芍药苷提取分离研究报告2
芍药苷的提取过程及原理
芍药苷的提取过程及原理
芍药苷是一种常见的药用成分，它主要存在于中药当中。
下面是芍药苷的提取过程及原理：
提取过程：
1.将干燥的芍药根切成小块，加入适量的乙醇，浸泡24小时。
2.将浸泡好的芍药根加入水中煮沸30分钟。
3.过滤掉芍药根渣，将滤液浓缩至一定浓度。
4.加入适量的醋酸乙酯，进行萃取。
5.去除醋酸乙酯，得到芍药苷。
提取原理：
芍药苷是一种苷类化合物，它主要存在于芍药根当中。
在提取芍药苷时，可以通过以下原理进行提取：
1.乙醇浸泡：乙醇可以提高芍药根中芍药苷的溶解度，从而使芍药苷能够更好地
被提取出来。
2.水煮沸：水可以将芍药根中的其他杂质和有机物去除，从而使芍药苷更加纯净。
3.醋酸乙酯萃取：醋酸乙酯可以提高芍药苷在有机溶剂中的溶解度，从而使芍药苷能够更好地被萃取出来。
4.浓缩：浓缩可以让提取物中的芍药苷浓度更高，从而更容易得到纯净的芍药苷。
标准曲线测定芍药苷含量的实验报告
标准曲线测定芍药苷含量的实验报告实验报告：标准曲线测定芍药苷含量
实验目的：
本实验旨在通过建立标准曲线的方法，准确测定芍药苷在样品中的含量。
实验步骤：
准备工作：
准备所需材料和试剂，包括芍药苷标准品、待测样品、甲醇、色谱纯水等。
预热高效液相色谱仪（HPLC）设备，设置合适的流速和检测波长。
准备标准品溶液：
使用适当的量取芍药苷标准品，并将其溶解于甲醇中，制备一系列浓度递增的标准品溶液，如10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL等。
注意保持标准品溶液的稳定性和准确浓度。
HPLC分析：
将标准品溶液和待测样品溶液注入HPLC系统，设置合适的进样体积和流速。
使用色谱柱分离目标化合物，并设置合适的检测波长进行检测。
记录各标准品溶液和待测样品的峰面积值。
构建标准曲线：
绘制芍药苷标准曲线，横坐标为芍药苷浓度，纵坐标为峰面积值。
使用线性回归分析等方法，根据标准曲线确定芍药苷含量与峰面
积之间的关系。
测定待测样品芍药苷含量：
根据待测样品的HPLC峰面积值，利用标准曲线得出相应的芍药苷含量。
计算出待测样品中芍药苷的浓度或含量。
实验结果：
根据所建立的标准曲线，我们可以准确地测定待测样品中芍药苷的含量。
白芍中芍药总苷类化合物的提取与分离工艺研究
佳。结论： 用 ＡＢ－ ８ 型大孔树脂来分离、富集白芍中芍药总苷工艺可行。
关键词 白芍 芍药苷 提取与分离 ＡＢ－ ８ 大孔树脂 上样 洗脱
中图分类号 Ｒ ２８４．２
文献标识码 Ａ
文章编号 １６７２－ ３９７Ｘ（ ２００６） １２－ ００５５－ ０４
白芍为毛茛科植物芍药 Ｐａｅｏｎｉａ Ｌａｃｔｌｆｌｏｒａ Ｐａｌｌ． 的 干 燥 根 ， 具 有 养 血 敛 阴 、平 抑 肝 阳 之 功效。白芍的主要有效成分为芍 药 苷 、白 芍 苷 、氧 化 芍 药 苷 和 苯
Ｋ３
３．１９
３．２９
３．２２
３．２３
ＳＳｉ
０．３９１４ ０．０５８０７ ０．０１４４７ ０．００４８６７
５６ ２００６ 年第 ２７ 卷第 １２ 期
治法方药
取 Ｄ１０１ 型、ＨＰＤ１００ 型及 ＡＢ－ ８ 型树脂各适量， 以 ９５％乙醇浸泡 ２４ｈ， 蒸 馏 水 洗 净 乙 醇 ， 用 ２ 倍 树 脂体积的 ５％ ＨＣｌ 溶液以 ４～６ 倍 体积／ｈ 的流速通过树脂柱， 并浸 泡 ２～４ｈ， 而后用蒸馏水洗至出水 中 性 ， 再 用 ２ 倍 树 脂 体 积 的 ２％ ＮａＯＨ 溶 液 按 照 ５％ ＨＣｌ 溶 液 处 理法洗至出水中性。 ２．３．１．２ 大 孔 吸 附 树 脂 种 类 的 筛 选 取上述预处理的 ３ 种树脂各适 量（ 相当于 ５ｇ 干树脂） ， 置具塞烧瓶 中， 各加含生药量 ０．５０ｇ／ｍｌ 的 上 样液 ２０ｍｌ， 置 ２５℃恒温摇床 １２ｈ， 取样测定， 以芍药苷为指标， 计算 各树脂对指标性成分的比吸附量
