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分子生物学 2

分子生物学一、名词解释：1、melting temperature ( Tm ):将核酸加热变形过程中，紫外光吸收值达到最大值50%时，的温度称为核酸的解链温度，由于这一现象和结晶的溶解类似，又称溶解温度。

2、C value paradox：C值矛盾，指生物基因组的大小同生物在进化上所处地位的高低没有绝对的相关性的现象。

3、Exon：外显子，这个区域的DNA包含编码信息,构成成熟mRNA。

4、semi-conservation replication：DNA半保留复制，指的是在复制时，DNA两条链解开，以每条链为模板，按照碱基互补配对原则合成互补链，这样形成的两个子代DNA分子与原来的亲代DNA分子完全相同，每个子代DNA分子中各有一条链来自亲本，一条链为新合成的。

5、promoter：启动子，在起始阶段，RNA聚合酶结合到位于基因起始上游处特殊序列的双链DNA上的特殊序列。

6、open reading frame ( ORF )：开放阅读框，无论是在原核生物中还是真核生物中，mRNA都具备至少含有一个由起始密码子开始、以终止密码子结束的一段连续的核苷酸序列。

7、gene family：基因家族，某一祖先基因由于重复和突变产生的一系列基因8、renaturation：DNA复性，指变性的DNA分子中两条彼此分开的多核苷酸链间碱基重新配对，形成双螺旋的过程。

9、cistron：顺反子，即结构基因，为决定一条多肽链合成的功能单位。

比传统基因概念更小的基本功能单位10、Pseudogene：假基因，与有关功能的基因在核苷酸顺序组成上非常相似，却不具有正常基因的功能。

11、Okazaki fragment ：冈崎片段，DNA复制中先合成较短片段，再由连接酶连成大分子DNA。

12、Primer：引物，一小段单链的DNA或RNA片段。

13、Klenow fragment：克列诺片段，DNA聚合酶I经枯草杆菌蛋白酶处理后产生的大片段。

(完整word版)医学分子生物学名词解释-2

1.转录泡（三元复合物）：转录泡是由RNA聚合酶核心酶、DNA模板链以及转录形成的RNA新链三者结合形成的转录复合物.在转录的延伸阶段，RNA聚合酶使DNA双螺旋解链，暴露出长度约为17bp的局部单链区，因外形酷似泡状结构故称之为转录泡2.3.密码子：mRNA上每3 个核苷酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸，这 3 个核苷酸称为密码,也叫三联子密码4.摆动假说：在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以”摆动"，因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子.5.SD序列：位于原核生物起始密码子上游7～12个核苷酸处的保守区，该序列能与16SrRNA的3端互补，促使mRNA与核糖体的结合，与翻译的起始有关。

6.校正tRNA：校正tRNA通过改变反密码子区校正突变。

可分为无义突变的校正RNA和错义突变的校正RNA、移码突变的校正RNA。

7.无义突变:在蛋白质的结构基因中，一个核苷酸的改变使代表某个氨基酸的密码子变成终止密码子（UAG、UGA、UAA),使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽的突变，叫做无义突变.8.错义突变:错义突变是由于结构基因中某个核苷酸的变化而使一种氨基酸的密码变成另一种氨基酸的密码.9.移码突变：在正常地DNA分子中，碱基缺失或增加非3地倍数，造成这位置之后的一系列编码发生移位错误的改变,这种现象称移码突变。

10.可读框:可读框是指mRNA上从起始密码子到终止密码子的一段序列.11.信号肽：常指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移(定位）的N—末端氨基酸序列（有时不一定在N端）。

12.分子伴侣:一类能帮助其他蛋白质进行正确组装、折叠、转运、介导错误折叠的蛋白质进行降解的蛋白。

当蛋白质折叠时,它们能保护蛋白质分子免受其它蛋白质的干扰。

很多分子伴侣属于热休克蛋白（例如HSP-60）,它们在细胞受热时大量合成.热激可导致蛋白质稳定性降低，增加错误折叠的几率,因此在受到热刺激时,细胞中的蛋白质需要更多热休克蛋白的帮助。

