植物组织中硝态氮的测定植物伤流液中无机磷含量的测定

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植物中硝态氮的测定方法

硝态氮是植物最主要的氮源。

植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况，因此可作为土壤肥氮肥的指标。

测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。

（一）原理在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可直接比色测定。

（二）仪器与用具（1）722型分光光度计1台；（2）电子顶载天平1台（感量1/万）；（3）刻度试管20ml26支；（4）刻度吸管0.1ml. 0.5ml. 5ml. 10ml各1支；（5）容量瓶50ml8个；（6）容量瓶25ml3个；（7）小漏斗（∮5cm）3个；（8）玻棒1根；（9）洗耳球1个；（10）电炉1个；（11）铝锅1个；（12）玻璃塞；（13）定量滤纸7cm。

试剂：500ppmNO3-标准溶液精确称取烘至恒重的KNO3 0.7221克溶于无离水中，定容至200ml。

5%水杨酸一硫酸溶液称取5克水杨酸溶于100ml,浓硫酸中（密度为1. 84），搅拌溶解后，贮于棕色瓶中。

置冰箱保存一周有效。

8%氢氧化纳溶液称取10克氢氧化纳溶于1dm3无离子水中即可。

（三）实验步骤1. 标准曲线的制作（1）吸取500ppmNO3-标准溶液1ml. 2ml. 3ml. 4ml. 6ml. 8ml. 10ml. 12ml分别放入501ml容量瓶中，用无离子定至刻度，使之成10. 20、30、40、60、80、100、120、ppm的系列标准溶液。

（2）吸收上述系列标准溶液0.11ml，分别放入刻度试管中，以0.11ml无离子水代替标准溶液作空白，再分别加入0.4ml水杨酸一硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20分钟后再加入8%NaOH溶液9. 51ml摇匀冷却至室温，显色液总体积为101ml。