病例 ４．眭某， 男， ４８ 岁。２００４ 年 ２ 月 １２ 日初诊。 患者右上腹疼痛反复发作半年， 发作 １ｄ。半年前 因胆囊结石行胆囊切除术， 术后仍有反复的右上腹 疼痛， 时作时止， 止时如常， 食油腻荤腥易作。今腹痛 阵发性加剧， 大便 ３ｄ 未行。血常规： ＷＢＣ ８．３×１０９／Ｌ， Ｎ ０．８５， Ｌ ０．１５； Ｂ 超、胃镜等检查未见异常。考虑为 术后肠粘连。观其舌红苔黄厚腻， 脉弦滑。此属湿热 燥屎内结， 治以清化湿热， 通腑化瘀止痛。处方： 醋柴胡 １０ｇ， 黄芩 １０ｇ， 枳实 １０ｇ， 厚朴 １０ｇ， 白芍 １０ｇ， 法半夏 １０ｇ， 制香附 １０ｇ， 广郁金 １０ｇ， 川芎 １０ｇ， 生大黄 ６ｇ， 生甘草 ３ｇ。常法煎服。 服药 ２ 剂即大便通畅， 腹痛缓解。本方服用 ７ 剂 后去大黄加桃仁、红花各 １０ｇ， 共服 ２１ 剂。随访半年 未发。 作者简介： 马朝群（ １９６４－ ） ， 男， 副主任医师， 在 读博士研究生， 主要从事普外科疾病的诊治工作。
正交试验法优选白芍中芍药苷的提取工艺研究
收稿日期:2002-12-11; 修订日期:2003-05-07作者简介:吴悟贤(1977-),男(汉族),湖南涟源人,现任北京理工大学新医药开发研究中心主管药师,硕士学位,主要从事天然药物开发研究工作.正交试验法优选白芍中芍药苷的提取工艺研究吴悟贤,李生才,牛之猛(北京理工大学新医药开发研究中心,北京 100081)摘要:目的:以白芍中主要成分芍药苷的含量为指标,优选提取最佳工艺条件。
方法:采用正交试验法进行优选。
结果:以70%的乙醇回流,调节pH 至6～7,上A B-8大孔吸附树脂层析后得到的芍药苷含量均在40%以上。
结论:采用此工艺对芍药苷的提取分离效果较好且操作简单迅速。
关键词:白芍; 芍药苷; 高效液相色谱; 正交试验法中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2003)07-0392-01Study on Optimum Extraction Process for Paeoniflorin in Paeonia lactif lora Pall by Orthog -onal DesignWU W u -x ian ,L I S heng -cai ,N IU Z hi -meng(The Center of N ew M edicine Develop ment and Research ,Beij ing Institute of T echnology ,Beij ing ,100081,China )Abstract :Objective :T o o ptimize the o ptimum ext raction pr ocess for paeo niflorin in Paeonia lactif lor a Pall by using contentof the paeoniflorin as t he index.Methods :T he ex traction process w as o ptim