分子生物学-2_真题-无答案

分子生物学-2(总分100,考试时间90分钟)一、判断题1. 用重组修复和SOS修复的方式修复DNA损伤，在修复完成后都会产生较高的基因突变概率。

A. 正确B. 错误2. DNA错配修复不需要消耗能量。

A. 正确B. 错误3. 紫外线照射损伤DNA的主要原因是形成了嘧啶二聚体。

A. 正确B. 错误4. 只有DNA聚合酶Ⅰ参与了大肠杆菌的错配修复过程。

A. 正确B. 错误5. 点突变不会造成移码突变。

A. 正确B. 错误6. 切除修复不能修复嘧啶二聚体造成的DNA损伤。

A. 正确B. 错误7. 大肠杆菌的DNA同源重组修复不需要DNA聚合酶。

A. 正确B. 错误8. 核苷酸的插入或缺失突变不一定会造成移码突变。

A. 正确B. 错误9. 碱基类似物造成DNA突变的主要原因是其掺入DNA后抑制了DNA复制。

A. 正确B. 错误10. 真核生物的DNA错配修复需要PCNA的参与。

A. 正确B. 错误11. 大肠杆菌的错配修复机制能修复所有可能的碱基错配。

A. 正确B. 错误12. DNA损伤的光复活修复过程需要内切酶的参与。

A. 正确B. 错误13. 镰状细胞贫血是由于血红蛋白β链基因发生了缺失突变。

A. 正确B. 错误14. 胸腺嘧啶二聚体可以使DNA聚合酶失活，因而阻碍了DNA合成。

A. 正确B. 错误15. 紫外线照射不会造成DNA的单碱基突变。

A. 正确B. 错误16. 通常情况下SV40基因组的突变率比HIV低。

A. 正确B. 错误17. 参与大肠杆菌SOS修复的DNA聚合酶是DNA聚合酶Ⅲ。

A. 正确B. 错误18. DNA修复过程通常需要DNA连接酶。

A. 正确B. 错误19. DNA中的碱基G如果发生脱氨基反应将导致DNA发生突变。

A. 正确B. 错误20. 着色性干皮病人的DNA错配修复系统存在缺陷。

A. 正确B. 错误二、选择题1. 以下哪一项不会引起插入/缺失(insertion/deletion)突变?A. 胞嘧啶的脱氨基作用B. DNA复制过程中发生的错误C. 转座作用D. 吖啶的诱变作用2. 由于碱基突变使编码Cys的密码子TGC突变为TGA，这种突变称为：A. 无义突变B. 错义突变C. 沉默突变D. 移码突变3. 下列哪种因素不会诱发DNA突变：A. 放射性同位素辐射B. 紫外线C. 亚硝酸盐D. 饱和脂肪乳剂4. 亚硝酸能够诱导DNA分子中碱基的哪一类反应：A. 嘧啶二聚体B. 脱氨基C. 烷基化D. 羟基化5. 尿嘧啶糖苷酶的功能是：A. 切除RNA分子中的尿嘧啶B. 切除RNA分子中的尿苷酸C. 切除DNA分子中的尿苷酸D. 切除DNA分子中的尿嘧啶6. 以下有关大肠杆菌SOS反应激活过程的描述哪一项正确：A. DNA损伤激活RecA，RecA激活LexA成为转录激活蛋白B. DNA损伤激活RecA，RecA诱导降解转录抑制蛋白LexAC. DNA损伤激活转录激活蛋白LexA，LexA诱导降解RecAD. DNA损伤激活转录抑制蛋白LexA，LexA诱导降解RecA7. 原核细胞DNA的甲基化位点主要是在以下哪种序列上，为错配修复系统提供了区分母链与子链的标签：A. CpGB. GA TCC. FAATD. TGAC8. 原核生物中主要负责DNA修复的是以下哪一类DNA聚合酶：A. DNA polymerase ⅠB. DNA polymerase ⅡC. DNA polymerase ⅢD. Klenow9. 以下哪类化合物最易造成DNA的插入或缺失突变：A. 硫酸二甲酯B. 5-溴尿嘧啶C. 吖啶衍生物D. 乙基乙磺酸10. 以下有关胸腺嘧啶二聚体的说法错误的是：A. 胸腺嘧啶二聚体的出现不会造成DNA复制的终止B. 细胞内有多种修复机制可以修复胸腺嘧啶二聚体C. 胸腺嘧啶二聚体是DNA复制过程中产生的D. 胸腺嘧啶二聚体的光复活修复机制在真核与原核生物中普遍存在11. 切除修复可以修复以下哪种类型的突变：A. 胸腺嘧啶二聚体B. 插入突变C. 缺失突变D. DNA片段倒转12. 以下哪一项不是：RecBCD的活性：A. 外切酶B. DNA解链酶C. A TP酶D. 蛋白酶13. 以下哪种酶或蛋白质不会在大肠杆菌SOS反应中出现：A. RecAB. RecBCDC. DNA聚合酶VD. LexA14. 以下哪种修复机制不需要DNA聚合酶活性：A. 光复活修复B. SOS修复C. 碱基切除修复D. 核苷酸切除修复15. 大肠杆菌的SOS反应中，负责DNA合成的是：A. DNA聚合酶ⅠB. DNA聚合酶ⅢC. DNA聚合酶ⅣD. DNA聚合酶Ⅴ16. 以下哪一项是硫酸二甲酯致使DNA损伤的作用途径：A. 脱氨基作用B. DNA链交联C. 脱碱基作用D. 碱基烷基化17. 哺乳动物细胞的Ku70蛋白和Ku80蛋白参与了以下哪一类DNA修复过程：A. 错配修复B. 双链DNA断裂修复C. 碱基切除修复D. 核苷酸切除修复18. 以下哪一类不属于DNA的自发损伤：A. 碱基自发脱氨基B. 碱基自发脱嘌呤C. DNA复制中产生的错配碱基D. 紫外线照射产生的嘧啶二聚体19. 哺乳动物DNA损伤发生后，细胞内哪类蛋白质表达会上升：A. DNA聚合酶B. DNA连接酶C. P53D. RNA聚合酶20. 以下哪种基因突变对大肠杆菌来说最有可能是致死性的：A. DNA聚合酶ⅠB. dUTPaseC. DNA甲基化酶D. LexA。

分子生物学课后习题答案 2)

分子生物学课后习题答案(2)《现代分子生物学》第四次作业1、简述原核生物和真核生物mRNA的区别。

答：①原核生物mRNA常以多顺反子的形式存在。

真核生物mRNA一般以单顺反子的形式存在。

②原核生物mRNA的转录和翻译不仅发生在同一个细胞空间里，而且这两个过程几乎是同步进行的。

真核生物mRNA的合成和功能表达发生在不同的空间和时间范畴内。

③原核生物mRNA半衰期很短。

真核生物mRNA的半衰期较长。

④原核与真核生物mRNA的结构特点也不同：原核生物mRNA的5’端无帽子结构，3’端没有或只有较短的poly A结构。

真核生物mRNA的5’端存在帽子结构，且绝大多数具有poly A结构。

2、大肠杆菌的终止子有哪两大类？请分别介绍一下它们的结构特点。

答：大肠杆菌的终止子可以分为不依赖于p因子（内在终止子）和依赖于p因子两大类。

不依赖于p因子的终止子结构特点：1.终止位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区，由这段DNA转录产生的RNA容易形成发卡式结构。

2.在终止位点前面有一端由4—8个A组成的序列，所以转录产物的3’端为寡聚U，这种结构特征的存在决定了转录的终止。

依赖于p因子的终止子的结构特点：1.转录的RNA也具有发夹结构，但发夹结构后无poly(U)。

2.形成的发夹结构较疏松，茎环上不富含GC。

3.终止需要ρ因子的参与。

4.与不依赖于ρ因子的终止一样，终止信号存在于新生的RNA 链上而非DNA链上过程。

3、真核生物的原始转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟的mRNA，以用作蛋白质合成的模版？答：1.装上5′端帽子；2.装上3′端多聚A尾巴；3.剪接：将mRNA前体上的居间顺序切除，再将被隔开的蛋白质编码区连接起来。

剪接过程是由细胞核小分子RNA参与完成的，被切除的居间顺序形成套索形；4.修饰：mRNA分子内的某些部位常存在N6-甲基腺苷，它是由甲基化酶催化产生的，也是在转录后加工时修饰的。

4、简述Ⅰ、Ⅱ类内含子的剪接特点。

分子生物学试题及答案2

分子生物学试题及答案2一、单项选择题（每题2分，共10分）1. DNA分子的双螺旋结构是由哪位科学家提出的？A. 牛顿B. 达尔文C. 沃森和克里克D. 孟德尔答案：C2. 以下哪个不是DNA聚合酶的功能？A. 复制DNAB. 修复DNA损伤C. 转录mRNAD. 合成DNA答案：C3. 在中心法则中，信息流的方向是什么？A. DNA→DNAB. DNA→RNA→蛋白质C. RNA→DNAD. 蛋白质→RNA答案：B4. 以下哪种分子不是RNA分子？A. mRNAB. tRNAC. rRNAD. DNA答案：D5. 基因编辑技术CRISPR-Cas9中，Cas9蛋白的作用是什么？A. 识别并结合到目标DNA序列B. 切割RNA分子C. 转录mRNAD. 翻译蛋白质答案：A二、多项选择题（每题3分，共15分）1. 下列哪些是真核生物mRNA的加工过程？A. 加帽B. 剪接C. 多聚腺苷酸化D. 甲基化答案：ABC2. DNA复制过程中涉及的酶有哪些？A. DNA聚合酶B. DNA连接酶C. DNA解旋酶D. DNA修复酶答案：AC3. 以下哪些是基因表达调控的机制？A. 转录因子的结合B. DNA甲基化C. 组蛋白修饰D. RNA干扰答案：ABCD4. 以下哪些是RNA分子的功能？A. 作为蛋白质合成的模板B. 催化生化反应C. 作为遗传物质D. 参与基因表达调控答案：ABD5. CRISPR-Cas9技术可以用于哪些应用？A. 基因敲除B. 基因插入C. 基因编辑D. 基因表达分析答案：ABC三、填空题（每空1分，共20分）1. DNA分子的双螺旋结构由两条反向平行的_________链组成。

