芍药苷提取分离研究报告材料2
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OLOH
本次试验的意义在于通过改进分离工艺来提高芍药苷的分离效果，以便应用 于工业化大生产
【仪器试剂】
材ห้องสมุดไป่ตู้：赤芍干燥根切片500g。（由实验室提供）
仪器：
名称
规格或型号
数量
备注
圆底烧瓶
500、1000、
2000mL/24mm
各1只
球形冷凝管
400mL/24mmX2
1支
烧杯
100、1000mL
各1只
锥形瓶
右边为吸附后滤液点样点，左边为吸附前样液 样点。箭头所指为蓝紫色斑点。
由TLC鉴别可知，芍药苷可以被活性炭吸附。取9份2mL浓缩液，都稀
释到10mL，加入等量的活性炭3g,分别以10%、20%、30%、40%、50%、
60%、70%、80%、90%乙醇溶液洗脱，经TLC检测，40%及以上浓度的乙
醇都能将芍药苷洗脱，而之前的都不能洗脱，部分点样如下
赤芍粉末（500g）
70%乙醇回流3次，1h/次，合并提取液 过滤
滤液
'减压浓缩仃＜60°C）
乙醇溶液（回收）浸膏
硅胶柱层析（干法）J纯乙酸乙酯洗脱洗脱液
减压浓缩至干
芍药苷
【具体操作】
醇水溶液回流提取赤芍干燥根切片500g，用粉碎机粉碎成细粉。取
250g加入2000mL圆底烧瓶中，分别以8倍、6倍、4倍量70%乙醇提取3次，每次提取1h。每提取一次便浓缩一次，回收乙醇便可循环利用，合并3次 的浓缩液。另一半药材以同样的方式处理，合并所有的浓缩液。
250、1000mL
各1只
铁架台
1副
带铁夹
玻璃棒
一根
克氏蒸馏头
24mm X2
一只
尾接管
24mm X2
1支
数字恒温水浴锅HH-2
型
4孔
1台
国华电器有限公司
SHB-3循环水式真空泵、
2孔
1台
郑州长城科工贸有限公司
布式漏斗
400mL
1只
旋转蒸发仪
1台
展开缸
1个
蒸发皿
1个
玻璃板
5cm xiOcm
25块
三角瓶
活性炭吸附分离取部分浓缩液稀释，加入活性炭吸附，过滤，将滤
液和原液进行硅胶薄层点样，喷以显色剂，观察活性炭是否能将芍药苷吸附住，
TLC鉴别如下：
展开剂——氯仿：乙酸乙酯：甲醇：甲酸40:
5:10:0.2（药典）。显色剂一一香草醛：甲醇：
硫酸5:80:15。配置方法：取0.1g香草醛，
以10mL浓盐酸溶解，取其2.5mL溶液于显色喷 瓶中，加甲醇40mL，再加浓硫酸7.5mL，摇匀 即得。药典记载，芍药苷遇香草醛会显现蓝紫 色斑点。
50mL
20个
层析柱
8 xiOOcm
1根
钢盆
1只
胶头滴管
1支
吸耳球
2个
量筒
10mL
1支
移液管
0.50mL
1支
具支试管
50mL
1支
钉子漏斗
1个
烘箱
一_-台
试剂
名称
规
格
厂家及批号
用量
乙酸乙酯
CP
天津市东丽区天大化学试剂厂
20080218
3000mL
98%乙醇
4000mL
甲醇
CP
洛阳昊华化学试剂有限公司060403
【前言】
芍药苷主要来源于毛茛科植物芍药根,牡丹根,紫牡丹根。关于芍药的使用， 我国很早就有书面记载， 始载于《神农本草经》，“主邪气腹痛， 除血痹，破坚积， 寒热疝瘕，止痛利小便，意气” 。我国明间用于治疗胸腹腰肋疼痛，自汗盗汗， 阴虚发热，月经不调，崩漏带下。现代研究表明其主要有效部位为芍药总苷，赤 芍提取物含芍药甙(Paeoniflorin)、芍药内酯甙(Albiflorin)、氧化芍药甙(Oxypaeo- niflorin)、 苯 甲 酰 芍 药 甙(Benzoylpaeoniflorin)、 芍 药 吉 酮(Paeoniflorigenone)、芍药新甙(Lactiflor- in)、胡萝卜甙(Daucosterol)，赤 芍精(d-儿茶精，d-Catechin)及没食子鞣质(Gallota nnin),苯甲酸(Ben zoic acid)，挥发油、脂肪油、树脂、糖、淀粉、黏液质、蛋白质等，主要成分为芍 药苷，其具有镇静、解痉、抗炎、抗应激性溃疡病、扩张冠脉血管、对抗急性心 肌缺血以及抑制血小板凝聚等多方面的作用， 而且毒性小。 临床上已试用于治疗 冠心病，老年性疾病，增强体质与免疫功能、抗炎止咳、祛痰平喘等方面，尤其 是老年慢性呼吸道疾病的治疗中可作辅助药物。
