核酸检验试剂配制方案
核酸提取与纯化试剂配方
核酸提取与纯化试剂配方核酸提取和纯化是分子生物学研究中常用的重要步骤。
核酸提取与纯化试剂包括溶解、提取、纯化和测定等步骤。
下面将详细介绍核酸提取与纯化试剂的配方和使用方法。
1. 细胞裂解缓冲液的配方：- 25mM Tris-HCl pH 8.0- 50mM EDTA- 1% SDS- 100μg/ml RNase A将以上试剂按比例混合制备成细胞裂解缓冲液，用于裂解细胞并保护核酸的完整性。
2. 提取缓冲液的配方：- 0.1M Tris-HCl pH 8.0- 0.14M NaCl- 0.001M EDTA- 1% SDS将以上试剂按比例混合制备成提取缓冲液，用于将细胞裂解液中的核酸与蛋白质分离。
3. 过滤缓冲液的配方：- 5M ammonium acetate- 100% isopropanol将5M乙酸铵与等量的100%异丙醇混合制备成过滤缓冲液，用于将核酸从提取液中沉淀。
4. 洗涤缓冲液的配方：- 70% ethanol将绝对乙醇与等量的去离子水混合制备成洗涤缓冲液，用于洗涤核酸沉淀，去除残留的盐类和蛋白质。
5. 纯化缓冲液的配方：- 10mM Tris-HCl pH 8.0- 1mM EDTA将以上试剂按比例混合制备成纯化缓冲液，用于重溶核酸并去除污染物。
使用步骤如下：1. 将待提取的细胞悬浮在细胞裂解缓冲液中，彻底裂解细胞膜。
2. 加入RNase A，在室温下孵育30分钟，酶解RNA。
3. 加入等体积的提取缓冲液，混合均匀后离心，将上清液转移至新离心管，保留上清液，其中含有DNA。
4. 加入等体积的过滤缓冲液，混合均匀后离心，将上清液抽取并丢弃，沉淀中包含核酸。
5. 加入洗涤缓冲液，混合均匀后离心，将上清液抽取并丢弃，重复一次洗涤步骤，确保去除残留的盐类和蛋白质。
6. 倒掉洗涤缓冲液，将离心管倒置在吸水纸上，待离心管底部的液滴完全干燥，避免残留的洗涤缓冲液影响纯化后的核酸。
7. 加入适量的纯化缓冲液，将沉淀重溶，确保核酸的完整性。
核酸的制备
四：沉淀核酸 1.将rnp部分用滴管吸出上层清液，在低 温下加入1.5~2倍的冷95%乙醇，并轻轻 搅拌。低温放置15min，3000rpm离心 10min，弃去上清液，即得RNA颗粒状沉 淀，待定性。 2.取2支干净试管，一管加入1.5mlDNA溶 液，另一管加入蒸馏水1.5ml，向两管中 加入3ml二苯胺试剂，于沸水中加热 10min，由乳白色变为蓝色为阳性反应。
4.将匀浆置离心机中离心20min（3000rpm）。
二：分离DNP、RNP
1.上层液倾出留待抽提RNA。 2.下层用二倍体积冷的1mol/LNaCl溶液抽提1h，待分离 DNA核蛋白。
三： 沉淀核蛋白 1.上清液：0.14mol/L的NaCl抽提液（内含RNA核蛋 白）加入等体积的氯仿和1/40体积的异戊醇，置带 塞离心管中，振摇30min，此时提取液为乳白色混 悬液，以3000rpm离心15min，离心物呈三层。 2. 沉淀：将抽提1h的1mol/LNaCl匀浆悬液以 3000rpm离心20min，弃去沉淀，将其上清液倒入 带塞的离心管中，加入等体积的氯仿及1/40体积的 异戊醇振摇30min，离心20min。
五：鉴定 1.RNA的呈色反应 取2支干净试管，一管加入1.5ml RNA溶液，另一管 加入蒸馏水1.5ml，向两管中加入3ml地衣酚试剂， 于沸水中加热10min，由黄色变为绿色为阳性反应。 2. DNA的呈色反应 取2支干净试管，一管加入1.5mlDNA溶液，另一管 加入蒸馏水1.5ml，向两管中加入3ml二苯胺试剂， 于沸水中加热10min，由乳白色变为蓝色为阳性反 应。
制作人：王世贵
制备方法：盐溶法
破碎细胞 鉴定
一：破碎细胞 1.将新鲜猪肝用0.14mol/L氯化钠溶液（内含0.01mol/L柠檬 酸）清洗干净。 2.用不锈钢刀片将猪肝切成小块。
核酸提取与纯化试剂配方
核酸提取与纯化试剂配方一、细胞裂解液细胞裂解液是核酸提取与纯化的关键试剂之一，其主要成分包括：1.缓冲液：如Tris-HCl、EDTA等，用于维持溶液的pH值和稳定金属离子。