答案：多脱氧核苷酸2. 在转录过程中，RNA聚合酶识别的DNA序列是_________序列。

答案：启动子3. 真核生物的mRNA在细胞核中经过剪接后，会加上一个_________结构。

答案：5'端帽子4. 在蛋白质合成过程中，tRNA分子的_________端携带氨基酸。

《分子生物学》习题及答案解析.doc

分子生物学习题及答案第1章序言1.简述孟德尔、摩尔根和Waston等人对分子生物学发展的首要奉献。

孟德尔是遗传学的奠基人，被誉为现代遗传学之父。

他经过豌豆试验，发现了遗传学三大根本规律中的两个，别离为别离规律及自在组合规律。

摩尔根发现了染色体的遗传机制，创建染色体遗传理论，是现代试验生物学奠基人。

于1933年因为发现染色体在遗传中的效果，赢得了诺贝尔生理学或医学奖。

Watson于1953年和克里克发现DNA双螺旋结构一（包含中心法则）,取得诺贝尔生理学或医学奖，被誉为''DNA之父”。

2.写出DNA、RNA、mRNA和siRNA的英文全名。

DNA： deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸RNA： ribonucleic acid 核糖核酸mRNA： messenger RNA 信使RNAtRNA： transfer RNA 转运RNArRNA： ribosomal RNA 核糖体RNAsiRNA： small interfering RNA 搅扰小RNA3.试述''有其父必有其子”的生物学实质。

其生物学实质是基因遗传。

子代的性状由基因决议，而基因因为遗传的效果，其基因的一半来自于父方，一般来自于母方。

4.早期首要有哪些试验证明DNA是遗传物质？写出这些试验的首要进程。

1）肺炎链球菌转化试验：表面光滑的S型肺炎链球菌（有荚膜多糖一致病性）；表面粗糙R型肺炎链球菌（无荚膜多糖）。

%1活的S型一打针一试验小鼠一小鼠死亡%1死的S型（经烧煮灭火）一打针一试验小鼠一小鼠存活%1活的R型一打针一试验小鼠一小鼠存活%1死的S型+活的R型一试验打针一小鼠死亡%1别离被杀死的S型菌体的各种组分+活的R型菌体一打针一试验小鼠一小鼠死亡（内只要死的S型菌体的DNA转化R型菌体导致致病菌）*DNA是遗传物质的载体2）噬菌体侵染细菌试验%1细菌培育基35S符号的氨基酸+无符号噬菌体一培育1-2代一子代噬菌体简直不含带有35S符号的蛋白质%1细菌培育基32N符号的核昔酸+无符号噬菌体一培育1-2代一子代噬菌体含有30% 以上32N符号的核昔酸*噬菌体传代进程中发挥效果的或许是DNA而不是蛋白质。

分子生物学实验_2

1 实验概述分子生物学试验指导1 实验概述1.1 实验目的实验过程中, 主要通过碱裂解法提取质粒DNA.对质粒进行双酶切、并连接构建成重组DNA分子、大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备、感受态细胞的转化以及目的蛋白质gfp 的正常表达, 来完成一系列分子生物学基础实验。

通过本实验, 学习并掌握碱裂解法、双酶切、氯化钙法制备感受态细胞的制备及采用α互补现象进行重组DNA鉴定的原理和方法。

1.2 实验原理质粒是细菌内共生型遗传因子, 它能在细菌中垂直遗传并且赋予宿主细胞特定的表型, 经过改造的基因工程质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的重要媒介, 这种基因的运载工具在基因工程中具有极广泛的用途。

本次实验中, 分子克隆质粒载体T所携带的外源基因是gfp绿色荧光蛋白, 实验的最终目的是将gfp基因插入表达载体P中, 组成重组子, 并导入到大肠杆菌细胞中并诱导其表达, 培养出绿色的大肠杆菌菌落。

为此, 我们要利用碱变性法将大肠杆菌中的质粒DNA提取出来, 并通过HandⅢ和NCO Ⅰ两种酶的双酶切作用, 从而获得目的外源基因片段gfp和表达载体-P质粒的DNA, 然后通过连接酶连接后形成重组子, 并通过氯化钙法导入大肠杆菌感受态细胞中, 让其在含有Amp和IPTG的LB琼脂平板上生长繁殖, 最后通过观察大肠杆菌能否在含有Amp 和IPTG的LB平板上长出绿色的菌落, 来判断gfp基因工程菌的构建效果。

广东工业大学现代分子生物技术实验报告2 实验流程2.1 实验安排表实验内容时间安排质粒T、质粒P的提取 3 h电泳检测质粒提取效果30～45 min确定质粒提取成功后, 利用HindⅢ、NcoⅠ这2种限制性内10～11 h切酶分别对质粒T、质粒P进行双酶切电泳检测酶切情况, 若酶切成功, 利用试剂盒回收DNA片断45 min利用T4 DNA连接酶进行连接14～16 h大肠杆菌感受态细胞的制备 3 h转化（gfp基因导入受体细胞） 2 h 重组子的筛选（在含有Amp的LB平板上筛选）12～16 h诱导表达与鉴定（加入诱导物IPTG诱导gfp表达）12～16 h2.2 实验流程图①质粒DNA的提取与纯化碱液裂解法；乙醇洗涤纯化（T-gfp质粒作为克隆载体、P32作为表达载体）②通过观察电泳图片, 来鉴定T、P两种质粒DNA的提取结果琼脂糖凝胶电泳的方法③对成功提取的T、P两种质粒DNA进行双酶切限制性内切酶Han dⅢ、NcoⅠ④T-gfp、P两种质粒的DNA片段的回收割胶（试剂盒快速回收）用刀片把凝胶上的目的DNA条带割取下来3 实验操作方法⑤连接T-gfp、P两种质粒的目的DNA T4噬菌体DNA连接酶（重组DNA分子的构建）⑥大肠杆菌感受态细胞的制备氯化钙法⑦将连接后的重组DNA分子导入大肠杆菌感受态细胞感受态细胞的转化⑧重组子的筛选含有AMP r的重组子才能在AMP平板上生长⑨将含有gfp、AMP r两种目的基因的重组子进行诱导表达重组DNA分子的鉴定在平板上加入底物IPTGgfp绿色荧光蛋白基因被诱导表达⑩gfp基因只有在诱导物IPTG和底物X-gal的存在时, 才能正常表达, 在平板上生成绿色的菌落构建出含有gfp绿色荧光蛋白基因的工程菌图2.1 gfp基因工程菌的构建与表达广东工业大学现代分子生物技术实验报告3实验操作方法3.1 质粒DNA的提取3.1.1 实验概述1.分子克隆载体载体是指运载外源DNA有效进入受体细胞内的工具。

