人(Human)尿素( urea)ELISA试剂盒说明书
尿素(Urea) 脲酶UV法
目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理脲酶催化尿素水解产生氨和CO2。
在谷氨酸脱氢酶催化下, NH3与α-酮戊二酸和NADH反应生成NA D+。
NADH在340nm处有特异吸收,通过测定NADH在340nm 处反应速度与同样处理过的标准比较计算出尿素含量。
脲酶尿素＋H2O ----------- NH3 ＋CO2GLDHNH3 ＋α-酮戊二酸＋NADH ------------- L－谷氨酸＋NAD+ ＋H2O2．标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：血浆使用EDTANa2（1.8mg/mL）或肝素（0.1mg/ml）作为抗凝剂。
2.4 标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂3.1 试剂：本科使用湖南永和阳光科技责任公司Urea试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂组成:尿素标准液7.14 mmol/L3.2：校准血清使用湖南永和阳光科技责任公司提供的40项校准血清。
尿素检测标准操作规程SOP
还原型辅酶I（NADH)
0.3mol/l
α-酮戊二酸
13.0mol/l
不同批次的试剂不推荐混合使用
7.4储存条件有效期
试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
7.5参数设置
主波长
340nm
辅助波长
405nm
反应方法
速率法
反应温度
37℃
反应方向
向下
试剂1
200ulቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
样本
2.5ul
4.1生理性：高蛋白饮食可引起血尿素浓度和尿液排出量显著增高。成人血清尿素浓度男性比女性平均高出0.3-0.8mmol/l，并随着年龄增加有增高倾向。妊娠妇女由于血容量增加，尿素浓度比非孕妇低。
4.2病理性：分为肾前性、肾性、肾后性。①肾前性:主要是严重失水引起的血液浓缩，肾血流量減少及肾小球滤过率降低，从而使尿素潴留，可见于剧烈呕吐、肠梗阻和长期腹泻;②肾性:为最常见的因素，可见于急性肾小球肾炎、肾功能衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎等，在肾功能不全的代偿期可见尿素轻度升高(＞8.0mmol/L)，肾功能衰竭失代偿期，尿素可中度升高(17.9～21.4mmol/L)，肌酐也中度升高(442.0umol/L);尿毒症时尿素＞21.4mmol/L，肌酐也可达1800umol/L，为尿毒症的诊断标准之一;③肾后性:如前列腺肥大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤等都可能使尿路阻塞引起血尿素升高。血液尿素减少较为少见，除了妊娠、蛋白质营养不良等情況外。常表示有严重的肝病、肝坏死。
12.2尿素氮测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体征、病史及其他的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13.性能指标
13.1线性范围：在（0.3-35.7）mmol/L范围内：a)线性相关系数（r）应>0.995;b)（0.3-10.0）mmol/L范围内，线性偏差应≦2.0mmol/L;（10.0-35.7）mmol/L范围内，线性偏差应该≦10.0%。
尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏微板法)说明书
脲酶波氏微板法)说明书
①血浆、血清：血浆、血清按照常规方法制备，直接用于该试剂盒的测定，-20℃冻存。
②尿液：尿液样品最好处理后测定，方法如下：取0.6ml尿液样品，加入沸石0.3g，加入无
注意事项：
1、本实验可测定560和630nm处的吸光度。
2、如果没有酶标仪，也可用分光光度计测定，但应注意加入试剂量不同，相应的检测次数会大大减少。
3、避免使用铵盐抗凝剂，否则会使结果偏高。
4、高浓度氟化物可抑制尿素酶，引起结果假性偏低。
5、采用酶标仪未调零情况下，空白管OD值一般在0.08~0.18之间，5mmol/L标准管参考范围一般在0.35~0.55之间。
6、以肉眼观察，一般情况下尿素浓度≤1mmol/L可显淡绿色或淡蓝色，浓度≥2mmol/L即可显蓝色，浓度≥15mmol/L即可显深蓝色，一般情况下接近上限比接近下限更准确。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
附录：参考标准曲线范围：根据说明书操作步骤采用酶标仪570nm测定尿素标准在0、0.2、0.4、0.6、0.8、1、3、5、10、15、20、25mmol/L时的吸光度，据此作出其标准曲线如下：
注意：由于试剂批次、仪器设备、操作方法及工作环境等不同，参考范围会有差异，该值仅供参考，对于要求精确计算尿素含量的，可以采用标准曲线进行多点测定；根据测定经验显示，标准品浓度小于0.2mmol/L或大于30mmol/L，标准曲线会有偏差。
尿素测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求jiuqiang
尿素测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人血清、血浆及尿液中尿素（UREA）的含量。
1.1 包装规格包装规格见表1。
1.2 主要组成成分主要组成成分见表2。
2.1 外观试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度试剂空白：A340nm下测定空白吸光度应≥1.0000。
2.3.2试剂空白吸光度变化率应不大于0.04/min。
2.4 准确度用国家标准品360012，对试剂盒进行测试，实测值与标示值的相对偏差应在±15%范围内。
2.5 分析灵敏度样本浓度为20mmol/L时，其吸光度变化率在0.0300～0.1000之间。
