紊乱（A/G倒置、M蛋白等）。
（二）供者红细胞的原因（很少见）（1）全凝集或多凝集；（2）粘附免疫球蛋白或抗体；（三）其它原因如患者血清中含青霉素抗体，供者红细胞致敏了青霉素（这种情况极罕见）。
二、推荐主侧配血（AHG）不相容的三步解决法（一）第一步：排除人为因素/操作失误和供者血液不合格（1）人为因素/操作失误①标本污染，标本取错或加错；②试剂不规范，试剂污染；③操作不规范，或未严格按照试剂说明书操作；④采用AHG试验时的离心力不标准或过大。
（2）供者血液不合格①供者红细胞直接抗球蛋白试验；②供者红细胞+AB型血清试验（排除全凝集或多凝集）。
（二）第二步：参考抗体筛查（抗筛）、直接抗球蛋白试验（直抗）和自身对照试验结果分析主侧配血不相容的原因和对策（表1）表1 主侧配血不相容的原因和对策（三）第三步：试验验证（1）同种抗体①抗体筛查，抗体特异性鉴定。
②选择抗体特异性对应抗原阴性的供者红细胞配血/输血。
（2）自身抗体/AIHA配血试验①自身红细胞吸收除去血清中自身抗体后，做抗体筛查及配血。
②同种红细胞吸收（红细胞经酶处理后可增强吸收效果）除去血清中自身抗体后，做抗体筛查及配血；为了避免自身抗体掩盖的同种抗体被吸收，须选用RhD、C、c、E、e，Fy，JK,MN,P等抗原与患者相同或比患者少的供者红细胞吸收，如果个别抗原患者为阴性而供者为阳性，可以采用化学方法（如ZZAP、2-Me、甘氨酸-HCL/EDTA、二磷酸氯喹等）灭活某些抗原。
③被检血清倍比稀释至自身抗体消失后，做抗体筛查和配血，但此法只适用于同种抗体效价比自身抗体高的标本。
④自身抗体存在，配血总是不相容，单纯自身抗体导致配血不相容不是输血禁忌，但是如果被自身抗体掩盖的同种抗体漏检，则可能发生严重的溶血性输血反应。
免疫血液学红细胞血小板配血试验
静电引力、氢键、疏水键及范德华力
影响红细胞抗原抗体反应的因素
• 离子强度： 反应液中的电解质会增加溶液的介电常
数，减弱抗原抗体间的静电作用。
降低离子强度可以显著增加抗原抗体结合 速率。如:离子强度由0.17M降到0.03M时，抗 D和D阳性红细胞的开始结合速率增加1000倍 。
二、HLA与器官移植 (一)肾移植 (二)骨髓移植
三、HLA与亲子鉴定
二、血小板血型
一类是与其他细胞表面或组织共有的 抗原，称血小板相关抗原
另一类为血小板特异性抗原
血小板血型
相关抗原：主要与红细胞的ABO血型系统以及
人类白细胞抗原(HLA)有关
特异性抗原：由血小板特有的抗原决定簇组成
，表现出血小板独特的遗传多态性，在其他细胞 和组织上不能发现
HLA的研究历史
最早发现人类白细胞抗原者为Dausset-1954年 • HLA不仅仅是白细胞特异性同种抗原。 • 它是分布广泛的组织抗原。
HLA的分型命名
血清学分型命名
• 具有临床意义的HLA基因有A、B、C、DR、DQ、DP等 位点(Loci)，每个位点又有若干等位基因，这些基 因的产物便是HLA抗原。
抗
原
抗
体
静电作用力
离子
聚凝胺技术
（1）低离子聚凝胺交叉配血技术
原理：聚凝胺（Polybrene），一种高价 阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很 多正电荷，可以中和红细胞表面的负电 荷，使红细胞之间距离减少，能引起正 常红细胞可逆性的非特异性凝集。如果 使抗体致敏的红细胞被聚凝胺凝集，则 凝集不可逆。
