常用苏木素几种配方与染色结果的比较
一种改良苏木素染液的配制方法
一种改良苏木素染液的配制方法摘要:目的准确控制苏木素染液配制过程中所需试剂的量,提高染色能力,节约成本。
方法准确称取苏木素2g,量取无水酒精150ml,用无水酒精彻底溶解苏木素,再依次加入碘酸钠240mg、硫酸铝钾20g、柠檬酸1g。
结果新配苏木素染液着色能力明显提高且无氧化膜产生,使用时间周期长,无需过滤。
结论染液配制简单,细胞核染色鲜艳,苏木素用量少,减少浪费。
关键词:苏木精;氧化;方法苏木素-伊红染色法,也就是我们常说的HE染色技术。
是各个医院实验室最常用的染色方法,也是各病理科最经典的染色技术。
然而苏木精染液的配制是HE染色技术的核心,它决定染色质量的优劣。
一般Harris苏木精染液的配制[1]时所需苏木素多,配制较为繁琐,也具有一定的危险。
为了节约成本,减少浪费,我们摸索一套自己的配制方法。
1 资料与方法1.1一般资料苏木素2g,无水酒精150ml,碘酸钠240mg,硫酸铝钾20g,柠檬酸1g,蒸馏水800ml。
1.2方法取一只2000ml烧杯,苏木素2g,无水酒精150ml,将酒精和苏木素倒入烧杯中,将烧杯置于磁力搅拌器进行搅拌10min,苏木素完全溶解后,加入800ml蒸馏水,搅拌5min后,加入碘酸钠240mg搅拌5min,再加入20g硫酸铝钾,搅拌40min。
待苏木红也硫酸铝钾完全结合后,最后加入1g柠檬酸终止氧化,搅拌5min后加入甘油120ml,搅拌2h。
棕色瓶盛装,放入阴暗地方室温保存2w后直接使用。
2 结果苏木素染液无需过滤,无沉渣和氧化膜形成。
染液着色能力强,切片染色蓝化后,细胞核着色清晰,细胞质清晰可见,呈鲜艳的蓝色。
大大减少了试剂的消耗。
3 讨论苏木精为一种无色或谈灰黄色粉末,分子式为C16H14O6,分子量302.288。
它是一种天然染料,是由中南美洲等地产的一种称"洋苏木素树"(hematoxylon campechianum)的树芯中提取出来的。
3种苏木素染液的染色效果比较
3种苏木素染液的染色效果比较在HE染色中,细胞核的着色情况直接影响着病理切片的质量。
而苏木素染液又是细胞核染色的关键,苏木素染色的好坏决定着细胞核的着色深浅,也决定了一张切片的质量[1]。
所以选择合适的苏木素染液十分重要。
我们对3种常用的苏木素染液的染色效果进行分析和比较,寻找更为稳定可靠的苏木素染色液。
1 材料与方法1.1材料1.1.1 Harris苏木素原料:苏木精1g,硫酸铝钾15g,无水乙醇10ml,蒸馏水200ml。
配置方法:先用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,用无水乙醇溶解苏木精再倒入已经溶解好的硫酸铝钾蒸馏水中,煮沸1min,稍冷却,慢慢加入红色氧化汞0.5g防止溅出,再煮沸2min,此时将烧瓶立即浸于冷水中冷却,当染液冷却后用纱布盖好瓶口,使用之前用滤纸过滤后每100ml加冰醋酸5ml就可以使用。
1.1.2 Gill改良苏木素原料:苏木精2g,硫酸铝钾17g,无水乙醇250ml,蒸馏水750ml,碘酸钠0.2g,冰醋酸20ml。
配置方法:先将苏木素溶于无水乙醇,再将硫酸铝钾溶于蒸馏水中,两溶液溶解后将其混合入碘酸钠,待苏木精氧化成紫红色,再加入冰醋酸。
1.1.3 Lillie-Mayerh苏木素原料:苏木精5g,硫酸铝钾5g,碘酸钠0.5g,蒸馏水600ml,甘油300ml,冰醋酸20ml。
配置方法:取1000ml的烧杯一个,将硫酸铝钾倒入蒸馏水中,苏木素同样也在蒸馏水中加热搅拌,等两液完全溶解再相互混合,搅拌充分后缓缓加入碘酸钠,搅匀煮沸3分钟,等温度降低到40度左右再加入甘油,待完全冷却后加入冰醋酸入棕色瓶备用。
1.2方法选择各类手术切除的人体病变组织,包括乳腺、子宫内膜、皮肤、卵巢、子宫颈病变等存档蜡块60例,连续切片,分别使用上述3种染色液进行HE染色,光学显微镜观察。
2 结果Lillie-Mayerh苏木素的切片细胞核呈鲜亮的蓝色,细胞核结构清晰,与胞浆对比鲜明;Gill苏木素染色的切片总体较鲜亮,但部分组织切片细胞核微细结构不清晰,与胞浆对比不如Lillie-Mayerh苏木素的切片;Harris苏木素染色的切片染色效果尚可,但1/10(6例)切片内有苏木素结晶沉淀,影响观察。
Lillis Mayer氏与Harris氏苏木素染色剂的对比应用与探讨
Lillis Mayer氏与Harris氏苏木素染色剂的对比应用与探讨目的探讨Lillis Mayer氏苏木素染色使用过程的稳定性、持久性及染色效果。
