微生物学基础知识

细菌图片
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真菌
真菌
藻类
藻类
霉菌：丝状真菌的统称，凡在营养基质上能形成绒 毛状、网状或絮状菌丝体的真菌，统称霉菌
• • • •
霉菌属于真菌家族的一员。 潮湿天气——发霉 酱、酱油——曲霉、毛霉。 发面、酿酒、醋——酵母菌
• 然而，有些霉菌是病原菌，会引起人及动 植物的病变，如黄曲霉，毒害肝脏，甚至 诱发肝癌。
环氧乙烷灭菌注意事项
• 1、可燃可爆性，与空气混合，含量达到3% （V/V）时即可爆炸。故此应用时需密闭，用 惰性气体如二氧化碳或氟利昂稀释后使用。 • 2、环氧乙烷对塑料、橡胶、纸板等穿透力强， 亲和力也强。故灭菌后需通过空气或采用排气 装置进行降解，解析至规定的安全浓度。 • 3、700ppm能闻出气味，高浓度下会损伤黏膜， 眼睛、鼻部和咽喉不适，头晕目眩，虚脱和胸 部疼痛。一般认为在50ppm的环境下可以长时 间工作，工作环境良好通风。
微生物的营养
• 水——新陈代谢必需的。 • 碳源——原料，能量来源。如糖类 • 氮源——合成菌体的原料，如铵盐、硝酸盐、 有机氮等。 • 无机盐类——氮、硫、钾、钙、镁等，调节 渗透压，调节酶的活性。 • 生长因子——B族维生素的化合物，碱基、 嘌呤、嘧啶等。
微生物的重要介质——空气
• 空气本身缺乏营养物质，日光对微生物有 很强的的杀菌作用，所以干燥空气不是微 生物的良好环境。 • 空气中的微生物主要来源于带有菌体和孢 子的灰尘，还来源于人和动物呼吸道排出。
生产活动中常见的方法
• • • • • • 1、机械消毒 （1）洗手，8分钟流水可以除去80%。 15分钟流水可以除去99.0%。 （2）过滤，戴口罩 厂房净化，初、高效过滤器 （3）吸附，树脂、活性炭。
热力灭菌——干热、湿热
• 机理：热力破坏细胞壁、细胞膜，使微生物蛋白质 凝固变性，从而导致其死亡。 • 干热：焚烧、烧灼、干烤（160-180℃,2h） • 湿热：煮沸（100℃,5min繁殖体;2h芽孢） • 流通蒸汽（水蒸气100℃,15-30min） • 间歇蒸汽（流动蒸汽间歇） • 巴氏消毒（62-65℃,30min, • 75-90℃，15秒，杀灭致病菌） • 蒸汽压力灭菌器（121℃,15-30min） • 比较之下，湿热穿透力更强，蛋白质更易凝固。
压力蒸汽灭菌器
紫外线消毒
• 长、中、短波段，以短波250-265nm的杀菌最 强。一般以253.7nm为代表波段。 • 紫外线穿透力差。湿度、尘粒对其有影响。 • 不能穿透固体物质，液体随深度增加而降低。 普通玻璃含氧化铁，阻挡紫外线，所以无法穿 透2mm厚窗玻璃，但能透过石英。 • 10-15m2,安1支30W，记录2500h,2000h更换。 • 每分钟照射产生的效果，相当于换气1-3次。 • 温湿度：15-35℃,45-65%。湿度80-90%效果降低30-40%，-4-0℃失效。 • 对人危害，避免直射和眼睛直视。皮肤红斑，紫外线眼炎。
洁净工作服
人员进出洁净区程序
洁净区更衣程序
洁净区的日常监控
• • • • • • 1、温、湿度。 2、静压差。 3、风量、风速、换气次数。 4、尘埃粒子数。 5、浮游菌数 6、沉降菌数
洁净室空调送风、回风示意图
洁净区环境监测要求
监测项目 温度 相对湿度 静压差 尘埃粒子 100级 10000级 100000级 18-28℃ 45-65% 不同洁净级别洁净室及洁净室与非洁净室 ≥5Pa 洁净室与室外大气之间 ≥10Pa ≥0.5um ≤3500 ≥0.5um ≤350000 ≥0.5um ≤3500000 ≥0.5um ≤10600000 300000级 监测频次 1次/班 1次/班 1次/班 1次/季
空气中的尘埃
消毒
• 概念：采用物理或化学方法，清除或杀灭 物体上病原微生物，并不一定能杀死含芽 孢的细菌或非病原微生物。 • 一、不必清除杀死所用微生物，主要针对 病原微生物。 • 二、消毒是相对的，不是绝对的，只要将 微生物减少到无害化的程度。 • 消毒剂：用来杀灭微生物的化学药物。常 用的如乙醇、新洁尔灭。
