输血前免疫血液学检查---疑难配血

输血前免疫血液学检查---疑难配血

血液标本的采集及准备

1. 输血申请单：必须含有病人姓名、住院号、床号及负责医师的签名。还应包含申请日期、用血原因及时间、用血种类及数量；年龄、性别、种族、疾病诊断、输血史、妊娠史、输血反应史、有无不规则抗体及血型等。

2. 受血者血样：

①认真核对后，方可采集；

②血液标本必须收集到有正确标记的带塞子的试管里，且标明病人姓名、住院号、采集日期及采集者；

③血液标本应是不抗凝血，以避免纤维蛋白、抗凝剂成分对血清学试验的干扰；

④溶血或混入静脉输注液体而致标本稀释的血液标本不得使用；

⑤须用输血前3天以内采集的血液标本；

⑥输血后，病人的血液标本须在4℃至少保存7天，以备重复试验。

⑦用右旋糖酐、聚乙酰吡咯酮（PVP）等大分子物质治疗后采集的血标本（如已标记说明应将红细胞洗涤）。脂肪乳可干扰配血实验结果，在输用脂肪乳之前应抽取血标本备用

3. 献血员血样：

①从血袋上附着的血样小辫获得献血员血液标本；

②在标本收集管上粘贴血袋上有关血液制品号的条形码标签；

③准确核对血袋上及标本管上的号码。

血清学试验

一、受血者试验

（一）血型鉴定

1. ABO血型鉴定：

⑴常规鉴定：

①正定型：用抗－A抗－B试剂检测受血者红细胞。

②反定型：用A和B型试剂红细胞检测血清中的抗体。

人ABO血型是由红细胞的抗原和血浆／血清中的抗体所决定，因此正反定型的结果应该一致。

表1 常规ABO正反定型试验

正定型反定型血型

抗－A抗－B A B

O0++0

＋00+A

0＋+0B

＋＋00AB

⑵如果正反定型不一致，则需进一步鉴定。可在正定型试验中增加抗－A1、

抗－AB及抗－H，反定型试验中增加A2、O及自身红细胞。

表2 疑难ABO正反定型试验

正定型反定型自身对照

抗-A 抗-B抗-AB抗-A

A1A2 B O

抗-H

正定型试验中的抗－AB是用来确认弱A和弱B抗原，抗－A1用于鉴定A亚型，抗－H用于鉴定亚型及孟买型。反定型试验中的A2细胞是用于鉴定A2亚型。O细胞用于鉴定是否存在ABO系统以外的同种抗体影响定型，自身对照用于是否存在自身抗体影响定型，如果与O细胞或自身对照为阳性，则定型结果不可靠，必须进一步进行血型鉴定。

⑶如果无法找到正反定型不一致的原因，则只能给病人输注O型红细胞，

病人血型可请血液中心血型参比试验室协助鉴定。

⑷ABO定型不一致的原因：

Ⅰ、反定型试验出现弱反应或缺失抗体：

新生儿；

老人；

低球蛋白症的白血病人或淋巴瘤病人（恶性）；

使用免疫抑制剂而致低球蛋白的病人；

先天丙球缺乏的病人；

免疫缺陷者；

骨髓移植病人；

双胞胎嵌合体。

Ⅱ、弱反应或缺失抗原：

A亚型、B亚型或AB亚型；

白血病导致A或B抗原减弱，何杰金病有时会抑制抗原表达，与白血病类似；

某种疾病（如腹腔癌、胰腺癌）导致血浆中存在大量的型物质，中和抗－A 或抗－B抗体，引起正定型为假阴性或弱阳性；洗涤红细胞可解决此问题；

获得性B；

抗－A或抗－B试剂中存在低频抗原的抗体。

Ⅲ、蛋白或血浆不正常引起的正反定型不符：

某些疾病导致球蛋白水平增高引起缗钱状凝集，纤维蛋白原水平的增高也会引起缗钱状凝集，导致假阳性凝集；洗涤红细胞

血浆增溶剂（葡聚糖、PVP）也会引起缗钱状凝集。

Ⅳ、其他原因引起的正反定型不符：

多凝集：当病人感染细菌或病毒后，病毒或细菌产生的酶使红细胞上掩蔽的T抗原暴露激活，由于正常人血清中都含有抗－T抗体，因此可与正常人血清产生凝集反应，正定型试验假阳性；

冷自身抗体引起的自家凝集反应，正反定型均可出现假阳性； DAT及IAT 均阳性。

存在ABO系统的意外抗体，如A2或A2B个体血清中可能存在天然抗－A1，导致反定型试验多出抗体；

被检者血清中存在ABO系统以外的同种抗体，反定型时出现假阳性反应；

非抗－A及抗－B的抗体与相应抗原形成复合体吸附在红细胞表面，引起正定型非特异性凝集，如抗－B的染料吖啶黄。

2. Rh（D）血型鉴定：

⑴Rh(D)抗原检测原则：

①对受血者常规一般只测Rh(D)抗原，而对献血员不仅要检查Rh(D)抗原，并在其为阴性的前提下必须进一步确定是否为弱Rh(D)（即D U）。

②Rh(D)阴性及弱D的受血者只能提供Rh(D)阴性血，不得使用D阳性及弱D的血。即弱D针对受血者而言为D阴性，而对于供血者而言则为D 阳性。

③对直接抗人球蛋白试验阳性的Rh(D)阴性红细胞进行Rh(D)定型时，易引起假阳性反应，因此必须按照试剂生产商的试剂使用说明书要求，增加对照试验。

⑵Rh（D）抗原检测方法：

①试管法；

②微柱凝胶法。

（二）、不规则抗体的检测和鉴定：

1. 血型不规则抗体检测：必须对有输血史、妊娠史或短期内需要接受多

次输血者及交叉配血不合者进行抗体筛选试验。

⑴抗体筛选的重要性：有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体，并可以

在配血前鉴定此意外抗体，获得充足的时间来选择缺少相应抗原的相配合的血，避免由于寻找不到相合的血液而造成患者病情的延误。

⑵抗体筛选用试剂红细胞：

①试剂红细胞必须含有下列抗原：

D,C,E,c,e,M,N,S,s,P1,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka,和Jkb

②目前已商品化的试剂红细胞有两种，分别为双人份细胞和三人份细胞

组。

两组细胞抗原分布图

Rh-Hr Kell Duffy Kidd Lewis P MN Lutheran Xg donor D C c E e K k Fya Fyb Jka Jkb Lea Leb P1M N S s Lua Lub Xga

ⅠR1R1+ + 0 0 ++ ++ 0＋＋0 +0+ + ++ 0 +＋

ⅡR2R2+ 0 + + 00 +＋＋＋0+ 0＋+ 0 +++ +0

三组细胞抗原分布图

Rh-Hr Kell Duffy Kidd Lewis P MN Lutheran Xg

donor D C c E e K k Fya

Fyb

Jka

Jkb

Lea Leb

P

1

MNSs Lua Lub Xga

1R1R1+ + 0 0 ++ ++ 00 +0 +＋+++0 0 +0

2R2R2+ 0 + + 00 ++ ++ ++ 0＋0+0+ 0 ++

3rr0 0 + 0 +0 +0 ++ 0+ 0＋+00+ 0 ++

③试剂红细胞是保存在保存液中，一旦用生理盐水或Liss液洗涤后则应

该在24小时内使用，否则会因污染、抗原丢失导致试验错误。

⑶抗体筛选技术：

①技术要求：