方法对Lillis Mayer氏与Harris氏苏木素在配方及使用过程进行比较。
结果Lillis Mayer氏与Harris氏苏木素染色均胞核着色细致、清晰,颜色鲜艳。
但在配方配制上Lillis Mayer氏苏木素较Harris氏苏木素安全,且Lillis Mayer氏苏木素使用时间较Harris氏苏木素长。
结论Lillis Mayer氏苏木素是一种配制方便、即配即用、性能稳定、染色效力强、对组织染色适应范围广的良好胞核染色剂,与Harris氏苏木素相比有更多的优点,值得推广使用。
标签:Lillis Mayer氏苏木素;Harris氏苏木素;玻璃器皿Lillis Mayer and Harris haematoxylin coloring agent contrast application and discussion WAMG Xiao-hong,ZHANG Li-juan,ZHENG Yan-xuan,et al.Guangdong Province Zhuhai Zhongshan University Attached Fifth Hospital,Zhuhai 519000,China【Abstract】Objective To investigate the stability , persistence and dyeing effect of Lillis the Mayer haematoxylin dyeing property.Methods To compare the Lillis Mayer and Harris haematoxylin in formula and use process comparison.Results Lillis Mayer and the Harris haematoxylin dyes the even nucleus coloration to be careful, to be clear, the color was bright. But Lillis the Mayer haematoxylin compares the Harris haematoxylin security in the formula configuration, and Lillis the Mayer haematoxylin period of revolution compared the Harris haematoxylin to be long.Conclusion Lillis the Mayer haematoxylin was one kind of configuration convenient, namely matches strongly namely with the stable property, the dyeing potency, dyes the adaptation scope broad good nucleus coloring agent to the organization, was known as more merits compared to the Harris sappan caesalpinia, was worth promoting the use.【Key words】Lillis Mayer haematoxylin; Harris haematoxylin; Glassware苏木素是一种纯天然染料,其染色性能差,经过多年精心加工配制,现用的苏木素配方,染色性能好,保持时间长,是世界上唯一的常规细胞核染料[1]。
浅谈三种苏木素的配制及比较
铝 钾 2 g枸 椽 酸 05 , 合 氯 醛 2 g 碘 酸 钠 O1 , 将 蒸 馏 5, . 水 g 5, . 先 g 水 稍 加 热 . 入 苏 木 素 并 不 断搅 拌 至 完 全 溶 解 。 而 加 入 硫 加 继
酸铝钾 。 其充分溶解后 , 令 加入 枸椽 酸 和 水合 氯醛 , 续 搅 拌 继
在 我们 日常病 理 制 片 中 . 常 用 的 亦 是 最 经 典 的 方 法 是 最 苏 木 素 一 伊 红 染 色 法 。 伊 红 染 液 配 方 比 较 固 定 . 在 染 色 中 而 起 着 至关 重 要 作 用 的 是 苏 木素 染 液 的配 制 其 配 制 方 法 有 多 种 . 们 选 用 了其 中三 种 配 方 进 行 染 色 比较 。根 据 我 院 实 际 我 工 作 情 况 。 为 H r s 木 素 染 液 比 较 适 合 工 作 量 大 的病 理 认 ar 苏 i 科 常规 染 色 1 材 料 与 方 法 1 三 种 苏 木 素 的配 方 及 配 制 方 法 . 1 11 H r s 木 素 液 .. ar 苏 1 i 苏 木 素 25 , 水 乙 醇 2 m , 酸 . 无 g 5 l硫
