全自动核酸提取仪器及试剂对比
国产全自动核酸提取仪的比较
>99%
30ul-15ml
杭州博日
32、96
高频振荡加热、紫外
30-60min
CV值<3%
有
>98%
10ul-1000ul
杭州奥盛
24、32、48、96
紫外、风扇
15-40min
CV值<5%
无
>95%
50ul-10ml
杭州艾康
32
紫外
12-40min
CV值<1.5%
有
>98%
20ul-1000ul
上海浩源
32
紫外
30-70min
CV值<5%
有
>99%
100ul-2400ul
上海英芮诚
32
紫外
30-50min
CV值<3%
有
>98%
20ul-1100ul
江苏硕世
32
紫外
30-50min
CV值<5%
有
>99%
Max1000ul
百泰克
32、96
紫外、过滤膜
<60min
CV值<5%
有
>99%
20ul-7000ul
国产全自动核酸提取仪的比较
厂家
仪器通道
防污染措施
提取时间
均一性
是否有试剂盒
磁珠回收率
处理体积
南京中科拜尔
16、20、32、96
循环风路、hepa滤膜、紫外
30-40min
CV值<5%
有
>99%
30ul-2000ul
西安天隆
24、32、48、96
两种全自动核酸检测系统对乙肝核酸检测性能的比较
两种全自动核酸检测系统对乙肝核酸检测性能的比较1. 引言1.1 背景介绍乙肝是一种由乙型肝炎病毒引起的肝炎感染,是全球范围内的公共卫生问题。
乙肝病毒主要通过血液和体液传播,感染者可能长期携带病毒而不易被发现,严重危害人类健康。
乙肝核酸检测是诊断乙肝感染的重要手段之一,能够准确、快速地检测出感染者体内的乙肝病毒核酸,对病情的诊断和治疗具有重要意义。
随着科技的发展和医疗设备的改进,全自动核酸检测系统逐渐成为乙肝核酸检测的主流工具。
这些系统能够自动完成样本处理、核酸提取、PCR扩增等步骤,大大提高了检测效率和准确性。
目前市面上有许多种全自动核酸检测系统,其中以系统A和系统B最为常见和应用广泛。
针对这两种系统,本文将从检测灵敏度、检测效率和成本效益等方面进行比较分析,旨在为乙肝核酸检测提供更好的选择和指导。
1.2 研究目的本研究旨在比较两种全自动核酸检测系统在乙肝核酸检测方面的性能表现,分析它们在检测灵敏度、检测效率和成本效益等方面的差异,为临床医学实践提供参考依据。
通过对这两种系统的工作原理进行详细解析,并结合相应指标的比较分析,旨在为乙肝核酸检测的选择提供决策支持,为临床医生、研究人员和患者提供更准确、快速和经济有效的检测方案选择。
通过本研究的深入比较,希望能够揭示不同系统之间的优劣势,为相关技术的研发和应用提供指导意见,促进乙肝疫苗接种和疾病预防控制工作的开展,提高核酸检测技术在临床诊断和流行病学监测中的应用水平和质量。
2. 正文2.1 核酸检测系统A的工作原理核酸检测系统A是一种全自动的检测系统,其工作原理主要包括以下几个步骤:样本处理阶段。
在这个阶段,样本会被提取并经过一系列处理步骤,包括溶解、离心、洗涤等,以保证样本中核酸的纯度和完整性。
接着,核酸提取阶段。
在这个阶段,通过化学方法或磁珠吸附法等技术,将样本中的核酸提取出来,并使其分离纯化。
然后,核酸扩增阶段。
在这个阶段,核酸会被放入PCR仪器中进行扩增,通过循环反应使核酸序列倍增。
三种不同核酸分析系统的效率比较分析
Fig. 1 Agarose electrophoresis results of four
kinds of transgenic maize PCR production
2. 2 多重 PCR 琼脂糖检测结果
为简 化 检 测 步 骤、提 高 检 测 效 率,将 提 取 的 DNA 模 板 进 行 多 重 PCR 检 测。 参 考 前 人 研 究[9 - 11],经过对缓冲液浓度、模板浓度、退火温度以 及引物浓度等条件进行试验设计,最终确定了最优
关键词: 转基因检测; 复合 PCR 扩增; 核酸分析系统 中图分类号: Q78 文献标识码: A 文章编号: 1000 - 7091( 2012) 06 - 0058 - 04
Efficiency Comparative Analysis of Three Different Nucleic Acid Analysis System
rad) ,凝胶分析成像系统( 北京天能) ,微量加样器 全式金) 。普 通 引 物 由 上 海 生 物 工 程 有 限 公 司 合
多种量 程 ( 德 国 Eppendoff) ,高 压 灭 菌 锅 YXQ-LS- 成,荧光引物由 Invitrogen 公司合成。试验中使用引
30S( 上海博讯) ,琼脂糖电泳装置( 北京六一) ,ABI 物终浓度为 10 μmol / L。
Abstract: Four kinds of genetically modified maize genomic DNA were extracted,using specific primers for PCR and multiplex PCR detection in this study. The PCR products were analyzed respectively by ordinary agarose gel electrophoresis and other three kinds of nucleic acid analyzer ABI 3730XL,Shimadzu MultiNA and QIAGEN QIAxcel. The experimental results were compared and summarized the advantages and disadvantages of the detection methods for nucleic acid fragments of different size,which provided an important reference for different analysis requirements.