2.6 线性区间在[0.17，44.00]mmol/L区间内，相关系数r≥0.990，在[0.17,10.00]mmol/L 区间内测定的绝对偏差应不超过±1.0mmol/L，在(10.00，44.00]mmol/L区间内测定的相对偏差应不超过±10%。
2.7 精密度2.7.1重复性对高、低两个浓度的血清样本或质控品重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于5.0%。
2.7.2批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。
2.8 稳定性试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为18个月。
试剂在规定的贮存条件下保存至有效期末，产品的性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1的要求。
大鼠尿素(Urea)酶联免疫分析(ELISA)
大鼠尿素(Urea)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
药品名称：通用名：大鼠尿素(Urea)酶联免疫分析试剂盒使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中尿素(Urea)含量。
实验原理本试剂盒应用间接法测定标本中大鼠尿素(Urea)水平。
用纯化的大鼠尿素(Urea)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的尿素(Urea)标准品和未知浓度的尿素(Urea)待检样品，温育后，加入生物素标记的抗IgG抗体，再与链霉亲和素-HRP 结合，形成免疫复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的尿素(Urea)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠尿素(Urea)浓度。
标本要求1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融操作步骤1.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样品孔。
然后在标准品孔中加入标准品50μl，在样本反应孔中先加入待测样品10μl再加入样品稀释液40μl（样品最终稀释度为5倍），盖上封板膜，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。
3.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用4.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复4次，拍干。
5.加生物素标记的抗-IgG抗体：每孔加入生物素标记的抗-IgG抗体50μl。
37℃温育30分钟6.洗涤：操作同4。
尿素(UREA)检测的标准操作程序
尿素（UREA）检测的标准操作程序一、目的规范在罗氏cobas c311生化分析仪上定量检测人血清、血浆中的尿素，确保检测结果的准确性及重复性。
二、范围检验科生化室检验人员。
三、该SOP变动程序本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准:专业组长，科室主任。
四、授权操作人检验科经过培训并被授权发报告的人员均可操作。
五、实验原理酶动力学法尿素 + H2O 尿酶 2NH+4+ CO22NH+4 + α-酮戊二酸 + NADH + H+ 谷氨酸脱氢酶 L-谷氨酸 + 2NAD+ + H2ONADH浓度降低的速率与样本中的BUN的浓度成正比，在340nm下进行检测。
六、标本1、标本类型：血清：使用标准取样试管或含分离胶的试管采集。
血浆：肝素、EDTA-K3 、枸橼酸钠或氟化钠/草酸钾抗凝均可。
2、样本稳定性：标本在2－8 度可稳定2 天，15－25度可稳定8小时，-20 度可稳定6 个月。
只能冻融一次。
七、仪器与试剂1、仪器：罗氏cobas c311生化分析仪2、试剂：罗氏原装配套尿素试剂，试剂无需任何处理，可直接使用3、试剂稳定性：未开封试剂盒按要求保存可稳定至有效期末，已开封试剂盒在仪器上可稳定8周八、校准1、校准物：S1:0.9%NaCl，S2:C.f.a.s(罗氏通用校准品，复溶后使用)。
2、校准方法：两点校准。
3、校准频率：每批试剂必须用新鲜试剂和校准一次。
另外，以下情况需要再次校准：校准过期:批校准稳定28天，盒校准7天。
九、操作程序1.每日开机准备：1.1仪器处于关机状态1.1.1检查供水、排水系统是否正常1.1.2接通仪器左侧电源开关, 以及电脑控制电脑的开关1.1.3登陆：输入用户名mjt及密码123，仪器初始化后进入待机状态1.2仪器处于休眠状态：1.2.1仪器在进入睡眠时指定的时间自动唤醒，或单击[[唤醒]]唤醒仪器；1.2.2系统退出睡眠状态至登录界面，输入用户名及密码，仪器初始化后进入待机状态。
尿素(UREA)测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求百奥泰康
尿素（UREA）测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人血清中尿素的浓度。
1.1 产品规格1.2 组成成分该试剂盒由试剂1（R1）、试剂2（R2）和校准品（选配）组成。
1.2.1试剂组成试剂1: Tris缓冲液≥20.0mmol/La-酮戊二酸≥5.0mmol/L 二磷酸腺苷（ADP）≥0.6mmol/L烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）≥0.2mmol/L试剂2：脲酶（Urease）≥6.0KU/L谷氨酸脱氢酶（GLDH）≥1.0KU/L1.2.2 校准品组成尿素目标浓度：8.50mmol/L该校准品为水基质液体校准品2.1 外观a) R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
b) R2应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