ized by the or thogo nal desig n.Results :T he opti-mum ex tr act ion colophony ,and the content of paeoniflo rin can be up t o 40%.Conclusion :T he separat ed effect of paeoni-flor in is v er y preferable by using this technolo gy ,furthermor e,the manipulatio n is simple and quick.Key words :P aeonia lactif lor a Pall; P aeoniflor in; HPL C; O rthog onal design 白芍为毛茛科植物芍药P aeonia lactif lora Pall 的干燥根。
芍药萃取可行性研究报告
芍药萃取可行性研究报告芍药提取物作为一种天然药物，有很大的药用潜力。
目前，工业上大多利用水、乙醇、乙酸乙酯等溶剂进行芍药提取工艺。
然而，传统的提取方法对环境有一定的影响，而且效率不高，且易受溶剂残留、溶剂回收难等缺点困扰。
因此，研究芍药的新型萃取工艺，对实现芍药的可持续利用和资源高效利用具有重要意义。
本报告针对芍药提取工艺进行了可行性研究，主要包括芍药提取物的化学成分分析、新型萃取工艺的设计、实验验证和经济评价等方面，以期为芍药提取工艺的改进和优化提供参考。
一、芍药提取物的化学成分分析通过文献综述和实验测试，可以得到芍药中主要的有效成分包括芍药苷、黄芍苷、芍药醇、黄酮类等。
这些成分对人体具有抗炎、抗菌、抗氧化等作用，并且对多种疾病具有一定的治疗效果。
因此，芍药提取工艺的优化与设计具有重要意义，可以提高有效成分的提取率，提高产品品质，降低生产成本。
二、新型萃取工艺的设计为了提高芍药提取的效率和减少对环境的影响，可以考虑采用超临界流体萃取技术。
该技术利用超临界流体在临界点以上的特性，具有溶解能力强、选择性好、环境友好等优点，可以实现对芍药有效成分的高效提取。
通过选择合适的超临界流体和工艺参数，可以实现对芍药有效成分的高效提取，提高产品的纯度和品质。
三、实验验证在设计好新型萃取工艺后，需要进行实验验证。
在实验过程中，需要考虑不同的萃取条件（如温度、压力、物料比等），并进行多次试验，以寻找最佳的萃取条件。
同时，还需要对萃取产物进行化学成分分析和质量评价，以确定提取工艺的优劣和可行性。
四、经济评价针对新型萃取工艺，需要进行经济评价。
该评价主要包括投资估算、生产成本分析、产品市场前景分析等内容。
通过经济评价，可以进一步确定新型萃取工艺的可行性，并为工业化生产提供参考。
需要指出的是，本报告只是对芍药萃取工艺进行可行性研究，具体的萃取工艺还需在实际工业生产中进行验证和改进。
希望本报告可以为芍药提取工艺的改进和优化提供一些思路和参考。
白芍中白芍苷提取和纯化工艺的研究
子或其底物L2精氨酸等激活后可产生大量NO[8,9],温肾Ⅰ号提高了模型大鼠的NO含量,可能与其激活MC吞噬功能有关。
本实验表明慢性肾衰肾阳虚证大鼠应用温肾Ⅰ号治疗后,其24h尿蛋白、BUN、Cr、均显著改善,而病理切片也显示,预防组其肾小管内结晶较少,改善了肾脏的病理损害,因此我们认为温肾Ⅰ号可能有减少2.82二羟基腺嘌呤结晶沉积于肾小管中的作用,从而减少腺嘌呤对肾小管、肾小球的损害。