具有独特的型特异性，并构成血小板膜结构 中的一部分
IgG性质自身抗体导致疑难配血
１ Ｗ ＋ １ ｗ ＋ １ ｗ ＋
与患 者 标本 在 盐 水 介质 、 人 球 介 质 中做 主次 配血 抗
作 者单 位 ： 龙 江 省 大庆 油 田总 医 院 、 齐 哈 尔 医学 院 附属 第 ｛医 院 黑 齐 一
（ 玲） 董
黑 龙 江 省 大庆 市 中心 血 站 （ 小平 ） 凤 邮 编 １ ３ ０ ６０１ 收稿 日期 ２０ —０ —２ ０８ １ ０
２ ７ ９
［３ 王 士 兴 ， 晓 ， 洪 良 ， 肾 上 腺 损 伤 的 Ｃ 诊 断 ｒ ］放 射 学 实 ２ 华 朱 等． Ｔ Ｊ，
践 ，０ ４ １ （ ） ５ ６ ９ ２ ０ ， ９ ８ ： ９ —５ ８
［］ 杨 占斌 ， 曾南 ． ５ 奠 陈坚 ． 上 腺 出 血 的 诊 治 ［ ］ 临 床 泌 尿 外 科 杂 肾 Ｊ．
该 患体 内含有 ＩＧ 性 质 自身 抗体 ， ２中与 随 机 １ ｇ 表 Ｏ 个 供者 交叉配 血在抗 人球 蛋 白介 质 中全部 较 均匀 凝 集 的结 果也 支持 了这种 结论 。经 过 以上试 验 选 取凝
集最 弱的供 者予 以输注 ， 输血效 果较 好 。
１ ２ ３ ４ ５
随 着 医学科 学 技 术 的不 断 发 展 ， 血前 的检 测 输 工作越 来 越 精 密 同 时 也 越 来 越 受 到 社 会 各 界 的 重 视， 而交 叉 配血 试 验 则是 确 保 患 者安 全 输 血 的最 后
一
对 于 自身 免 疫 溶 血性 贫 血 的患 者 ， 尽 量 避 免 应 输 血 。如果必 须输 血时须 排 除患 者血 清 中 同种抗 体
维普资讯
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｑ ｈ ｒＭ ｅ ｉａ ｌ ｇ ． ０ ８， １２ ， ． ｏ ｒ ａ Ｑｉｉａ ｄｅ ｌＣｏｌ ｅ ２ ０ Ｖｏ． ９ Ｎｏ ５ ｏｆ ｅ
疑难血型鉴定疑难配血
ABO正反定型不符病例分析8
患者男性，65岁，因脑瘤住院治疗。
术前申请血型鉴定及备血。
40余年前服役 查血型A型
ABO正反定型不符病例分析8
血清学检查 抗-A 抗-B
4＋ －
Ac Bc Oc － －－
分析：患者血型可能是AB亚型。
ABO正反定型不符病例分析8
进一步试验 试管法 吸收放散试验 唾液中血型物质 血型基因
进一步试验 重复试验（试管法） 吸收放散试验 唾液血型物质 基因检测
输血：A型红细胞+血小板，亚型无抗-A1，选 择输A型血液（AABB）。
建议临床：病情缓解后复查（再次入院治疗） 复发时抗原再次减弱。
ABO正反定型不符病例分析2
患者，女性，32岁，发热、贫血，原因待查收 入院。
ABO正反定型不符病例分析2
聚凝胺方法稀释血清，同时稀释免疫球蛋 白，减少干扰。
柱凝集方法：要先在试管里进行配血， 37℃30min后洗涤，再放入卡中，离心看结果。
谢谢
资料整理
• 仅供参考,用药方面谨遵医嘱
新生儿，出生后24小时内黄疸，诊断新生儿溶 血症。
患儿贫血，高胆红素血症。
临床申请换血。
ABO正反定型不符病例分析7
抗-A 抗-B 抗-A,B 4＋ 2＋ 4＋
分析：患者是新生儿，只做正定型。血 型可能是A型，脐带血中有Wharton胶。