磁珠法和柱式法提取核酸在新城疫荧光定量检测中的比较
新城疫(newcastle disease ,ND )是由新城疫病毒(newcas-tle disease virus ,NDV )强毒株引起的、以感染禽类为主的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病[1],具有很高的发病率和死亡率,在全球范围内广泛流行,曾在世界范围内引起三次大的流行,给养禽业造成了巨大的经济损失,严重影响了养禽业的发展,该病与高致病性禽流感并列为世界公认的最重要的2个禽类疫病[2,3]。
世界动物卫生组织(OIE )将新城疫列为A 类疫病,我国将其列入一类动物疫病[4]。
目前检测新城疫病毒的常用方法为荧光定量RT-PCR ,该方法比常规的检测方法用时少、周期短、灵敏、准确、特异性强、操作简便[5],且不易引起污染,还可用于病毒的定量分析。
在检测过程中,提取核酸是关键环节,因为提取后的核酸质量及其完整性会直接影响到后续试验结果[6]。
本研究选用实验室常用的磁珠法和柱式法提取病毒核酸进行荧光定量RT-PCR 检测,发现两种提取方法在灵敏度及重复性等方面存在差异。
现将研究结果报告如下。
1材料与方法1.1材料1.1.1主要仪器与设备King Fisher Flex 96通道全自动核酸提取仪,微量移液器,MIKRO 200R 高速冷冻离心机,BIO-RAD CFX Connect 荧光定量PCR 仪。
1.1.2检测试剂新城疫病毒荧光RT-PCR 试剂盒,购自深圳澳东检验检测科技有限公司,批号:66080;病毒核酸(RNA )抽提试剂盒(离心柱式),购自深圳澳东检验检测科技有限公司,批号:69015;病毒核酸提取试剂(磁珠法),购自广州和实生物技术有限公司,批号:CZD00412。
1.1.3样品2020年主要禽病流行病学调查及监测中,筛查出的新城疫阳性样品(鸡咽泄拭子和环境拭子),共22份。
1.2方法1.2.1磁珠法将拭子样品混匀,静置3~5min ,取200μL 上清,由KingFisher Flex 96通道全自动核酸提取仪提取核酸,最后获得100μL RNA 溶液。
乙肝病毒DNA检测2种不同核酸提取方法的性能验证情况分析
乙肝病毒DNA检测2种不同核酸提取方法的性能验证情况分析董剑;许小华【摘要】目的:对乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测的2种不同核酸提取方法,即手工法(煮沸法)和全自动核酸提取仪法(磁珠法),在使用相同的检测试剂和核酸扩增仪的条件下进行性能验证,以评价其验证结果.方法:依据《医学实验室质量和能力认可准则》《全国临床检验操作规程》等相关文件,由同一操作人员应用中山达安公司生产的HBV-DNA检测试剂盒和ABI7500实时荧光核酸扩增仪,分别采用手工法和全自动核酸提取仪法提取HBV-DNA进行临床样本的批内精密度、批间精密度、正确度、线性范围性能验证实验.结果:手工法的高值血清批内精密度为2.18%,低值血清批内精密度为3.76%;高值质控品批间精密度为3.29%.全自动核酸提取仪法的高值血清批内精密度为1.78%,低值血清批内精密度为2.44%;高值质控品批间精密度为2.84%.正确度验证分别取浓度为2.0×103、2.0×104、2.0×105、2.0×106copies/ml的可溯源标准品进行验证,手工法偏倚分别为-4.88%、-2.51%、-2.46%,-2.12%,全自动核酸提取仪法偏倚分别为-2.37%、-0.95%、0.74%、-1.33%.线性范围验证中,手工法和全自动核酸提取仪法的相关系数分别为0.9660、0.985 8,均能满足临床检测的需求.结论:全自动核酸提取仪法较手工法提取核酸有利于简化HBV-DNA提取流程,实现分子生物实验室自动化提取核酸.【期刊名称】《医疗卫生装备》【年(卷),期】2019(040)006【总页数】4页(P40-43)【关键词】乙型肝炎病毒DNA定量检测;手工(煮沸法);全自动核酸提取仪法(磁珠法);性能验证;血清【作者】董剑;许小华【作者单位】联勤保障部队第909医院检验科,厦门大学附属东南医院检验科,福建漳州363000;联勤保障部队第909医院检验科,厦门大学附属东南医院检验科,福建漳州363000【正文语种】中文【中图分类】R318;R446.10 引言乙型肝炎也被称为乙肝,是目前世界上最常见的一类传染病,据不完全统计[1] ,在全世界范围每年至少有100万以上的患者死于乙肝。
不同新型冠状病毒核酸检测试剂性能比较分析
Doi : 10. 13621 /j. 1001 - 5949. 2020. 10. 0913-实验研究-不同新型冠状病毒核酸检测试剂性能比较分析张伟宏马 雯*2,李富荣2,葸 静3,金哲宇2叭崔学强2,何瑞芬2,张俊华2,朴文花2[基金项目]宁夏重点研发计划科技支撑"新型冠状病毒感染的肺炎疫情防控”专项(2020BEG03023)[作者单位]1.宁夏银川市疾病预防控制中心,宁夏银川7500022. 宁夏回族自治区人民医院临床医学检验诊断中心, 宁夏银川7500023. 宁夏金域医学检验所,宁夏银川7500024. 苏州大学附属第一医院骨科,江苏苏州215006[通讯作者]朴文花,Email : ******************[摘要]目的 比较6种新型冠状病毒核酸检测试剂盒的性能,为相关实验室选择核酸检测试剂提供参考依据。
方法 选择6种国产新型冠状病毒核酸检测试剂盒,比较其基本情况,并用5例阳性患者的咽拭子标 本,提取RNA 倍比稀释后进行RT-qPCR 检测,分析扩增结果,评估各试剂盒的差异。
结果 使用核酸检测试剂盒检测稀释后的RNA ,扩增后可见IC 基因、N 基因及ORF1ab 基因的Ct 值及A Rn 值有显著差异;在1 :16稀释 倍数时F 试剂未检测到ORF1ab 基因,C 试剂在1 :64时无法检出ORF1ab 基因和N 基因,A 、B 、D 试剂在1 :256 稀释倍数时未检测到ORFlab 基因和N 基因,E 试剂在各个稀释度均可扩增IC 、ORF1ab 、N 及E 4个基因。
结论新型冠状病毒核酸检测试剂对低病毒载量核酸的检测能力有较大差异,各实验室选用试剂时需要进行 性能验证,根据检测目的和检测对象选择合适的试剂盒。
