伊曲康唑脂质体体外抗真菌作用研究

伊曲康唑脂质体体外抗真菌作用研究

魏华1，刘艳1，董迪1，宋笑丹2，吴琳华1*

(1. 哈尔滨医科大学附属第二医院药学部；黑龙江省高校重点实验室，哈尔滨 150086；2. 哈

尔滨医科大学附属第一医院药学部，哈尔滨 150001)

摘要目的研究伊曲康唑脂质体体外抗深部真菌作用。方法参照美国临床实验室标准化协会(CLSI，曾经名为NCCLS)推荐的M27-A2方案微量液基稀释法，测定伊曲康唑脂质体、伊曲康唑注射液的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC)，采用平皿菌落计数法绘制杀菌曲线。结果伊曲康唑脂质体与伊曲康唑注射液相比，对56株受试菌株的MIC、MFC 和杀菌曲线相似。结论伊曲康唑脂质体保持了与市售伊曲康唑注射液相似的体外抑菌、杀菌活性，具有良好的体外抗真菌作用。

关键词伊曲康唑；脂质体；最小抑菌浓度(MIC)；最小杀菌浓度(MFC)；杀菌曲线In Vitro Antifungal Activity of Itraconazole Liposome

WEI Hua1，DONG Di1，SONG Xiao-dan2，WU Lin-hua1*

(1. Department of Pharmacy, the Second Affiliated Hospital of Harbin Medical University, Key

Laboratory of College in Heilongjiang Province, Harbin 150086, China; 2. Department of Pharmacy, the First Affiliated Hospital of Harbin Medical University, Harbin 150001, China)

ABSTRACT：OBJECTIVE To study the antifungal activity of Itraconazole Liposome in vitro. METHODS According to the reference M27-A2 broth microdilution method recommended by the clinical and laboratory standards institute (CLSI; formerly NCCLS) subcommittee, assay the minimal inhibitory concentration (MIC) and the minimal fungicidal concentration (MFC) of Itraconazole Liposome and Itraconazole Injection, killing curve was drown by calculating the colony number . RESULTS MIC, MFC and killing curve of Itraconazole Liposome against 56 fungi were similar to those of Itraconazole Injection in experiments. CONCLUSION Itraconazole Liposome retained similar antifungal activity as Itraconazole Injection. Itraconazole Liposome has significant action in inhibiting fungi and fungicidal effect and excellent antifungal activity in vitro study experiments.

KEY WORDS：itraconazole；liposomes ;the minimal inhibitory concentration (MIC) ;the minimal fungicidal concentration (MFC) ;killing curve

作者简介：魏华，女，硕士研究生

* 通讯作者：吴琳华，女，博士，教授，硕士生导师Email：wulinhua1985@

所属专业：药剂学

伊曲康唑（itraconazole，ITZ）是三唑类广谱抗真菌药物，通过抑制真菌细胞膜必需成分麦角固醇的生物合成而发挥其抗真菌作用[1]，对深部真菌感染疗效较好[2]，是近数十年来抗真菌药物治疗的一个很大进展[3]。伊曲康唑注射液长期大量应用会造成体内药物蓄积，将伊曲康唑制成脂质体的剂型可以更好地发挥其疏水性，减少用药剂量，提高其生物利用度，提高伊曲康唑在靶器官的浓度[4]。本实验考察了伊曲康唑脂质体对临床常见五种深部真菌体外抗真菌活性，并与市售伊曲康唑注射液进行比较，为进一步开发伊曲康唑脂质体提供实验依据。

1 材料

1.1药物与试剂

伊曲康唑原料药(寿光富康制药有限公司，纯度99.0%，批号：070308)；伊曲康唑脂质体(本室自制)；伊曲康唑注射液(比利时杨森公司，规格：每支25 mL，含伊曲康唑0.25 g，批号：7DB0W01); TritonX-100 (Sigma公司)；卵磷脂(北京奥博星生物技术责任有限公司，批号：20070412)；胆固醇(北京奥博星生物技术责任有限公司，批号：20071108)；二甲基亚砜 (Beyotime分装，碧云天生物技术研究所)；吗啡啉丙磺酸(广州威佳公司)；RPMI-1640粉末(Gibco公司)。

1.2菌种

白色念珠菌16株，克柔念珠菌10株，光滑念珠菌10株，近平滑念珠菌10株，热带念珠菌10株，均为临床分离株，菌株经特殊试验鉴定后保存在-80℃冰箱内直到使用。药敏质控的标准菌株近平滑念珠菌ATCC22019、克柔念珠菌ATCC6258。以上菌种均由哈尔滨医科大学附属第二医院检验科提供。

1.3 培养基

RPMI1640液体培养基: RPMI1640粉末10.4 g溶解于900 ml双蒸水中，加入MOPS 34.53 g (使其终浓度为0.165 mol·L-1)，搅拌溶解。用1 mol·L-1氢氧化钠溶液调pH值至7.0 (25 ℃)，定容至1000 ml，用0.22 µm无菌微孔滤膜过滤，4 ℃保存备用。

沙堡氏琼脂培养基(SDA)：葡萄糖2%、蛋白胨1%、琼脂2%，蒸馏水配制，灭菌后备用。

1.4 仪器

生物安全柜(上海跃进医疗器械厂)；BUCHIEL161旋转蒸发仪(瑞士布琪有限公司)；KQ3200E医用超声波清洗器(昆山市超声仪器公司)；DHP-2000型恒温培养箱(天津市华北实验仪器有限公司)；涡旋混合器(天津市富兰斯电子科贸有限公司)；XB-K-25型血细胞计数板(浙江省玉环县求精医用仪器厂)；8001-75型电子显微镜(北京永新诺华科技有限公司)。