ABO正反定型不符病例分析7
进一步试验 洗涤患儿红细胞，做血型
进一步试验 试管法 洗涤患者红细胞 盐水替代法（洗涤结果）
输血：A型红细胞（试管法配血）、血小板
ABO正反定型不符病例分析5
患者，女性，45岁，诊断急性白血病。O+。 因贫血申请输血。妊娠史、输血史 第一天申请，第三天配血（标本48h）。 输血过程中出现溶血。
输血前免疫血液学检查标准
输血前免疫血液学检查标准随着输血技术的日益成熟和治疗需求的不断增长，输血前的免疫血液学检查已成为血液安全的重要保障。
输血前免疫血液学检查标准的制定可以最大限度地保障受血者的健康和安全，防止出现输血反应等不良事件。
输血前免疫血液学检查主要包括ABO血型、Rh血型、血型抗体筛查、感染标志物检测和异种血清学检测等。
下面就来详细介绍一下这些检查项目的标准。
首先是ABO血型和Rh血型。
这两项检查是最基本、最常规的血液学检查项目。
ABO血型主要是根据血红细胞表面的A、B抗原和血浆中的抗A、抗B抗体来确定的。
Rh血型主要是根据Rh抗原在红细胞表面的表达与否来判断，分为Rh（+）和Rh（-）两种。
这两项检查的标准非常明确，可采用标准血清试剂和试管凝集法进行检测。
在输血前必须进行此类检查，以充分了解患者的血型和Rh因子，从而选择相应的血液制品。
第二是血型抗体筛查。
ABO血型抗体和非ABO血型抗体都可能引起输血反应，应该在输血前进行筛查检测。
夹层凝胶卡片试验和间接抗人球蛋白试验是目前最常用的抗体筛查方法，其优点是灵敏度高、简便、安全。
在实验室工作中，将人血清样品加入抗人球蛋白或人红细胞悬液，如有凝集反应，表明该患者含有相应的非ABO抗体。
筛查方法的选择应考虑临床需求、实验室设备条件和检测费用等综合因素。
第三是感染标志物检测。
输血前免疫血液学检查应该包括细菌、病毒、寄生虫等感染标志物检测。
近年来，随着HIV、乙型肝炎病毒（HBV）和C型肝炎病毒（HCV）等病原体的广泛传播，输血前感染检测显得尤为重要。
其主要检测项目包括HBsAg、Anti-HBc、Anti-HCV、HIV抗体、梅毒螺旋体抗体等。
感染标志物检测是采用免疫学、分子学检测和放射免疫法等技术手段实施的，确保患者的血液没有感染性病原体才可进行输血。
最后是异种血清学检测。
红细胞的表面抗原具有种特异性，当受血者的免疫系统遇到异体红细胞时，就会产生抗体反应，导致输血反应。
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输血前免疫血液学检查---疑难配血血液标本的采集及准备1. 输血申请单：必须含有病人姓名、住院号、床号及负责医师的签名。
还应包含申请日期、用血原因及时间、用血种类及数量；年龄、性别、种族、疾病诊断、输血史、妊娠史、输血反应史、有无不规则抗体及血型等。
2. 受血者血样：①认真核对后，方可采集；②血液标本必须收集到有正确标记的带塞子的试管里，且标明病人姓名、住院号、采集日期及采集者；③血液标本应是不抗凝血，以避免纤维蛋白、抗凝剂成分对血清学试验的干扰；④溶血或混入静脉输注液体而致标本稀释的血液标本不得使用；⑤须用输血前3天以内采集的血液标本；⑥输血后，病人的血液标本须在4℃至少保存7天，以备重复试验。
⑦用右旋糖酐、聚乙酰吡咯酮（PVP）等大分子物质治疗后采集的血标本（如已标记说明应将红细胞洗涤）。