2.蛋白酶抑制剂：如PMSF等，用于抑制蛋白酶活性，保护核酸不被降解。
3.去垢剂：如SDS等，用于破坏细胞膜和细胞器，使核酸从细胞中释放出来。
二、洗涤液洗涤液主要用于去除杂质和蛋白质，提高核酸的纯度。
其成分主要包括：1.缓冲液：如Tris-HCl、EDTA等，用于维持溶液的pH值和稳定金属离子。
2.无水乙醇：用于去除盐离子和其他有机杂质。
3.去垢剂：如SDS等，用于破坏蛋白质结构，使其易于去除。
三、平衡液平衡液主要用于调节溶液的离子浓度和pH值，以便进行后续的纯化操作。
其成分主要包括：1.缓冲液：如Tris-HCl、EDTA等，用于维持溶液的pH值和稳定金属离子。
2.盐离子：如KCl、NaCl等，用于调节溶液的离子浓度。
四、洗脱液洗脱液主要用于从纯化柱上洗脱核酸，其成分主要包括：1.缓冲液：如Tris-HCl、EDTA等，用于维持溶液的pH值和稳定金属离子。
2.洗脱液添加剂：如甲醇、异丙醇等，用于提高洗脱效率。
五、储存液储存液主要用于储存纯化后的核酸，其成分主要包括：1.缓冲液：如Tris-HCl、EDTA等，用于维持溶液的pH值和稳定金属离子。
2.防腐剂：如叠氮化钠等，用于抑制微生物生长。
3.其他添加剂：如抗坏血酸、抗氧化剂等，用于提高核酸的稳定性和抗氧化能力。
在制备和使用核酸提取与纯化试剂时，需注意以下几点：1.应选择高质量的试剂和原料，以保证试剂的质量和稳定性。
2.应按照规定的操作步骤进行试剂配制和使用，以保证实验结果的准确性和可靠性。
3.应注意试剂的储存和使用期限，避免过期或变质试剂的使用。
转基因植物NOS基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)说明书
转基因植物NOS基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)说明书转基因植物NOS基因核酸检测试剂盒(PCR荧光探针法)说明书试剂盒简介货为了适应新加坡石斑鱼虹彩病毒染料法荧光定量PCR试剂盒快速检测和疫病研究的需要，本公司参照 OIE国际标准中规定的引物序列，经多次实验及系统优化，开发生产了本试剂盒。
应用本试剂盒进行检测具有快速、灵敏、特异、准确、安全操作简单、应用广泛和高通量检测等特点及优点。
试剂盒组成及试剂配制：酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶4.生物su标记抗体稀释液（Biotinantibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRPavidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.生物su标记抗体（Biotinantibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRPavidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10.终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
样本处理及要求：1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于20℃或80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于20℃或80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。
GBS-DNA试剂准备 (2)
GBS-DNA试剂准备标准操作规程
1.目的
规范B族链球菌核酸DNA定性检测的试剂准备操作。
2.范围
GBS-DNA 定性检测实验的PCR 反应液配制。
3.操作人员
PCR室在岗工作人员。
4. 操作步骤
4.1 GBS—DNA试剂准备
4.1.1 试剂复融：从冰箱中取出B族链球菌核酸检测试剂盒，从试剂盒中取出GBS- PCR 反应液、酶混合物、UNG，提取固形物、浓缩清洗液。