（3）以空白作参比，在410nm波长下测定吸光度。

植物中总磷氮测定方法

植物中总磷氮测定方法
植物中总氮磷测定方法主要有两种：化学方法和仪器分析法。

下面将对这两种方法分别进行介绍。

一、化学方法：
1.直接燃烧法：该方法将植物样品直接燃烧至灰烬，然后用酸进行溶解，并利用灭菌水制备比色液进行测定。

该方法适用于不同类型的植物材料，但需要考虑到灼烧过程中磷氮的损失。

2.高压消解法：该方法先将植物样品加入高压容器中，然后用强酸和氧化剂进行消解。

消解后的溶液可以直接进行颜色反应，用于磷氮浓度的测定。

该方法适用于各种类型的植物样品，但消解过程中需要注意温度和压力的控制，以避免溶液中磷氮的丢失。

3.传统湿法：该方法将植物样品先用酸进行提取，然后用沉淀法将磷氮分离，并利用比色反应进行测定。

该方法适用于样品含有较高水分的情况，但提取过程中需要注意酸的浓度和提取时间的控制，以避免对磷氮测定的干扰。

二、仪器分析法：
1.紫外-可见光谱法：该方法利用紫外-可见光谱仪测定样品在特定波长处的吸光度，进而计算磷氮浓度。

该方法可以快速测定大量样品，但需要校准标准曲线和校正系统的波长漂移。

2.气相色谱法：该方法将植物样品进行提取，并利用气相色谱仪测定样品中磷氮的浓度。

该方法适用于样品中磷氮浓度较低的情况，但提取和处理过程中需要注意避免污染和样品损失。

3.液相色谱法：该方法利用液相色谱仪测定样品中磷氮的浓度。

该方
法通过样品的分离和检测来测定磷氮的含量，具有较高的灵敏度和精确度，但需要较长的分析时间和较昂贵的设备。

以上是常用的植物中总磷氮测定方法。

根据实际需求和样品类型的不同，选择合适的测定方法可以提高测定的准确性和效率。

实验12 植物体内硝态氮含量的测定

实验12 植物体内硝态氮含量的测定植物对氮的吸收与利用，对于其生长发育和产量形成具有重要的影响。

氮素如果以亚硝酸盐或硝酸盐的形式被植物吸收，则称为植物体内的硝态氮(N-NO3-)含量。

在植物体内量测硝态氮含量，不仅可以为揭示植物氮素代谢的特点和生理机制提供数据，还可以指导植物耐受性研究和农业生产。

1 实验原理硝态氮是植物生长发育和产量形成的重要因素，在不同发育阶段的植物中，其含量也相应发生变化。

硝态氮含量可采用摄谱光度法和电化学法测定，其中电化学法的准确性更高且应用范围更广。

本实验是利用电化学法，根据硝酸与还原剂还原成亚硝酸或氨态氮时的电离电流大小的差异，测定植物体内的硝态氮含量。

2 实验步骤2.1 样品处理取适量新鲜样品，如茄子、番茄等，去皮、去籽并洗净。

将样品碾磨成泥状，加入特定的醋酸钾(KCH3COO)提取液(醋酸钾10 g/L)，摇匀，封口密封24 h在4℃下提取。

离心后，取上清，用玛瑙瓶收集。

将所需植物红单色隐花苣、矮生豌豆、楸树等的种子按5 g每袋加入15 mL的海绵培养体，在恒温箱中翻转培养6 d至10 d。

2.3 制备电极制备硝酸电极(NH4NO3-SCE单接)和参比电极，使用前需打磨至光亮。

取同样量的植物提取液和硝酸标准溶液，加入还原剂及缘草酸进行反应。

反应完毕后，测量1 min内的电流，计算硝态氮含量。

2.5 数据处理及统计按照硝态氮含量公式计算并汇总数据，进行ANOVA方差分析及t检验。

3 注意事项3.1 样品应尽量新鲜，提取液操作要快，以避免样品中硝态氮被还原。

3.2 试剂应准确、无杂质、无缺损，若出现异常，应立即更换。

3.3 电极应保持干燥、光洁，并调整标定。

3.4 电化学池应密封，避免气泡干扰或溢液现象。

4 结果分析实验结果如下表所示：在统计学分析中，各组数据的p值均小于0.05，表明差异极显著，比较表明楸树叶片硝态氮含量最高，其次是红单色隐花苣和矮生豌豆，而茄子和番茄中硝态氮含量最低。

植物组织中硝态氮含量的测定

植物组织中硝态氮含量的测定目的意义根系吸收的无机态氮，有铵态氮和硝态氯。

植物体内硝态氮合量可以反映土壤氮素供应情况，常作为施肥指标。

叶菜类和根菜类中常含有大量硝酸盐，在烹调和腌制过程中可转化为亚硝酸盐而危害人体健康。

测定植物组织硝态氮含量对研究植物氮素营养和农产品安全性均有重要作用。

一、实验原理本实验采用硝基水杨酸比色法测硝态氮，其原理是在有浓硫酸的条件下NO3-与水杨酸生成硝基水杨酸。

产物硝基水杨酸在碱性条件下(PH>12)呈黄色，在410 nm处有最大吸收峰，在范围内，其颜色的深浅与含量成正比，可直接比色测定。

二、材料、设备和试剂1.材料玉米、接骨木、瓜类、葡萄等植株幼苗。

2.设备电子天平、分光光度计、恒温水浴锅、容量瓶、刻度试管、漏斗、滤纸等。

3.试剂（1）100mg/L硝态氮标准溶液精确称取烘干至恒重的KNO3 0.7221g溶于蒸馏水（无离子水）中，定容至1000ml。

（2）5%水杨酸-硫酸溶液称取5g水杨酸溶于100ml浓硫酸中（密度为1.84），搅拌溶解后，贮存于棕色瓶中，置冰箱保存1周有效。

（3）8%氢氧化钠溶液称取20g氢氧化钠溶于250ml蒸馏水中。

三、操作方法1．标准曲线的制作(1)吸取100 mg/L硝态氯标准溶液1m1、2ml、4m1、6m1、8ml、10ml、12m1分别放入10ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，使之成为10、20、40、60、80、100、120µg /m1硝态氮的系列标准液。

(2)取8支试管，分别编号为0-7，以0号管加入0.1ml蒸馏水作空白，1-7号管分别吸取上述系列标准溶液0.1ml。

再分别加入0.4ml 5％水杨酸—硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20min后，再加入8％NaOH溶液9.5ml，摇勾冷却至室温，以空白作参比，在410nm波长下测定吸光度，以硝态氯含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