脂肪乳可干扰配血实验结果，在输用脂肪乳之前应抽取血标本备用3. 献血员血样：①从血袋上附着的血样小辫获得献血员血液标本；②在标本收集管上粘贴血袋上有关血液制品号的条形码标签；③准确核对血袋上及标本管上的号码。
血清学试验一、受血者试验（一）血型鉴定1. ABO血型鉴定：⑴常规鉴定：①正定型：用抗－A抗－B试剂检测受血者红细胞。
②反定型：用A和B型试剂红细胞检测血清中的抗体。
人ABO血型是由红细胞的抗原和血浆／血清中的抗体所决定，因此正反定型的结果应该一致。
表1 常规ABO正反定型试验正定型反定型血型抗－A抗－B A BO0++0＋00+A0＋+0B＋＋00AB⑵如果正反定型不一致，则需进一步鉴定。
可在正定型试验中增加抗－A1、抗－AB及抗－H，反定型试验中增加A2、O及自身红细胞。
表2 疑难ABO正反定型试验正定型反定型自身对照抗-A 抗-B抗-AB抗-AA1A2 B O抗-H正定型试验中的抗－AB是用来确认弱A和弱B抗原，抗－A1用于鉴定A亚型，抗－H用于鉴定亚型及孟买型。
反定型试验中的A2细胞是用于鉴定A2亚型。
O细胞用于鉴定是否存在ABO系统以外的同种抗体影响定型，自身对照用于是否存在自身抗体影响定型，如果与O细胞或自身对照为阳性，则定型结果不可靠，必须进一步进行血型鉴定。
⑶如果无法找到正反定型不一致的原因，则只能给病人输注O型红细胞，病人血型可请血液中心血型参比试验室协助鉴定。
⑷ABO定型不一致的原因：Ⅰ、反定型试验出现弱反应或缺失抗体：新生儿；老人；低球蛋白症的白血病人或淋巴瘤病人（恶性）；使用免疫抑制剂而致低球蛋白的病人；先天丙球缺乏的病人；免疫缺陷者；骨髓移植病人；双胞胎嵌合体。
Ⅱ、弱反应或缺失抗原：A亚型、B亚型或AB亚型；白血病导致A或B抗原减弱，何杰金病有时会抑制抗原表达，与白血病类似；某种疾病（如腹腔癌、胰腺癌）导致血浆中存在大量的型物质，中和抗－A 或抗－B抗体，引起正定型为假阴性或弱阳性；洗涤红细胞可解决此问题；获得性B；抗－A或抗－B试剂中存在低频抗原的抗体。
Ⅲ、蛋白或血浆不正常引起的正反定型不符：某些疾病导致球蛋白水平增高引起缗钱状凝集，纤维蛋白原水平的增高也会引起缗钱状凝集，导致假阳性凝集；洗涤红细胞血浆增溶剂（葡聚糖、PVP）也会引起缗钱状凝集。
Ⅳ、其他原因引起的正反定型不符：多凝集：当病人感染细菌或病毒后，病毒或细菌产生的酶使红细胞上掩蔽的T抗原暴露激活，由于正常人血清中都含有抗－T抗体，因此可与正常人血清产生凝集反应，正定型试验假阳性；冷自身抗体引起的自家凝集反应，正反定型均可出现假阳性； DAT及IAT 均阳性。
存在ABO系统的意外抗体，如A2或A2B个体血清中可能存在天然抗－A1，导致反定型试验多出抗体；被检者血清中存在ABO系统以外的同种抗体，反定型时出现假阳性反应；非抗－A及抗－B的抗体与相应抗原形成复合体吸附在红细胞表面，引起正定型非特异性凝集，如抗－B的染料吖啶黄。
2. Rh（D）血型鉴定：⑴Rh(D)抗原检测原则：①对受血者常规一般只测Rh(D)抗原，而对献血员不仅要检查Rh(D)抗原，并在其为阴性的前提下必须进一步确定是否为弱Rh(D)（即D U）。
②Rh(D)阴性及弱D的受血者只能提供Rh(D)阴性血，不得使用D阳性及弱D的血。
即弱D针对受血者而言为D阴性，而对于供血者而言则为D 阳性。