[关键词]2019新型冠状病毒;核酸检测;试剂盒;性能比较[中图分类号]R192.3 [文献标识码]AComparison and analysis oftheperformancein different COVID-19 nucleic acid detection reagentsZHANG Weihong 1,MA Wen 2, LI Furong 2,XI Jing 3,JIN Zheyu 2'4, CUI Xueqiang 1,HE Ruifen 2,ZHANG Junhua 2,PIA O Wenhua^.1. The Center for Disease Control and Preventionof Yinchuan ,Yinchuan 750002,China ;2. The Department of Clinical MedicalExamination and Diagnosis Center ,Ningxia Hui Autonomous Region People's Hospital ,Yinchuan 750002,China ; 3. Ningxia Jinyu Medical Laboratory ,Yinchuan 750002,China ; 4. Department of Orthopedics ,The First Affiliated Hospital of Suzhou University , Suzhou 215006, ChinaCorresponding author : PIA O Wenhua ,Email : ******************[Abstract ] Objective To compare and analyze the detection ability of six domestic SARS -CoV -2 (Covid-19) detection kits ,thus providing reference for molecular laboratories. Methods Six domestic detection kits ,categorized randomLy from A to F , were selected and applied in the detection of SARS-Cov-2. Five positive nasopharyngeal swab specimens were selected in the study , Ct(threshold cycle )value , ARn value and detection of target genes(ORF1ab ,E and N gene )and IC gene were analyzed and evaluated prior to and after different dilution folds. Results Ct (threshold cycle )and ARn value for ORF1ab , IC , E , N gene showed statistically significant differences at different dilution folds for six detection kits. At the dilution of 1:16,F kit was unable to detect ORF1ab gene. At the dilution of 1 :64, C kit was unable to detect ORF1ab and N gene. At a dilution of 1 :256, A , B and D kits were unable detect ORF1ab and N genes. E kit detected IC , ORF1ab , N and E gene at all dilution folds. Conclusion Detection ability for 6 nucleic acid detection kits varied for low -viral load samples. Performance validation prior selection of kits is recommended. Selection of reagent kits should be based on the aim of the testing and testing subjects.[Key words ] SARS-Cov-2; Nucleic acid detection ; Re a ge n t kits ; Performance comparison.由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)在世界范围内迅速蔓延,RT-qPCR 检测新冠病毒核酸阳性作为诊断疾病 的标准,在疾病的防控中发挥了重要的作用⑴。
核酸提取仪的原理、分类及几种核酸提取仪的比较-科邦实验室
核酸提取仪(Nucleic Acid Extraction System)是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸提取工作的仪器。广泛应用在疾病 控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。
只配套 QIAGEN 离心柱相关试剂
盒,成本高
震荡加热模块
离心柱法,粘 稠样品和组织
容易堵柱子
组织需要预 先研磨过夜
消化
20-30 元
预消化 5 小时 或者过
夜
分类: 1. 根据仪器型号大小不同划分
1) 自动液体工作站 自动液体工作站是功能非常强大的设备,液体分液、吸液等自动完成,甚至能通过整合扩增、检测等功能,实现标本提取、扩增、 检测全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用,不太适合常规实验室提取核酸,一般都应用在单一类标本并且一次提取标本量非常 大(至少 96 个,一般几百个)的实验需求上。自动工作站的平台建立及平台的运作,需要比较大的资金。 2) 小型自动核酸提取仪 小型的自动化仪器是通过运行结构的特殊性来达到自动提取核酸的目的,可以在任何实验室得到应用。 2. 根据提取原理不同划分 1) 采用离心柱法的仪器 离心柱法核酸提取仪主要采用离心机和自动移液装置相结合的方法,通量一般在 1-12 个样本,操作时间和手工提取差不多,并不 能提高实际工作效率,且价格昂贵,不同型号仪器的耗材也不能通用,仅适合经费充足的大型实验室使用。 2) 采用磁珠法的仪器 以磁珠为载体,利用磁珠在高盐低 PH 值下吸附核酸,在低盐高 PH 值下与核酸分离的原理,再通过移动磁珠或转移液体来实现核 酸的整个提取纯化过程。由于其原理的独特性,所以可设计成很多种通量,既可以单管提取,也可以提取 8-96 个样本,且其操作简单 快捷,提取 96 个样本仅需 30-45min,大大提高了实验效率,且成本低廉,因而可以在不同实验室使用,是目前市场上的主流仪器。
核酸提取质量保证与全自动核酸提取仪的性能评价 廖璞
不同核酸提取方法产率比较 (通过样本浓度倍比稀释后比较灵敏度)
Journal of Virological Methods 171 (2011) 195–199。
重庆市临床检验中心
DNA核酸提取评价
纯度 (Purity)
检测260nm、280nm、(320nm)OD值,计算比值
RNA核酸提取评价
完整性(Integrity)
不同RIN值对GAPDH扩增的影响 Methods. 2013 Jan;59(1):20-31.