同时调整了下丘脑-垂体-肾上腺皮质、性腺功能的紊乱,并且对雄激素分泌产生一定的调节作用;通过调整大鼠的非特异性免疫功能而改善其腹腔巨噬细胞功能,增强了机体的抵抗力,从而达到预防的效果。
参考文献1 赵 红,董尚朴.慢性肾功能衰竭的中医治疗.河南中医,2002;24(10):795～62 傅晓晴.腺嘌呤制作肾阳虚型慢性肾功能衰竭大鼠模型的电镜病理学研究.福建中医学院学报,2002;12(3):413 王起恩,樊晶光,吴卫东等.温石棉与吸烟对肺泡巨噬细胞产生一氧化氮的影响.中华劳动卫生职业病杂志,1997;15(1):4～6 4 周 蓓等.化浊解毒汤对慢性肾功能衰竭大鼠的实验.2002;19(4):281～35 陈 奇.中药药理研究方法学,北京:人民卫生出版社,1993.10386 晓 阳,刘宝瑛等.复方中草药制剂对雄性大鼠血清睾酮水平的影响.中国实验临床免疫学杂志,1999;11(6):114～87 金小红,王小京等.慢性肾功能不全患者血中内皮素和一氧化氮检测的临床意义.肾脏病与透析肾移植杂志,1996;10(5)358 Plum J,Tabatabaei MM,Lordnejad MR et al.Nitric oxide produc2 tion in peritoneal macrophages from peritoneal dialysis patients with bacterial peritonitis.Perit Dial Int,1999;19(Suppl2):378～839 auermeister K,Burger M,Almanasreh N et al.Distinct regulation of IL28and MCP21by L PS and interferon2gammatreated human peri2 toneal macrophages.Nephrol Dial T rarsplant,1998;13(6):1412～9(收稿日期:2003211228)白芍中白芍苷提取和纯化工艺的研究3杨士友 孙 备 黄世福 吕 凌 田 军(安徽省药物研究所,合肥 230022)摘要 目的 对白芍的提取工艺进行了正交试验研究,并以芍药苷的提取率为指标,筛选出最佳的工艺条件。
煎煮法提取赤芍中芍药苷的研究
３次， ／ ， ２ｈ 次 芍药苷提取率 为 ３ ． ｇ ｇ ５ ４ｍ ／ 。结论 煎煮仍是 常用的 中药提取 方法 ， 该研 究为赤 芍煎煮法提 取提供 参考的优
１９ ， １ １ ） ６ １ ９ ６ ３ （ １ ：５ ．
参考 文献 ：
社 ．９ ０ ６ ３ １７ ：３ ．
５ ４．
［ 陈业高 ， 物化学成分 ［ ． ２］ 植 Ｍ］ 北京 ： 化学工业出版社 ，０４：３ ２０ ３ ． ［ ３］ 薛公达 ， 原思 通． 鸡化 学成 分 的初 步研究 ［ ］ 中国药 学杂 志 ， 樗 Ｊ．
［ ８］ 王
２ ８１
强， 罗集鹏 ． 中药分析 ［ ． Ｍ］ 北京 ： 中国医药科技 出版社 ，０ ５： ２０
煎 煮 法提 取 赤芍 中芍 药 苷 的研 究
陈 赘
（ 华南 理工 大学 化学 与化 工学 院 ， 东 广州 广 ５０４ ） ６０ １
摘要 ： 目的 研究常规煎煮法提取赤芍中芍药苷的２＂ 。方法 采用正交实验设计， ｒＬ ； － 考察乙醇浓度、 提取时间、 提取次数、
Ｌ ＨＺ Ｅ Ｅ ＩＩＥＡ ＤＭ Ｔ ＲＡＭ ＤＣ Ｅ Ｅ Ｒ Ｈ２１ Ｏ ２ Ｏ ３ Ｉ Ｉ ＮＭ ＤＣＮ Ｎ Ａ Ｅ Ｉ Ｅ ＩＡＲ Ｓ Ａ Ｃ ０Ｖ Ｌ．１ ． Ｓ Ｈ ０ Ｎ
时珍 国医国药 ２ １ ０ ０年第 ２ 卷第 ３期 １