孙 丽 萍
( 西 省妇 幼 保 健 院病 理 科 , 西 南 昌 30 0 ) 江 江 306
中图分类号 R 4 . 4 68
文献标识码 3 0 1— 1 64 1 2 ( 00 — 3 8 0 0
d i1 .9 9 . s .6 4 1 2 .0 0O .6 o :03 6  ̄i n1 7 ~ 1 92 1 .30 1 s
酸。
1 染 色 脱蜡水洗后 的切片分别人① H s . 2 a 苏木 素染液
浸染 5 n 经 1 mi, %盐酸乙醇分化 ,%氨水返蓝 , l 再染伊红。②
常用染色剂及配制
常用染色剂及配制常用染色剂及配制供组织学诊断用的优秀常规染色剂,不仅须使细胞核和细胞浆有选择性着染,也要使结缔组织着色。
苏木素-伊红染色的切片适当分色,可使这些结构得以区分,胞核表现为蓝色,胞浆和结缔组织纤维呈各种色调的粉红,因此这是一种最常用的常规染色剂。
一、苏木素-伊红染色的基本原理苏木素是最早用于生物学上的天然染色剂之一,百余年来,一直是生物学实验室最常用的组织学中细胞核的染料,它是从苏木树的树心中提炼出来的,为浅褐色结晶或淡黄褐色的粉末状物。
易溶于乙醇、甘油,也可溶于热水。
苏木素本身没有染色能力,它经过氧化后,能产生具有染色能力的苏木红,苏木红又称为氧化苏木素或苏木因。
苏木素变成苏木红的过程叫作“成熟”。
成熟的方法一般有两种:一种是把配制好的苏木素液在开口瓶中放置两个月以上,让其在日光和空气中的氧的作用下使之氧化。
故一般地盛苏木素的瓶子放在向阳处,时间愈长,染色的效果愈好。
常配制一大瓶,备长期使用。
另一种方法是在苏木素液中加入氧化剂,如磺酸钠,过锰酸钾,氧化汞,双氧水等。
用这种方法成熟与用第一种方法者不同的是,它放置时间愈长,染色的效果愈低。
这是因为苏木红被继续氧化可生成无色的化合物,故一次不宜配制过多,还应放置40C冰箱内避光保存以延长使用时间。
它的优点是配制后即可使用。
成熟的苏木素对组织并无亲和力,须加入含金属离子的媒染剂,才能达到染色的目的。
一般用于明矾苏木素的媒染剂为钾明矾或氨明矾。
主要是利用明矾中的铝离子和苏木红结合形成的铝沉淀色素为紫蓝色,对染色质有很大的亲和力,水和酒精都不能使其褪色。
用于铁苏木素的媒染剂是三价铁离子,苏木红的铁沉淀色素为黑蓝色,不溶于水,因此,故不能配制大量含媒染剂的混合液,一般用时现配,或在染色过程中,先用铁明矾媒染,然后再染苏木素,如磷钨酸苏木素染色即是。
常规苏木素染色的对比染色是用伊红,也有采用焰红,因为焰红比伊红色泽更鲜明,此外还有采用橘黄G,比布里希猩红,波尔多红等作为对比染色。
苏木精、苏木素染色液溶液配制方法
华越洋苏木素(苏木精)染色液的配制各类溶液的配制方法如下:华越洋苏木素染色液:500ml1) Harry`s苏木素苏木素 1g 无水酒精 10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素,蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,然后两液混合并煮沸,加入氧化汞,继续加热和搅拌至溶液为深紫色,立即冷却,恢复至室温后过滤备用。
(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml分别用无水酒精溶解苏木素,蒸馏水溶解硫酸铝钾,然后两液混合后,依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛 5g 用蒸馏水溶解苏木素后,依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛,过滤后备(4)Ehrlich氏苏木素(1886)苏木素 1g无水酒精 50ml甘油50ml硫酸铝钾 7.5g蒸馏水 50ml冰醋酸 5ml将苏木素溶于无水酒精里,硫酸铝钾溶于蒸馏水中,然后所有的试剂都加在一起,充分搅拌均匀后,放于窗台上阳光充足的地,让其慢慢氧化成熟,大约需四个星期,才可使用。
该液量种很好的细胞核染色液,用它染后,细胞核染色清晰,不易过染。
对于用酸脱钙组织细胞核的染色,该试剂优于其它各种苏木素。
这种自然氧化成熟的苏木素,可长期使用,不会变质。
