可溶性果胶检测试剂盒(咔唑比色法)
咔唑比色法测定掺假蜂蜜中果胶的含量
咔唑比色法测定掺假蜂蜜中果胶的含量任雪梅;胡梅;周传静;王文特;吴裕健【摘要】A method for determination of pectin content in honey was established by carbazole colorimetry. The pectin was extracted by 63 ％hot ethonal to remove the sugar in honey. The results showed that the top grade concentrated sulphurie acid should be used during the experience. And the ethonal, which was used to dilute carbazole, should be pured. The recovery of pectin was 88.2％～ 94.6％ with the detectable limit of 0.15 mg/kg.%建立了咔唑比色法测定蜂蜜中掺假果胶含量的方法.采用63%热乙醇溶液洗除蜂蜜中的糖分,提取试样中的果胶.结果表明,试验过程中试剂要采用优级纯浓硫酸,配制咔唑显色剂的乙醇使用前要进行精制.半乳糖醛酸的加标回收率为88.2%-94.6%,检出限为0.15 mg/kg.【期刊名称】《山东农业科学》【年(卷),期】2011(000)003【总页数】3页(P100-102)【关键词】蜂蜜;果胶;掺假【作者】任雪梅;胡梅;周传静;王文特;吴裕健【作者单位】山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100;山东省产品质量监督检验研究院/国家加工食品质量监督检验中心,山东,济南,250100【正文语种】中文【中图分类】O656.31;S896.1蜂蜜是一种营养丰富、组成复杂的天然食品，它不仅能为人类提供各种营养元素以满足正常的生理需要，还有增进食欲、改善肠胃功能、治疗贫血、保护肝脏、提高人体免疫能力等多种功能，因此蜂蜜成为消费者青睐的营养保健品。
果胶的检测技术
3 果胶的检测技术在对果胶的研究中，通常以含量、酯化度、相对分子质量、凝胶度等作为评价指标。
3.1 果胶含量的测定目前，测定果胶含量的方法主要有：质量法、咔唑比色法、果胶酸钙滴定法和蒸馏滴定法。
果胶酸钙滴定法较适于纯果胶的测定，对于例如柑橘果皮这种有色样品，不易确定滴定终点；而蒸馏滴定法在蒸馏的时候部分糠醛会发生分解，影响回收率，故而运用较少。
所以，果胶含量的测定一般采用质量法和咔唑比色法。
近年来新的果胶含量检测方法——离子交换色谱法（Ion ex-change chromatogram，IEC）引起了人们的关注，其常用的色谱柱和检测器见表3。
吴玉萍等[1]研究了用高效液相色谱法测定烟草中果胶含量。
烟草中的果胶先采用盐酸水解，水解产生的半乳糖醛酸以Waters Sugar-Pak1钙型阳离子交换柱为固定相，0.05g/L EDTA钙钠水溶液为流动相，示差折光仪为检测器测定半乳糖醛酸含量，由半乳糖醛酸含量换算为果胶含量。
B.M. Yapo等[2]以高效阴离子色谱-脉冲安培检测（HPAEC-PAD）技术测定果胶含量。
采用脉冲安培检测器，离子色谱以CarboPacPA-100柱（250mm×4 mm i.d.）为固定相，流动相为0.1 mol/L NaOH 和0.17 M NaOAc，流速为1 mL/min；柱温30℃，测表3：检测果胶含量的离子交换色谱法3.2 果胶酯化度的测定自然界果实中天然存在的果胶都是高酯果胶，经酸或碱处理高酯果胶降低酯化度后可获得低酯果胶。
果胶中含甲氧基的最大理论值为16.3％，若该值以酯化度来表示是100％，则甲氧基含量与酯化度的转换计算式应是：酯化度= 甲氧基含量/16.3%。
果胶酯化度的检测技术由最早的比色法、滴定法发展到80年代的高效液相和气相、90年代的核磁共振和红外光谱等方法。
而近几年，拉曼光谱分析果胶的酯化度的方法也有报导。
Synytya等[4]用拉曼谱不仅可测定甲酯化程度，而且还可测定乙酰化程度。
果胶甲酯化程度试剂盒说明书
果胶甲酯化程度试剂盒说明书 微量法100T/96S注 意：正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：植物细胞壁中的果胶是植物初生细胞壁的主要成分，除了起结构支撑、物质运输等作用外，还具有抵抗逆境的作用。
果胶甲酯化程度影响了细胞壁的坚韧程度及其抗性。