GBS - PCR 反应液置于室温复融，复融后把试剂震荡混匀并放于掌式离心机上离心5 秒。
酶混合液不需复融，震荡混匀后放于掌式离心机上离心5 秒，立即放回4 ℃冰箱。
4.1.2 排PCR 管：在PCR 管盒上排列n 个PCR 管（n ＝标本数＋阴性对照＋阳性对照)，并盖上PCR 盒盖。
4.1.3 配液：取出GBS-PCR反应液，将n×44.3μL GBS-PCR反应液，n×0.5μL Taq DNA Polymerase，n×0.2μL UNG加入一个离心管并振荡混匀，瞬时离心后，分装至n个PCR反应管，每管45μL，盖上管盖后转移到样本处理区的传递窗内。
4.1.4 清洗液制备：取出10×浓缩清洗液与灭菌纯化水按1:9进行稀释。
4.1.5 配液结束后立即把PCR 主反应液、酶混合物、UNG置于一20 ℃冰箱，将提取固形物、清洗液及阳性对照、阴性对照、内参照转移到样品处理区的传递窗内。
核酸检测痰液消化液储存液配方
核酸检测痰液消化液储存液配方
成分质量/体积
二硫苏糖醇
氯化钠
氯化磷
磷酸氢二钠
磷酸二氢钾
水
PH值7.4±0.2（25℃）
0.1g 0.78g
0.02g
0.112g
0.02g 7.5ml
5.支气管灌洗液：将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管（约30cm深处），注入5ml生理盐水，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并用采样液冲洗收集器一次，也可用小儿导尿管接在50ml注射器上来替代收集。
6.肺泡灌洗液：局部麻醉后将纤维支气管镜通过口或鼻经过咽部插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其顶端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓加入灭菌生理盐水，每次30~50ml，总量100~250ml，不应超过300ml。
7.粪便标本：取1ml标本处理液，挑取黄豆粒大小的粪便标本加至管中，轻轻吹吸3~5次，室温静置10分钟，以8000rpm离心5分钟，吸取上清液进行检测。
粪便标本处理液可自行配制，配方见表2。
也可使用HANK’S液或其它等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液溶解便标本制备便悬液。
如患者出现腹泻症状，则留取粪便标本3~5ml，轻轻吹打混匀后，以8000rpm离心5分钟，吸取上清液备用。
核酸提取与纯化试剂配方
核酸提取与纯化试剂配方核酸提取与纯化试剂的配方主要包括缓冲液、酶、洗涤剂和溶剂等组分。
缓冲液是核酸提取与纯化试剂的核心组成部分，它提供了适宜的pH和离子浓度，有助于维持核酸的稳定性和纯净性。
常用的缓冲液有Tris-HCl缓冲液、EDTA缓冲液等。
酶是核酸提取与纯化试剂中的重要成分，主要用于消化细胞膜和细胞核膜，释放核酸。
常用的酶有蛋白酶K、RNase A等。
洗涤剂用于去除细胞残渣、蛋白质和其他杂质，保证提取的核酸纯净。
一般常用的洗涤剂有SDS、NaCl等。
溶剂则用于溶解和洗涤核酸，常用的溶剂有乙醇、异丙醇等。
核酸提取与纯化试剂的使用方法如下：1. 准备样品：首先需要准备待提取核酸的样品，可以是细胞、组织或体液等。
样品的获取和保存要遵循一定的规范，以保证提取的核酸质量和纯度。
2. 细胞破碎：将样品加入破碎缓冲液中，使用超声波、机械破碎或冻融等方法破碎细胞，释放核酸。
破碎缓冲液中含有适量的酶，可以帮助破碎细胞膜和细胞核膜。
3. 消化蛋白质：加入蛋白酶K等消化酶，消化样品中的蛋白质，以便更好地分离核酸。
4. 沉淀核酸：加入酒精或其他沉淀剂，使核酸沉淀下来。
离心沉淀后，将上清液倒掉，留下核酸沉淀。
5. 洗涤核酸：用洗涤缓冲液洗涤核酸沉淀，去除杂质和残留的试剂，保证核酸的纯净。
6. 溶解核酸：用适量的溶剂溶解核酸，使其溶解均匀，并保持其稳定性。