重庆市临床检验中心
核酸提取其它评价
干扰物质、交叉污染
干扰试验
一、将已知病原体含量 的溶血或脂血标本用待评价 试剂提取,比较所得到的结 果。可知纯化后是否将有关 抑制物去除从而反映提取纯 度。
组织样本结合杆菌检测 不同提取方法效率比较
(检测限比较)
重庆市临床检验中心
临床病原微生物核酸提取
提取方法的选择
依据 标本类型
考虑 后续实验 对提取质 量的要求
依据
相关标准、 指南
重庆市临床检验中心
临床病原微生物核酸提取
提取方法的选择
依据治疗、监测要求选择
重庆市临床检验中心
临床病原微生物核酸提取
重庆市临床检验中心
微量样本的核酸质量评价
如NanoDrop超微量分光光度计、quabit、 Quant-iT荧光定量分析–用 于下游检测为(NGS)等需要精密测定的实验
重庆市临床检验中心
主要分子诊断技术对核酸提取的要求
1 临床病原微生物核酸检测
2 染色体病和遗传性疾病基因检测
3
肿瘤基因检测
4 器官移植配型HLA基因分型检测
核酸自动提取纯化仪
核酸自动提取纯化仪面对当前疫病世界范围内流行蔓延,需要大规模进行核酸检测的现状,核酸提取产业化、自动化已成为不可抵挡的趋势,因此,核酸自动提取纯化仪在核酸提取自动化过程中不可或缺。
核酸自动提取纯化仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器。
它可替代原来复杂的手动操作,仪器自动完成对细胞或组织的处理,分析提取出目标DNA/RNA。
洛阳慧庆生物科技有限公司的核酸自动提取纯化仪的提取原理为磁珠法。
它是通过细胞裂解液裂解样本,从样本中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中,再在磁场作用下,使磁性颗粒与液体分开,回收颗粒(即磁珠-核酸混合物),再用洗脱液洗脱即可以得到高纯度的核酸。
洛阳慧庆生物科技有限公司的核酸自动提取纯化仪具有自动化程度高,提取速度快,结果稳定,操作简便等优点。
使用96孔深孔板试剂盒,可同时纯化1-32个样品,一批样本的提取时间最短可达11分钟。
可搭配不同种类的磁珠法核酸提取试剂,快速提取动植物组织、血液、体液等样品中的DNA或RNA。
同时它体积小巧,重量为17千克,仪器运行接近静音,便于运输和放置实验室使用,内置电池,在突然断电情况下仍可运行2小时,防止因断电等情况而导致实验无法进行。
洛阳慧庆核酸自动提取纯化仪产品特点:1、最大通量:32个样本/批;2、提取时间:11min/批;(可根据不同试剂盒产品进行差异化参数设置)3、实验重复性、稳定性好;4、操作简单,触屏可视化界面;5、体积小巧、运输方便、占据实验空间小,仪器重量仅17kg;6、专业的结构设计,仪器运行接近静音;7、操作软件设计通用性强,可适合各厂家提取试剂盒;8、内置电池,在突然断电情况下仍然可以继续运行;9、一次性磁棒套、紫外灭菌灯以及先进排气系统(HEPA)的使用,可有效保障环境和人员的生物安全,并且可有效截留气溶胶,避免不同批次试剂间的交叉污染。
国内外核酸提取仪介绍
核酸提取仪可以 应用于DN、RN 等核酸分子的提 取
核酸提取仪可以 提高核酸提取的 效率和纯度
核酸提取仪广泛 应用于分子生物 学、医学、生物 技术等领域
核酸提取仪的原理
核酸提取仪是一种用于从生物样品中提取核酸的仪器。
核酸提取仪的原理主要是利用物理和化学方法如离心、过滤、吸附等将核酸从生物样品 中分离出来。
性能稳定:国外核酸 提取仪的性能稳定能 够保证实验结果的准 确性和可靠性。
应用广泛:国外核酸 提取仪的应用范围广 泛包括科研、医疗、 生物技术等领域。
技术支持:国外核酸 提取仪的制造商通常 提供完善的技术支持 和售后服务确保仪器 的正常运行和使用。
国内外核酸提取仪 的比较
技术水平的比较
国内核酸提取仪:技术水平不断提升部分产品已达到国际先进水平 国外核酸提取仪:技术成熟性能稳定但价格较高 技术差距:国内核酸提取仪在某些关键技术上仍存在差距如自动化程度、检测精度等 发展趋势:国内核酸提取仪技术水平不断提升有望缩小与国外产品的差距
技术水平:国内核酸提取仪的技术水平已经达到国际先进水平 研发能力:国内核酸提取仪的研发能力不断提升已经具备自主研发能力 生产能力:国内核酸提取仪的生产能力不断提升已经具备大规模生产能力 应用领域:国内核酸提取仪的应用领域不断拓展已经广泛应用于医疗、科研等领域
国外核酸提取仪的 发展
国外核酸提取仪的历程
智能化:核酸提取仪将更加智能化实现 自动化、无人化操作
便携化:核酸提取仪将更加便携化满足 现场检测的需求
成本降低:随着技术的成熟和生产规模 的扩大核酸提取仪的成本将逐渐降低提 高普及率
应用领域拓展:核酸提取仪的应用领域 将不断拓展如环境监测、食品检测等领 域
THNK YOU
五种核酸提取仪的比较
五种核酸提取仪的比较 Document number:NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT
五种核酸自动提取仪的比较
百泰克仪器如何避免样品交叉污染
1、百泰克仪器的设计使每个样本在提取过程中有独立的空间,整个过程中,带有DNA的磁棒只
在规定的6个孔移动,不经过其他样本的上空,所以不会产生滴液污染。
百泰克仪器相对于其他仪器的优势
1、百泰克仪器相对于其他仪器有明显的优势,从上述对比表格中很清楚的得出结论,最明显的优势是我们的仪器不管对于任何样本都可以提取,不会受样本类型的影响,不会产生吸附柱堵住,移液器枪头堵住导致裂解不好等影响,纯度和得率高于对方一筹。
五种核酸提取仪的比较
五种核酸自动提取仪的比较
百泰克仪器如何避免样品交叉污染
1、百泰克仪器的设计使每个样本在提取过程中有独立的空间,整个过程中,带有DNA的磁棒只在规定的6个孔移动,不经过其他样本的上空,所以不会