测定原理：果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇，甲醇与2,4-戊二酮反应显色，在412nm 下测定吸光值；同时半乳糖醛酸在70℃下与浓硫酸反应生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸，5-甲酰基-2-呋喃甲酸与3,5-二甲基苯酚反应产生有色物质，在450nm 下有最大吸光值。
以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。
自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、酶标仪、96 孔板、恒温水浴锅、蒸馏水、硫酸。
试剂组成和配制：提取液：液体100mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体3mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体3mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体3mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体 2.5mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂五：粉剂×1 瓶，4℃避光保存；临用前加入22mL 试剂六充分溶解待用，用不完的试剂4℃避光保存。
试剂六：液体25mL×1 瓶，4℃保存。
试剂七：液体3mL×1 瓶，4℃保存。
试剂八：液体 2.5mL×1 瓶，4℃避光保存。
酶液提取：称取约0.1g 组织，加入1mL 蒸馏水，进行冰浴匀浆。
10000g 4℃离心10min，弃上清，留沉淀。
沉淀中加入1mL 提取液，混匀后90℃水浴2h，冷却至室温，10000g4℃离心10min，取上清待测。
测定操作表：1．甲醇生成量测定：试剂名称（μL）空白管测定管样本50提取液50试剂一25 25混匀，室温静置30min试剂二25 25试剂三20 20混匀，冰浴至紫色褪去，约需要15-30min试剂四20 20水60 60试剂五200 200混匀，60℃反应15min。
咔唑比色法测定果胶含量
咔唑比色法测定果胶含量-标准曲线的制作1方法原理方法基于果胶物质水解，生成半乳糖醛酸在强酸中与咔唑的缩合反应。
然后，对其紫红色呈色溶液进行比色定量。
2试剂(1)乙醇(化学纯)：无水乙醇和950mL·L-1乙醇。
(2)精制乙醇：取无水乙醇(化学纯)或950mL·L-1乙醇1000mL，加入Zn粉4g和硫酸(1∶1)4mL，置恒温水浴中回流10h后，用全玻璃仪器蒸馏。
馏出液每1000mL加入Zn粉和KOH各4g，进行重蒸馏。
(3) 1.5g·L-1咔唑乙醇溶液：称取化学纯咔唑0.150g，溶解于精制乙醇，并定容至100mL。
(4)标准半乳糖醛酸：以医药公司上海化学试剂采购供应站分装的L.Light出品α-D水解半乳糖醛酸作为标准半乳糖醛酸。
(5)浓硫酸(优级纯)(注2)。
(6)0.05mol·L-1HCl溶液。
3 操作步骤(1)半乳糖醛酸标准曲线的制作：准确称取α-D-水解半乳糖醛酸100mg，溶解于蒸馏水，并定容至100mL，混合后得1mg·mL-1的半乳糖醛酸原液。
移取上述原液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0mL，分别注入100mL容量瓶中，稀释至刻度，即得一系列浓度为10、20、30、40、50、60、70μg·mL-1的半乳糖醛酸标准溶液。
取30mm×200mm的硬质大试管7支，用吸管注入浓H2SO4各12mL。
置冰水浴中冷却，边冷却边分别沿壁徐徐加入上述不同浓度的半乳糖醛酸标准溶液各2mL，充分混合后，再置冰水浴中冷却。
然后，在沸水浴中加热10min，冷却至室温后，加入1.5g·L-1咔唑溶液各1mL，充分混和。
另以蒸馏水代替半乳糖醛酸标准溶液，依上法同样处理，作为试剂空白。
室温下放置30min后，用721型分光光度计，在波长530nm下，分别测定其吸光度(A)，以测得的吸光度(A)为纵座标，每mL标准溶液中半乳糖醛酸的含量为横座标，制作标准曲线。
咔唑比色法测定苹果渣提取液果胶含量的研究
通讯作者 ： 仇农学 ， 陕西师范大学食 品工程 系，１０２ ｍ ｉ ｏｘ ＿３ １ ２． ｍ ７０６． ａ＇ ｕｉ ８０＠１６ ｏ ｏ ｇ Ｌ ｙ ｎ ｃ