以上化学成分 预试验提示 ， 肺筋 草 中含有 黄酮及 其苷类 、 三 ［ 李 国胜 ， ４］ 樊金拴． 巴山冷杉化学成分 的初步研究 ［ ］ 西北林 学院学 Ｊ． 萜皂苷 、 氨基酸 、 原糖 、 质 、 机酸 、 还 鞣 有 油脂 、 香豆 素及 内脂 等化 报 ，０ ５，０ ３ ：４ ． ２０ ２ （ ）１ ２ 学成分 ， 可能含有生物碱和挥发油 。本研究为进一步对肺筋草进 ［ 梁 波 ， ５］ 李宝林 ， 吴振 海 ， 太白蓼挥发油的化学成分 和抗菌实验 等． 行生物活性成分 的确定及提取 、 分离 、 纯化 提供 了研 究基 础。 初步研究［ ］ 药物分析杂志 ，０ ６ ２ １ ） １６ ． Ｊ． ２ ０ ，６（２ ：７ ５
牡丹籽粕中提取芍药苷方法的资料
三、研究内容
牡丹籽粕中芍药苷类成分的分离 纯化和结构鉴定
牡丹籽粕中芍药苷类的含量分析
牡丹籽粕中提取芍药苷的工艺研究
芍药苷提取液的纯化研究
三-1、牡丹籽粕中芍药苷类成分 的分离纯化和结构鉴定
取1 Kg牡丹饼粕过40目筛，用30%乙醇冷浸 提取3次，合并提取液，减压浓缩，再用高 浓度乙醇沉淀，取上清液浓缩回收溶剂， 得到480 mL混悬液。过HPD-200A型大孔吸 附树脂柱，用50%乙醇洗脱。流出液合并后， 各洗脱馏分用半制备型高效液相色谱分离 纯化。
三-3、牡丹籽粕中提取芍药苷 的工艺研究
通过对表2各因素的综合评 价，由表2中极差大小可以 看出，影响提取液芍药苷浓 度的因素主次顺序为B＞C＞ D＞A。随所选水平因素变动， 4种因素的最佳组合为 A3,B3,C2,D3，这与R的大 小排列是一致的，即用10倍 于原料的70 %乙醇溶液在 50℃的超声处理30 min，芍 药苷提取量最高。
三-4、芍药苷提取液的纯化研究
95%乙醇处理后树脂（HPD200A，HPD10 0， D-101，D-101A，AB-8）做吸附 解吸附纯化研究实验，通过静态动力 吸附曲线、动态吸附试验筛选树脂， 并在此基础上考察上样液浓度对吸附 效果的影响和乙醇浓度对洗脱效果的 影响
三-4、芍药苷提取液的纯化研究
三-1、牡丹籽粕中芍药苷类成分 的分离纯化和结构鉴定 各洗脱馏分用半制备型高效液相色谱分离 纯化，分别得到主要的化学成分，包括化 合物1（380 mg）、2（700 mg）、3（100 mg）、4（400 mg）、5（320 mg）和6（14 0 mg）。
图1 饼粕提取物的LC-MS色谱图
三-1、牡丹籽粕中芍药苷类成分 的分离纯化和结构鉴定 • 对提取物进行LC-MS分析，经质谱碎片分析 得出：化合物1和3为同分异构体，相对分 子质量为642，2和4为同分异构体，相对分 子质量为480。 • 对6种化合物进行H-NMR分析（谱图见附 表），结合文献初步确定了这6种化合物的 化学结构，它们分别是：化合物1： 6′-O -D葡萄糖芍药内酯苷；2：芍药内酯苷； 3： β -gentiobiosylpaeoniflorin；4： 芍药苷；5： 苯甲酸；6：芍药苷元。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
【前言】芍药苷主要来源于毛茛科植物芍药根,牡丹根,紫牡丹根。
关于芍药的使用，我国很早就有书面记载，始载于《神农本草经》，“主邪气腹痛，除血痹，破坚积，寒热疝瘕，止痛利小便，意气”。
我国明间用于治疗胸腹腰肋疼痛，自汗盗汗，阴虚发热，月经不调，崩漏带下。