见下表。

2．样品制备称新鲜植物组织l-2g研成匀浆，(或称经70℃烘干磨碎过60目即孔径0.25mm筛的干样100mg)装入20m1具塞刻度试管，加无离子水10-20ml，盖紧塞子，置于45℃恒温水浴浸提1h，其间不断摇动，然后过滤或离心(如含色素需脱色)，滤液备用。

植物体内硝态氮含量的测定

原理
在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸。生成的硝基水杨酸在碱性条件下（pH>12）呈黄色，最大吸收峰的波长为量呈正比，可直接比色测定。
材料、仪器与试剂
植物材料：菠菜仪器：分光光度计；天平（感量0.1 mg）；试管；刻度吸量管0.1 ml、0.5 ml、5 ml、10 ml各1支；50 ml容量瓶；小漏斗（ø 5cm）3个；玻棒；洗耳球；水浴锅；封口膜；7 cm 定量滤纸若干；
• 在标准曲线上查得或用回归方程计算出硝态氮的浓度，再用以下公式计算其含量。 V NO3 -N含量= (C× 1000 )/W • 式中 C—标准曲线上查得或回归方程计算得NO3- —N浓度； • V—提取样品液总量； • W—样品鲜重。
注意事项：
1、一定不要将5%水杨酸-硫酸溶液溅到桌面、
实验步骤 1. 标准曲线的制作
（1）吸取500 mg/L 硝态氮的标准溶液1 ml、2 ml、4 ml、6 ml、8 ml、10 ml分别放入50 ml 容量瓶中，用无离子水定容至刻度，使之成10、20、 40、60、80、100mg/L的系列标准溶液。
(2)吸取上述系列标准溶液0.1 ml，分别放入烘干的试管中，以0.1 ml 蒸馏水代替标准溶液作空白。再分别放入0.4 ml 5%水杨酸-硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20 min后，再加入8% NaOH 溶液9.5 ml，摇匀冷却至室温。则显色液总体积为10 ml。 (3)绘制标准曲线：以空白作参比，在410 nm 波长下测定吸光度。以吸光度为横坐标，硝态氮浓度为纵坐标，绘制标准曲线并计算出回归方程。
2.样品中硝酸盐的测定
(1)样品液的制备：取一定量的植物材料，剪碎混匀，用天平精确称取材料2 g 左右，放入试管中，加入10 ml 去离子水，用塑料封口，置于沸水浴中提取30 min。到时间后取出，用自来水冷却，将提取液过滤到25 ml容量瓶中，并反复冲洗残渣，最后定容至刻度。 (2)样品液的测定：吸取样品液0.1 ml放入烘干的试管中，然后加入5%水杨酸-硫酸溶液0.4 ml，混匀后置室温下20 min，再慢慢加入9.5 ml 8% NaOH溶液，待冷却至室温后，以空白作参比，在410 nm 波长下测其吸光度。

植物体内硝态氮含量的测定

植物体内硝态氮含量的测定
测定植物体内硝态氮含量的方法可以通过以下步骤进行：
1. 样品准备：选择一定数量的植物组织或器官作为样品，如根、茎、叶等。

将样品收集并保持新鲜。

2. 样品处理：将样品在离子交换树脂柱中进行前处理，使用硝化态氮还原剂将硝态氮还原为氨。

3. 反应体系：将还原后的样品与含有硫酚酸、过硫酸铵等试剂的反应体系混合，形成可测定的化合物。

4. 反应媒介：选择合适的反应媒介来测定反应产生的化合物，如使用紫外光谱法、分光光度法、电化学法等。

5. 检测与测量：使用相应的仪器或设备进行测量和记录，根据每种方法的特点和原理，选择合适的测量方式。

值得注意的是，硝态氮含量的测定方法可能因不同的植物物种和研究目的而有所差异，因此建议在实施前进行相关的文献调研和方法优化。

植物营养学实验指导（实验二）

植物营养学实验指导（实验二）植物营养学实验指导（实验二）(实验二不同养分水平的溶液培养与植株中养分含量的速测)实验二不同养分水平的溶液培养与植株中养分含量的速测（综合性实验）一．原理绿色植物在整个生活周期中，除了通过叶片的光合作用外，只要满足正常生长发育所需的各种矿质元素和其他条件，植物不一定非在土壤中生长不可。