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原果胶检测试剂盒(咔唑比色法)
原果胶(PP)检测试剂盒(咔唑比色法)简介：天然果胶类物质以原果胶、果胶(Pectin)、果胶酸的形态广泛存在于植物的果实、根、茎、叶中，是细胞壁的一种组成成分，它们伴随纤维素而存在，构成相邻细胞中间层粘结物，使植物组织细胞紧紧黏结在一起。
原果胶是不溶于水的物质，但可在酸、碱、盐等化学试剂及酶的作用下，加水分解转变成水溶性果胶。
果胶(Pectin)又称多聚半乳糖醛酸，是由D-半乳糖醛酸以α-1,4糖苷键连接形成的直链状聚合物，本质上是一种线形的多糖聚合物，含有数百个脱水半乳糖醛酸残基。
原果胶是一种非水溶性的物质，在未成熟的果实或植物组织中果胶物质大多与纤维素结合以原果胶的形式存在，原果胶能使果实或其他植物组织坚硬、变脆。
Leagene 原果胶(PP)检测试剂盒(咔唑比色法)检测原理是果胶物质水解生成半乳糖醛酸，后者在硫酸溶液中咔唑进行缩合反应形成紫红色的化合物，该化合物呈色强度与半乳糖醛酸浓度成正比，该化合物颜色在反应内呈色最深，当反应液颜色最深时在波长处测定吸光度，通过与标准曲线比较，计算出样品中原果胶或可溶性果胶含量。
该试剂盒主要用于定量检测植物组织或果实中原果胶含量，亦可用于定量检测植物组织或果实中可溶性果胶含量，进而计算出总果胶含量(为原果胶含量与可溶性果胶含量之和)。
该25T试剂盒可以检测25-30左右个样本。
该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：编号名称TC212325TStorage试剂(A): 果胶标准(1mg/ml) 1ml 4℃避光试剂(B): SP Lysis buffer 2×500ml RT试剂(C): PP Lysis buffer 100ml RT使用说明书1份1、蒸馏水2、浓硫酸3、实验材料：桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织4、研钵或匀浆器5、试管6、离心机7、水浴锅8、比色杯9、分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、可溶性及原果胶提取：①取果实或其他植物组织，洗净，擦干，称取剪碎的新鲜样品，置于研钵或匀浆器。
咔唑比色法测定剑麻果胶含量
咔唑比色法测定剑麻果胶含量
丁建东;张雪红;姚先超;黄艳伟;林翠梧
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】2010(031)011
【摘要】采用咔唑比色法测定剑麻果胶粉中果胶含量的方法,对其测定条件作了详细的试验,获得了较佳的测定条件:浓硫酸用量为6.0mL,水解温度为70℃,水解时间为20min,0.15%咔唑无水乙醇溶液用量为0.5 mL,在室温下显色,显色时间为
30min.用于实际样品的测定时,结果较为满意.
【总页数】3页(P138-140)
【作者】丁建东;张雪红;姚先超;黄艳伟;林翠梧
【作者单位】广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西师范学院,化学与生命科学学院,广西,南宁,530001;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004;广西大学化学化工学院,广西,南宁,530004
【正文语种】中文
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比色法测定可溶性糖、果胶、半纤维素、纤维素含量
比色法测定可溶性糖、果胶、半纤维素、纤维素含量标准液配制1、1.00mg/mL葡萄糖标准液：秤取干燥至恒重的葡萄糖100mg，加水溶解定容至100mL，混匀。
2、1.00mg/mL木糖标准液：秤取干燥至恒重的木糖100mg，加水溶解定容至100mL，混匀。
3、1.00mg/mL半乳糖醛酸标准液：秤取干燥至恒重的半乳糖醛酸100mg，加水溶解定容至100mL，混匀。
试剂配制：1、0.5M 磷酸buffer（pH7）：7.01g K2HPO4·3H2O、2.61g KH2PO4溶于100mL 蒸馏水。
2、0.2% 蒽酮试剂：0.2g 蒽酮溶于100mL 浓硫酸。
3、A试剂：6g 苔黑酚（6.87g C7H8O2·H2O）溶于100mL 无水乙醇。
B试剂：0.1g FeCl3（0.17g FeCl3·6H2O）溶于100mL 37% 浓盐酸。