③对直接抗人球蛋白试验阳性的Rh(D)阴性红细胞进行Rh(D)定型时，易引起假阳性反应，因此必须按照试剂生产商的试剂使用说明书要求，增加对照试验。
⑵Rh（D）抗原检测方法：①试管法；②微柱凝胶法。
（二）、不规则抗体的检测和鉴定：1. 血型不规则抗体检测：必须对有输血史、妊娠史或短期内需要接受多次输血者及交叉配血不合者进行抗体筛选试验。
⑴抗体筛选的重要性：有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体，并可以在配血前鉴定此意外抗体，获得充足的时间来选择缺少相应抗原的相配合的血，避免由于寻找不到相合的血液而造成患者病情的延误。
⑵抗体筛选用试剂红细胞：①试剂红细胞必须含有下列抗原：D,C,E,c,e,M,N,S,s,P1,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka,和Jkb②目前已商品化的试剂红细胞有两种，分别为双人份细胞和三人份细胞组。
两组细胞抗原分布图Rh-Hr Kell Duffy Kidd Lewis P MN Lutheran Xg donor D C c E e K k Fya Fyb Jka Jkb Lea Leb P1M N S s Lua Lub XgaⅠR1R1+ + 0 0 ++ ++ 0＋＋0 +0+ + ++ 0 +＋ⅡR2R2+ 0 + + 00 +＋＋＋0+ 0＋+ 0 +++ +0三组细胞抗原分布图Rh-Hr Kell Duffy Kidd Lewis P MN Lutheran Xgdonor D C c E e K k FyaFybJkaJkbLea LebP1MNSs Lua Lub Xga1R1R1+ + 0 0 ++ ++ 00 +0 +＋+++0 0 +02R2R2+ 0 + + 00 ++ ++ ++ 0＋0+0+ 0 ++3rr0 0 + 0 +0 +0 ++ 0+ 0＋+00+ 0 ++③试剂红细胞是保存在保存液中，一旦用生理盐水或Liss液洗涤后则应该在24小时内使用，否则会因污染、抗原丢失导致试验错误。
⑶抗体筛选技术：①技术要求：尽可能多的检测出有临床意义的抗体。
尽可能少的检测出无临床意义的抗体。
尽可能快的完成抗体检测。
②方法选择：每种方法都有自己的特点，适应于不同范围及情况。
立即离心盐水试验技术：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反应活性抗体，但此方法会检查出无临床意义的抗体，如冷凝集素抗－I及抗－IH等。
但漏检IgG性质的抗体。
Liss－间接抗人球技术（Liss-IAT）：此方法可以有效的用于检测不规则抗体(IgG性质)，目前市场上见到的微胶柱方法都是Liss-IAT的方法，如澳斯邦(AusBio)的博唯优(BioVue)、达亚美(DiaMed)的ID-卡，以及Immucol的Capture技术也是Liss-IAT方法。
此方法缺点是无法排除无临床意义抗体的干扰。
酶试验（菠萝酶或木瓜酶）：很少用于输血前检查中的抗体检测，因为酶方法会破坏一些红细胞抗原，如M，N，S，Fya和Fyb, 但酶技术可以增强Rh 及Kell系统的抗体检测。
主要用于MNSs系统的抗体鉴定。
低离子聚凝胺技术（LIP-IAT）：所需试验时间少（3～5分钟）、方法灵敏度高，但由于反应温度为室温，因此无法排除无临床意义抗体的干扰（尤其是室温盐水反应性抗体）。