7. 储存核酸：将提取纯化的核酸存储在低温下，以保持其稳定性和纯净性，以备后续实验使用。
核酸提取与纯化试剂的配方和使用方法是分子生物学实验中的基础知识，掌握好这些知识对于研究人员的实验顺利进行具有重要意义。
在实验过程中，需要注意各个步骤的操作规范和试剂的质量控制，以确保提取到高质量的核酸样品。
此外，在实际应用中，还可以根据具体的实验需求进行一定的调整和优化，以获得更好的实验结果。
提取与纯化核酸是分子生物学研究中的重要步骤，核酸提取与纯化试剂的配方和使用方法在实验室中得到广泛应用。
核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法
核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法20×SSC20×SSPE Buffer50×Denhardt’s溶液■组份浓度 3.0 M NaCl，0.3 M 柠檬酸钠■配制量 1 L■配制方法 1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
NaCl 175.3 g柠檬酸钠·2H2O 88.2 g2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加14 N HCl，调节pH值至7.0后，加去离子水将溶液定容至1 L。
4. 高温高压灭菌后，室温保存。
■组份浓度 3.0 M NaCl，0.2 M NaH2PO4，0.02 M EDTA■配制量 1 L■配制方法 1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
NaCl 175.3 gNaH2PO4·H2O 27.6 gNa2EDTA·2H2O 7.4 g2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 加NaOH调节pH值至7.4（约6.5 ml的10 N NaOH）。
4. 加去离子水将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
■组份浓度1%（W/V） Ficoll 4001%（W/V） Polyvinylpyrrolidone1%（W/V） BSA■配制量 500 ml■配制方法 1. 称量下列试剂，置于500 ml烧杯中。
Ficoll 400 5 gPolyvinylpyrrolidone 5 gBSA 5 g2. 加去离子水约400 ml，充分搅拌溶解。
3. 加去离子水将溶液定容至500 ml。
4. 用0.45 μm滤器过滤后，分装成每份25 ml。
5. -20℃保存。
0.5 M磷酸盐BufferSalmon DNA (鲑鱼精DNA)DNA变性缓冲液■组份浓度 0.5 M Na2HPO4■配制量 1 L■配制方法 1. 称量134 g Na2HPO4·7H2O置于1 L烧杯中。
新冠病毒核酸检测实验室配套新冠检测配套试剂及耗材技术要求
新冠病毒核酸检测实验室配套新冠检测配套试剂及耗材技术要求1、新冠核酸提取试剂①样品类型：鼻咽拭子、血清、血浆、尿液、脑脊液和其他无细胞体液，细胞培养上清液②样品量：100µl-560µl③规格：能提供1人份/板、8人份/板、16人份/板的核酸提取试剂能满足各种标本量的提取任务，减少试剂无谓的损耗④洗脱体积为50 µl-100 µl⑤无酚/氯仿抽提，健康环保⑥重复性强，产量高，核酸回收率>90%⑦不需添加蛋白酶K、直接接入样本就上机提取⑧生产厂家通过ISO13485生产体系验证和高新技术企业认证2、新冠核酸扩增试剂①检测基因：ORF1ab基因、N基因。
②检测方法：实时荧光定量PCR法。
③产品具有国家药品监督管理局医疗器械注册证明（提供扫描件或影印件）④上机反应时间：75分钟以内⑤荧光通道：3个荧光通道，可在一个管子中同时检测ORF1ab基因、N基因和内标基因（RNaseP），无需分成多管⑥检测操作：预混反应试剂可直接分装，无需混合步骤；也可提供单人份包装，直接加入样本即可上机检测⑦灵敏度（LOD）：≤500 copies/mL，中检院灵敏度检测中可检出S1-S6水平（137copies/mL ）⑧重复性：中检院检测国家精密性参考品Ct值的CV≤0.7%⑨质量控制：含有阴阳性质控品及内标对照，监测样本的核酸提取、PCR扩增等过程中出现的假阴性、假阳性事件。
