小鼠骨髓染色体制备及观察

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小鼠骨髓染色体制备及观察

许多化学毒物具有遗传毒性

基因突变:碱基置换和移码突变。

染色体畸变(structural chromosome aberration):是指由于染色体或染色单体断裂,造成染色体或染色单体缺失或引起各种重排,从而出现染色体结构异常

颜色体数目异常:整倍性和非整倍性改变。

染色体损伤的类型:

☐染色体数目的改变

①非整倍体:亚二倍体或超二倍体。

②整倍性改变:染色体成倍增加。

☐染色体结构的改变

1.断裂和裂隙:

2.微小体;较断片小而呈圆形。

3.有着丝点环:带有着丝点部分,两端形成环状结构并伴有一双无着丝

点断片。

4.无着丝点环:成环状结构。

5.插入/重复

8 非特定性型变化:如粉碎化、着丝点细长化、粘着等

整倍性畸变

非整倍性畸变

如何评价化合物的遗传毒性?

鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验):是最常用的检查基因突变的方法。检测受试物诱发鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型突变株(his-)回复突变成野生型(his+)的能力

☐评价染色体损伤的试验方法包括:

常用啮齿类动物骨髓嗜多染红细胞(PCE) 微核试验 体外培养细胞或者体内染色体畸变试验

2、实验原理

☐有丝分裂:真核细胞的染色质凝集成染色体,复制的姐妹染色单体在纺锤丝的牵拉下分向细胞的两极,从而产生两个染色体数目和遗传性相同的子细胞的一种细胞分裂的类型。

☐细胞周期:从一次有丝分裂完成时开始,到下一次有丝分裂结束时为止,成为一个细胞周期。

G1:从有丝分裂结束到DNA 复制之前;

S: DNA 合成;

G2:DNA 复制结束到有丝分裂开始;

M :有丝分裂期

✓增殖群细胞,细胞始终保持分裂能力,持续进入分裂循环;

✓不再增殖细胞,比如神经细胞;✓暂不增殖细胞,

比如肝脏细胞。

端着丝粒染色体

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