4、四硼酸钠/硫酸溶液：0.5g Na2B4O7溶（0.95g Na2B4O7·10H2O）于100mL 浓硫酸。
5、1.5mg/mL 间羟基联苯溶液：0.15g 间羟基联苯（3-phenylphenol）溶于100mL 5mg/mL NaOH。
6、氯仿-甲醇（1：1，v/v）7、DMSO-H2O（9：1，v/v）操作步骤样品65℃烘干3天，打碎。
1、磷酸buffer 提取可溶性糖(研磨)（1）将已过40目筛的样品在50°C 条件下烘干。
混匀，平行称取6 份0.1000g（左右）干重样品于15 ml离心管中。
（2）加入 5 ml pH=7的0.5M磷酸buffer，50°C 摇2 h, 2100 g 离心10 min,。
（3）收集上清于50 ml离心管中。
沉淀再用 5 ml buffer洗2 次，5 ml蒸馏水洗2 次。
收集所有上清于50 ml离心管中，定容测定C5、C6。
2. 氯仿-甲醇（Chloroform-methanol）提取脂类（1）于沉淀中加入5 ml氯仿-甲醇（1：1 v/v）, 用封口膜密封，在摇床中40°C（150转）振荡1 h,。
咔唑比色法测定玉米种皮中的果胶含量_李春明
作者单位:哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生检验学教研室,哈尔滨150001作者简介:李春明(1977-),男,吉林九台人,硕士在读,主要从事膳食纤维营养学研究。
文章编号:1001-0580(2004)04-0490-01 中图分类号:R115 文献标识码:B检验技术咔唑比色法测定玉米种皮中的果胶含量李春明,管春梅果胶是半乳糖醛酸的聚合多糖,对其测定的方法主要有重量法、容量法和比色法 1 ,其中比色法是通过测定样品中半乳糖醛酸的含量,再换算成果胶的含量。
本实验对比色法进行优化,确定最佳实验条件。
1 仪器与试剂1 1 仪器 721型分光光度计(上海第三分析仪器厂);电动离心机;恒温水浴箱。
试剂半乳糖醛酸标准溶液:称取半乳糖醛酸(1个结晶水,理论分子量212 16)54 64mg ,用重蒸馏水溶解,加入0 25ml 1mol/L N aOH 并定容至50ml,其浓度为1mg/ml,用时逐级稀释;咔唑(试剂级):0 1%咔唑乙醇溶液,将0 1g 经升华提纯的咔唑溶解于精制乙醇中,并稀释至100ml;5% -荼酚溶液:1 5g -萘酚用精制乙醇溶解并定容至30ml 。
2 方法2 1 条件实验 取1ml 60 g/ml 半乳糖醛酸标准溶液于10ml 比色管中,加入0 5ml 0 1%咔唑乙醇溶液及6ml 浓硫酸,混匀,立刻放入85 水浴5min,再冷却15min,于525nm 处测量A 值。
2 2 样品处理 10g 玉米种皮原料与50ml pH =2的HCl 溶液混合,在87~90 水浴锅中水浴1h,真空抽滤,得滤液44ml,用氨水调至pH =5,取3ml 滤液于比色管中,加入75 的95%乙醇溶液5ml,在75~85 水浴中加热12min,充分搅拌,移入10ml 离心管中,再加入95%乙醇定容至10ml,离心15min,弃去上清波,用63%乙醇将离心管中的沉淀洗入比色管中,定容至10ml,在85 水浴中加热10min,移入离心管,离心15min,弃去上清液,用63%乙醇反复洗涤沉淀、加热、离心,直至上清液穆立虚反应阴性,然后将制备的果胶沉淀用蒸馏水洗入20ml 比色管中,加入1ml 1mol/L 的NaOH 溶液,并用蒸馏水稀释至刻度,混匀,至少放置15min,并不时振荡,过滤后,滤液用于比色测定。
可溶性果胶(WSP)检测试剂盒说明书 微量法
可溶性果胶（WSP）检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC4125规格：100T/48S产品内容：提取液一：80%乙醇200mL，即将160mL无水乙醇和40mL蒸馏水混合，自备。
提取液二：液体50mL×1瓶，4℃保存。
提取液三：液体120mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：浓硫酸25mL×1瓶，自备。
试剂二：液体2.5mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体5mL×1支，4℃保存。
标准品：粉剂×1支，10mg半乳糖醛酸，4℃保存。
临用前加入0.943mL提取液三，配成50μmol/mL 的标准液，4℃保存。
产品简介：果胶(Pectin)是构成细胞初生壁和中胶层的主要成分，对细胞起着软化和黏合作用。