现代研究表明其主要有效部位为芍药总苷，赤芍提取物含芍药甙(Paeoniflorin)、芍药内酯甙(Albiflorin)、氧化芍药甙(Oxypaeo- niflorin)、苯甲酰芍药甙(Benzoylpaeoniflorin)、芍药吉酮(Paeoniflorigenone)、芍药新甙(Lactiflor- in)、胡萝卜甙（Daucosterol），赤芍精（d-儿茶精，d-Catechin）及没食子鞣质（Gallotannin），苯甲酸（Benzoic acid），挥发油、脂肪油、树脂、糖、淀粉、黏液质、蛋白质等，主要成分为芍药苷，其具有镇静、解痉、抗炎、抗应激性溃疡病、扩张冠脉血管、对抗急性心肌缺血以及抑制血小板凝聚等多方面的作用，而且毒性小。
临床上已试用于治疗冠心病，老年性疾病，增强体质与免疫功能、抗炎止咳、祛痰平喘等方面，尤其是老年慢性呼吸道疾病的治疗中可作辅助药物。
【理化性质】芍药苷（Paeoniflorin）又名芍药甙，化学名为：β-D-Glucopyranoside,5,6-[(benzoyloxy)methyl ].tdtrahydro-5-hydroxy-2-m ethyl-2,5-methano-1H-3,4-dioxacyclobuta[cd]petalen-1a(2H)-yl,[laR-(1a α,2β,3aα,5a,5aα,5bα)]- 分子式C23H28O11 ,分子量480.45，熔点196℃。
本品为吸湿性无定形粉末，四醋酸酯为无色针状结晶，属蒎烷单萜苷，极性较大。
药典记载，芍药苷遇香草醛会显现蓝紫色。
本次试验的意义在于通过改进分离工艺来提高芍药苷的分离效果，以便应用于工业化大生产。
【仪器试剂】材料：赤芍干燥根切片 500g。
（由实验室提供）有关芍药苷的提取常用水提、醇提以及超声三种方法。
由于水提率不如醇提，而超声又会影响芍药苷结构的稳定性，所以采用醇提。
分离采用活性炭吸附及硅胶柱层析。
具体操作流程如下：【流程图】：1h/次，合并提取液℃)滤液醇水溶液活性炭℃）乙醇溶液（回收）浸膏硅胶柱层析（干法）纯乙酸乙酯洗脱洗脱液减压浓缩至干芍药苷【具体操作】醇水溶液回流提取赤芍干燥根切片500g，用粉碎机粉碎成细粉。
取250g加入2000mL圆底烧瓶中，分别以8倍、6倍、4倍量70%乙醇提取3次，每次提取 1h。
每提取一次便浓缩一次，回收乙醇便可循环利用，合并3次的浓缩液。
另一半药材以同样的方式处理，合并所有的浓缩液。
活性炭吸附分离取部分浓缩液稀释，加入活性炭吸附，过滤，将滤液和原液进行硅胶薄层点样，喷以显色剂，观察活性炭是否能将芍药苷吸附住，TLC鉴别如下：展开剂——氯仿：乙酸乙酯：甲醇：甲酸 40：5：10：0.2（药典）。
显色剂——香草醛：甲醇：硫酸 5：80：15。
配置方法：取0.1g香草醛，以10mL浓盐酸溶解，取其2.5mL溶液于显色喷瓶中，加甲醇40mL，再加浓硫酸7.5mL，摇匀即得。
药典记载，芍药苷遇香草醛会显现蓝紫色斑点。
右边为吸附后滤液点样点，左边为吸附前样液样点。
箭头所指为蓝紫色斑点。
由TLC鉴别可知，芍药苷可以被活性炭吸附。
取9份2mL浓缩液，都稀释到10mL，加入等量的活性炭3g,分别以10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%乙醇溶液洗脱，经TLC检测，40%及以上浓度的乙醇都能将芍药苷洗脱，而之前的都不能洗脱，部分点样如下:从右至左分别为20%、30%、40%、50%乙醇溶液的洗脱液点样点。
从上至下分别为蓝紫色斑点、浅黄色斑点、点样点。