因此，在用蒸馏水及必需的几种元素配成的溶液中，植物同样可以正常生长发育，这种培养方法称为溶液培养（又称水培）。

由于溶液培养其元素的种类和数量可以控制，因此要了解某种元素的数量对植物生长发育的影响时，可有意识地配制不同水平某种元素的培养液，根据植物的生长发育情况及症状，了解其影响。

收获后，通过测定植株中的养分含量，了解养分在植物体中的累积情况。

二．材料、仪器及药品1、材料准备玉米或白菜幼苗于实验前15天左右砂培育苗。

2、仪器气泵、天平、pH计、分光光度计、火焰光度计10ml刻度吸管、1000ml量筒、培养箱及泡沫板、移液器、棉花、试剂瓶、容量瓶、白瓷板、标准滴唧、比色管3、药品(1)Ca(NO3)2?4H2O, (2)KNO3, (3 )KH2PO4, (4) K2SO4, (5) CaCl2, (6) NaH2PO4, (7) NH4NO3, (8) KCl (9) FeSO4?7H2O, (10) EDTA-Na2, (11) H3BO3, (12) CuSO4?5H2O, (13) MnSO4?4H2O, (14) ZnSO4?7H2O, (15)(NH4)6Mo7O24?4H2O。

（16）MgSO4?7H2O4、试剂（1）浸提剂：称取化学纯氯化钠58.5克放入烧杯中，加入约500毫升蒸馏水溶解，用小量筒准确量取2.1毫升浓盐酸倒入烧杯中，搅匀，移入量筒中，用蒸馏水稀释至1000毫升。

（2）混合标准原液用分析天平准确称取分析纯的下列试剂于小烧杯中：磷酸二氢钾0.2194克，硝酸钾1.806克，硫酸钾3.873克，用少量蒸馏水溶解，然后转移至500毫升容量瓶中，用少量蒸馏水洗烧杯几次，都无损地移入量瓶中，最后用蒸馏水稀至刻度，摇匀，即得含磷100mg?L-1，含硝态氮500mg?L-1，含钾5000mg?L-1的混合标准原液。

植物生理学实验植物组织中硝态氮测定

数据记录与处理
数据记录
在实验过程中，及时、准确地记录每个样品硝态氮的提取量和测定值。
数据处理
根据记录的数据，进行统计分析，计算出每个样品硝态氮的含量，并得出实验结果。
04
结果分析
数据整理与表格制作
总结词
数据整理与表格制作是实验结果分析的基础，需要将实验数据整理成表格，以便进行后续分析。
详细描述
06
参考文献
参考文献
总结词
该文献提供了植物组织中硝态氮测定的基本原理和实验步骤。
详细描述
该文献详细介绍了硝态氮在植物组织中的存在形式、测定硝态氮的意义以及实验操作流程，包括样品采集、处理、测定方法等。该文献还强调了实验过程中的注意事项和误差控制，为实验者提供了重要的参考依据。
总结词
该文献重点介绍了植物组织中硝态氮测定的最新技术和方法。
硝态氮是植物必需的营养元素之一，对于植物的生长和发育具有重要作用。
提高植物抗逆性
硝态氮的适量供应可以提高植物的抗逆性，如抗旱、抗寒等。
硝态氮的测定方法：酚二磺酸法
酚二磺酸法是一种常用的硝态氮测定方法，其原理是利用酚二磺酸与硝态氮反应生成硝基酚，然后通过比色法测定硝基酚的含量，从而计算出硝态氮的含量。
在实验结束后，将实验数据整理成表格，包括实验组和对照组的数据，以及每个样品的测定值。表格应包含实验日期、样品名称、测定值等必要信息，以便后续分析和比较。
结果计算与误差分析
总结词
结果计算与误差分析是实验结果分析的重要环节，需要计算测定结果的平均值、标准差等统计指标，并分析误差来源。
详细描述
根据整理好的数据，计算实验组和对照组的平均值、标准差等统计指标，分析误差来源。误差可能来源于实验操作、仪器误差、样品处理等多个方面，需要根据实际情况进行分析和评估。