果胶间以Ca2+桥及其他离子键、氢键、糖苷键、酯键和苯环偶联的方式交联，通过不同的抽提方法可以提取各种形式的果胶，如水溶性果胶（WSP）、离子结合型果胶（ISP）和共价结合果胶（CSP）。
可溶性果胶在酸性条件下水解生成半乳糖醛酸，后者在硫酸溶液中与咔唑进行缩合反应形成紫红色的化合物，生成物质在530nm处有最大吸收峰。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、台式低温离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、丙酮、浓硫酸、无水乙醇和蒸馏水。
操作步骤：一、可溶性果胶的提取：取约0.1g样本，加入1mL提取液一，室温快速匀浆，95℃水浴20min，冷却至室温，4000g，25℃离心10min，弃上清。
沉淀加入1.5mL提取液一和丙酮交替各洗2遍（涡旋振荡2min左右，4000g，25℃离心10min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入1mL提取液二（去除淀粉）浸泡15小时，4000g，25℃离心10min，弃上清，加入2mL提取液三，充分匀浆。
8000g，4℃离心10min，取上清液待测。
实验1 果胶的提取及含量测定
2、仪器
① 分光光度计。 ② 25mL比色管。
3、试剂
① 99%乙醇。 ② 70%乙醇。 ③ 0.05 mol/L盐酸溶液。 ④ 0.5 mol/L氢氧化钠。 ⑤ 0.15%咔唑乙醇溶液：称取化学纯咔唑0.15g，溶解于精制乙 醇中并定容到100mL。咔唑溶解缓慢，需加以搅拌。 ⑥精制乙醇：取无水乙醇或95%乙醇1000mL，加入锌粉4g，硫 酸(1:1)4mL，在水浴中回流10h，用全玻璃仪器蒸馏，馏出液 每1000mL加锌粉和氢氧化钾各4g，重新蒸馏一次。 ⑦半乳糖醛酸标准溶液：准确称取半乳糖醛酸10mg，溶于蒸馏 水并定容到100mL，得浓度为0.1mg/mL半乳糖醛酸标准贮备液。 ⑧浓硫酸：优级纯。 ⑨ 5%苯酚水溶液
实验一 果胶的提取及含量测定
张莉莉
2015.10.20
果胶广泛存在于水果和蔬菜中，如苹果中含量 为0.7-1.5%（以湿品计），在蔬菜中以南瓜含量最 多（达7-17%）。
果胶的基本结构是以α-1,4糖苷键连接的聚半乳糖醛酸， 其中部分羧基被甲酯化，其余的羧基与钾、钠、铵离子结 合成盐。
在果蔬中，尤其是未成熟的水果和皮中，果胶 多数以原果胶存在，原果胶通过金属离子桥（如 Ca2+）与多聚半乳糖醛酸中的游离羧基相结合。原 果胶不溶于水，故用酸水解，生成可溶性的果胶， 再进行提取、脱色、沉淀、干燥，即为商品果胶。 从柑橘皮中提取的果胶是高酯化度的果胶（酯化度 在70%以上）。在食品工业中常利用果胶制作果酱、 果冻和糖果，在汁液类食品中作增稠剂、乳化剂。
② 提取果胶 a. 水溶性果胶提取：将预处理过的样品放入250mL
用咔唑比色法测定食品中的果胶实验
2、样品处理时应充分洗涤去除糖分，减少其存在对咔唑的呈色反应的影响。
3、在测定样液和制作样液标准曲线时，应使用相同规格、同批号的浓硫酸，以保证浓度一致，减少硫酸浓度对咔唑的呈色反应的影响。
4、样品提取液的测定
取果胶提取液，用水稀释到适当浓度(含半乳糖醛酸10～70μg/mL)。取2mL稀释液于50mL比色管中，以下按制作标准曲线的方法操作，测定吸光值。从标准曲线上查出半乳糖醛酸的浓度(μg/mL)。
5、计算（略）
四、注意事项
1、本法的测定结果以半乳糖醛酸表示，不同来源的果胶中半乳糖醛酸的含量不同，如甜橙为77．7％，柠檬为94．2％，柑橘为96％，苹果为72％～75％，若把结果换算为果胶的含量，可按上述关系计算换算系数。
果胶经水解可生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸在强酸中可与咔唑试剂发生缩合反应，生成紫红色化合物，该紫红色化合物的呈色强度与半乳糖醛酸含量成正比，故可通过测定吸光值对果胶含量进行定量。
此法适用于各类食品的果胶含量的测定，具有操作简便、快速、准确度高、重现性好等特点。
二、实验仪器：
分光光度计，恒温水浴锅，95%乙醇或无水乙醇等。
三、实验步骤：
1、样品处理（略） 8支50mL比色管，各加入12mL浓硫酸，于冰水浴中边冷却边缓缓依次加入浓度为0、10μg/mL、20μg/mL、30μ/ml、40μ/L、50μg/mL、60μg/mL、70μg/ml的半乳糖醛酸标准溶液2mL，充分混合后，再置于冰水浴中冷却。然后在沸水浴中准确加热10min，迅速冷却到室温，各加入0.15％咔唑试剂1mL。充分混合，室温下放置30min，以半乳糖醛酸含量为0的半乳糖醛酸标准溶液为空白，在530nm波长下测定吸光值，以半乳糖醛酸含量为纵坐标，吸光值为横坐标，绘制标准曲线。
