鸡胚
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鸡胚为一活的有机体,因此要严格 无菌操作,同时动作要仔细,以免造成 物理死亡。接种后24小时内死亡应不计 结果。
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流感病毒鸡胚培养法
福建省疾病预防控制中心 杨式芹
一、概况
1911年Rous和Murphy首先应用鸡胚 培养研究肉瘤病毒(Rous肉瘤)的繁殖。 1938年Goodpasture和Burnet等应用 鸡胚繁殖病毒、Cox应用卵黄囊培养立克 次氏体。
鸡胚培养法的优点:
1. 它的组织分化程度低,可选择适当途径 接种,病毒易复制,感染病毒的膜和液体 含大量病毒。 2. 是个整体,有神经血管的分布及脏器的 构造。 3. 来源充足,操作简单,通常是无菌的, 对接种的病毒不产生抗体。
(二)接种途径
1.尿囊腔接种:该途径一般用于流感、新城 鸡瘟病毒和腮腺炎的适应和传代。 2.羊膜腔接种:这途径主要用于临床材料 (如患者的鼻洗液及咽漱液)分离病毒。 3.卵黄囊接种:该接种途径主要用于抗流感 病毒药物实验。 4.绒毛尿囊膜—壳块培养法:该法可用于流 感病毒滴定、中和试验和药物实验。
二、鸡胚的结构与生理
鸡胚是由三个胚层发育起 来的,即外胚层,中胚层和内 胚层,它们构成胚胎的组织与 器官。
(约10日龄鸡胚的结构见图)
三、材料
(一)7~11日龄鸡胚
(二)孵卵箱
(三)检卵灯、开卵钻和卵盘 (四)其它
四、接种技术
(一)活胚检查
1.血管:活胚可见清晰的血管,有时可见血管搏 动,死胚血管模糊成淤血带或淤血块。 2.胎动:活胚可见明显的自然运动,尤其在转动 胚胎时,死胚见不到任何胎动,胚胎发红像出血样, 有的呈现黑块。 3.血管网是否丰满:发育好的鸡胚可见密布丰满 的血管网,也就是绒毛尿囊膜,死胚则见不到这一 现象。
鸡胚培养法的缺点:
1. 一般的病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指 征。 2. 卵黄中常常含有抗家禽病原体的母体抗体。 3. 某些细菌、衣原体和病毒能够从感染的母鸡传 递到鸡胚。 4. 通常鸡胚常常含有白血病病毒。 5. 在鸡食物中加入抗菌素,母鸡吃后会传递给鸡 胚,鸡胚就会产生对立克次体和衣原体感染的抵 抗。