(整理)分子生物学 (2)

名词解释基因：产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。

基因组：生物有机体的单倍体细胞中的所有DNA，包括核中的染色体DNA和线粒体、叶绿体等亚细胞器的DNA。

基因组大小：是指一个基因组中所拥有的DNA含量，一般以重量计算，单位通常是皮克（10-12克），写成pg；有时也用道耳顿；或是以核苷酸碱基对的数量表示，单位为百万计，写成Mb或Mbp。

1pg等于978Mb。

C值矛盾：也称C值反常现象，C值谬误。

C值，通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量，以每细胞内的皮克（pg）数表示。

而C值矛盾则是C值往往与种系的进化复杂性不一致的现象，即基因组大小与遗传复杂性之间没有必然的联系，某些低等的生物C值却很大，如一些两栖动物的C值甚至比哺乳动物还大。

核型：是指染色体组在有丝分裂中期的表型, 是染色体数目、大小、形态特征的总和。

在对染色体进行测量计算的基础上, 进行分组、排队、配对, 并进行形态分析的过程叫核型分析。

CpG岛：C pG双核苷酸在人类基因组中的分布很不均一，而在基因组的某些区段，CpG保持或高于正常概率，GC含量大于50%,长度超过200bp。

卫星DNA：又称随机DNA。

因为真核细胞DNA的一部分是不被转录的异染色质成分，其碱基组成与主体DNA不同，因而可用密度梯度沉降技术如氯化铯梯度离心将它与主体DNA分离。

卫星DNA通常是高度串联重复的DNA。

基因簇：指基因家族中的各成员紧密成簇排列成大串的重复单位，定于染色体的的特殊区域。

基因簇少则可以是由重复产生的两个相邻相关基因所组成，多则可以是几百个相同基因串联排列而成。

他们属于同一个祖先的基因扩增产物。

也有一些基因家族的成员在染色体上排列并不紧密，中间还含有一些无关序列。

但总体是分布在染色体上相对集中的区域。

基因家族：在基因组进化中，一个基因通过基因重复产生了两个或更多的拷贝，这些基因即构成一个基因家族，是具有显著相似性的一组基因，编码相似的蛋白质产物。

分子生物学实验2 大肠杆菌感受态细胞的制备

实验大肠杆菌感受态细胞的制备实验原理：转化是将异源DNA分子引入另一细胞系，使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段。

受体细胞一般是限制-修饰系统缺陷的变异株，经过CaCl2等化学试剂的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许带有外源DNA的载体分子通过的感受态细胞。

经过转化的细胞在选择性培养基上，可以筛选出转化体，即带有外源DNA分子的受体细胞。

实验目的：学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞过程。

实验内容：JM109感受态细胞的制备、一、实验材料和试剂大肠杆菌JM109或DH5α，LB固体/液体培养基，0.1mol/LCaCl2溶液。

二、主要设备台式高速离心机，超净工作台，低温冰箱，恒温水浴锅，制冰机，分光光度计，微量移液器、恒温摇床，等。

三实验方法1.受体菌的培养从于37℃培养16-20小时的新鲜LB平板上挑取新活化单菌落，接种于3~5ml LB液体培养基中，37℃下振荡培养（300rpm）12小时左右，直至对数生长后期。

将该菌悬液以1：100~1：50（V：V）的比例接种于100ml LB液体培养基，37℃下振荡培养2~3小时至OD600=0.35～0.5左右。

2.感受态细胞的制备（1）在无菌条件下，将培养液转入预冷的1.5ml离心管中，冰上放置20min，使其停止生长。

（2）4℃下，4000rpm离心5min，弃去上清。

（3）加入0.75ml预冷的0.1mol/L CaCl2溶液悬浮细胞，冰上放置30分钟，4℃下4000离心5min。

（4）弃去上清，加入0.2ml预冷的0.1mol/L CaCl2溶液悬浮细胞，贮存于4℃备用。

或贮存于-70℃（加10-30%的甘油），可保存半年。

四.注意事项：1、整个实验都应在无菌的条件下操作。

2、整个操作均在冰上进行，不能离开冰浴，否则细胞转化率会降低。

分子生物学 (2)

一名词解释1.基因：产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。

2.断裂基因：在DNA 分子的结构基因内既含有能转录翻译的片段，也含有不转录翻译的片段，这类基因称断裂基因3.顺反子：由顺/反测验定义的遗传单位，与基因等同，都是代表一个蛋白质质的DNA 单位组成。

一个顺反子所包括的一段DNA 与一个多肽链的合成相对应。

4.变性：是DNA双链的氢键断裂，最后完全变成单链的过程称为变性。

5.复性：热变性的DNA缓慢冷却，单链恢复成双链。

6.顺式作用元件：影响自身基因表达活性的非编码DNA序列。

例：启动子、增强子、弱化子等7.反式作用因子：能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质。

8.增强子：在启动区存在的能增强或促进转录的起始的DNA序列。

但不是启动子的一部分。

9.PCR:即聚合酶链式反应。

扩增样品中的DNA 量和富集众多DNA 分子中的一个特定的DNA 序列的一种技术。

在该反应中，使用与目的DNA 序列互补的寡核苷酸作为引物，进行多轮的DNA合成。

每一轮中都包括DNA 变性，引物退火和在Tap DNA 聚合酶催化下的DNA 合成反应。

10.SD 序列:原核生物起始密码AUG 上游7～12 个核苷酸处的一段保守序列，能与16S rRNA 3′端反向互补，被认为在核糖体-mRNA 的结合过程中起作用。

11.转录：生物体以DNA为模板合成RNA的过程。

12.操纵子:细菌基因表达和调控的单位，包括结构基因和能被调控基因产物识别的DNA 控制元件。

13.SSB:即单链结合蛋白，大肠杆菌中一种与单链DNA 结合的蛋白质14.启动子:DNA 模板上具有活化RNA 聚合酶、启动转录起始功能的特殊序列。

15.终止子:模板DNA 上的具有终止转录功能的特殊序列。

16.Tm值：增色效应达到最大值一半时的温度17.C值矛盾：C值与生物结构或组成的复杂性不一致的现象18.多顺反子：原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位转录成的 mRNA 能编码几种功能相关的蛋白质。