产生滴液污染.
百泰克仪器相对于其他仪器的优势
1、百泰克仪器相对于其他仪器有明显的优势,从上述对比表格中很清楚的得出结论,最明显的优势是我们的仪器不管对于任何样本都可以提取,不会受样本类型的影响,不会产生吸附柱堵住,移液器枪头堵住导致裂解不好等影响,纯度和得率高于对方一筹。
全自动核酸提取仪工作原理
全自动核酸提取仪工作原理一、引言全自动核酸提取仪是一种高效、精确的实验设备,广泛应用于生物医学领域的核酸提取过程中。
它通过自动化的方式,实现了对样本中的核酸进行提取和纯化的过程,大大提高了实验效率和准确性。
本文将主要介绍全自动核酸提取仪的工作原理。
二、工作原理全自动核酸提取仪主要由样本处理模块、核酸提取模块、洗涤模块、干燥模块和存储模块组成。
其工作原理可以概括为以下几个步骤:1. 样本处理:将待提取的样本放入样本处理模块中,通过特定的方法,如离心或超声波处理,使样本中的细胞或病毒破裂,释放出核酸。
2. 核酸提取:经过样本处理后,样本中的细胞或病毒溶解,核酸溶液与提取试剂混合后形成复合物。
核酸提取模块中的磁珠吸附这些复合物,并通过磁力的作用将其沉降到底部。
3. 洗涤:经过核酸提取后,为了去除杂质和残留的试剂,需要进行洗涤步骤。
洗涤模块中的洗涤缓冲液与磁珠上的核酸复合物结合,然后通过磁力的作用将洗涤液吸附到底部,将杂质和残留的试剂去除。
4. 干燥:洗涤后的核酸复合物需要去除液体,以便进行后续的操作。
干燥模块中的干燥缓冲液与磁珠上的核酸复合物结合,然后通过磁力的作用将液体吸附到底部,使核酸复合物干燥。
5. 存储:经过干燥后的核酸复合物可以长时间保存。
存储模块中的稳定液与核酸复合物结合,形成稳定的复合物,以便后续的分析和实验。
三、优势与应用全自动核酸提取仪具有以下优势和应用:1. 高效性:全自动核酸提取仪可以同时处理多个样本,大大提高了核酸提取的效率。
相比手工操作,其处理速度更快,且结果更准确可靠。
2. 准确性:全自动核酸提取仪通过精确的控制和自动化的操作,可以减少人为操作的误差,提高核酸提取的准确性。
3. 灵活性:全自动核酸提取仪可根据不同的实验需求和样本特点进行调整和优化,适用于不同类型的核酸提取。
4. 应用广泛:全自动核酸提取仪广泛应用于医学、生物学、遗传学等领域的核酸提取过程中。
例如,在临床诊断中,可用于病毒核酸的提取和检测,以帮助医师进行疾病的早期诊断和治疗。
全自动核酸提取仪器及试剂对比
计算机接口 程序管理
USB 新建、编辑、删除模式程序,自由灵活编辑提取程序
NP968
污染控制 处理时间 产品外形尺寸 重量 使用电源 操作温度范围 操作湿度范围
内置紫外消毒模块 10-45分钟 410mm×400mm×450mm
37Kg AC110~240V 50Hz/60Hz 750VA 10℃~40℃ 低于80%
核酸自动纯化系统-32 1. 最大容量:1000μl 2. 最大样品数:32检测/每次 3. 操作时间:30-50分钟/每次 4. 程式编辑功能 5. 全中文界面 6. 触控式面板 7. 加热功能 8. 紫外光杀菌功能 9. 尺寸:40cm×40cm ×45cm(长×宽×高)
/show1equip.asp?equipid=368483 4
8
简化样本制备 cobas® AmpliPrep分析仪使整个样本提取 过程自动化。手工操作步骤仅限于样本 加载和卸载,试剂装在密封且带有条码 标签的即用型试剂盒(专利设计)中, 使试剂数据输入更快速准确。
定性和定量结果 cobas® AmpliPrep分析仪为定性和定量分 子诊断提供了整合的自动化样本制备系 统。
2
圣湘生物 半自动核酸提取仪
仪器大小:约长400mm 宽400mm 高450mm
/a/qxcp/zizhuchanpin/zidonghuahesuantiquyi/2012/0428/140.html
3
复星诊断 半自动核酸提取仪
SuperPure System-32
/products/instrumentation-automation/realtime-pcr/m2000-sp-rt.html#
6
QIAGEN 全自动核酸提取工作站
核酸提取自动化仪器原理
核酸提取自动化仪器原理引言核酸提取是生物学研究和临床诊断中非常重要的步骤之一,它可以从生物样本中分离和纯化出核酸分子。
传统的核酸提取方法通常耗时、劳动密集且易受操作者技术水平的影响。
为了提高核酸提取的效率和准确性,自动化仪器被广泛应用于核酸提取过程中。
本文将详细解释与核酸提取自动化仪器原理相关的基本原理。
核酸提取自动化仪器基本原理核酸提取自动化仪器主要由以下几个部分组成:样本处理模块、核酸纯化模块、溶剂处理模块、温控模块、机械臂和控制系统。
1. 样本处理模块样本处理模块是核酸提取自动化仪器的第一个部分,其主要功能是将待提取的样本加入到自动化仪器中。
样本可以是血液、组织、细胞等生物样本,通常需要经过前处理步骤,如离心、裂解等。
样本处理模块通常包括样本输入装置、样本转移装置和样本处理装置。
样本输入装置用于将待提取的样本输入到自动化仪器中。
常见的输入方式包括使用样本管架、样本针头等。
样本转移装置用于将样本从输入装置中转移到样本处理装置中。
转移过程通常需要控制样本的体积和精确度。
样本处理装置是核酸提取的关键部分,它包括样本混匀、裂解、蛋白质沉淀等处理步骤。
2. 核酸纯化模块核酸纯化模块是核酸提取自动化仪器的核心部分,其主要功能是从样本中分离和纯化核酸分子。
核酸纯化的基本原理是利用核酸的特性,在特定条件下将核酸与其他样品成分分离开来。
核酸纯化模块通常包括细胞破碎、蛋白质去除、核酸吸附、洗脱等步骤。
细胞破碎是核酸纯化的第一步,它通常使用裂解缓冲液和机械力等方式将细胞破碎,释放出细胞内的核酸。