植物组织中硝态氮含量的定量测定

植物组织中硝态氮含量的定量测定植物组织中硝态氮含量的定量测定是研究植物生长发育过程中氮代谢调节的关键指标之一。

硝态氮是植物体内氮代谢过程中的重要中间产物，在植物体内具有重要的生理作用，能作为植物施肥效果评估的重要参考指标。

目前植物硝态氮含量的常规检测方法有色谱法、分光光度法、酶联免疫吸附法等。

1. 色谱法色谱法是比较常用的植物硝态氮含量检测方法之一。

该法主要分为气相色谱和高效液相色谱两种。

气相色谱法主要是利用气相柱进行分离，并以热导检测器检测硝态氮的含量。

使用气相色谱方法检测硝态氮含量时，需要样品经过完全的蒸馏和净化，才能避免样品中其它杂质的影响。

高效液相色谱法主要是利用液相柱进行分离，并以紫外检测器检测硝态氮的含量。

该方法比气相色谱法具有更高的准确度和灵敏度。

2. 分光光度法分光光度法是另一种常用的植物硝态氮含量检测方法。

该方法主要利用硝酸还原酶将硝酸盐转化为亚硝酸盐，然后利用还原亚硝酸的反应与二苯胺形成偶氮染料，并通过分光光度法检测其光密度变化来计算硝态氮的含量。

分光光度法比较适用于样品数目较小的试验。

3. 酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法是一种快速、敏感的植物硝态氮含量检测方法。

该方法主要利用硝酸还原酶将硝酸盐转化为亚硝酸盐，并与抗硝酸盐多克隆抗体结合，然后再用辣根过氧化物酶与抗硝酸盐抗体结合，最后通过比色法检测抗体和其结合的亚硝酸盐的含量来计算硝态氮的含量。

综上所述，植物组织中硝态氮含量的定量测定需要根据实验的要求和对象选择不同的检测方法，以便获得准确、可靠的试验结果，为植物生长发育、施肥管理等提供科学依据。

实验植物体内硝态氮含量的测定

实验12 植物体内硝态氮含量的测定植物体内硝态氮含量可以反映土壤氮素供应情况，常作为施肥指标。

另外，蔬菜类作物特别是叶菜和根菜中常含有大量硝酸盐，在烹调和腌制过程中可转化为亚硝酸盐而危害健康。

因此，硝酸盐含量又成为蔬菜及其加工品的重要品质指标。

测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养状况，而且对鉴定蔬菜及其加工品质也有重要的意义。

传统的硝酸盐测定方法是采用适当的还原剂先将硝酸盐还原为亚硝酸盐，再用对氨基苯磺酸与α-萘胺法测定亚硝酸盐含量。

此法由于影响还原的条件不易掌握，难以得出稳定的结果，而水杨酸法则十分稳定可靠，是测定硝酸盐含量的理想选择。

【原理】在浓酸条件下，NO 3―与水杨酸反应，生成硝基水杨酸。

其反应式如下：生成的硝基水杨酸在碱性条件下（pH>12）呈黄色，最大吸收峰的波长为410nm ，在一定范围内，其颜色的深浅与含量成正比，可直接比色测定。

【仪器与用具】分光光度计；天平（感量0.1mg ）；20ml 刻度试管；刻度吸量管0.1ml 、0.5ml 、5ml 、10ml 各1支；50ml 容量瓶；小漏斗（φ5cm ）3个；玻棒；洗耳球；电炉；铝锅；玻璃泡；7cm 定量滤纸若干。

【试剂】500mg/L 硝态氮标准溶液：精确称取烘至恒重的KNO 3 0.7221g 溶于蒸馏水中，定容至200ml 。

5%水杨酸─硫酸溶液：称取5g 水杨酸溶于100ml 比重为1.84的浓硫酸中，搅拌溶解后，贮于棕色瓶中，置冰箱保存一周有效。

8%氢氧化钠溶液：80g 氢氧化钠溶于1L 蒸馏水中即可。

【方法】1．标准曲线的制作（1）吸取500mg/L 硝态氮标准溶液1ml 、2ml 、3ml 、4ml 、6ml 、8ml 、10ml 、12ml 分别放入50ml 容量瓶中，用无离子水定容至刻度，使之成10、20、30、40、60、80、100、120mg/L 的系列标准溶液。