采用UNG酶-dUTP反应体系，防止气溶胶污染导致的假阳性3、一次性病毒采样管①双拭子：采样拭子型号：A型（口腔），B型（鼻腔）②包装及规格：独立包装，管身≥5ml，保存液≥3ml③每支采样管配单独的标本运输袋4、八连管①医疗级聚丙烯材质制成②可配套投标方案中的PCR仪器上使用5、过滤吸嘴①独立盒装，96支/盒②环氧乙烷灭菌。
核酸提取试剂测试方案
核酸提取试剂测试方案概述核酸提取试剂是分子生物学研究中必不可少的试剂之一，其作用是从样本中提取出纯度高且含量足够的核酸。
本文档旨在介绍核酸提取试剂的测试方案，以确保提取出的核酸质量可靠。
实验材料•核酸提取试剂•核酸样本•离心管•离心机•磁珠测试步骤1.准备样本–将待提取核酸的样本转移到离心管中。
样本可以是细胞、组织或液体等。
–样本的选择和处理应根据实验的具体目的进行。
–注意避免污染和损坏样本。
2.核酸提取试剂的加入–按照核酸提取试剂的说明书中的推荐比例加入试剂。
注意根据样本的量进行比例的调整。
–轻轻颠倒离心管，使试剂均匀地与样本混合。
3.离心–将离心管放入离心机中，以适当的转速离心一段时间。
–离心的目的是使沉淀、悬浮物和溶液分离，并将核酸沉淀到离心管的底部。
4.上磁珠–将磁珠加入离心管中，与样品混合均匀。
–磁珠的作用是富集核酸，并与杂质分离。
5.离心–再次将离心管放入离心机中，以适当的转速离心一段时间。
–离心的目的是将磁珠与离心管壁分离，使核酸留在磁珠上。
6.除去上清–使用磁力架或磁珠分离仪，将离心管放在磁力场中，使磁珠集中到离心管壁。
–轻轻倾斜离心管，将上清液除去。
注意避免将核酸沉淀损坏。
7.洗涤–加入洗涤缓冲液至离心管中，与核酸结合的杂质将与洗涤缓冲液一起被去除。
–离心一段时间，使磁珠与洗涤缓冲液分离。
–除去洗涤缓冲液。
8.重复洗涤步骤–重复步骤7两到三次，以确保核酸的纯度和质量。
9.去除上清和干燥–与步骤6类似，使用磁力架或磁珠分离仪去除洗涤缓冲液。
–最后将离心管在空气中风干数分钟。
10.(可选)重溶–如果需要，可以使用适当的缓冲液将核酸重溶。
11.检测核酸质量–使用核酸分析仪器（如紫外-可见光分光光度计）检测核酸的纯度和浓度。
–可以通过测量吸光度（即260 nm波长处的吸光度）来评估核酸的浓度和纯度。
结论本文档介绍了核酸提取试剂的测试方案，通过按照给定的步骤操作，可以确保从样本中提取到高质量和高纯度的核酸。
核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法
1. 称量下列试剂，置于l L烧杯中。
NaCl
175.3 g
NaH2PO4·H2O
27.6 g
Na2EDTA·2H2O 7.4 g
2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 加NaOH调节pH值至7.4(约6.5 ml的10 N NaOH)。 4. 加去离子水将溶液定容至l L。 5. 高温高压灭菌后，室温保存。 50 X Denhardt’S溶液 1%(W/V) Ficoll 400(菲可400/水溶性 组份浓度
组份浓度
5×
Denhardt‘s
0.5%(W/V)
SDS
100 g/ml
Salmon DNA
50%(V/V)
Formamlde
配制量
配制方法
1. 称量下列试剂，置于200 ml烧杯中。
20×SSC(或SSPE) 30 ml
100 mL
50×Denhardt’s
10 ml
10% SDS
5 ml
10 mg/ml Salmon 1 ml DNA
2. 向烧杯中加入约200 ml的去离子水后，加热搅拌充分溶 解。
3. 加入180 ml的甘油(Glycerol)后，使用2 N NaOH调节pH值 至7.0。
4. 用去离子水定容至500 ml后，室温保存。 10 × Loading Buffer (RNA电泳用) 组份浓度
