高中生物 第六章 蛋白质和DNA技术 6.2 DNA片段的扩

化钝市安居阳光实验学校学业达标测评(十五)

一、选择题

1．RNA引物的合成所需的酶是( )

A．DNA解旋酶B．DNA聚合酶

C．RNA聚合酶D．RNA解旋酶

【解析】细胞内DNA复制时的RNA引物是由RNA聚合酶催化形成的。

【答案】C

2．PCR过程与细胞内的DNA复制相比，主要有两点不同，它们是( )

①PCR过程需要的引物是人工合成的DNA单链

②PCR过程不需要DNA聚合酶

③PCR过程中DNA解旋不依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的

④PCR过程不需要解旋，直接以双链DNA为模板进行复制

A．①② B．①③

C．③④ D．②③

【解析】PCR过程与细胞内的DNA复制相比主要有两点不同：①是引物不同，PCR过程以DNA为引物，细胞内DNA复制时以RNA为引物。②是解旋的方法不同，PCR过程通过热变性解旋，DNA复制依靠解旋酶解旋。

【答案】B

3．PCR技术利用了DNA的________原理，来控制DNA的解聚与结合( ) A．特异性B．稳定性

C．热变性D．多样性

【解析】在PCR中，DNA的解聚与结合是通过热变性来完成的。

【答案】C

4．PCR仪实质上是一台自动调控温度的仪器，下列关于它调控不同温度的目的叙述错误的是( )

A．95 ℃，使DNA分子变性，解开螺旋

B．55 ℃，使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性

C．72 ℃，使DNA分子开始复制，延伸

D．72 ℃，使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性

【解析】72 ℃时，DNA分子在DNA聚合酶的作用下开始复制、延伸。

【答案】D

5．DNA在________nm的紫外线波段存在一强烈的吸收峰，其峰值的大小与DNA含量有关( )

A．220 B．240

C．260 D．280

【解析】DNA对紫外线的吸收峰值在260 nm处。

【答案】C

6．下图中PCR第二轮产物a、b、c、d分别是以PCR第一轮产物的哪一条单链DNA为模板复制产生的( )

A．②①③④ B．①③④②

C．①②④③ D．①②③④

【解析】以①链为模板复制而来的DNA应只含有引物Ⅰ(a)；以④链为模板复制而来的只有引物Ⅱ(d)；b、c是以②、③为模板复制而来的。

【答案】D

7．在PCR扩增DNA的实验中，根据设计，一分子DNA经30次循环后，应得到约230个DNA分子，但结果只有约210个DNA分子。出现该现象的原因可能是( )

①循环次数不够②TaqDNA聚合酶活力不够或其活性受到抑制③引物

不能与亲链结合④系统设计欠妥

A．①②③ B．②③④

C．①③④ D．①②③④

【解析】该现象属于在PCR扩增中假阴性现象。其原因有：(1)TaqDNA 聚合酶活力不够或其活性受到抑制导致催化效率降低，得到的产物比预期的少；

(2)引物设计不合理，可能不能与模板DNA结合，导致无法进行扩增；(3)提取的模板数量或质量不过关，可能不能起模板作用，也无法进行扩增；(4)PCR系统设置不妥，达不到预期的效果；(5)循环次数过少，产物的量比预期的少。

【答案】D

二、非选择题

8．PCR技术是把某一DNA片段在实验条件下，合成许许多多相同片段的一种方法，利用这种技术能快速而特异的扩增任何要求的目的基因或者DNA分子片段，“人类基因组计划”的研究中常用到这种技术。请结合有关知识，回答有关此技术的一些问题：

(1)PCR技术能把某一DNA片段进行扩增，依据的原理是____________。

(2)在实验条件下，DNA分子进行扩增，除了所要扩增的DNA片段外，还需要________、________和________等条件。

(3)某DNA片段有160个碱基，其中有腺嘌呤35个，若让该DNA分子扩增三次(即复制三次)至少需要腺嘌呤脱氧核苷酸和鸟嘌呤脱氧核苷酸的数目分别是________和________个。

【解析】(1)DNA分子具有双螺旋结构，扩增时DNA分子双链之间的氢键断裂，两条链彼此分开，各自吸收细胞内的脱氧核苷酸，按照碱基互补配对原则合成一条新链，然后新旧链联系起来，各自形成一个完整的DNA分子。

(2)PCR反应的条件：①稳定的缓冲液环境，②DNA模板，③分别与模板DNA 两条模板链相结合的两种引物，④A、T、G、C四种脱氧核苷酸。⑤耐热的DNA

聚合酶，一般用TaqDNA 聚合酶。⑥能严格控制温度变化的温控设备。

(3)在DNA 片段中，有腺嘌呤35个，可求出鸟嘌呤为160－35×2

2＝45个，

DNA 分子扩增三次需要腺嘌呤脱氧核苷酸35×(23

－1)＝245个，鸟嘌呤脱氧核苷酸45×(23

－1)＝315个。

【答案】 (1)DNA 分子具有双螺旋结构和DNA 分子中碱基的互补配对 (2)四种脱氧核苷酸 引物 DNA 聚合酶 (3)245 315