（2）吸取上述系列标准溶液0.1ml ，分别放入刻度试管中，以0.1ml 蒸馏水代替标准溶液作空白。

植物组织中硝态氮的测定植物伤流液中无机磷含量的测定-推荐下载

植物组织中硝态氮的测定【实验目的】伤流是植物根系主动吸水的证明，不同植物或同一种植物在不同季节的伤流强度均不同，伤流强度反应根系生理活动强弱和根系又吸收面积大小。

伤流除含有大量水分外，还含有各种无机盐及根部合成有机物包括植物激素。

硝态氮是植物最主要的氮源。

植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况，因此可作为土壤肥氮肥的指标。

测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。

【原理】硝态氮与硝酸试粉作用，生成粉红色的偶氮化合物，其颜色深浅与硝态氮的浓度成正相关，将样品显示的颜色与标准比色阶进行比较，可快速求得硝态氮的浓度。

硝酸试粉主要是由锌粉、柠檬酸、ɑ-萘胺、对氨基苯磺酸混合而成，硝态氮与硝酸试粉反应如下：NO 3-+H +NO 2-+Zn 2++H 2OSO 3H2+2H SO 3HN +N+2H 2O化化化化化化化化化化化NH 2+NNH 2ɑ-萘胺重氮化合物对-苯磺酸-偶氮-萘胺【实验材料】接骨木伤流液【实验试剂】硝酸试粉、50%醋酸、50mg/L 氮流液【实验步骤】在比色盘的五个孔中加入如表所示溶液：孔号项目123456各管NO 3-浓度(mg/mL)1020305060X 蒸馏水（滴）43210050mg/L 硝态氮液（滴）12345伤流液550%醋酸（滴）111111硝酸试粉（勺）1111115min 后即成5个不同浓度20、40、60、80、100 mg/mL 硝态氮的比色阶。

再用6号孔中加入伤流液5滴及硝酸试粉1勺，搅拌，5min 后，将其所显粉红色与标准比色阶比较确定样品液中硝态氮的浓度。

【实验结果及处理】1.经过比色样品溶液的颜色介于2~3之间。

2.根据结果，伤流液中硝态氮的浓约为(10/5+20/10)/2=2mg/mL 【讨论】1.如若伤流液浓度过高，超过容量范围可先将伤流液稀释一定倍数后在进行滴加。

实验5-植物体内硝态氮含量的测定

取一定量的植物材料剪碎混匀后精确称取2g左右重复三次根叶片叶柄分别放入三支试管中加入10ml无离子水用玻璃塞封口置入沸水浴中提取30min到时间后取出用自来水冷却再将提取液过滤到25ml容量瓶中并反复冲洗残渣定容至刻2样品液的测定
实验 5
植物体内硝态氮含量的测定
一、实验目的
1、学会植物组织中硝态氮含量的测定方法；
5%水杨酸一硫酸溶液称取5克水杨酸溶于100ml,浓硫酸中（密度为1. 84），搅拌溶解后，贮于棕色瓶中，置冰箱保存一周有效。
8%氢氧化纳溶液称取80克氢氧化纳溶于1dm3无离子水中即可。
四、方法步骤
1.标准曲线绘测：（1）吸取500mg/L NO3- 标准溶液1ml、2ml、3ml、4ml、6ml. 8ml、10ml、12ml分别放入50ml容量瓶中，用无离子水定至刻度，使之成10、 20、30、40、60、80、100、120mg/L系列标准溶液。（2）吸收上述系列标准溶液0.1ml，分别放入刻度试管中，以 0.1ml无离子水代替标准溶液作空白，再分别加入0.4ml 5%水杨酸一硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20min后再加入8%NaOH 溶液9.5ml摇匀冷却至室温，显色液总体积为10ml。（3）以空白作参比，在410nm波长下测定吸光度。以NO3- N浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2.组织液NO3-N的提取（1）样品液的制备：取一定量的植物材料剪碎混匀后，精确称取2g左右，重复三次（根，叶片，叶柄），分别放入三支试管中，加入10ml无离子水，用玻璃塞封口，置入沸水浴中提取30min，到时间后取出，用自来水冷却，再将提取液过滤到25ml容量瓶中，并反复冲洗残渣，定容至刻度。（2）样品液的测定：分别吸取样品0.1ml分别于三支试管中，然后加入5%水杨酸一硫酸溶液0.4 ml，混匀后置室温下 20min，再慢慢加入9.5 ml 8%NaOH溶液，待冷却至室温后，以空白作参比，在410nm波长下测其吸光度。在标准曲线上查得或用回归方程计算出NO3- N浓度，再用下公式计算其含量。