10 mM
EDTA
50%(V/V)
的OD260值。 7. 计算溶液的DNA浓度后，稀释DNA溶液至10 mg/ml。 8. 煮沸10min后，分装成小份(1 ml/份)。-20℃保存。 9. 使用前在沸水浴中加热5min后，迅速冰浴冷却。 DNA变性缓冲液 组份浓度 1.5 M NaCl，0.5 M NaOH 配制量 1 L 配制方法
新冠病毒核酸检测试剂配制、扩增区工作流程
新冠病毒核酸检测试剂配制、扩增区工作
流程
确认转运箱，转运箱外表75%酒精喷雾消毒。
生物安全柜内打开转运箱（开箱瞬间75%酒精喷雾消毒）。
核对当天新冠病毒核酸检测标本信息并录入电脑、LIS系统。
紫外消毒30分钟。
清理核酸提取人员穿戴防护用品产生的垃圾
护目镜紫外照射30分钟后擦拭干净放回原位
注意收听对讲机通知，协助核酸提取人员工作
核酸提取试剂4℃冰箱复温，按需配制扩增体系完善《核酸检测标本登记表》《核酸检测试剂出入库表》
样本上机检测
待核酸提取人员出来后开启所有房间紫外灯，照射30分钟后关闭。
结果读取、保存、报告审核。
完善《核酸检测标本登记表》及电子表格。
向科主任报告检测结果。
关闭核酸提取室生物安全柜紫外灯、传递窗紫外灯、移动紫外灯。
将转运箱放至5号窗口。
系好双层黄色垃圾袋，交由专业人员高压灭菌并记实签字，依照感染性医疗废弃物处置惩罚。
核酸提取效率验证方案
核酸提取效率验证方案
1、选用试剂盒内带的阳性质控品作为参考品（因其是合成的质
粒，纯度比较高）；
2、准备10只干净的1。
5ml离心管，分别加100ul阴性血清，每
管分别5ul阳性质控品混匀作为待测样本；
3、在上述的10管待测样本中分别加100ul浓缩液，充分混匀后,12
000rpm离心10min，弃上清，留沉淀；
4、10管待测样本沉淀中分别加入20ulDNA提取液充分混匀，100℃
恒温10±1min;
5、12 000rpm离心5min，备用；
6、取24管PCR反应管,第一组10管直接分别加阳性质控品5ul，
第二组10管分别加提取好的核酸5ul,另外加一组(4管）标准品。
7、各反应管瞬时离心，上机；
8、温度条件设置按说明书.
9、提取效率分析：
第一组10管定量值分别计算对数值并计算出算术平均值() 第二组10管定量值分别计算对数值并计算出算术平均值（)
DNA提取效率=
注：RNA提取效率验证同DNA,一组直接加阳性质控品,一组参与提取和逆转录过程。
核酸测定SOP
核酸测定SOP1．目的规定核酸含量测定试验方法，指导检验人员实验操作，保证检验结果的正确性。
2．范围本SOP适用于原液核酸含量测定。
3．定义无4．职责4.1.QC负责本规程的起草、修订、培训及执行。
4.2.QA、QC组长、质量管理部经理负责本规程的审核。
4.3.质量总监负责批准本规程。
4.4.QA负责本规程执行的监督。
5．引用标准《中华人民共和国药典》2020年版三部。
6．材料6.1.仪器设备：紫外-可见分光光度计及光程为1cm的石英比色皿；台式离心机。
6.2.试剂及溶液：12%三氯乙酸溶液：称量12g三氯乙酸，用水溶解并定容至100ml。
7．流程图无8．程序8.1.原理核酸于260nm波长处有较大吸光度值。
蛋白质对其有干扰，用三氯乙酸沉淀去除蛋白质再进行比色。
8.2.供试品测定8.2.1.方法一：量取供试品约3ml，于260nm波长处用光程为1cm的石英比色皿测定其吸光度，水做空白对照。
（适用于A群脑膜炎球菌多糖原液和C群脑膜炎球菌多糖原液）8.2.2.方法二：量取供试品3ml于适宜的尖底离心管中，加等体积的12%三氯乙酸混匀，静置30分钟，以每分钟4000转离心，离心40分钟，取上清液，同时做空白对照，于260nm波长处用光程为1cm的石英比色皿测定其吸光度。
（适用于PPD 原液）8.3.计算按E1cm1%=200计算核酸含量，即核酸含量（㎎/ml）=测得OD值×50×样品稀释倍数/1000核酸含量(mg/g) = 测得OD值×50×样品稀释倍数/1000÷固体总量(g/ml)其中：E1cm1%=200表示当核酸浓度为1%（g/ml），液层厚度为1cm时的吸光度数值为200。