果胶物质的测定
(2)果胶酯酸(Pectinic
acid)：它的基本结构是 多聚半乳糖醛酸，呈胶态。其中甲基酯的含 量是可变的。酯化程度100%的完全甲基化的 果胶酯酸，甲氧基(CH3O—)含量为16.32%。 按甲氧基含量的不同，果胶酯酸分为两类。 甲氧基含量大于7%的，叫作高甲氧基果胶(又 称果胶，Pectin)；甲氧基含量小于7%的，叫 作低甲氧基果胶(又称低酯果胶)。果胶酯酸与 糖和酸在适当条件下能形成凝胶。甚至，不 用加糖，只要有多价正离子存在，，低酯果 胶也可形成凝胶。果胶酯酸的游离羧基与金 属离子可形成正盐或酸式盐。
干燥样品
样品处理
测 定 方 法
新鲜样品
水溶性果胶的提取
提取果胶
总果胶的提取
测定
新 鲜 样 品
干 燥 样 品
盛有99 水浴沸腾回流 由于果胶分解酶作用， 装上回流 切片 ％乙醇 15min 果胶会迅速分解，将 冷凝器 的500ml 切片浸入乙醇中，钝 锥形瓶 化酶的活性 研细 筛选 称取5—10g样 加热乙醇 苯酚-硫酸法：取检液 品于烧杯中 1ml,置于试管中，加 入5％苯酚水溶液1ml，再加入硫酸5ml， 混匀，溶液呈褐色，证明检液中含有糖分 检验滤液 残渣磨碎并 布氏漏斗 冷却 冷却 是否呈糖 滴加 70 ％热 过滤 过滤 反应 乙醇 呈褐色 称取试 样3050g
(3)果胶酸(Pectic
acid)：它的基本结构是聚半 乳糖醛酸，呈胶态。它同果胶酯酸的差别是 其中的羧基是游离的，不以甲基酯的形式存 在，但实际限难得到无甲酯的果胶物质。通 常，把甲氧基含量为1%的，叫作果胶酸。天 然的果蔬，仅含有少量果胶酸。而在酶的作 用下，水溶性的果胶物质可以转变为果胶酸。 果胶酸的游离羧基与金属离子也形成正盐或 酸式盐。
咔唑比色法测定掺假蜂蜜中果胶的含量
Ｋｅ ｒ ｓ Ｈｏ ｅ ｙ ｗｏ ｄ ｎ ｙ；Ｐｅ ｔ ｃｉ ｎ；Ａｄ ｔ ｒｔｏ ｕｌ ａｉｎ ｅ
蜂 蜜是一 种营养 丰富 、 组成 复杂 的天然食 品 ，
法 ∞ 和滴定 法等 ， 两 法测 定 的结 果分 别 用果 胶 前 酸钙 和糠 醛 的 回收 率 表示 ， 法直 接得 到 半乳 糖 无
它不仅 能为人 类提供 各种营养 元素 以满 足正 常的
生理 需要 ， 有增 进 食欲 、 善肠 胃功 能 、 还 改 治疗 贫 血 、 护 肝脏 、 高人 体免 疫 能力 等多 种功 能 ， 保 提 因 此蜂蜜 成为消 费者青 睐的营养保 健 品。但掺伪 现
醛酸 的有 关信 息 ， 操作 比较 繁 杂 。滴 定 法适 合 且
ｔ ．Ｔ ｅｐ ｃｉ ｓｅ ｔ ｃｅ ｙ６ ％ ｈ ｔｅ ｏ ａ ｏｒｍｏ ｅｔｅｓ ｇ ｒｉ ｏ ｅ ．Ｔ ｅｒｓ ｌ ｈ ｗｅ ａ ｅ ｒ ｙ ｈ ｅ ｔ ｗａ ｘｒ ｔｄｂ ３ ｎ ａ ｏ ｔ ｎ ｌ ｅ ｖ ｕ ａ ｎ ｈ ｎ ｙ ｈ ｅｕｔ ｓ ｏ ｄ ｔ ｔｔ ｈ ｔ ｈ ｓ ｈ ｈ
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咔唑比色法测定剑麻果胶含量
多称重设 备有限公 司。
结的聚合物 ， 安全无毒 ， 具有 良好 的乳化 、 增稠 、 稳定和 胶凝作用 ， 广泛用于食 品 、 医药 、 化妆品 、 纺织 、 印染 、 冶
金、 烟草等行业 中【】 ｌ。果胶 含量的测定方 法主要有重 － ３ 量法 、 容量法和 比色法 。这些方法 中重 量法和容量 法操作繁琐 ， 且不 能表现果胶 中的半乳糖醛酸的含量 。
色 ， 色时 间 为 ３ ｍｎ 用 于 实 际样 品 的 测 定 时 。 显 ０ ｉ。 结果 较 为 满 意 。
关键 词 ： 咔唑 比 色法 ； 麻 果胶 ； 定 剑 测
Ｄｅｅ ｍｉ ｔｏ ｏ ｉａｌ ｃ ｉ Ｃｏ ｅ ｒ ａ ｏ ｅＣｏｏ ｉ ｔ ｉ ｅｈｏ ｔ ｒ ｎａ ｉｎ ｆＳ ｓ ｔｎ ｎｔｎｔ Ｃａ ｂ ｚ ｌ ｌｒ ｍｅｒ ｃＭ ｔ ｄ Ｐｅ ｂｙ
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果胶含量检测试剂盒说明书 微量法
果胶含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC1405规格：100T/48S产品内容：试剂一：标准液1mL×1支，4℃保存。
试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。
产品说明果胶是一种植物胶体，分布于果蔬类植物中，存在于植物的细胞壁和细胞内层。