c) 校准品应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2 净含量液体组分不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度应不小于1.000。
2.3.2试剂空白吸光度变化率应不大于0.004/min2.4 分析灵敏度UREA试剂盒测定浓度20.00mmol/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.025。
2.5 准确度测试参考物质，相对偏差应不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1重复性变异系数应不大于5%。
2.6.2批间差批间相对极差（R）应不大于10%。
2.7 线性在（0,40.00]mmol/L范围内，UREA试剂盒的线性相关系数r应不低于0.9900；在（0,10.00]范围内绝对偏差应不超过1.00mmol/L，在(10.00,40.00]范围内相对偏差应不超过±10%。
2.8校准品溯源性依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供尿素校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。
校准品溯源至国家标准物质GBW09175。
2.9稳定性原包装的UREA试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为18个月。
ELISA检测试剂盒使用指南
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的免疫学实验技术，用于检测体内特定抗原或抗体的存在和浓度。
ELISA检测试剂盒是用于进行ELISA实验的组合套装，包括抗体或抗原、酶标记物、底物、缓冲液等。
本文将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，以帮助用户顺利进行ELISA实验。
1.准备实验材料：-ELISA检测试剂盒：根据实验需要选择适当的ELISA检测试剂盒，确保其在储存和运输过程中无损坏。
-样本：准备需要检测的样本，如血清、尿液、组织提取物等。
确保样本的质量和浓度满足实验要求。
-微孔板：根据试剂盒的要求选择合适的微孔板，同时注意其质量有无污染。
-基本实验设备：如计量器、洗板机、显微镜等。
2.实验步骤：-取出储存在4℃的试剂，确保其达到室温（一般为20-25℃），再根据实验步骤进行下一步操作。
-预处理样本：根据试剂盒的说明书，进行样本的预处理，包括稀释、纯化、稳定化等步骤。
-加样：将样本按照试剂盒要求的体积加入微孔板中，通常每个孔需要加入100-200μL的样品。
-洗板：使用洗板机或手工操作，将孔中的杂质洗净。
洗板时应注意洗涤缓冲液的使用浓度和洗涤次数。
-加入特异性抗体：根据试剂盒的说明书，将稀释好的特异性抗体加入各孔中，确保操作的准确性和每孔的稀释倍数。
-洗板：重复第4步的操作，将未结合的抗体洗净。
-加入酶标记物：根据试剂盒的说明书，将稀释好的酶标记物加入各孔中，确保加入的量准确无误。
-洗板：重复第4步的操作，将未结合的酶标记物洗净。
-加入底物：将稀释好的底物加入各孔中，使其与酶标记物反应，生成可视化的颜色。
-终止反应：根据试剂盒的要求，在一定的反应时间后，加入终止剂停止反应。
终止剂的选择需符合试剂盒的要求。
-检测结果：使用酶标仪或目视观察检测孔中的颜色变化，通过测量吸光度或颜色强度来确定样本中目标物的浓度。
3.数据分析：-计算样本的结果：根据试剂盒的说明书，根据吸光度或颜色强度测量结果，计算样本中目标物的浓度。
尿素(Urea)测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求sainuopu
尿素（Urea）测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中尿素的含量。
1.1试剂盒包装规格试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml；试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：1×10L，试剂2：1×2L；试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml；试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×54ml，试剂2：2×18ml；试剂1：3×45ml，试剂2：3×15ml；试剂1：4×54ml，试剂2：4×18ml；试剂1：2×300ml，试剂2：1×200ml；试剂1：1×9L，试剂2：1×3L；试剂1：2×30ml，试剂2：2×10ml。
校准品（选配）：1×1ml；1×3ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观液体双试剂：试剂1无色至浅黄色澄清液体；试剂2无色至浅黄色澄清液体。
校准品：无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不小于1.0。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应不大于0.04。
2.4 分析灵敏度测定浓度为7.0mmol/L样本时，吸光度变化率（ΔA/min）应在（0.01，0.11）范围内。
2.5 线性范围在（0.9，35.70）mmol/L线性范围内，理论浓度与实测浓度的线性相关系数r 不小于0.990。
艾博信尿素(UREA)测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）说明书
尿素(UREA )测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）说明书【产品名称】尿素(UREA)测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）【包装规格】a)试剂1：2×45mL 试剂2：1×18mL b)试剂1：4×50mL 试剂2：2×20mL c)试剂1：2×100mL试剂2：2×20mL【预期用途】用于体外定量测定人体血清中尿素的含量。