9．EHS无10．派生记录《核酸含量测定记录》11．相关文件《UV-2550分光光度计使用、清洁保养SOP》12．注意事项供试品溶液的吸光度读数，以在0.2～0.8为宜。
PCR实验室化学试剂配制程序
PCR实验室化学试剂配制程序1．目的：保证实验中用到的各种溶液符合实验要求。
2．适用范围：核酸扩增荧光检测实验室常用溶液：4%NaOH溶液、75%酒精、消毒剂（三氯异氰尿酸或二氯异氰尿酸钠）、2%戊二醛溶液等。
3．负责人：操作人：4．程序：4．4 化学试剂的配制：4．4．1 用具：干燥洁净的250ml量桶一只，1000ml量桶一只，1000ml 烧杯一只，三角烧瓶两只，天平一架，100ml塑料试剂瓶、2000ml广口瓶各一只。
4．4．2 配制步骤：4．4．2．1 配制4%NaOH溶液:a）用天平称取4克分析纯的NaOH固体，置于一只三角烧瓶中。
b）用250ml量桶准确取100ml水，缓缓注入盛放NaOH固体的三角烧瓶中。
c）摇荡三角烧瓶使NaOH固体充分溶解。
d）然后缓缓倾倒入100ml塑料试剂瓶中密封保存备用。
4．4．2．2 配制消毒剂:a）一般桌面、器具和地面的消毒只要使有效氯达到500mg/L，即可达到消毒作用。
b）消毒剂为粉状（20克/袋），如配制一升的消毒剂溶液，则取500g，倒入烧杯中，缓缓加入1000ml水充分溶解，备用。
c）如需加大消毒力度，则有效氯浓度加大。
4．4．2．3 配制75%酒精溶液:a）一般常规消毒的75%酒精由医院药剂科提供。
b）RNA提取的75%酒精的配制，试剂盒提供DEPC水，酒精用分析纯的无水酒精，根据当天的标本数量进行配制。
4．4．2．4 配制2%戊二醛溶液:a）准确量取戊二醛原液20ml倒入1000ml烧杯中。
b）量取980ml水，缓缓倒入1000ml烧杯中，混匀，加至2000ml 广口瓶中备用。
注意事项：每份配制好的溶液保质期为14天。
新冠病毒核酸10合1混采检测技术规范
新冠病毒核酸10合1混采检测技术规范
1.实验原理：新冠病毒核酸检测技术（10合1混采）是应用分子生物学技术，通过检测新冠病毒RNA（核酸）的特异性序列，采用双聚体共轭核苷酸（PCR）技术合成特定区域，检测新冠病毒病毒核酸。
2.样品准备：样品可以是各种新冠病毒感染性患者的血清、血浆、咽拭子、痰、尿液等。
3.标本处理：采集的检测样品可以使用其他新冠病毒核酸检测方法进行预处理，然后分装，每个装有2.0-3.0 mL样品，装入一个TUBE容器。
4.核酸提取：将各个TUBE中的样品混合，在2-8℃下迅速提取相应受检病毒的核酸，使用含有酶抑制剂（活性氧类）的核酸提取试剂（注：必要时可使用非活性氧类核酸提取试剂）。
5.PCR反应：将提取得到的核酸按照相关试剂的说明书进行实验，加入相应受检病毒特异性引物、双链合成荧光探针和Taq DNA 聚合酶等，进行PCR反应，反应条件为：95℃ 预反应5min，35 次循环（94℃，30s；
56-60℃，30s；72℃，30s），最后一次循环的温度控制为72℃，持续时间为10min，反应结束。
6.荧光定量：将反应结束后的混合物移液到特定的定量
比色板，在荧光PCR仪上进行定量检测，可以检测出各种新冠病毒核酸的定量浓度。
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核酸检测粪便标本处理液配方
核酸检测粪便标本处理液配方8.肛拭子：用消毒棉拭子轻轻插入肛门3~5cm，再轻轻旋转拔出，立即放入含有3~5ml病毒保存液的15ml外螺旋盖采样管中，弃去尾部，旋紧管盖。
9.血液标本：建议使用含有EDTA抗凝剂的真空采血管采集血液标本5ml，根据所选用核酸提取试剂的类型确定以全血或血浆进行核酸提取。
如需分离血浆，将全血1500~2000rpm离心10分钟，收集上清液于无菌螺口塑料管中。
10.血清标本：用真空负压采血管采集血液标本5ml，室温静置30分钟，1500~2000rpm离心10分钟，收集血清于无菌螺口塑料管中。