分子生物学技术 (2)

分子生物学技术
分子生物学技术是一种应用于分子生物学研究和应用的技
术手段。

它使用分子生物学原理和技术来研究和处理生物
分子，如DNA、RNA和蛋白质。

这些技术主要包括：
1. DNA克隆：将DNA片段插入载体（如质粒）中，使其
扩增，并能在宿主细胞中稳定复制。

2. PCR（聚合酶链式反应）：通过体外扩增目标DNA片段，从而快速产生大量DNA。

3. DNA测序：确定DNA序列，以揭示基因结构和功能。

4. 基因组学：通过高通量测序技术对整个基因组进行分析，以研究基因组的结构和功能。

5. RNA干扰（RN）：通过引入双链RNA来抑制特定基因的表达，从而研究基因的功能。

6. 基因编辑技术：如CRISPR-Cas9，通过设计和引入特定的DNA序列，实现对基因组的精确编辑。

7. 蛋白质表达和纯化：通过转基因细胞或原核细菌表达特定蛋白质，并通过蛋白质纯化技术来纯化蛋白质。

这些技术在基础研究、医学诊断、新药开发、农业改良等领域中被广泛应用。

分子生物学试题及答案2

分子生物学试题及答案2一、选择题1. DNA复制的起始点是由什么酶识别的？A. DNA聚合酶B. 拓扑异构酶C. 解旋酶D. 引物酶答案：D2. 转录过程中，RNA聚合酶的作用是什么？A. 合成RNAB. 识别转录起始点C. 合成DNAD. 校对RNA序列答案：A3. 以下哪种酶在蛋白质合成中不参与氨基酸的活化？A. 转氨酶B. 氨酰-tRNA合成酶C. 肽酰转移酶D. 氨酰-tRNA连接酶答案：A二、填空题4. 真核生物的基因表达调控主要发生在_________阶段。

答案：转录5. 人类基因组计划的主要目的是确定人类所有_________的精确序列。

答案：基因6. 细胞周期中，DNA复制发生在_________期。

答案：S三、简答题7. 简述PCR技术的原理及其应用。

答案：PCR（聚合酶链反应）技术是一种用于快速复制特定DNA序列的分子生物学技术。

其原理是利用DNA聚合酶在体外循环进行DNA 的合成，通过反复的变性、退火和延伸三个步骤，使目标DNA片段指数级扩增。

PCR技术广泛应用于基因克隆、遗传病诊断、法医学鉴定等领域。

8. 描述真核生物mRNA的加工过程。

答案：真核生物mRNA的加工包括剪接、5'端加帽和3'端加尾。

在剪接过程中，内含子被移除，外显子连接形成成熟的mRNA。

5'端加帽是为mRNA加上一个特殊的结构，有助于其在细胞质中的稳定性和翻译效率。

3'端加尾则是在mRNA的3'端加上一串腺苷酸，这同样有助于mRNA的稳定性。

四、论述题9. 论述基因编辑技术CRISPR-Cas9的原理及其在医学研究中的应用。

答案：CRISPR-Cas9是一种革命性的基因编辑技术，它源自细菌的免疫机制。

CRISPR是细菌基因组中的一种重复序列，与病毒DNA片段结合，形成RNA分子，这些RNA分子可以指导Cas9酶精确地识别并切割目标DNA序列。

在医学研究中，CRISPR-Cas9被用来研究基因功能、治疗遗传性疾病、开发新的癌症疗法等。

分子生物学课后习题答案

第一章绪论☐DNA重组技术和基因工程技术。

DNA重组技术又称基因工程技术，目的是将不同DNA片段（基因或基因的一部分）按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。

DNA重组技术是核酸化学、蛋白质化学、酶工程及微生物学、遗传学、细胞学长期深入研究的结晶，而限制性内切酶DNA连接酶及其他工具酶的发现与应用则是这一技术得以建立的关键。

DNA重组技术有着广泛的应用前景。

首先，DNA重组技术可以用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽，如激素、抗生素、酶类及抗体，提高产量，降低成本。

其次，DNA重组技术可以用于定向改造某些生物的基因结构，使他们所具有的特殊经济价值或功能成百上千倍的提高。

☐请简述现代分子生物学的研究内容。

1、DNA重组技术(基因工程)2、基因表达调控(核酸生物学)3、生物大分子结构功能(结构分子生物学)4、基因组、功能基因组与生物信息学研究第二章遗传的物质基础及基因与基因组结构☐核小体、DNA的半保留复制、转座子。

核小体是染色质的基本结构单位。

是由H2A、H2B、H3、H4各两分子生成八聚体和由大约200bp的DNA构成的。

核小体的形成是染色体中DNA压缩的第一步。

DNA在复制过程中，每条链分别作为模板合成新链，产生互补的两条链。

这样新形成的两个DNA分子与原来DNA分子的碱基顺序完全一样。

因此，每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，这种复制方式被称为DNA的半保留复制。

转座子是存在染色体DNA上的可自主复制和移位的基本单位。

转座子分为两大类：插入序列和复合型转座子。

☐DNA的一、二、三级结构特征。

DNA的一级结构是指4种脱氧核苷酸的连接及其排列顺序，表示了该DNA分子的化学构成。

DNA的二级结构是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构。

分为左手螺旋和右手螺旋。

DNA的高级结构是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。

分子生物学(2)

一、单选题1.核小体结构中，DNA绕组蛋白复合物（）圈。

A、1B、1.25C、1.75D、22.属于反式作用因子的是（）A、增强子B、终止子C、启动子D、转录因子3.大肠杆菌中调控碳源平衡利用的蛋白是（）A、NusAB、CsrAC、DsrAD、OxyS4.酵母三杂交实验主要用于分析（）之间的互作关系A、DNA和DNAB、DNA和RNAC、DNA和蛋白质D、RNA和蛋白质5.下列不属于顺式作用元件的是（）A、启动子B、增强子C、沉默子D、操纵子6.原核生物基因表达调控主要发生在（）A、翻译后水平B、转录水平C、翻译水平D、转录后水平7.原核生物基因表达和调控的单位称为（）A、多顺反子B、操作子C、操纵子D、单顺反子8.原核生物基因表达调控主要为（）A、负调控B、阻遏表达C、诱导表达D、正调控9.下列有关乳糖操纵子的说法正确的是（）A、乳糖操纵子中既有转录起始水平的调控，又有转录终止水平的调控B、乳糖操纵子中既有翻译起始水平的调控，又有翻译终止水平的调控C、乳糖操纵子中既有正调控又有负调控D、乳糖操纵子中既有转录水平的调控，又有翻译水平的调控10.在下列哪种培养基条件下，大肠杆菌乳糖操纵子的表达水平最高（）A、高葡萄糖、低乳糖B、高葡萄糖、高乳糖C、低葡萄糖、低乳糖 D低葡萄糖、高乳糖11.原核生物RNA聚合酶的核心酶不包含的亚基是（）。