尿素是人体含氮蛋白质代谢的终产物.血清中的尿素的含量是肾功能的一个重要指标，肾脏受损或组织蛋白分解增加，尿素的值会升高；而在肝脏受损或怀孕时，血清中的尿素会降低[1]。
【检验原理】尿素+H 2O−−→−尿素酶2NH 3+CO 2NH 3+α-氧代戊二酸+NADH +H +−−→−GLDH L-谷氨酸+NAD ++H 2O此反应速度与尿素含量成正比，在340nm 处，测定固定时间间隔内NADH 吸光度值的下降速率，下降速率与样本中的尿素含量成正相关。
【主要组成成分】试剂1主要组分Tris 缓冲液100mmol/L 尿素酶20KU/L α-氧代戊二酸5.0mmol/L 谷氨酸脱氢酶（GLDH ）15KU/LProClin300适量试剂2主要组分Tris 缓冲液100mmol/L 还原型辅酶Ⅰ（NADH ）0.25mmol/LProClin300适量注：不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。
【储存条件及有效期】贮存于2～8℃，有效期为18个月，生产日期、有效期见标签。
【适用仪器】艾威德AS-420/AS-660/AS-1200；日立HITACHI 7020型/7060型/7180型/7600型/LABOSPECT 008AS 型；贝克曼AU400/AU480/AU640/AU680/AU2700/AU5400/AU5800/AU5811/AU5821；佳能TBA-FX8/TBA-120FR /TBA-2000FR ；罗氏cobas 8000c 702/cobas 8000c 701/cobas 8000c 502；西门子SIEMENS ADVIA 1800/ADVIA 2400；雅培ABBOTT ARCHITECT c8000/ARCHITECT c16000/ARCHITECT ci8200；西森美康SYSMEX BM6010/C ；科华KHB 卓越310/卓越330/卓越400/卓越450/ZY-1200/ZY-1280；迪瑞CS-240/CS-T300/CS-300B/CS-380/CS-400A/CS-400B/CS-600A/CS-600B/CS-800A/CS-800B/CS-1200/CS-1200ISE/CS-1300B/CS-1400；迈瑞MINDRAY BS-220/BS-330/BS-350E/BS-380/BS-390/BS-400/BS-430/BS-600/BS-800/BS-2000M ；颐兰贝ES-200/ES-380/ES-480；赛诺迈德SUNMATIK-9050型；雷杜Chemray 420；英诺华D280；特康TC6010L ；锦瑞GS400；普康6066。
ELISA 检测试剂盒 说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断小鼠小鼠（（MouseMouse））肿瘤坏死因子可溶性受体肿瘤坏死因子可溶性受体ⅠⅠ（TNFsR-TNFsR-ⅠⅠ）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ（TNFsR-Ⅰ）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ（TNFsR-Ⅰ）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
ELISA检测试剂盒使用指南
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的免疫学实验方法，用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。
它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势，被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。
本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。
一、实验准备1.阅读检测项目的说明书：在使用试剂盒前，仔细阅读说明书，了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。
2.样本准备：根据实验要求，准备样本。
如果需要检测血清中的抗体水平，可以采集血液样本，离心分离血清；如果需要检测细胞培养上清中的分子，将上清收集，并使其清晰，避免细胞或杂质的污染。
3.样本预处理：根据实验需求，对样本进行必要的预处理。
例如，可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本，以改变样本组分和浓度。
4.准备品质控制样品：制备阳性和阴性控制样品，用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。
5.实验器材准备：准备所需实验器材，如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。
确保器材的干净和完整，并按照说明书要求对其进行预处理。
二、试剂使用步骤1.试剂准备：根据说明书要求，将试剂从冰箱中取出，并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。
确保试剂瓶盖紧闭，并避免暴露在直接阳光下。
2.实验操作：按照说明书的要求，将试剂加入到酶标板中，并根据实验设计进行标准曲线的设置。
标准曲线用于测量未知样品的数量，并计算出浓度。
3.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行孵育。
孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。
4.洗涤：使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。
洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。
5.补液：在洗涤完成后，加入辣根过氧化物酶标况稀释液，促进酶标物与特异性结合物的反应。