500mL
三氯甲烷
CP
天津市富宇精细化工有限公司80423
500mL
活性炭
CP
350g
硅胶G
CP
青岛海浪硅胶干燥剂厂
310g
有关芍药苷的提取常用水提、醇提以及超声三种方法。由于水提率不如醇提, 而超声又会影响芍药苷结构的稳定性， 所以采用醇提。分离采用活性炭吸附及硅 胶柱层析。具体操作流程如下：
【流程图】：
从右至左分别为20%、30%、40%、50%
乙醇溶液的洗脱液点样点。从上至下分
别为蓝紫色斑点、浅黄色斑点、点样点。
由图可以判断芍药苷不能被30%及更低 浓度的乙醇洗脱下来，但40%及以上浓度的 乙醇都可以洗脱。
将所有浓缩液与以上检测液合并，加1500mL蒸馏水稀释，加入350g经
105C活化1h的活性炭吸附。搅拌，0.5h后过滤。滤液TLC检测没有发现蓝 紫色斑点，说明芍药苷完全被活性炭所吸附。滤出的活性炭先以自来水洗至无 色，再用80%乙醇溶液进行洗脱，直到洗脱液经TLC检测没有蓝紫色斑点为 止，说明被吸附的芍药苷都被洗脱下来。将各次的洗脱液旋转蒸发浓缩，温度 应小于60C。
【理化性质】
芍药苷 (Paeoniflorin)又名芍药甙， 化学名为：B-D-Glucopyranoside,5,6-[(benzoyloxy)methyl].tdtrahydro-5-hydroxy-2-
methyl-2,5-methano-1H-3,4-dioxacyclobuta[cd]petalen-1a(2H)-yl,[laR-( 1aa,2B,3aa,5a,5aa,5ba)]-分子式C23H28O11,分子量480.45，熔点196°C。本品为吸湿性无定形粉末，四醋酸酯为无色针状结晶，属蒎烷单萜苷， 极性较大。药典记载，芍药苷遇香草醛会显现蓝紫色。
洗脱剂的选择在进行硅胶柱层析之前应先选择合适的洗脱剂才
能得到较纯的分离物，提高分离效率及节约成本。取3mL浓缩液稀释至10mL作点样液。
展开剂一氯仿：甲醇8:1
①、②、③、分别为蓝紫色斑点、浅黄色 斑点、点样点。可见芍药苷与另一种物质的Rf
展开剂一氯仿：甲醇8:2
最右端为浓缩液，其余皆为稀释液。
①、②、③、④、⑤依次为浅红、蓝紫、
本次试验的意义在于通过改进分离工艺来提高芍药苷的分离效果，以便应用 于工业化大生产
【仪器试剂】
材ห้องสมุดไป่ตู้：赤芍干燥根切片500g。（由实验室提供）
仪器：
名称
规格或型号
数量
备注
圆底烧瓶
500、1000、
2000mL/24mm
各1只
球形冷凝管
400mL/24mmX2
1支
烧杯
100、1000mL
各1只
锥形瓶
右边为吸附后滤液点样点，左边为吸附前样液 样点。箭头所指为蓝紫色斑点。
由TLC鉴别可知，芍药苷可以被活性炭吸附。取9份2mL浓缩液，都稀
释到10mL，加入等量的活性炭3g,分别以10%、20%、30%、40%、50%、
60%、70%、80%、90%乙醇溶液洗脱，经TLC检测，40%及以上浓度的乙
醇都能将芍药苷洗脱，而之前的都不能洗脱，部分点样如下
赤芍粉末（500g）
70%乙醇回流3次，1h/次，合并提取液 过滤
滤液
'减压浓缩仃＜60°C）
乙醇溶液（回收）浸膏
硅胶柱层析（干法）J纯乙酸乙酯洗脱洗脱液
减压浓缩至干
芍药苷
【具体操作】
醇水溶液回流提取赤芍干燥根切片500g，用粉碎机粉碎成细粉。取
250g加入2000mL圆底烧瓶中，分别以8倍、6倍、4倍量70%乙醇提取3次，每次提取1h。每提取一次便浓缩一次，回收乙醇便可循环利用，合并3次 的浓缩液。另一半药材以同样的方式处理，合并所有的浓缩液。
250、1000mL
各1只
铁架台
1副
带铁夹
玻璃棒
一根
克氏蒸馏头
24mm X2
一只
尾接管
24mm X2
1支
数字恒温水浴锅HH-2
型
4孔
1台
国华电器有限公司
SHB-3循环水式真空泵、
2孔
1台
郑州长城科工贸有限公司
布式漏斗
400mL
1只
旋转蒸发仪
1台
展开缸
1个
蒸发皿
1个
玻璃板
5cm xiOcm
25块
三角瓶
活性炭吸附分离取部分浓缩液稀释，加入活性炭吸附，过滤，将滤
液和原液进行硅胶薄层点样，喷以显色剂，观察活性炭是否能将芍药苷吸附住，
TLC鉴别如下：