由图可以判断芍药苷不能被30%及更低浓度的乙醇洗脱下来，但40%及以上浓度的乙醇都可以洗脱。
将所有浓缩液与以上检测液合并，加1500mL蒸馏水稀释，加入350g经105℃活化1h的活性炭吸附。
搅拌，0.5h后过滤。
滤液TLC检测没有发现蓝紫色斑点，说明芍药苷完全被活性炭所吸附。
滤出的活性炭先以自来水洗至无色，再用80%乙醇溶液进行洗脱，直到洗脱液经TLC检测没有蓝紫色斑点为止，说明被吸附的芍药苷都被洗脱下来。
将各次的洗脱液旋转蒸发浓缩，温度应小于60℃。
洗脱剂的选择在进行硅胶柱层析之前应先选择合适的洗脱剂才能得到较纯的分离物，提高分离效率及节约成本。
取3mL浓缩液稀释至10mL作点样液。
展开剂—氯仿：甲醇 8：1①、②、③、分别为蓝紫色斑点、浅黄色斑点、点样点。
可见芍药苷与另一种物质的R f太接近，难以分离。
①②③展开剂—氯仿：甲醇 8：2最右端为浓缩液，其余皆为稀释液。
①、②、③、④、⑤依次为浅红、蓝紫、棕黄、浅黄、点样点。
①②③④⑤①展开剂—氯仿：甲醇 8：3①为蓝紫色斑点，但出现严重拖尾现象，作为洗脱剂是不可取的。
展开剂—纯乙酸乙酯最右端为浓缩液，其余皆为稀释液。
①①、②、③分别为浅红、蓝紫色、点样斑点，与氯仿--甲醇 8：2的展开系统相比，既使芍药苷与极性更大的物质如多糖等分开又与极性小的物质如跑在前面的红色斑点分开，所以选择纯乙酸②乙酯作为上柱洗脱剂比较合理。
③硅胶柱层析分离采用干法上柱。
取110g旧硅胶G和200g新硅胶G于烘箱中105℃活化1.5h。
用蒸发皿将浓缩液浓缩成浸膏，以适量98%乙醇溶解，与活化好的旧硅胶拌样，自然风干，再放到烘箱中80℃干燥2h。
取8×100cm层析柱，检测不漏水，塞上脱脂棉，松紧适宜。
先以新硅胶装柱，以吸耳球敲实整平，垫一张滤纸，再装干燥好的拌样旧硅胶，敲实整平，再垫一张滤纸。
以玻璃棒引流加入纯乙酸乙酯，打开活塞，开到最大，使乙酸乙酯排尽柱中的空气，当有液滴流出时，旋转活塞调节流速2ml/min左右。
用50mL三角瓶接取流份，30mL/份，TLC检测，用药典展开剂氯仿：乙酸乙酯：甲醇：甲酸 40：5：10：0.2。
合并显色斑点相同的流份旋转蒸发浓缩。
从第55流份开始，只有红色斑点，253nm荧光灯下观察无点；从第73流份，开始出现蓝紫色斑点，而80到90（第90流份借了200mL）流份没有任何斑点；从第91到183流份只有蓝紫色斑点，253nm荧光灯下观察无点，接收流份增至50mL/份；之后到186流份没有斑点，卸柱。
将91至183流份分步旋转蒸发浓缩，将浓缩液收集与500mL输液瓶中。
在收集过程中有白色粉末析出，部分粉末结块于瓶底，加热只有部分能溶解。
加少量甲醇完全溶解，过滤，转置50mL锥形瓶中自然结晶，不成，冷冻干燥得干粉，称重3.1g。
【鉴定】· TLC鉴定显蓝紫色斑点展开剂--氯仿：乙酸乙酯：甲醇：甲酸40：5：10：0.2（药典）。
显色剂—香草醛：甲醇：硫酸 5：80：15。
·紫外检测再230nm处有最大吸收峰，为芍药苷特征吸收峰。
·高效液相测定供试液制备精密称定芍药总苷24mg，置经洗净的10mL容量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，摇匀，密塞，即得。
色谱条件S_G el C18 ,5um色谱柱；流动相：甲醇—水（35：65）；柱温：室温；流速：1mL/min；检测波长230nm；进样量为20uL；tR=5.65±0.25min。
对峰面积进行计算，其中230nm处主峰所占比例为87.37%，即芍药苷含量为87.37%。