蛋白质去除是将蛋白质从核酸中分离出来的步骤,常用的方法包括酚-氯仿法、酶解法等。
核酸吸附是利用核酸与某些固相材料(如硅胶、磁珠等)之间的亲和性将核酸吸附在固相材料上。
洗脱步骤是将吸附在固相材料上的核酸从固相材料上洗脱下来,得到纯净的核酸溶液。
3. 溶剂处理模块溶剂处理模块是核酸提取自动化仪器的另一个重要部分,其主要功能是提供和处理用于核酸提取的各种溶剂。
两种HBV DNA定量检测方法的临床对比研究
两种HBV DNA定量检测方法的临床对比研究王爽;王雅杰;郭杰;王大刚;时景仁;潘美晨;殷商启;何超男;孟欢;张响【摘要】目的比较某国产实时荧光定量PCR试剂(后称国产试剂)与某进口(后称进口试剂)检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA的定量的结果.方法根据进口试剂检测结果抽取514份慢性乙型肝炎的血浆标本,采用国产全自动核酸提取仪和PCR高敏试剂进行HBV DNA定量平行检测,以分析国产试剂的检测情况和与进口试剂的结果差异和相关性.结果进口试剂和国产试剂的阳性检出率分别为77.2%和78.5%,不符合率分别为7.2%和8.6%,两者无明显差异;Spearman相关分析显示,两种试剂检测的HBV DNA在20~1.7×108 IU/mL区间内检测结果的相关系数(r=0.966,P<0.0001),表明二者具有较强的相关性;Bland?Altman分析2种方法检测病毒载量的差异分析显示结果具有较高的一致性.结论国产高敏试剂和进口试剂,检测血浆HBVDNA在20~1.7×108 IU/mL的病毒载量结果具有较好的相关性和一致性.【期刊名称】《分子诊断与治疗杂志》【年(卷),期】2019(011)005【总页数】5页(P374-378)【关键词】乙型肝炎病毒DNA;荧光定量PCR;病毒载量;一致性【作者】王爽;王雅杰;郭杰;王大刚;时景仁;潘美晨;殷商启;何超男;孟欢;张响【作者单位】首都医科大学附属北京地坛医院检验科,北京,朝阳100015;首都医科大学附属北京地坛医院检验科,北京,朝阳100015;首都医科大学附属北京地坛医院检验科,北京,朝阳100015;首都医科大学附属北京地坛医院检验科,北京,朝阳100015;首都医科大学附属北京地坛医院检验科,北京,朝阳100015;首都医科大学附属北京地坛医院检验科,北京,朝阳100015;首都医科大学附属北京地坛医院检验科,北京,朝阳100015;首都医科大学附属北京地坛医院检验科,北京,朝阳100015;首都医科大学附属北京地坛医院检验科,北京,朝阳100015;首都医科大学附属北京地坛医院检验科,北京,朝阳100015【正文语种】中文在目前全球面临的最严峻的公共卫生问题中,乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是最大的问题之一,目前全球慢性感染者逾2.57 亿人,每年死亡88.7 万人,其中约25%死于肝癌或肝脏相关并发症[1]。
国产全自动核酸提取仪的比较
国产全自动核酸提取仪的比较比较国产全自动核酸提取仪的特点:厂家仪器通道防污染措施提取时间___ 16、20、32、96 循环风路、hepa滤膜、紫外 30-40min西安天隆 24、32、48、96 紫外 30-50min杭州博日 32、96 30-60min___ 24、32、48、96 紫外 15-40min杭州艾康 32 紫外 12-40min___ 32 循环风路、hepa滤膜、紫外 30-70min___ 24、32、96 紫外 30-50min江苏硕世 24、32、96 30-50min百泰克 16、32 <60min厦门致善 32 30-60min___生物 24、32 30-40min天根 16、32 30-40min均一性 CV值___ <5%西安天隆 <5%___ <3%___ <5%杭州___ <1.5%___ <5%___ <3%江苏硕世 <5%百泰克 <5%厦门致善 <5%___生物 <5%天根 <5%是否有试剂盒磁珠回收率处理体积南京___ 有。
99% 30ul-2000ul西安天隆有。
99% 30ul-15ml杭州博日有。
98% 10ul-1000ul___ 无。
95% 50ul-10ml杭州艾康有。
98% 20ul-1000ul___ 有。
99% 100ul-2400ul___ 有。
98% 20ul-1100ul江苏硕世有。
99% Max1000ul百泰克有。
99% 20ul-7000ul厦门致善有。
99% 50ul-1000ul___生物有。
99% 50ul-1000ul天根有。
99% 20ul-2400ul对比这些国产全自动核酸提取仪,可以发现它们在通道、防污染措施、提取时间、均一性、是否有试剂盒、磁珠回收率和处理体积等方面存在差异。
其中,南京___、西安天隆、杭州博日、杭州奥盛、杭州艾康、___、___、江苏硕世、___、厦门致善、济凡生物和天根这些品牌的全自动核酸提取仪都有其各自的特点和优势。
不同核酸提取方法SARS-CoV-2核酸检测性能比较
文章编号:1673-8640(2021)05-0530-05 中图分类号:R373.9 文献标志码:A DOI:10.3969/j.issn.1673-8640.2021.05.015不同核酸提取方法SARS-CoV-2核酸检测性能比较张云丽,王 鑫,邵 玲,曲 波,赵鸿梅(辽宁省人民医院检验医学科,辽宁沈阳 110016)摘要:目的比较磁珠吸附法和样本释放剂法对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测结果的符合率、重复性及检出限,优选出提取效率高、耗时短、成本低的核酸提取方法。