A、αB、βC、β’D、σ12.下列关于复制和转录的描述中错误的是（）。

A、在体内只有一条DNA链转录，而体外两条DNA链都复制B、复制产物在通常情况下大于转录产物C、两过程均需要RNA引物D、在这两个过程中合成方向都是5’-3’13.关于内含子的叙述，正确的是（）。

A、通过RNA剪切被去掉B、通过DNA重组被去掉C、在翻译过程中被核糖体划过而避免翻译D、所指导合成的多肽序列在翻译后被切除14.以下表述正确的（）。

A、σ因子指导真核生物hnRNA的转录后加工，最后形成mRNAB、细菌的转录物（mRNA）通常是多基因的C、转录是以半保留方式获得序列相同的两条DNA链的过程D、依赖DNA的DNA聚合酶是多亚基酶，它负责DNA的转录15.以DNA为模板，RNA聚合酶作用时，不需要（）。

分子生物学2

一、名词解释1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA 是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。

2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。

几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。

3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP 与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ）4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。

5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA 的翻译。

6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。

7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。

9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。

10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。

产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。

PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。

11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA及增强子，弱化子等。

12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。

13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。

(整理)分子生物学2

生物大分子(biomacromolecule):具有较大的分子量,由简单的小分子排列组成,具有复杂的空间结构形成精确的相互作用系统,构成生物的多样化和生物个体精确的生长发育和代谢调节控制系统.阐明生物大分子复杂的结构及结构与功能的关系是分子生物学的主要任务.基因芯片技术：将大量探针分子（通常每平方厘米点阵密度高于 400 ）固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交，通过检测每个探针分子杂交信号的强度，获取样品分子的数量和序列信息.基因:是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位,对于编码蛋白质的结构基因来说，基因是决定一条多肽链的DNA片段。

根据其是否具有转录和翻译功能可以把基因分为三类:第一类是编码蛋白质的基因，它具有转录和翻译功能，包括编码酶和结构蛋白的结构基因以及编码阻遏蛋白的调节基因.第二类是只有转录功能而没有翻译功能的基因，包括tRNA基因和rRNA基因.第三类是不转录的基因，它对基因表达起调节控制作用，包括启动基因和操纵基因.基因组：(genome):泛指一个有生命体、病毒或细胞器的全部遗传物质；在真核生物，基因组是指一套染色体（单倍体）DNA。

携带生物体全部遗传信息的核酸量。

基因组中不同的区域具有不同的功能：有些区域编码蛋白质的结构基因有些区域复制及转录的调控信号有些区域的功能尚不清楚真核生物基因组特点:1. 真核生物基因组DNA与蛋白质结合形成染色体，储存于细胞核内，除配子细胞外，体细胞内的基因的基因组是双份的（即双倍体,diploid），即有两份同源的基因组.2. 真核细胞基因转录产物为单顺反子。

一个结构基因经过转录生成一个mRNA分子，再翻译生成一条多肽链.3. 存在重复序列，重复次数可达百万次以上4. 基因组中不编码的区域多于编码的区域5. 大部分基因含有内含子，因此，基因是不连续的（断裂基因，split gene）6. 基因组远远大于原核生物的基因组，具有许多复制起始点，而每个复制子的长度较小.高度重复序列(high repeated sequence)高度重复序列在基因组中重复频率高，可达百万（106）以上，因此复性速度很快在基因组中所占比例随种属而异，约占10-60％，在人基因组中约占 20 ％。

分子生物学2 (2)