【结果】经46天试验得到淡黄色芍药总苷冷冻干燥粉3.1g，经高效液相测定芍药苷含量为87.37%。
【讨论】●药材提取浓缩液出现沉淀问题醇提水沉，赤芍粉末经醇提过滤浓缩，静置一夜后，棕色浓缩液中出现了褐色的沉淀，轻摇即散，没有将其过滤出来进行检测。
●活性炭吸附洗脱问题采用活性炭吸附时，一定要在水溶液中进行，在醇溶液中是不能吸附或吸附效果极差的。
但实际操作中，没有将醇提液浓缩成浸膏再以水溶解，而只是将其浓缩至闻之没有乙醇的气味便加入了活性炭，能完全吸附含侥幸成分。
洗脱时，一定要先用水洗至无色，洗掉色素及其他杂质，再用30%的乙醇洗掉部分杂质。
但实际操作中，没有以水洗至完全无色，而且只用30%乙醇洗了一遍，以致残留了许多杂质。
●上柱后各接收流份处理及不能结晶问题上柱后各物质相对被分开，极性小的物质最先被洗脱下来，出现杂质种类多含量少的现象，而且这些杂质在253nm荧光下都有斑点。
但从第55流份到72流份只有红色斑点的物质，253nm荧光灯下观察无点，将其单独收集。
但在最后的浓缩处理过程中，不颠将其掉入水浴锅。
虽然进行了抢救，将水浴锅中的水引出，糖瓷盘中蒸发干，以甲醇溶解过滤，点样，红色斑点依旧在，但已不明显，放置一段时间后，容器壁上有水垢状物质结出，溶液点样已基本看不到红点，弃去。
91到183流份只有蓝紫色斑点，253nm荧光灯下观察无点，应为芍药苷，将其单独收集，每500mL洗脱液浓缩一次，乙酸乙酯循环利用。
采用旋转蒸发浓缩至有微粒混悬为止，用胶头滴管转置500mL输液瓶中，随着浓缩液的增多，在放置过程中析出的白色沉淀越来越多。
水浴80℃加热，只有部分溶解，加入少量甲醇便完全溶解。
旋转蒸发至干，甲醇溶解过滤，于50mL锥形瓶中结晶。
随着甲醇的挥发，溶液越来越浓，但沉淀一直没有析出，液体的颜色也越来越深，由之前的浅黄向红色转变，有可能部分芍药苷已分解，因为芍药苷暴露于空气中或长期见光易被氧化分解使颜色加深，变成红棕色或红褐色。
为减少损失，将甲醇蒸干，用少量蒸馏水溶解，转至蒸发皿中，液面高度不能超过1cm，于冰箱中冻结成冰，再进行冷冻干燥，得芍药总苷的冷冻干燥粉。
得不到结晶的原因分析①芍药苷在甲醇中溶解度过大；②乙酸乙酯洗脱浓缩液有结晶析出时，没有及时的将其滤出，以致后来引入杂质增多难以结晶。
个人推测：由试验可以看出芍药苷在乙酸乙酯中的溶解度并不大，但要使芍药苷能够结晶，必须先制成过稀溶液，再旋转蒸发浓缩至有混悬现象出现的过饱和溶液便可析出可滤出的成形沉淀。
收稿日期：2008-6-8试验日期：2008-03-31至05-16【参考文献】[ 1 ] 国家药典委员会. 中国药典, Ⅰ部[ S ]. 北京: 化学工业出版社,2000: 125.[ 2 ] 马双成, 邓少伟. 赤芍总苷的生产工艺研究[J]. 中草药, 1998, 29(10):664-667.[ 3 ] 潘浪胜 ,吕秀阳,吴平东. 赤芍中芍药苷提取工艺的优化[J]. 天然产物研究与开发Nat Prod Res Dev 2006 ,18 :1052107[ 4 ] 谢晓梅廖自荣. 中国中医药科技[J]. 2005 Vol. 12 No. 2[ 5 ] 周红涛,骆亦奇. 胡世林,等. 赤芍与白芍的化学成分含量比较研究.中国药学杂志2003 ;38 (9) :654[ 6 ] 阮金兰,赵钟祥,曾庆忠,等. 赤芍化学成分和药理作用研究进展.中国药理学通报2003 ;20 (9) :965[ 7 ] 吴立军. 天然药物化学. 北京：人民卫生出版社，2007。