方法采用2种核酸提取方法的3种商品化核酸提取试剂,分别对阴性样本、阳性样本及不同浓度(稀释度20~28)的SARS-CoV-2 RNA标准品进行RNA提取及实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测,以Ct值评价不同核酸提取方法的性能。
结果3种核酸提取试剂的阴性和阳性样本结果符合率均为100%。
使用磁珠吸附法进行核酸提取的变异系数(CV)(CV为0.89%~1.58%)低于样本释放剂法,样本释放剂B的CV(CV为0.83%~2.73%)次之,样本释放剂A的CV最大(CV为1.62%~4.90%)。
磁珠吸附法及样本释放剂B提取核酸的检出限均为156.3 拷贝/mL,样本释放剂A的检出限为625.0 拷贝/mL。
结论磁珠吸附法核酸提取试剂核酸提取效率高、重复性好,适合大批量样本的集中操作。
关键词:严重急性呼吸综合征冠状病毒2;核酸检测;核酸提取;实时逆转录荧光聚合酶链反应Comparison of different nucleic acid extraction methods for the detection of SARS-Cov-2 ZHANG Yunli,WANG Xin,SHAO Ling,QU Bo,ZHAO Hongmei.(Department of Clinical Laboratory,Liaoning Provincial People's Hospital,Shenyang 110016,Liaoning,China)Abstract:Objective To compare the consistency rate,repeatability and detection limit of magnetic bead adsorption method and sample releasing agent method in the nucleic acid extraction of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2),so as to optimize the extraction method of nucleic acid with high extraction efficiency,short time consuming and low cost. Methods Totally,3 commercial nucleic acid extraction reagents for 2 methods of nucleic acid extraction were used to extract RNA from negative samples,positive samples and SARS-CoV-2 standard samples with different dilution(20-28),and real-time fluorescence reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) was performed. Ct value was used to evaluate the performance of different nucleic acid extraction methods. Results The consistency rate of negative and positive samples of 3 nucleic acid extraction reagents was 100%. The coefficient of variation(CV) of magnetic bead adsorption method was lower than those of sample releasing agent method(CV 0.89%-1.58%),sample releasing agent A(CV 1.62%-4.90%) and sample releasing agent B(CV 0.83%-2.73%). The detection limit of magnetic bead adsorption methodand sample releasing agent B was 156.3 copies/mL,and that of sample releasing agent A was 625.0 copies/mL.Conclusions The magnetic bead adsorption method of nucleic acid extraction is efficient and reproducible,which is suitable for the centralized operation of a large number of samples.Key words:Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2;Nucleic acid detection;Nucleic acid extraction;Real-time fluorescence reverse transcription-polymerase chain reaction作者简介:张云丽,女,1988年生,主管技师,主要从事临床生化免疫研究。
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/show1equip.asp?equipid=347691 7