6.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。
7.反应停止：根据试剂盒的要求，加入相应的停止液，停止酶反应。
尿素(UREA)测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求kemei
尿素（UREA）测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中尿素（UREA）的浓度。
1.1包装规格1.2主要组成成分试剂1主要组分：a-酮戊二酸 11 mmol/LNADH0.34mmol/L试剂2主要组分：尿素酶≥1.0KU/L谷氨酸脱氢酶≥1.0KU/L2.1外观2.1.1试剂1应为无色或淡黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物。
2.1.2试剂2应为无色或淡黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2装量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：UREA试剂盒在波长340nm处测定试剂的空白吸光度值，应不小于1.0。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：UREA试剂盒在波长340nm处测定试剂的空白吸光度变化率，应不大于0.010。
2.4分析灵敏度试剂盒测试5.0mmol/L被测物时，吸光度的变化率（△A/min）应不小于0.01。
2.5准确度测定国家标准物质GBW09175a，相对偏差应不超过15%。
2.6精密度2.6.1重复性重复测试（5.0±0.5）mmol/L和（10.0±2.0）mmol/L的样本，所得结果的变异系数CV应不大于5%；2.6.2批间差测试（5.0±0.5）mmol/L的样本，所得结果的批间相对极差应不大于10%。
2.7线性范围UREA试剂盒在[0.5，36.0]mmol/L范围内，线性相关系数（r）应不小于0.990；a）在[0.5，20.0]mmol/L区间内，线性绝对偏差应不超过±2mmol/L；b）在(20.0，36.0]mmol/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为12个月。
在试剂盒有效期满后2个月内，分别检测2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项，结果应符合各项目的要求。
尿素(UREA)检测标准操作规程
深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司尿素测定方法
2、适用范围
适用于尿素的测定
3、试剂仪器
3.1试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒
3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃—8℃有效期一年。
试剂不可以冰冻。
4、操作程序
4.1方法原理
脲酶
尿素+ 2H2O————→2N H4+ + CO32-
谷氨酸脱氢酶
a-酮戊二酸+ NH4+ +NADH————→L-谷氨酸+ NAD+ + H2O
4.2样本要求
新鲜血清或肝素血浆，样本收集后应尽快测定，必须避光保存，避免使用溶血样本。
4.3上机操作
4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-220全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”
4.3.2校准“
4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱取出，复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2校准程序：每30天需要定标一次。
当有以下情况时需重新定标：
1）换试剂批号或出现质控漂移时；
2）当仪器做完保养后；
3）仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行定标，定标通过后进行检测。
UREA说明书
[产品名称]中文名称：尿素（UREA ）检测试剂盒（速率法） 英文名称：Urea Assay Kit; UREA[包装规格]R 1 4 × 60 ml R 2 4 × 15 mlR 1 4 × 80 ml R 2 4 × 20 ml R 1 4 × 120 ml R 2 2 × 60 ml R 1 8 × 40 ml R 2 2 × 40 ml R 1 4 × 50 ml R 2 2 × 25 ml R 1 2 × 40 ml R 2 2 × 10 ml R 1 4 × 50 ml R 2 4 × 50 ml R 1 1 × 30 mlR 2 1 × 7.5 ml[预期用途]用于临床实验体外定量分析人血清或血浆中的尿素的含量。
尿素的测定对肾功能不全的诊断具有重要的意义，通常在尿液排泄障碍，如肾小球功能降低、脱水、浮肿，尿素生成过剩，如高蛋白饮食，组织坏死情况下尿素测定结果均呈现上升趋势。
而在尿素排泄过多，如多尿；尿素生成减少，如低蛋白饮食、肝功能不全情况下呈下降趋势。
[测定原理]脲酶 尿素 + 3H 2O NH 4+ + HCO 3 -+ OH -GLDHNH 4++α-酮戊二酸+NADH 谷氨酸 + NAD + + H 2O [主要组成成份][储存条件及有效期]试剂在2℃~8℃无腐蚀性气体中避光贮存。
有效期12个月。
开瓶后2℃~8℃可稳定30天。
[适用仪器]日立等类型生化分析仪[样本要求]血清、肝素血浆。
[检验方法]测定类型：速率法 主波长：340 nm 副波长：380 nm 温度：37 ℃ 试剂1(R1)：240 µl 标本量：3 µl 试剂2（R2）：60 µl 延迟时间：60S 反应时间：60S[计算]样品中的尿素（mmol/L ）（A 2–A 1）样品= ————————— × UREA 标准液浓度mmol/L（A 2–A 1）标准注：本试剂适用于手工操作或半自动生化仪。
尿素氮(BUN)试剂盒使用说明