但染色时间较长,需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时,该液可加入20-30mg的碘酸钠,以促使其迅速氧化成熟,但这试剂配成后,就不是原来的苏木素,不能长期使用,但起码可用半年左右。
(5)Weigert氏铁苏木素A液:苏木素 1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精,让其慢慢氧化成熟,约四周以后,便可以使用,或者用成熟的10%的苏木素酒精配制,即时可用。
B液: 29%三氯化铁水溶液 4ml蒸馏水 95ml盐酸1ml临用时,取A液和B液等份混合,即可使用,在4小时内使用完毕,如果超时,这种试剂便过分氧化而失效。
苏木素配制
(1)明矾苏木素1.Harris氏苏木素(1990)∙苏木素 2.5g无水酒精 25ml硫酸铝钾(钾明矾) 50g或硫酸铝铵(铵明矾)蒸馏水 500ml黄*色氧化汞 1.25g冰醋酸 20ml该溶液为当前最广泛使用的染液,由于它染色时间短,效果好,很受使用者的欢迎。
配制时,先将苏木素溶于酒精(平时也可将苏木素以10%的浓度溶解好,贮存备用),取一2000ml的三角烧瓶,倾入钾明矾,加入蒸馏水,于电炉上加热,熔解钾明矾,完全熔解后,待温度至90℃左右时,加入预先溶解好的酒精苏木素,继续加热至沸腾,延续3-5min,此时溶液逐渐加深,变为紫红色,拔离电源,加入黄*色氧化汞,当充分氧化后,重新插上电源继续加热3-5min,此时溶液变深紫色,拔去电源,直接将三角烧瓶插入预先备好的冰水里,放于暗处,第二天过滤后加入冰醋酸,即可使用三个月,但据我们的实践及多年的经验认为,只要掌握好切片的“无水化”,该染液可反复使用达一年之久(天天使用)。
注意事项:∙①苏木素一定要预先溶解,否则较难彻底溶解。
②加入黄*色氧化汞后,可产生大量的气泡,因此,配制500ml的溶液,一定要选择2000ml以上的容器,否则液体便会溢出。
③当溶液变为深紫色后,应终止氧化,烧瓶应直接插入冰水中,不要担心玻璃瓶会爆裂,因三角烧瓶经特殊处理的,不会有爆裂的危险,如果有,那是属于产品质量问题。
迅速冷却的主要目的是不让溶液过度氧化,以免缩短溶液的使用寿命。
④溶液过滤后方加入冰醋酸,不要颠倒过来。
如果加入冰醋酸后再过滤,过滤速度将非常慢,这是因为醋酸会使滤纸中的纤维膨胀,增加了密度,使溶液不易通过,导致过滤时间延长。
⑤该苏木素在使用一段时间后,可以在表面产生金属膜。
当出现这种现象时,可用粗滤纸捞去,否则贴于切片上将较难除去。
⑥苏木素加入冰醋酸后,其PH值在2-2.28之间。
改良的苏木素配制法(1000ML)一、材料和方法:1、药品:苏木色精2G,硫酸铝5G,碘酸钾(钠)0.2G,乙醇(95%、100%)250ML,蒸馏水750ML,丙三醇50ML,柠檬酸0.3G。
苏木素染色液分类依据
苏木素染色液分类依据
苏木素染色液可以根据不同的分类标准进行归类。
首先,可以根据其化学成分进行分类。
苏木素染色液通常是由苏木素(也称为碘化苏木素)和乙醇或甲醇溶液组成的。
其次,可以根据其用途进行分类。
苏木素染色液在生物学和医学领域被广泛应用,用于细胞和组织的染色,特别是在组织学中用于观察细胞核和胞质的结构。
此外,还可以根据其配方和浓度进行分类,不同的配方和浓度适用于不同的实验和染色要求。
另外,苏木素染色液还可以根据其制备工艺和生产厂家进行分类,不同的制备工艺和生产厂家可能会影响其性能和稳定性。
总的来说,苏木素染色液可以根据化学成分、用途、配方和浓度、制备工艺和生产厂家等多个方面进行分类。
这些分类依据可以帮助实验室和研究人员选择适合其实验需求的苏木素染色液,从而取得准确可靠的实验结果。
特殊染色
高碘酸-无色品红法
蒸馏水 偏重亚硫酸钠 170ml 3.96g
活性炭 2.0g(第二天称) 碱性品红(用研钵磨细更佳)加入蒸馏水中溶 解后依次加入盐酸及偏亚硫酸钠,塞住瓶口(锥 形瓶、小口瓶比较好)摇动容器以充分混和(此时 颜色会有明显变化)放置过夜后加入活性炭摇动 数分钟静止1小时后过滤,呈无色或淡稻草黄色 为佳。(不用时冰箱4℃左右保存)
应用:
明确含铁血黄素的存在。如长期的肺郁 血、出血;陈旧性出血灶;肝硬化时慢性脾 郁血的含铁结节;硬化性血管瘤;动脉瘤性 骨囊肿;绒毛色素性滑膜炎等。
胆色素
三氯醋酸三氯化铁(Hall)法:
试剂配制: ㈠Fouchet 液: 甲液:三氯醋酸 25 克 蒸馏水 100 毫升, 乙液:三氯化铁 1克 蒸馏水 10 毫升 两者均宜少量新鲜配制,棕色瓶贮存。 临用时取甲液 30ml 乙液 3ml 等份混合。
Masson 法
•1 切片脱蜡至水.