果胶中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等，主要成分是半乳糖醛酸，其独特的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。
采用咔唑比色法测定果胶含量。
果胶水解成半乳糖醛酸，在硫酸溶液中与咔唑试剂缩合生成紫红色化合物，在530nm处有最大吸收峰。
测定样品中半乳糖醛酸的含量，即可确定果胶的含量。
需自备的仪器和用品研钵、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、浓硫酸和蒸馏水。
操作步骤：一、样品处理将组织样品捣碎，按照样品质量(g)和蒸馏水体积(mL)为1:5-10的比列（建议取约0.1g样品，加入1mL蒸馏水），充分匀浆，8000g、4℃离心10min，取上清液待测。
二、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至530nm处，蒸馏水调零，试剂一和试剂二37℃预热10min以上。
三、测定操作表（在EP管中加入下列试剂）试剂名称（μL）空白管标准管对照管测定管待测样本5050试剂一50蒸馏水5050试剂二505050混匀浓硫酸400400400400充分混匀，95℃水浴5min后，冷却至室温，取200μL置微量石英比色皿或96孔板中，测定530nm 处吸光值，空白管、标准管、对照管和测定管吸光值分别记为A1、A2、A3和A4。
若A大于1，需将待测样本用蒸馏水稀释（可稀释10倍或20倍）注意：空白管和标准管只要做一管，每个测定管需设一个对照管。
四、计算公式果胶含量(mg/mg prot)=(C标准×V1)×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(V1×Cpr)×稀释倍数=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷Cpr×稀释倍数果胶含量（mg/g鲜重）=(C标准×V1)×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)×稀释倍数=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷W×稀释倍数C标准：标准管浓度，0.05mg/mL；V1：加入样本体积，0.05mL；V2：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。
(word完整版)果胶的检测技术
3 果胶的检测技术在对果胶的研究中，通常以含量、酯化度、相对分子质量、凝胶度等作为评价指标。
3.1 果胶含量的测定目前，测定果胶含量的方法主要有:质量法、咔唑比色法、果胶酸钙滴定法和蒸馏滴定法。
果胶酸钙滴定法较适于纯果胶的测定，对于例如柑橘果皮这种有色样品，不易确定滴定终点;而蒸馏滴定法在蒸馏的时候部分糠醛会发生分解,影响回收率，故而运用较少。
所以,果胶含量的测定一般采用质量法和咔唑比色法。
近年来新的果胶含量检测方法—-离子交换色谱法（Ion ex—change chromatogram，IEC）引起了人们的关注，其常用的色谱柱和检测器见表3。
吴玉萍等[1］研究了用高效液相色谱法测定烟草中果胶含量。
烟草中的果胶先采用盐酸水解，水解产生的半乳糖醛酸以Waters Sugar-Pak1钙型阳离子交换柱为固定相，0。
05g/L EDTA钙钠水溶液为流动相，示差折光仪为检测器测定半乳糖醛酸含量，由半乳糖醛酸含量换算为果胶含量。
B。
M. Yapo等［2]以高效阴离子色谱-脉冲安培检测（HPAEC-PAD）技术测定果胶含量。
采用脉冲安培检测器，离子色谱以CarboPacPA-100柱(250mm×4 mm i。
d。
）为固定相,流动相为0.1 mol/L NaOH 和 0.17 M NaOAc，流速为1 mL/min；柱温30℃，3。
2 果胶酯化度的测定自然界果实中天然存在的果胶都是高酯果胶，经酸或碱处理高酯果胶降低酯化度后可获得低酯果胶.果胶中含甲氧基的最大理论值为 16。
3％,若该值以酯化度来表示是 100％，则甲氧基含量与酯化度的转换计算式应是：酯化度 = 甲氧基含量 /16.3％.果胶酯化度的检测技术由最早的比色法、滴定法发展到80年代的高效液相和气相、90年代的核磁共振和红外光谱等方法。
而近几年,拉曼光谱分析果胶的酯化度的方法也有报导.Synytya等［4]用拉曼谱不仅可测定甲酯化程度，而且还可测定乙酰化程度。