灭菌
• 概念：用以使产品无任何形式的存活微生 物的过程，且该过程应经过确认。 • 此概念是绝对的。 • 灭菌剂：用来灭菌，杀灭一切微生物的药 物。如过氧乙酸、甲醛、环氧乙烷等。
• 消毒与灭菌二者的关系：消毒不一定达到 灭菌的程度；灭菌一定能达到消毒的目的； 灭菌是最彻底的消毒。
无菌
• 概念：产品上无存活微生物的状态。 • 即用何种方法，都检不出活的微生物。
• 人及其活动产生大量的尘埃粒子 、人身上携带的各种微生物 均对洁净室造成污染，手 、口腔 、鼻腔、头发 也是污染源。 • 如何减少人对洁净室的污染？
• （1）养成良好卫生习惯，勤洗澡、洗头，勤理发、剃胡 须，勤剪指甲，勤更衣。 • （2）严格控制进入洁净室人数，只有洁净室工作人员和 经授权人员方可进入，并且进出洁净室要进行登记。 • （3）进入洁净室的人员，不能患传染病、皮肤病，包括 隐性传染病；体表有伤口、感冒、咳嗽、腹泻者不宜进入 洁净室。 • （4）不携带个人物品进入生产区，不在生产区内吃东西。 • （5）工作前洗干净手，不涂抹化妆品，上岗时不佩戴饰 物、手表。
紫外灭菌
电消毒法——臭氧
• 臭氧—无声放电法产生的。在一对交流电极之 间隔以介电体。当空气或氧气通过高压电极 （6000-8000V）时，在具有足够动能的放电电 子中，使氧分子电离，一部分氧分子被聚合为 臭氧。臭氧有很强的杀菌力，高效，广谱。 • 机理：破坏细胞膜，酶，破坏新陈代谢，使微 生物死亡，灭菌速度快，降解不产生二次污染。 • 净化车间的消毒——臭氧发生器 • 过量，会产生呼吸系统障碍，1mg/L能嗅出， 2.5-5mg/L即头痛，疲倦，脉搏加速。故此不可 长时间停留。
≥5um 0
沉降菌 个/皿 ≤1
≥5um ≤2000
≤3
≥5um ≤20000
霉菌图片
霉菌图片
霉菌的结构及特点
• 霉菌具有完整的细胞结构。
• 由细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、线 粒体、核糖体、内质网及各种内含物（如 肝糖、脂肪滴等）组成。 • 特点：不能进行光合作用；以孢子进行繁 殖；具有发达的菌丝体和子实体构造；营 养方式为分解吸收型；陆生性较强，在潮 湿偏酸性环境下易于生长。
化学灭菌法
• 概念：用化学制剂的气体或蒸汽对物品进 行的灭菌。 • 常用化学制剂： • 环氧乙烷 • 甲醛 • 过氧乙酸 • 乳酸 • 戊二醛等
环氧乙烷灭菌
• 环氧乙烷：室温、常压下，无色气体，有醚样 臭味。沸点为10.8℃，温度低于10.8℃时，气 体液化呈无色透明液体，能溶于水。 • 具有较强扩散和穿透能力，作用快。对细菌芽 孢，真菌和病毒等各种微生物均具有杀灭作用， 属于广谱灭菌剂。 • 机理：与微生物蛋白质，DNA等发生非特异性 烷基化作用，对菌体细菌的代谢产生不可逆性 破坏。 • 应用范围：对热敏感的塑料、橡胶、皮革制品， 聚丙烯、聚乙烯包装的药品和器械等。
• 空气中微生物的数目决定于尘埃的总量。 随人的密度，活动的程度（尘土搅动情况） 以及温度、湿度、风力等因素的影响。
空气携带细菌的方式
• 一、附着在尘土上，漂浮在空气中。
• 二、在人咳嗽，喷嚏，唱歌，讲话，呼吸 时，通过口腔、鼻腔喷出飞沫，长时间浮 游在空气中。 • 空气中的微生物是生产中引起污染的重要 来源之一，因此必须做好空气的清洁、消 毒管理工作。
• 1、设计、建设时应考虑便于清洁，内表面应 平整、光滑、无裂缝，接口严密，无颗粒物脱 落，能耐受清洗、消毒。墙壁与地面交界处呈 弧形或其他措施。防尘、防污染、防止昆虫和 其他动物的进入。 • 2、门密封良好，向洁净度高的方向开启。 • 3、按工艺合理布局，人流、物流分开并固定 走向。 • 4、水、电线路暗敷。接缝可靠密封。灯具应 造型简单，便于清洁，接缝应可靠密封。
人是洁净区最大的污染源