尿素氮（BUN）试剂盒使用说明微量法货号：BC1535规格：100T/96S产品内容：标准品：液体1mL×1支，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，4℃避光保存，临用前加4mL蒸馏水充分溶解。
试剂二：液体8mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体8mL×1瓶，4℃避光保存。
产品说明：尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物，在尿酶催化下分解转化成氨。
血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。
在碱性条件下，尿酶水解尿素产生氨，氨与次氯酸反应生成氯胺，再与酚衍生物作用生成绿色吲哚酚，在630nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
操作步骤：一、样品处理1.组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(mL)为1：5-10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL蒸馏水），匀浆后于25℃，12000rpm离心10min，取上清待测。
2.细胞：按照细胞数量（104个）：蒸馏水体积（mL）为500-1000：1的比例（建议500万个细胞加入1mL蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）；然后4℃，12000rpm离心10min，取上清置于冰上待测。
3.血清或其它液体：直接检测。
二、测定操作空白管标准管测定管样品（μL）20标准品（μL）20H2O（μL）20试剂一（μL）404040充分混匀，于37℃反应10min试剂二（mL）707070试剂三（mL）707070充分混匀，于37℃显色10min，于微石英比色皿/96孔板，双蒸水调零，测定630nm处吸光值，记为A空白管、A标准管和A测定管三、计算公式：1.按样本质量计算：尿素氮含量（mg/g）=（A测定管-A空白管）/（A标准管-A空白管）×C标准品÷W=0.005×（A测定管-A空白管）/（A标准管-A空白管）÷W2.按细胞数计算：尿素氮含量（mg/104cell）=（A测定管-A空白管）/（A标准管-A空白管）×C标准品÷细胞数量=0.005×（A测定管-A空白管）/（A标准管-A空白管）÷细胞数量3.按液体体积计算：尿素氮含量（mg/L）=（A测定管-A空白管）/（A标准管-A空白管）×C标准品=5×（A测定管-A空白管）/（A标准管-A空白管）C标准品：标准品浓度，5mg/L；W：样品质量，g注意事项：配制好的试剂一在2-8℃条件下可保存一周。
尿素(MSDS)
尿素(MSDS)第一部分：化学品名称化学品中文名称：脲化学品英文名称：urea中文别名：英文别名：技术说明书编码：分子式：CH 4 N 2 O第二部分：成分/组成信息主要成分：CAS No.：57-13-6第三部分：危险性概述危险性类别：侵入途径：健康危害：本品属微毒类。
对眼睛、皮肤和粘膜有刺激作用。
环境危害：燃爆危险：第四部分：急救措施皮肤接触：脱去污染的衣着，用大量流动清水冲洗。
眼睛接触：提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。
就医。
吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。
保持呼吸道通畅。
如呼吸困难，给输氧。
如呼吸停止，立即进行人工呼吸。
就医。
食入：饮足量温水，催吐。
就医。
第五部分：消防措施危险特性：遇明火、高热可燃。
与次氯酸钠、次氯酸钙反应生成有爆炸性的三氯化氮。
受高热分解放出有毒的气体。
有害燃烧产物：灭火方法：消防人员必须穿全身防火防毒服，在上风向灭火。
灭火时尽可能将容器从火场移至空旷处。
然后根据着火原因选择适当灭火剂灭火。
灭火注意事项及措施：第六部分：泄漏应急处理应急处理：隔离泄漏污染区，限制出入。
建议应急处理人员戴防尘口罩，穿一般作业工作服。
不要直接接触泄漏物。
小量泄漏：小心扫起，置于袋中转移至安全场所。
大量泄漏：收集回收或运至废物处理场所处置。
第七部分：操作处置与储存操作注意事项：储存注意事项：储存于阴凉、通风的库房。
远离火种、热源。
防止阳光直射。
包装密封。
应与氧化剂、酸类、亚硝酸钠、干粉分开存放，切忌混储。
储区应备有合适的材料收容泄漏物。
第八部分：接触控制/个体防护最高容许浓度：中国MAC:未制定标准；前苏联MAC:10监测方法：工程控制：严加密闭，提供充分的局部排风。
呼吸系统防护：可能接触其粉尘时，必须佩戴防尘面具（全面罩）。
紧急事态抢救或撤离时，应该佩戴空气呼吸器。
眼睛防护：呼吸系统防护中已作防护。
身体防护：穿防毒物渗透工作服。
手防护：戴橡胶手套。
其他防护：工作现场禁止吸烟、进食和饮水。
尿素(UREA)测定试剂盒(紫外—谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求mairui
2性能指标
2.1外观
试剂应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物。
2.2净含量
液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度
试剂以水为空白在37 ℃±1 ℃，340 nm 波长条件下，吸光度应大于0.5A。
2.3.2试剂空白吸光度变化率
试剂以水为空白在37 ℃±1 ℃，340 nm 波长条件下，吸光度变化率应小于0.0060A/min。
2.4分析灵敏度
当样本浓度为 5 mmol/L 时，吸光度变化率应不小于0.022 A/min。
2.5线性范围
试剂盒在（0.9～40.0）mmol/L 范围内：
a)线性相关系数r 应不小于0.9900；
b)当样本浓度不大于24 mmol/L 时，线性绝对偏差应不大于±2.4 mmol/L；当样本浓度大于24 mmol/L 时，线性相对偏差应不大于±10.0%。
2.6测量精密度
2.6.1重复性
变异系数：CV 应不大于 4.0％。
2.6.2批间差
相对偏差：R 应不大于 6.0％。
2.7准确度