展开剂——氯仿：乙酸乙酯：甲醇：甲酸40:
5:10:0.2（药典）。显色剂一一香草醛：甲醇：
硫酸5:80:15。配置方法：取0.1g香草醛，
以10mL浓盐酸溶解，取其2.5mL溶液于显色喷 瓶中，加甲醇40mL，再加浓硫酸7.5mL，摇匀 即得。药典记载，芍药苷遇香草醛会显现蓝紫 色斑点。
50mL
20个
层析柱
8 xiOOcm
1根
钢盆
1只
胶头滴管
1支
吸耳球
2个
量筒
10mL
1支
移液管
0.50mL
1支
具支试管
50mL
1支
钉子漏斗
1个
烘箱
一_-台
试剂
名称
规
格
厂家及批号
用量
乙酸乙酯
CP
天津市东丽区天大化学试剂厂
20080218
3000mL
98%乙醇
4000mL
甲醇
CP
洛阳昊华化学试剂有限公司060403
【前言】
芍药苷主要来源于毛茛科植物芍药根,牡丹根,紫牡丹根。关于芍药的使用， 我国很早就有书面记载， 始载于《神农本草经》，“主邪气腹痛， 除血痹，破坚积， 寒热疝瘕，止痛利小便，意气” 。我国明间用于治疗胸腹腰肋疼痛，自汗盗汗， 阴虚发热，月经不调，崩漏带下。现代研究表明其主要有效部位为芍药总苷，赤 芍提取物含芍药甙(Paeoniflorin)、芍药内酯甙(Albiflorin)、氧化芍药甙(Oxypaeo- niflorin)、 苯 甲 酰 芍 药 甙(Benzoylpaeoniflorin)、 芍 药 吉 酮(Paeoniflorigenone)、芍药新甙(Lactiflor- in)、胡萝卜甙(Daucosterol)，赤 芍精(d-儿茶精，d-Catechin)及没食子鞣质(Gallota nnin),苯甲酸(Ben zoic acid)，挥发油、脂肪油、树脂、糖、淀粉、黏液质、蛋白质等，主要成分为芍 药苷，其具有镇静、解痉、抗炎、抗应激性溃疡病、扩张冠脉血管、对抗急性心 肌缺血以及抑制血小板凝聚等多方面的作用， 而且毒性小。 临床上已试用于治疗 冠心病，老年性疾病，增强体质与免疫功能、抗炎止咳、祛痰平喘等方面，尤其 是老年慢性呼吸道疾病的治疗中可作辅助药物。
500mL
三氯甲烷
CP
天津市富宇精细化工有限公司80423
500mL
活性炭
CP
350g
硅胶G
CP
青岛海浪硅胶干燥剂厂
310g
有关芍药苷的提取常用水提、醇提以及超声三种方法。由于水提率不如醇提, 而超声又会影响芍药苷结构的稳定性， 所以采用醇提。分离采用活性炭吸附及硅 胶柱层析。具体操作流程如下：
【流程图】：
从右至左分别为20%、30%、40%、50%
乙醇溶液的洗脱液点样点。从上至下分
别为蓝紫色斑点、浅黄色斑点、点样点。
由图可以判断芍药苷不能被30%及更低 浓度的乙醇洗脱下来，但40%及以上浓度的 乙醇都可以洗脱。
将所有浓缩液与以上检测液合并，加1500mL蒸馏水稀释，加入350g经
105C活化1h的活性炭吸附。搅拌，0.5h后过滤。滤液TLC检测没有发现蓝 紫色斑点，说明芍药苷完全被活性炭所吸附。滤出的活性炭先以自来水洗至无 色，再用80%乙醇溶液进行洗脱，直到洗脱液经TLC检测没有蓝紫色斑点为 止，说明被吸附的芍药苷都被洗脱下来。将各次的洗脱液旋转蒸发浓缩，温度 应小于60C。
【理化性质】
芍药苷 (Paeoniflorin)又名芍药甙， 化学名为：B-D-Glucopyranoside,5,6-[(benzoyloxy)methyl].tdtrahydro-5-hydroxy-2-
methyl-2,5-methano-1H-3,4-dioxacyclobuta[cd]petalen-1a(2H)-yl,[laR-( 1aa,2B,3aa,5a,5aa,5ba)]-分子式C23H28O11,分子量480.45，熔点196°C。本品为吸湿性无定形粉末，四醋酸酯为无色针状结晶，属蒎烷单萜苷， 极性较大。药典记载，芍药苷遇香草醛会显现蓝紫色。
洗脱剂的选择在进行硅胶柱层析之前应先选择合适的洗脱剂才
能得到较纯的分离物，提高分离效率及节约成本。取3mL浓缩液稀释至10mL作点样液。
展开剂一氯仿：甲醇8:1
①、②、③、分别为蓝紫色斑点、浅黄色 斑点、点样点。可见芍药苷与另一种物质的Rf
展开剂一氯仿：甲醇8:2
最右端为浓缩液，其余皆为稀释液。
①、②、③、④、⑤依次为浅红、蓝紫、