11.物体表面标本：参考《农贸（集贸）市场新型冠状病毒环境监测技术规范》（WS/T776—2021）推荐的方法，采样拭子充分浸润病毒保存液后在表面重复涂抹，将拭子放回采样管浸润，取出后再次涂抹采样，重复3次以上。
对表面较大的物体进行多点分布式采样。
12.污水标本：采集污水的水体标本时，参考《污水中新型冠状病毒富集浓缩和核酸检测方法标准》（WS/T799-2022），用无菌聚乙烯瓶采集污水样本，采样体积为300ml。
可根据现场条件和检测需求确定水样采集方式，如瞬时水样（采样点位某一时间随机采集的样本）或混合水样（同一采样点位不同时间所采集的瞬时水样混合后的样本）；如农贸（集贸）市场内排水沟内无法采集足够体积水样，可采集污水的拭子标本，参考《农贸（集贸）市场新型冠状病毒环境监测技术规范》（WS/T776-2021）推荐的方法，用拭子浸入吸附污水，将拭子放回采样管浸润，取出后再次浸入污水，重复3次以上，对每个污水采样位置应进行多点分布式采样。
13.其他材料：如唾液等标本，依据检测需求采集。
（六）标本包装。
标本采集后应在生物安全二级实验室生物安全柜内分装。
1.所有标本应当放在大小适合的带螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的标本采集管里，拧紧。
容器外注明标本编号、种类、姓名及采样日期。
2.将密闭后的标本装入密封袋，每袋限一份标本。
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核酸检验试剂配制方案
核酸检验是一项非常重要的实验室技术，用于检测和分析DNA和RNA的序列和结构。
核酸检验试剂的配制是核酸检验工作中的关键环节，下面是一个700字的核酸检验试剂配制方案。
一、试剂准备
1. Tris-HCl缓冲液：
将121.14g Tris-HCl溶解在800ml去离子水中，调pH至7.5，加去离子水至1L。
2. EDTA溶液：
将186.1g EDTA二钠溶解在800ml去离子水中，加去离子水至1L。
3. NaCl溶液：
将58.44g NaCl溶解在800ml去离子水中，加去离子水至1L。
4. Lyse Buffer溶液：
将10ml Tris-HCl缓冲液、1ml EDTA溶液、8ml NaCl溶液混合，加去离子水至50ml。
5. 2×载脂体缓冲液：
将40ml Tris-HCl缓冲液、8ml EDTA溶液、70ml NaCl溶液混合，加去离子水至200ml。
6. 蛋白酶K溶液：
将1mg的蛋白酶K溶解在1ml去离子水中。
7. 合成引物：
按需要合成引物序列，并与合成公司确认纯度和浓度。
二、试剂配制
1. DNA提取试剂配制：
将1ml Lyse Buffer溶液和10μl蛋白酶K溶液混合，制成DNA 提取试剂。
2. PCR反应液配制：
将50μl 2×载脂体缓冲液、5μl DNA模板、1μl合成引物、3μl MgCl2、1μl dNTP混合，加去离子水至100μl，制成PCR反应液。
3. 电泳缓冲液配制：
将242g Tris和36g boric acid溶解在800ml去离子水中，加去离子水至1L，pH调至8.0，加入20ml 0.5M EDTA混合，最终体积调至1L。
4. DNA标记液配制：
将1μl DNA样品和9μl DNA加载缓冲液混合，制成DNA标记液。
5. 试剂保存温度：
将所有试剂保存在适宜的温度下，避免阳光直射和高温。
三、注意事项
1. 试剂配制时要严格按照实验室的操作规程进行，避免实验污染。
2. 在试剂配制过程中，要注意试剂的稀释和酸碱调节，确保试剂的浓度和pH值符合实验要求。
3. 使用前，要对配制好的试剂进行质量控制和验证，确保试剂的稳定性。
4. 试剂配制后要及时标注，注明试剂名称、配制日期和保存条件。
5. 在使用试剂时，要遵守安全操作规程，戴好实验手套和安全眼镜，避免试剂进入眼睛或溅到皮肤上。
总结：
以上就是一个700字的核酸检验试剂配制方案，该方案包括了常用的核酸检验试剂的配制方法和注意事项。
通过合理配制试剂，可以保证核酸检验的准确性和可靠性，为后续的实验工作提供有力的支持。