测定校准品，测定结果与靶值的相对偏差应不大于±10.0%。
2.8分析特异性
血红蛋白浓度在500 mg/dL 内、抗坏血酸浓度在30 mg/dL 内、内源性酯浓度在500 mg/dL 内、胆红素浓度在40 mg/dL 内，对试剂检测结果的偏差影响应在±10%以内。
2.9校准品均一性
试剂盒校准品的均一性：CV 应不大于 4.0％。
1。
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本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）尿素（Urea）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被尿素（Urea）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的尿素（Urea）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、1、2、4、8、16mmol/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍)；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒性能1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2.灵敏度：最低检测浓度小于0.1mmol/L。
3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6.有效期：6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
上海笃玛生物科技有限公司FOR RESEARCH USE ONLY.NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.Human Urea ELISA Kit instruction Intended useThis Urea ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at450nm using a spectrophotometer.In order to measure the concentration of Urea in the sample, this Urea ELISA Kit includes a set of calibration standards.The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus Urea concentration.The concentration of Urea in the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve.Sample collection and storagesSerum-Use a serum separator tube and allow samples to clot for30minutes before centrifugation for10minutes at approximately3000×g.Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at-20℃or-80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles Plasma-Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant.Centrifuge samples for30minutes at3000×g at2-8℃within30minutes of collection.Store samples at-20℃or-80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids-Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at-20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note:The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis or granule was allowed.Materials required but not supplied1.Standard microplate reader(450nm)2.Precision pipettes and Disposable pipette tips.3.37℃incubatorPrecautions1.Do not substitute reagents from one kit to another.Standard,conjugate and microplates are matched for optimal e only the reagents supplied by manufacturer.2.Do not remove microplate from the storage bag until needed.Unused strips should be stored at2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3.Mix all reagents before using.