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可溶性果胶(SP)检测试剂盒(咔唑比色法)
简介：
天然果胶类物质以原果胶、果胶(Pectin)、果胶酸的形态广泛存在于植物的果实、根、茎、叶中，是细胞壁的一种组成成分，它们伴随纤维素而存在，构成相邻细胞中间层粘结物，使植物组织细胞紧紧黏结在一起。
原果胶是不溶于水的物质，但可在酸、碱、盐等化学试剂及酶的作用下，加水分解转变成水溶性果胶。
果胶(Pectin)又称多聚半乳糖醛酸，是由D-半乳糖醛酸以α-1,4糖苷键连接形成的直链状聚合物，本质上是一种线形的多糖聚合物，含有数百至约1000个脱水半乳糖醛酸残基，其相应的平均相对分子质量为50000~150000。
Leagene 可溶性果胶(SP)检测试剂盒(咔唑比色法)检测原理是果胶物质水解生成半乳糖醛酸，后者在硫酸溶液中咔唑进行缩合反应形成紫红色的化合物，该化合物呈色强度与半乳糖醛酸浓度成正比，该化合物颜色在反应1-2h 内呈色最深，当反应液颜色最深时在波长530nm 处测定吸光度，通过与标准曲线比较，计算出样品中果胶含量。
该试剂盒主要用于定量检测植物组织或果实中果胶含量。
该25T 试剂盒可以检测25-30左右个样本。
该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
自备材料：
1、 蒸馏水
2、 浓硫酸
3、 实验材料：桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织
4、 研钵或匀浆器
5、 试管
6、 离心机
7、 水浴锅
8、 比色杯
9、 分光光度计 编号 名称 TC2113 25T Storage 试剂(A): 果胶标准(1mg/ml) 1ml 4℃ 避光 试剂(B): SP Lysis buffer 2×500ml RT 试剂(C): SP Assay buffer 3ml 4℃ 避光 使用说明书 1份
操作步骤(仅供参考)：
1、可溶性果胶提取：
①取果实或其他植物组织，洗净，擦干，称取剪碎的新鲜样品0.2g，置于研钵或匀浆器。
②加入SP Lysis buffer，充分研磨或匀浆后转入10ml试管中。
用SP Lysis buffer冲洗研钵或匀浆器并转移至试管中，补加SP Lysis buffer。
③沸水浴，在煮沸过程中及时补加SP Lysis buffer，取出冷却至室温，离心，弃上清液。
重复该步骤，以去除样品中的糖分以及其他物质。
④取含有沉淀的试管，加入蒸馏水，水浴以溶解果胶。
取出冷却至室温，离心，将上清液转移至新试管中。
用少量蒸馏水洗涤沉淀，离心，一并将上清液转移至上述新试管中，加蒸馏水定容，即为可溶性果胶提取液。
计算：
以1-5号管系列果胶标准(10、20、30、40、50μg)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，直接计算直线回归方程。
组织样品的果胶(μg)={m×V T}/(W×V s)
式中：m=根据标准曲线求得的测定管果胶含量(μg)
V T=可溶性果胶提取液总体积(ml)
W=样品鲜重(g)
V s=加样时所用可溶性果胶提取液的体积(ml)=0.5
液体样品的果胶(μg/ml)=m×N/V
式中：m=根据标准曲线求得的测定管果胶含量(μg)
N=稀释倍数
V=加样时所用可溶性果胶提取液的体积(ml)=0.5
注意事项：
1、浓硫酸具有强腐蚀性，应小心操作，沿管壁缓慢加入。
2、取样量、试剂用量应根据果胶含量适当调整。
3、可溶性糖对测定结果有较大影响，应彻底去除样品中的可溶性糖。
4、SP Assay buffer应密闭避光保存，避免有效成分挥发。
5、SP Assay buffer的反应时间根据具体情况而定。
6、如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，但应考虑酶标仪的最大检测体
积。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
相关：
编号名称
CS0201细胞线粒体分离试剂盒
DC0032 Masson三色染色液
DM0007 瑞氏-姬姆萨复合染色液
NR0001 DEPC处理水(0.1%)
PS0013 RIPA裂解液(强)
TC1167 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)
TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)。