分子生物学251-1001. 关于启动子的说法，下面哪项不正确：（） [单选题] *A. 原核启动子结构相对简单B. 原核启动子含-10和-35区的保守序列C. 真核启动子常含有一些核心启动元件D. 启动子通常位于转录起始点上游E. 原核启动子-35区是Pribnow box(正确答案)2. ρ因子的功能是（） [单选题] *A.与启动子结合B.参与转录启动过程C.增加转录速率D.具有ATP酶活性和解链酶活性，参与转录终止过程(正确答案)E.释放结合在启动子上的RNA聚合酶3. 转录前起始复合物(PIC)是指（） [单选题] *A.RNA聚合酶与TATA序列结合B.RNA聚合酶与TATAAT序列结合C.各种转录因子互相结合后再与RNA聚合酶、DNA模板结合(正确答案)D.α因子与RNA聚合酶结合E.阻遏物变构后脱离操纵基因复合物4. 有关RNA聚合酶的叙述，哪一条是正确的（） [单选题] *A.在转录时需RNA作引物B.能同时催化多核苷酸链向两端延长C.不能从5’端延长多核苷酸链(正确答案)D.以四种NMP为原料合成多核苷酸链E.也能催化DNA的合成5. RNA转录与DNA复制中的不同点是（） [单选题] *A.遗传信息储存于碱基排列的顺序序中B.新生链的合成以碱基配对的原则进行C.合成方向为5′→3′D.RNA聚合酶缺乏校正功能(正确答案)E.DNA的双股链中只有一条链转录，两条链均可被复制6. 原核生物转录过程中起辨认起始点作用的是: （） [单选题] *A.核心酶B.σ-亚基(正确答案)C.β-亚基D.α-亚基E. 全酶7. 5′-ATCGTACGGCTA-3′为一结构基因的有意义链，其转录产物为（） [单选题] *A.5′-TAGCCTACGAT-3′B.5′-TAGCATGCCGAT-3′C.5′-UAGCAUGCCGAU-3′D.5′-AUCGUACGGCUA-3′(正确答案)E.5′-UAGCCGUACGAU-3′8. 参与原核生物转录延长阶段的酶是（） [单选题] *A.RNA聚合酶全酶B.引物酶C.核心酶α2ββ′(正确答案)D.RNA聚合酶ⅡE.RNA聚合酶Ⅲ9. 对鹅膏蕈碱(α-amanitin)非常敏感的是（） [单选题] *A.RNA聚合酶IB.DNA聚合酶IC.RNA聚合酶II(正确答案)D.DNA聚合酶IIE.RNA聚合酶III10. 一患者因恶心、呕吐、腹泻和腹痛急诊，医生得知患者食过野蘑菇，该蘑菇已知含有α-鹅膏蕈碱，该肝毒性八肽抑制哪个酶（） [单选题] *A.核糖核酸酶D.DNA引物酶C.DNA连接酶D.RNA聚合酶(正确答案)E.DNA聚合酶11. 对于σ因子的描述哪一项是恰当的（） [单选题] *A.RNA聚合酶的亚基，负责识别DNA模板上转录RNA的特殊起始部位(正确答案)B.DNA聚合酶的亚基，能沿5′→3′及3′→5′方向双向合成C.核糖体30S亚基，与mRNA结合D.核糖体50S亚基，催化肽键形成E.是50S和30S亚基组成70S核蛋白体的桥梁12. 原核生物中识别DNA模板上转录起始点的是（） [单选题] *A.RNA聚合酶的核心酶B.RNA聚合酶的亚基(正确答案)C.RNA聚合酶的α亚基D.RNA聚合酶的β亚基E.因子13. 最适合σ因子(sigma factor)的叙述是（） [单选题] *A.它可辨别转录的终止信号，终止转录B.它能促进mRNA结合在核糖体上C.它是核糖体的一个亚基，能催化肽键的形成D.它是DNA聚合酶的一个亚基，可使DNA复制双向进行E.它是RNA聚合酶的一个亚基，可识别转录的起始信号(正确答案)14. 下列关于TATA盒的叙述，正确的是（） [单选题] *A.位于操纵子的第一个结构基因处B.属于负性顺式调节元件C.能编码阻遏蛋白D.发挥作用的方式与方向无关E.能与RNA聚合酶结合(正确答案)15. Pribnow box序列是指（） [单选题] *A.TATAAT(正确答案)B.AAUAAAC.TFGACAD.TAAGGE.AATAAA16. 启动子(promoter)是指（） [单选题] *A. mRNA开始被翻译的那段RNA顺序B. 为阻遏蛋白所结合的那段DNA顺序C. 开始转录生成mRNA的那段DNA顺序D. 转录起始点附近那段RNA聚合酶识别并结合的DNA顺序(正确答案)E. 转录终止的DNA顺序17. 关于转录的反义链，正确的是：（） [单选题] *A.是不能转录出mRNA的DNA双链B.也称编码链C.是转录生成tRNA和rRNA的母链D.同一DNA单链上不同区段有的是有意义链，有的是反义链(正确答案)E.是基因调节的成分18. 有关非依赖ρ因子终止转录的描述哪项是不正确的（） [单选题] *A.终止子含有反向重复序列B.转录产物5′末端有密集的U(正确答案)C.茎环结构改变RNA聚合酶的构象D.转录产物的3′末端可形成茎环结构E.茎-环结构可使不稳定的杂化双链更不稳定19. 原核生物的mRNA转录终止需要下列哪种因子（） [单选题] *A.释放因子B.ρ因子(正确答案)C.信号肽D.σ因子E.DnaB20. 合成RNA需要的原料是（） [单选题] *A.dNMPB.dNTPC.NMPD.NDPE.NTP(正确答案)21. ρ因子的功能是（） [单选题] *A.与启动子结合B.参与转录启动过程C.释放结合在启动子上的RNA聚合酶D.具有ATP酶活性和解链酶活性，参与转录终止过程(正确答案)E.增加转录速率22. 转录因子(TFI、TFⅡ、TFⅢ)的命名根据是（） [单选题] *A.含有I、Ⅱ、Ⅲ几种亚基B.真核生物中RNA聚合酶I、Ⅱ、Ⅲ对应的转录因子(正确答案)C.分别作用于GC、CAAT、TATA序列D.被转录的基因为I、Ⅱ、ⅢE.分别作用于阻遏基因、-35区和-10区23. 真核生物的TATA盒是（） [单选题] *A.DNA合成的起始位点B.RNA聚合酶与DNA模板稳定结合处(正确答案)C.翻译起始点D.RNA聚合酶的活性中心E.转录起始点24. 真核生物转录终止修饰点序列是（） [单选题] *A.GC boxB.TATA boxC.AATAAA和其下游的GT序列(正确答案)D.AAUAAAE.Pribnow盒25. 转录因子（） [单选题] *A.是真核生物RNA聚合酶的组分B.是原核生物RNA聚合酶的组分C.有σ亚基D.是转录调控中的反式作用因子(正确答案)E.是转录调控中的顺式作用元件26. 肽链合成后的加工不包括: （） [单选题] *A.切除肽链起始端的(甲酰)蛋氨酸残基B.切除部分肽段C.二硫键的形成D.某些氨基酸的羟化，磷酸化E.5’端加(正确答案)27. 信号肽的作用是（） [单选题] *A.指导多肽合成的起始B.指导DNA合成C.指导RNA转录D.引导多肽链进入内质网腔(正确答案)E.指导核蛋白体解聚28. 下列哪个过程不属于蛋白质翻译后加工过程? （） [单选题] *A.亚基聚合B.3’端添polyA尾(正确答案)C.丝、苏氨酸的磷酸化D.信号肽的去除E.蛋白质的糖基化29. 蛋白质合成时下列哪种物质能使多肽链从核糖体上释出？（） [单选题] *A.终止密码子B.IFC.RF(正确答案)D.转位酶E.转肽酶30. 可存在于蛋白质分子中，而无遗传密码子的α-氨基酸有（） [单选题] *A.羟脯氨酸(正确答案)B.谷氨酰胺C.甲硫氨酸D.天冬酰胺E.半胱氨酸31. 蛋白质生物合成不需要的物质是: （） [单选题] *A.氨基酸B.氨基酸-tRNA合成酶C.因子(正确答案)D.核糖体E.mRNA32. 下面哪个不是终止密码：（） [单选题] *A. UUA(正确答案)B. UAAC. UAGD. UGAE. 线粒体密码表中，AGA和AGG可做终止密码33. 遗传密码子的简并性是指：（） [单选题] *A.三联体密码子之间无标点间隔B.三联体密码子中的碱基可以变更C.一个氨基酸可以有一个以上的密码子(正确答案)D.一个密码子只代表一种氨基酸E.一些密码子可适用于一种以上的氨基酸34. 密码子的作用特点是（） [单选题] *A.一种氨基酸至少对应一个密码子(正确答案)B.一种氨基酸仅和一个密码子对应C.一种tRNA只和一个密码子对应D.每种tRNA都与两个或两个以上的密码子对应E.密码子和氨基酸可以直接识别35. 遗传密码指的是（） [单选题] *A.蛋白质分子中的氨基酸B.mRNA从5’端向3’端排列的碱基C.tRNA分子中排列的碱基D.mRNA从起始码开始每相邻的三个碱基(正确答案)E.rRNA分子中排列的碱基36. 在翻译过程中携带氨基酸的是: （） [单选题] *A.tRNA(正确答案)B.mRNAC.rRNAD.hnRNAE.snRNA37. 关于tRNA的错误描述是: （） [单选题] *A.氨基酸的运载工具B.都有反密码子C.对氨基酸有高度特异性D.一种tRNA可携带不同的氨基酸(正确答案)E.分子中含较多的稀有碱基38. 以下哪一种酶不参与原核生物蛋白质生物合成（） [单选题] *A.氨基酰-tRNA合成酶B.引物酶(正确答案)C.转位酶D.转肽酶E.转甲酰基酶39. 氨基酰-tRNA合成酶有高度特异性，是由于: （） [单选题] *A.能特异地识别特定氨基酸B.能特异地识别tRNAC.能特异地被ATP活化D.能特异识别A和B二者(正确答案)E.能特异识别A.B和C三者40. 遗传密码的统一性，表明（） [单选题] *A.所有生物的基因密码都是相同的B.所有生物的核基因密码都是相同的(正确答案)C.生物在进化过程中，遗传密码不发生改变D.所有的遗传信息受同一因素调控E.除了核基因密码外，别无其它基因密码存在41. 在蛋白质生物合成中，催化氨基酸之间肽键形成的酶是: （） [单选题] *A.氨基酸合成酶B.转肽酶(正确答案)C.羧基肽酶D.氨基酸连接酶E.氨基酸氧化酶42. 氨基酰-tRNA合成酶催化的底物是: （） [单选题] *A.tRNA与氨基酰-ATP-EB.tRNA与氨基酰-AMP-ED.tRNA、游离氨基酸与ATP(正确答案)E.tRNA与氨基酰-E43. 氨基酸活化的专一性取决于（） [单选题] *A.tRNAB.mRNAC.核糖体D.氨基酰-tRNA合成酶(正确答案)E.转肽酶44. 证明遗传密码子不重叠的证据是（） [单选题] *A.poly(UG)指导合成poly((正确答案)C)ys Val)B.单个碱基突变只改变蛋白质的一个氨基酸C.一个氨基酸可有几个密码子D.一个密码子只代表一种氨基酸E.有一个起始密码子，三个终止密码子45. 一个tRNA的反密码子为IGC，与其互补的密码子是（） [单选题] *A.GCA(正确答案)B.GCGGD.ACGE.UCG46. tRNA的作用是（） [单选题] *A.将一个氨基酸连接到另一个氨基酸上B.把氨基酸带到mRNA的特定位置上(正确答案)C.增加氨基酸的浓度D.将mRNA连接到核糖体上E.tRNA的5＇端磷酸基与氨基酸的α-羧基结合47. 操纵子调节系统属于（） [单选题] *A.复制水平调节B.转录水平调节(正确答案)C.翻译水平调节D.逆转录水平调节E.翻译后水平调节48. 蛋白质生物合成的直接模板是: （） [单选题] *A.rRNAB.tRNAC.mRNA(正确答案)D.核糖体E.DNA49. 真核生物的翻译起始密码子是: （） [单选题] *A.AUUB.AUAC.AUG(正确答案)D.AGAE.GUG50. 一mRNA的部分顺序和密码子编号为：....140/CAG141/CUC.142/UAA.143/CGG 144/UAG 145/AAU 146/AGC....在141和142号密码子之间插入一个鸟嘌呤(G)核苷酸，翻译后生成的肽链的氨基酸数为 (D) [单选题] *A.142(正确答案)B.143C.144D.145E.146。

