HE染色操作流程
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H E染色操作流程
公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]
HE染色操作流程
HE染色,即是苏木精-伊红染色法,是最常用的染色方法,在质量较佳的HE染色切片上,各种组织或细胞的一般形态结特点都可以观察到。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
[试剂材料]
1.试剂:%醇溶性伊红染液,改良的哈瑞(Harris)苏木素,%盐酸酒精溶液
伊红:
配制方法:中性红 0.5g,80%酒精100ml,将伊红溶于酒精内搅拌,全部溶解后即可使用。
苏木精:
配制方法:A液:苏木素1g,无水酒精10ml
B液:硫酸铝钾20g,蒸馏水200ml
两液分别溶解后混合,加热煮沸后,慢慢加入红色氧化汞,此时有大量气泡产生,故容器要大,以防液体溢出,然后将染液迅速冷却,冷却后过滤,并每100ml加入冰醋酸6ml,甘油10ml。
%盐酸酒精溶液
配制方法:盐酸,70%酒精100ml
2.材料:石蜡切片
[操作流程]
1.将石蜡切片置于烘箱中60℃烤1~2h;
2.石蜡切片常规二甲苯,乙醇脱蜡至水,
3.苏木素染10分钟,
4.流水冲洗,去余色,
5.0.7%盐酸乙醇分化数秒钟,
6.流水冲洗,切片变蓝约15分钟,
%乙醇30秒钟,
8.酒精性伊红染30秒,
95%乙醇30秒钟,
95%乙醇30秒钟,
100%乙醇30秒钟,
%乙醇30秒钟,
13.石碳酸二甲苯30秒钟,(1: 4石碳酸1-二甲苯4)
二甲苯30秒钟,
二甲苯30秒钟,
16.中性树胶封片。
[实验结果]:
镜下观察细胞核呈蓝色;细胞浆一般呈红色;胶原纤维呈不同程度的红色,红细胞呈亮红色;粘蛋白呈浅蓝色;钙化组织呈深蓝色等。
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