• （6）洁净室内随时保证手的清洁，注意消毒。手在消 毒以后，不再接触与工作无关的物品，不裸手直接接触 药品。 • （7）工作时，不要快速走动，操作的动作要轻、幅度 要小，讲话要少、声音要细，避免不必要的走动和动作， 不要频繁进出洁净室。 • （8）行走时，不要穿过层流罩，不可避免时，应离层 流罩外一米以外。 • （9）休息时，若站着，手臂沿身体下垂，不要两臂交 叉；若坐着，把手放在膝盖上，不要两臂交叉或双腿交 叉。 • （10）离开工作场地（包括食饭、上厕所），必须脱掉 工作服装。
车间常用的消毒剂
• 1、 醇类：乙醇——一般浓度 75% • 手部消毒，设备表面及环境表面消毒。 • 地漏液封 • 2、 季铵盐类 • 新洁尔灭——一般浓度 0.1-0.2% • 手、皮肤消毒，操作台面，环境表面。 • 地漏液封
影响消毒剂作用的因素
• • • • 1、消毒剂的种类、浓度。 2、消毒剂作用时间。 3、细菌的菌龄和种类。 4、消毒环境：温湿度、酸碱度。
人是洁净区最大的污染源
• 企业应建立职工健康档案，直接接触物料和产 品的人员每年至少体检一次，患有传染病和感 染性疾病的人员不得从事直接接触产品的工作。 • 进入洁净区人员按净化程序净化。穿戴洁净工 作服、帽口罩、工作鞋。直接接触产品的人员 每隔一定时间对手进行消毒。 • 洁净工作服质地应光滑，不产生静电，不脱落 纤维和颗粒。工作服和帽子应有效遮盖内衣和 头发。不同洁净级别应定期集中在相应洁净级 别的环境中清洗、干燥、整理、存贮。
• 无菌操作：在操作中采用或控制一定条件， 尽量避免产品污染微生物的一种操作方法。 为此目的，所用的一切物品、环境，均应 事先灭菌，操作也应在无菌操作室中进行。 • 无菌观念：指在无菌操作时，避免污染任 何微生物。
物理消毒方法
• 1.机械消毒法（刷、冲洗、擦拭、吸附、过 滤）如洗手、戴口罩 • 2.热力消毒（干热、湿热）应用广泛，效果 可靠。 • 3.光学消毒（红外、紫外灯） • 4.电学消毒（电磁波，高压产生臭氧） • 5.声学消毒（超声波） • 6.辐射灭菌（钴60）
微生物的分布
• • • • 土壤 水 空气——重要介质 人类及动物的体表、呼吸道、消化道等
微生物绝大部分个体小，形态简单， 易受环境影响而变异。
非细胞型 （病毒） 原核微生物 （细菌） 真核微生物（真菌） 单细胞 （藻类）
• 微生物 •
• 普通细胞的结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、 细胞核。 • 细菌的特殊结构：芽孢、荚膜、鞭毛、菌毛
微生物学基础知识、洁净技术
2018年
认识微生物
• • • • • • • • 微生物无处不在，无所不有。 一般空气中：800-3500个/m3 土壤中：1-500×108个/g 饮用水的要求：细菌总数≤100个/ml 大肠杆菌≤3个/ml 人的头皮上：140万个/cm2 人的双手细菌数：4-40万个 极端环境，耐高温、高压，低温，强酸、强碱， 适应性强
洁净室
• 5、操作台应光滑、平整。无缝隙、不脱落 尘粒和纤维，不积尘，便于清洗、消毒， 不可用木质或油漆台面。 • 6、洁净区水池、地漏不得对无菌医疗器具 产生污染，定期清洁、消毒、液封，防止 倒灌。 • 7、洁净区温湿度、压差要求： • 温度：18-28℃；相对湿度：45%-65% • 洁净区不同洁净级别房间的静压差应大于 5pa；洁净室与室外大气的静压差应大于 10pa。
洁净技术
• 洁净室（区）：需要对尘粒及微生物含量 进行控制的房间（区域）。其建筑结构、 装备及其作用均具有减少对该房间（区域） 内污染源的介入，产生和滞留的功能。
• 生产厂房：按生产工艺和产品质量要求分 为一般生产区和洁净区。 • 一般生产区应设计合理，采光、通风良好， 能满足生产需要。
洁净室
洁净区一些要求
洁净地漏
洁净区污染的来源
• 生产中的风险：污染、混淆、差错。
• 洁净区污染的因素：人、空气、接触表面 （设备及环境表面）、物料等。
百度文库
• 污染来源：粉尘、有害蒸汽和气体、余热 和余湿。
• 洁净度：洁净环境内单位体积空气中含大 于或等于某一粒径的悬浮粒子和微生物最 大允许统计数。
人是洁净区最大的污染源