2016年CLSI-M100S主要更新内容解读

2016年CLSI M100S（第26版）主要更新内容解读
张雅薇? ? 王辉（通讯作者）
北京大学人民医院检验科
此文发表在《中华检验医学杂志》
2016年3月第39卷第3期，165-169建立和完善病原菌鉴定和体外药敏试验的标准化操作规程，是加强微生物室能力建设的基本要求之一。

其对优化临床药物选择、减缓耐药菌的产生具有重要意义。

CLSI 制定的药敏试验标准是我国实验室遵循的指导性文件。

作为CLSI批准的药敏试验标准（包括M02-A12、M07-A10和M11-A8）的补充文件，2016年M100-S26正式更名为M100S（第26版）。

本文将重点解读CLSI M100S（第26版）文件[1]中的主要更新内容，以供临床实验室参考。

一、常规试验及报告药物的更新
CLSI M100S（第26版）文件新增了多种目前新上市的新药如ceftolozane-他唑巴坦、奥利万星、泰地唑胺和特拉万星作为临床选择性报告的药物，并修订了几种抗菌药物的临床药敏报告组别，见表1。

注：a A组：常规测试并报告的药物。

b B组：常规测试，但选择性报告的药物。

c C组：补充性抗菌药物，选择性地报告。

d U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物。

e O组：其他药物，是指对微生物有作用，但在美国不常规要求测试的药物。

f其他非肠杆菌科：包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌（除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）。

二、药敏折点的相关更新
2016年CLSI M100S（第26版）文件修订了头孢唑林对肠杆菌科的纸片法和MIC折点，并建议将头孢唑林药敏结果用于预测口服头孢菌素的药敏。

当头孢唑林用于治疗由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌引起的非复杂性尿路感染时，建议使用新修订的折点，见表2，
折点建立基于
的给药方案为1g每12h；除非复杂性尿路感染外，当患者为其他感染时，仍沿用
M100-S25中头孢唑林对肠杆菌科的折点。

新版标准删除了下列药物对各菌种的折点：替卡西林和头孢噻吩对肠杆菌科的折点；替卡西林对铜绿假单胞菌；替卡西林和美洛西林对不动杆菌属；美洛西林、替卡西林和氨苄西林对其他非肠杆菌科（包括假单胞菌属和其他非苛养、非发酵糖革兰阴性杆菌，除外铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄食单胞菌）的折点。

同时也删除了美洛西林和替卡西林对厌氧菌的折点。

三、常规药敏试验、补充药敏试验、初筛试验、替代药物检测法和等效药物检测法
鉴定抗菌药物的敏感和耐药
M100S（第26版）增加了常规药敏试验、补充药敏试验、初筛试验、替代药物检测
法和等效药物检测法的说明，见表3～7。

1.常规药敏试验：用于临床常规检测的纸片扩散法、肉汤或琼脂稀释法。

2.补充（非常规）药敏试验：通过常规纸片扩散法、肉汤或琼脂稀释法以外的方法
检测某种或某类药物的敏感性或耐药性，且该方法无需额外试验确证药物的敏感性
或耐药性。

3.初筛药敏试验：结果用于预测，需要额外的试验确证药物的敏感性或耐药性。

4.替代药物检测法：当目标抗菌药物的药敏无法检测或替代药物的药敏操作优于目
标抗菌药物时，该药物可替代目标抗菌药物进行药敏试验。

5.等效药物检测法：可预测与其密切相关的同类药物的药敏结果，并通过减少多种
密切相关药物的药敏检测数量以提高检测效率。

四、福氏志贺菌和宋内志贺菌的流行病学临界值（epidemiological cutoff value, ECV）
流行病学临界值是CLSI M100-S25引入的新概念，指根据体外药敏表型（MIC值）来区分有无获得性和（或）突变耐药细菌，该MIC值即为ECVs。