上海笃玛生物科技有限公司Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature (20-25°C)Materials suppliedName96determinations48determinations Microelisa stripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent 6.0ml 3.0mlHRP-Conjugate reagent10.0ml 5.0ml20X Wash solution25ml15mlChromogen Solution A 6.0ml 3.0mlChromogen Solution B 6.0ml 3.0mlStop Solution 6.0ml 3.0mlClosure plate membrane22User manual11Sealed bags11Note:Standard(S0→S5)concentration was followed by:0,1,2,4,8,16mmol/L Reagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water1:20.Assay procedure1.Prepare all re a g e n t s before starting assay procedure.It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2.Add standard:Set Standard wells,testing sample wells.Add standard50μl to standard well.3.Add Sample:Add testing sample10μl then add40μl of Sample Diluent to testing sample well;Blank well doesn’t add anyting.4.Add100μl of HRP-conjugate reagent to each well,c over with an adhesive strip and incubate for60minutes at37°C.5.Aspirate each well and wash,repeating the process four times for a total of five washes.Wash by filling each well with Wash Solution(400μl)using a squirt bottle, manifold dispenser or plete removal of liquid at each step is essential to good performance.After the last wash,remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting.Invert the plate and blot it against clean paper towels.6.Add chromogen solution A50μl and chromogen solution B50μl to each well. Gently mix and incubate for15minutes at37°C.Protect from light.7.Add50μl Stop Solution to each well.The color in the wells should change from blue to yellow.If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform,gently tap the plate to ensure thorough mixing.8.Read the Optical Density(O.D.)at450nm using a microtiter plate reader within15minutes.Calculation of results1.This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample.上海笃玛生物科技有限公司The standard curve is generated by plotting the average O.D.(450nm) obtained for each of the six standard concentrations on the vertical(Y)axis versus the corresponding concentration on the horizontal(X)axis.2.First,calculate the mean O.D.value for each standard and sample.All O.D.values,are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation.Construct the standard curve using graph paper or statistical software.3.To determine the amount in each sample,first locate the O.D.value on theY-axis and extend a horizontal line to the standard curve.At the point of intersection,draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration.4.Any variation in operator,pipetting and washing technique,incubation time ortemperature,and kit age can cause variation in result.Each user should obtain their own standard curve.5.The sensitivity by this assay is0.1mmol/L6.StandardcurveStorage：2-8℃.validity：six months.FOR RESEARCH USE ONLY;NOT FOR THERAPEUTIC ORDIAGNOSTIC APPLICATIONS!PLEASE READ THROUGHENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!上海笃玛生物科技有限公司。