研究生入学考试专业课现代分子生物学-2

研究生入学考试专业课现代分子生物学-2(总分：100.00，做题时间：90分钟)一、论述题(总题数：29，分数：100.00)1.什么是封闭复合物、开放复合物以及三元复合物?（分数：3.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：()解析：封闭复合物：RNA聚合酶全酶与DNA组成的复合物，DNA仍处于双链状态，不能起始RNA的合成。

开放复合物：RNA聚合酶全酶所结合的DNA序列中有一小段双链被解开，形成转录泡，酶的构象也发生改变，β和β"亚基牢固夹住DNA，这种由启动子与RNA聚合酶的复合物在这里能进行RNA的起始合成。

三元复合物：由开放复合物与最初的两个NTP相结合并在两个核苷酸之间形成磷酸二酯键后所形成的包括RNA聚合酶、DNA和新生RNA的复合物。

2.简述σ因子的作用。

（分数：3.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：()解析：负责模板链的选择和转录的起始，它是酶的别构效应物，使酶专一性识别模板链上的启动子，极大地提高RNA聚合酶对启动子区DNA序列的亲和力，极大地降低RNA聚合酶与模板DNA上非特异性位点的亲和力。

3.什么是Pribnow box?它的保守序列是什么?（分数：3.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：()解析：Pribnow box(TATA box)是一个由5个核苷酸(TATAA)组成的保守序列，是聚合酶结合位点，其中央大约位于起点上游10bp处，所以又称为-10区。

分子生物学复习资料.doc

1：操纵子：在细菌基因组中，编码一组在功能上相关的蛋白质的几个结构基因，与共同的控制位点组成一个基因表达的协同单位，称为操纵子。

操纵基因：是操纵子中的控制基因，是阻遏蛋白的结合部位。

2：阻遏蛋白：是负调控系统中由调节基因编码的调节蛋白。

3：RNA病毒：基因组的是核酸是RNA的病毒。

病毒是最简单的生物,外壳蛋白包裹着里面的遗传物质核酸。

4：诱导物：诱导（induction）--可诱导基因在特定环境信号刺激下表达增强的过程。

在可诱导的操纵子中产生诱导作用的小分子物质就叫做诱导物(inducer)。

例如大肠杆菌的乳糖操纵子。

5：Tm（melting temperature）：是使DNA双螺旋链解开一半时的温度。

DNA Tm 一般在70—85℃之间。

6：重叠基因：一段核酸序列可以编码多于一个多肽链。

7：内含子：在编码区能够编码蛋白质的序列。

8：外显子：在编码区不能够编码蛋白质的序列。

9：DNA损伤(DNA damage)：是指在生物体生命过程中DNA双螺旋结构发生的任何改变。

10：DNA的转座，或称移位（transposition），是由可移位因子（transposable element）介导的遗传物质重排现象。

11：转座：从DNA到DNA的转移过程称转座。

12：反转座：从DNA到RNA再到DNA的转移过程叫反转座。

后者为经RNA介导的转座过程。

反转座仅发生于真核生物中。

13：转录( transcription )：是在DNA指导的RNA聚合酶催化下,按照碱基配对的原则,以四种NTP为原料,合成一条与DNA互补的RNA链的过程。

14：启动子：是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。

15：终止子(terminator) ：能提供转录终止信号的DNA序列称为终止子。

16：顺式作用元件(cis—acting element)是指对基因表达有调节活性的DNA序列，其活性只影响与其自身同处在一个DNA分子上的基因17：反式作用因子：与顺式作用元件相互作用的蛋白因子就称为反式作用因子（转录因子）。