ROCHE 全自动核酸提取工作站
cobas AmpliPrep
/products/Pages/COBASAmpliPrep.aspx
8
简化样本制备 cobas® AmpliPrep分析仪使整个样本提取 过程自动化。手工操作步骤仅限于样本 加载和卸载,试剂装在密封且带有条码 标签的即用型试剂盒(专利设计)中, 使试剂数据输入更快速准确。
定性和定量结果 cobas® AmpliPrep分析仪为定性和定量分 子诊断提供了整合的自动化样本制备系 统。
高通量 最多可在系统上同时加载72个样本和3种 不同的测定。
磁珠提取技术 cobas® AmpliPrep分析仪能净化PCR所需的 RNA或DNA靶标。
仪器比较
厂家 圣湘 复星 天隆
仪器 The NatCH 64 system SuperPure System-32
NP968
通量 64 32 32
/show1equip.asp?equipid=368483 4
天隆科技 半自动核酸提取仪
产品型号 处理体积 样品通量 磁珠回收效率
加热温度
振荡混合 试剂种类 操作界面
内部程序
计算机接口 程序管理
NP968
污染控制 处理时间 产品外形尺寸 重量 使用电源 操作温度范围 操作湿度范围
9
试剂比较
厂家
圣湘 复星 QIAGEN
雅培
罗氏 PerkinElmer
检测下限 (IU/ml)
10 15 10.2
10 15 20 20
线性范围 (IU/ml) 20~2x109 100~109 31.6~2x107
10~109
20~109 20~109
方法学
磁珠法 磁珠法 硅胶膜-磁珠
法 磁珠法
时间 30min 30~50min 10~45min
样本体积 200ul ~1ml ~1ml
QIAGEN 罗氏 雅培
PerkinElmer
QIAsymphony SP Cobas AmpliPrep
m2000sp Pre-NAT
96 72 24-96 96
// // 180min 130min
~1ml 650ul 0.2/0.5/1.rumentation-automation/realtime-pcr/m2000-sp-rt.html#
6
QIAGEN 全自动核酸提取工作站
QIAsymphony SP
QIAsymphony 技术将硅胶膜或NI-NTA纯化 的速度和效率与易于操作的磁珠相结合。 更高的操作安全性,样本体积多至1 ml , 50 mg 组织或107 个细胞,以及多样的应 用(RNA、DNA和蛋白纯化),使 QIAsymphony SP工作站成为自动化样本制 备技术上一座新的里程碑。 工作站提供试管架和96孔板底座,可加载 多种类型的试管和96孔板,包括10-16.9 mm 的带条形码标签的试管或 96孔微孔板 或深孔板。上样模块共可放置4 个可加载 24个样本的试管架和一个用作内参的试管 架,或最多放置4个96孔微孔板或深孔板。 工作站在样品管/板进入仪器时自动扫描 条形码,确保纯化全过程的样本追踪。
M2000SP
Barcoded Laboratory Tubes Reduces transcription error and provides positive Precision Pipetting Eliminates manual mixing or manipulation Open Mode Flexible protocol for various sample types and volumes Efficient Sample Extraction Flexible throughput options of 24 to 96 samples
+PCR板分装总时间约2小时。
+
MSM 1
2
圣湘生物 半自动核酸提取仪
仪器大小:约长400mm 宽400mm 高450mm
/a/qxcp/zizhuchanpin/zidonghuahesuantiquyi/2012/0428/140.html
3
复星诊断 半自动核酸提取仪
USB 新建、编辑、删除模式程序,自由灵活编辑提取程序
内置紫外消毒模块 10-45分钟 410mm× 400mm× 450mm 37Kg AC110~240V 50Hz/60Hz 750VA 10℃~40℃ 低于80%
雅培 全自动核酸提取工作站
仪器特性: 最大样本量:96 提取时间: ~180min 样本体积:0.2 /0.5 /1.0ml
/Pshow.asp?Thex=51&Cla=11
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核酸提取仪NP968 30uL-1000uL 1-32 >95% 裂解加热温度:室温-120℃ 洗脱加热温度:室温-120℃ 多模式多档可调 磁珠法试剂 中文操作系统,彩色液晶屏触控操作
内建15组模式程序(可存储 >500组程序)
磁珠法 磁珠法
样本用量 ul 200 // //
500 200 650 200 ~400
10
11
SuperPure System-32
核酸自动纯化系统-32 1. 最大容量:1000μl 2. 最大样品数:32检测/每次 3. 操作时间:30-50分钟/每次 4. 程式编辑功能 5. 全中文界面 6. 触控式面板 7. 加热功能 8. 紫外光杀菌功能 9. 尺寸:40cm× 40cm × 45cm(长× 宽× 高)
几家公司的核酸提取仪 器及试剂对比
1
© 2009 PerkinElmer
PerkinElmer 全自动核酸提取工作站-Pre-NAT
JANUS
仪器型号:Pre-NAT
仪器大小:长2300mm 宽810mm 高950mm
样本通量:1~96个
样本体积: 10ul~400ul
处理时间:原始管上机,96个样本提取