聚乙二醇-间接抗人球方法（PEG-IAT）:PEG-IAT是很灵敏且有效的检测抗体的方法，可以提高反应的强度，同时此方法可以有效的避免无临床意义抗体的干扰。
⑷自身对照：即使用病人自己的血清和自己红细胞进行抗体检测，有助于确定抗体筛选阳性结果是同种抗体还是自身抗体、或是缗钱引起。
2. 抗体鉴定：在病人血清不规则抗体检查为阳性时，且时间允许的情况下，在交叉配血之前，应该可以进行简单的抗体鉴定试验，确定抗体的特异性，会有助于选择无对应抗原的相合血。
如抗－cE抗体在人群中的相合率为30%。
二、供血者检测从供血中心获得的血液，交叉配血前须进行ABO定型，对于Rh（D）阴性的血液还需确认其非弱Ｄ型，并把检测结果与血袋上的标识相比较，确保一致。
交叉配血一、血液的选择（一）、血型：1、ABO 系统：①全血：必须选择同样血型的全血。
②成分血：选择血型相配的血。
病人血型相合的血浆相合全血相合的红细胞000,A,B,AB0Ａ0，A A,AB AＢ0,B B,AB BＡＢ0,A,B,AB AB AB2、Rh系统:①Rh(D)阳性患者可以选择阳性血及阴性血。
②Rh(D)阴性及弱Ｄ患者只能选择Rh(D)阴性血。
3、其他系统：对于已经明确抗体特异性的病人，则应选择缺乏相应抗原的血液。
（二）、储存时间：一般来说，首先使用较陈旧的血，但以下情况属于例外，需用新鲜血。
1、病人将接受大量的血液（超过自身总血量）。
2、新生儿换血及婴幼儿输血（病人本身血容量小，而用血量又大）。
3、接受定期输血的病人（如地中海贫血病人、肾透析病人、再障病人），使输血间隔时间延长。
（三）、新生儿换血的血液选择：1、Rh(D)新生儿溶血病，选择Rh(D)阴性ABO血型与婴儿和母亲相配合，或O型Rh(D)阴性的洗涤红细胞及AB型血浆，用母血清进行交叉配血。
2、ABO新生儿溶血病，选择ABO血型与婴儿及母亲相配合的且Rh血型与婴儿相同的红细胞及AB型血浆组成的血液使用。
3、其他任何新生儿溶血，选择不含特异性抗体所对应抗原的ABO系统与婴儿相同的血输注。
新生儿溶血病换血用的ABO系统血型相合红细胞选择婴儿血型母血型供血者血型00,A,B0A 0,B0 A,AB A,0B 0,A0 B,AB B,0AB00A A,0B B,0AB AB,A,B,0二、交叉配血：交叉配血有两个重要作用，其一是确认供血者及受血者的ABO血型的相合性，其二是可检测出受血者血清中不规则抗体，此抗体可能在抗体筛选试验中由于筛选试剂红细胞缺乏相应抗原而漏检。
（一）主侧交叉及次侧交叉试验：1、主侧交叉：由病人血清及供血者红细胞组成次侧交叉：由病人红细胞及供血者血清组成（由于我市尚未对供血者进行抗体筛选，因此次侧交叉是非常必要的）。
自身对照：病人自身血清及病人自身红细胞组成，自身对照有助于分析解释交叉配血试验中出现的阳性结果。
2、常规配血技术：选择的技术不仅要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽可能多的不配合的IgG抗体。
最大限度的减少抗体的漏检。
⑴立即离心技术配血法：用于检查ABO的不配合及室温反应活性抗体引起的不配合。
⑵抗人球蛋白配血法：用于检查不规则抗体(IgG)引起的交叉配血不配合，有Liss－抗人球法、PEG－抗人球法、LIP－抗人球法。