植物硝酸盐测定方法

植物体内硝态氮含量的测定一、试剂1．硝氮-N标准溶液500μg氮/mL 精确称取0.7221g烘干至恒质量的KNO3溶于去离子水中，定容至200mL。

2．5%水杨酸-硫酸溶液称取5g水杨酸溶于100mL浓硫酸中（相对密度1.84），搅拌溶解后，贮于棕色瓶中，置冰箱保存一周有效。

3．8%氢氧化钠溶液称取20g氢氧化钠溶于250mL去离子水中。

二、实验步骤1．标准曲线的制作（1）吸取500μg/mL NO3--N标准溶液 1 mL、2mL、4mL、6mL、8mL、10mL、12mL分别放入50 mL容量瓶中，用去离子水定容至刻度，使之成10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL、120μg/mL NO3--N的系列标准溶液。

（2）吸取上述系列标准溶液0.1 mL，分别放入刻度试管中，以0.1 mL去离子水代替标准溶液做空白。

再分别加入0.4 mL 5%水杨酸-硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20min后，再加入8% NaOH溶液9.5 mL，摇匀冷却至室温。

显色液总体积为10 mL。

（3）以空白做参比，在410nm波长下测定吸光度。

以NO3--N浓度做横坐标（x），吸光度为纵坐标（y），绘制标准曲线并计算出回归方程。

2．样品中硝酸盐的测定（1）样品液的制备取一定量的植物材料剪碎混匀。

精确称取2~3g 3份，分别放入3支刻度试管中，加入10 mL去离子水，用玻璃珠封口，置入沸水浴中提取30min后取出，用自来水冷却，将提取液过滤到25 mL容量瓶中，并反复冲洗残渣。

最后定容至刻度。

（2）样品液的测定吸取样品液0.1 mL分别于3支刻度试管中，然后加入5%水杨酸-硫酸溶液0.4 mL，混匀后置室温下20min，再慢慢加入9.5 mL 8% NaOH溶液，待冷却至室温后，以空白做参比，在410nm波长下测其吸光度。

在标准曲线上查得或用回归方程计算出NO3—N 浓度，计算样品中的NO3--N的含量。

植物体内硝态氮含量的测定

二、植物体内硝态氮含量的测定硝态氮是植物最主要的氮源。

植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况，因此可作为土壤肥氮肥的指标。

测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。

（二）仪器与用具（1）722型分子光光度计1台；（2）电子顶载天平1台（感量1/万）；（3）刻度试管20cm326支；（4）刻度吸管0.1cm3. 0.5cm3. 5cm3. 10cm3各1支；（5）容量瓶50cm38个；（6）容量瓶25cm33个；（7）小漏斗（∮5cm）3个；（8）玻棒1根；（9）洗耳球1个；（10）电炉1个；（11）铝锅1个；（12）玻璃塞；（13）定量滤纸7cm。

试剂：500ppmNO3-标准溶液精确称取烘至恒重的KNO3 0.7221克溶于无离水中，定容至200cm3。

5%水杨酸一硫酸溶液称取5克水杨酸溶于100cm3,浓硫酸中（密度为1. 84），搅拌溶解后，贮于棕色瓶中。

置冰箱保存一周有效。

8%氢氧化纳溶液称取10克氢氧化纳溶于1dm3无离子水中即可。

（三）实验步骤1. 标准曲线的制作（1）吸取500ppmNO3-标准溶液1cm3. 2cm3. 3cm3. 4cm3. 6cm3. 8cm3. 10cm3. 12cm3分别放入501cm3容量瓶中，用无离子定至刻度，使之成10. 20、30、40、60、80、100、120、ppm的系列标准溶液。

（2）吸收上述系列标准溶液0.11cm3，分别放入刻度试管中，以0.11cm3无离子水代替标准溶液作空白，再分别加入0.4cm3水杨酸一硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20分钟后再加入8%NaOH 溶液9. 51cm3摇匀冷却至室温，显色液总体积为101cm3。