2016年新增了阿奇霉素对福氏志贺菌和宋内志贺菌的ECVs。

当阿奇霉素抑菌圈直径≥16mm或MIC≤8mg/L 时，可以推断福氏志贺菌为野生型；当阿奇霉素抑菌圈直径≤15mm或MIC≥16mg/L
时，则该福氏志贺菌为非野生型。

此外，阿奇霉素对宋内志贺菌野生型和非野生型的流行病学临界值分别为MIC≤16mg/L和MIC≥32mg/L。

五、关于药敏质控的相关更新
2016年文件新增和修订了下列药物对部分质控菌株纸片扩散法和MIC法的质控范围，包括氨曲南-阿维巴坦、Delafloxacin、Gepotidacin、Levonadifloxacin和Lefamulin 等，见表8~9。

六、关于药敏试验操作和结果读取的建议
对于葡萄球菌属、肺炎链球菌、β溶血链球菌和草绿色链球菌，当通过微量肉汤稀释法检测氯霉素、克林霉素、红霉素、利奈唑胺、泰地唑胺和四环素的MIC时，细菌拖尾生长可能造成结果误读。

对于上述情况，CLSI建议读拖尾现象开始的最低浓度为其MIC值，应忽略细菌微量生长[3]。

当培养基中含有甲氧苄啶和磺胺时，拮抗剂可能使细菌微量生长，终点判读为80%抑制生长的药物浓度。

此外，当通过微量肉汤稀释法检测氯霉素、红霉素、利奈唑胺、泰地唑胺和四环素对肠球菌的MIC时，CLSI 建议将拖尾现象开始的最低浓度作为其MIC值，以避免拖尾现象影响判读终点。

此外，M100S（第26版）新增了某些药物（包括Cadazolid、Delafloxacin、Gepotidacin、Lefamulin、Levonadifloxacin和塞克硝唑）的溶剂和稀释剂选择，以及新型复合制剂（阿米卡星-磷霉素、头孢吡肟-他唑巴坦和亚胺培南-relebactam）的制备方法。

七、其他主要更新
CLSI M100S（第26版）未包括部分不常见细菌，而CLSIM45文件[4]提供了这些细菌药敏试验的标准化方法，包括药物选择、结果解释和质控。

新版M45文件新增了对气球菌属、孪生球菌属、乳球菌属、微球菌属和胶胨罗斯氏菌的药敏试验。

此外，M100S（第26版）文件附录A（药敏结果确证与微生物鉴定）将奥利万星、特拉万星和泰地唑胺加入肠球菌属、金黄色葡萄球菌、β溶血链球菌和草绿色链球菌的耐药表型检测中。

附录B新增某些细菌对部分药物的天然耐药情况，包括肠杆菌科细菌对泰地唑胺、奥利万星和特拉万星，梭菌属对氨基糖苷类，无害梭菌对万古霉素和氨基糖苷类，
拟杆菌属对氨基糖苷类、青霉素和氨苄西林，以及猫狗梭杆菌对氨基糖苷类和喹诺酮类天然耐药。

同时删除了铜绿假单胞菌对磷霉素的天然耐药。

参考文献
[1]Clinical and Laboratory Standards Institute. M100S. Performance Standards forAntimicrobial Susceptibility Testing: Twenty-Sixth Edition [S]. Wayne, PA:CLSI, 2016.
[2]Clinical and Laboratory Standards Institute. M100-S25. Performance Standardsfor Antimicrobial Susceptibility Testing: Twenty-Fifth Informational Supplement[S]. Wayne, PA: CLSI, 2015.
[3]Clinical and Laboratory Standards Institute. M07-A10—Methodsfor Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That GrowAerobically; Approved Standard-Tenth Edition [S]. Wayne. PA: CLSI. [4] Clinical and LaboratoryStandards Institute. M45 Methods for Antimicrobial Dilution and DiskSusceptibility Testing of Infrequently Isolated of Fastidious Bacteria [S].Wayne, PA: CLSI.
2020-2-8。