•2 苏木素染核(可略)
•3 丽春红酸性品红5分钟
•4 快速水洗.蒸馏水洗
•5 1%磷钼酸滴染1-3分钟 •6 倾去余液直接滴加亮绿液5分钟 •7 快速水洗后烤箱烘干,透明封固 •结果:胶原纤维绿色 肌纤维红色
胶原纤维染色的应用 1. 区别胶原纤维与肌纤维。 2. 观察某些病变组织的纤维化及 程度等。
染色方法: 1 常规切片 、脱蜡至蒸馏水 2 0.5%高碘酸氧化5-10分钟 3 流水冲洗数分钟,蒸馏水洗一次 4 无色品红20分钟 5 水洗 5分钟后苏木素染核 6 常规脱水(或烤箱烘干)透明封固 结果:糖原或中性粘液或霉菌等 鲜红色,核蓝色。
注意事项
•1 配制过程中玻璃器皿要干净,试剂要纯。
Harris苏木素染液的新配制
3.2 氧化剂添加要适时。Harris苏木素染色周期短,我们发现与氧化剂的添加时间有关。Harris苏木素原配方是在近100℃时加入氧化汞后,继续用小火加温。而实际工作中,根据观察配制过程,当苏木素染液温度在91℃左右时,添加氧化汞,即能使氧化汞完全分解于苏木素液中,又不会很快完全氧化,使染液一直处于染色力最强的三氧化苏木素状态,达到Harris苏木素染液长期最佳使用效果。
3.3 媒染剂剂量减少。苏木红要对细胞具有强的亲和力,必须加入媒染剂——硫酸铝钾。从苏木精分子的结构式来看不可能结合很多的铝离子,故Harris苏木素原配方常用1g苏木素配20g硫酸铝钾为媒染液,在实际应用中,当冷却和久置后有大量沉淀生成,甚至有明矾结晶析出。以上不良现象主要是因为媒染剂用量过大。我们根据文献报道,用1g苏木素配8.8g硫酸铝钾,不但节约试剂,而且减轻了媒染剂副作用的影响。
1.5 次日晨,将配制的苏木素液进行过滤。加入2g柠檬酸搅匀,此时的 Harris液为绛红色。
2.结果
配制好的染液即可使用。切片染1′—3′,涂片30″—1′,然后入水、分化、蓝化,胞核呈鲜蓝色。
3.讨论
3.1 Harris苏木素染液,有很多优点,所用试剂较少,操作步骤简单。但在实际运用中也有些缺点,如染色周期短,有沉淀现象和氧化膜等。我们根据文献报道反复摸索,对Harris苏木素染液进行了一些调整。
1.2 将2.5g苏木素放入25ml无水乙醇中,搅拌至完全溶解。
1.3 将22g硫酸铝钾加入500ml蒸馏水内,加热溶解,然后加入苏木素无水乙醇液,使溶液尽快沸腾后,移离开火焰。
1.4 搅拌溶液,待温度下降至91℃左右时,将氧化汞缓缓加入。此时,烧瓶内液体变成紫红色,但不会沸腾溅出。继续搅拌至看不到氧化汞的黄颜色为止,迅速将烧瓶放置于冷水中,用纱布置于瓶口处盖之。注意,瓶口不能用橡皮塞,否则会有氢氧化铝凝胶形成。
HE染色中(Harris)苏木素液的配制
HE染色中(Harris)苏木素液的配制摘要】目的讨论HE染色(Harris)改良苏木素液配制。
方法用改良的苏木素配置液(B液)与市场买来的苏木素液(A液)在染色切片量和使用时间以及成本作比较。
结果B液在染色切片用量和使用时间以及成本均优于A液。
结论B液值得在病理学技术中值得推广。
【关键词】石蜡切片苏木色精硫酸铝钾氧化汞在病理学技术工作中,石蜡切片HE染色仍是临床病理诊断中最为实用、简便的方法。
苏木素染液是HE染色(Harris)中较关键的组成。
细胞中的细胞核带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷苏木素碱性染料的结合而染色,经苏木素染成鲜明蓝色。
[1]染色效果的好坏与使用的切片量和染液使用时间相关外,关键取决于染色液的配制。
我科经过多年摸索实验,对HE染色中苏木素染液进行改良,在染色切片量与使用时间以及降低成本方面均优于市场买来的染液,现将工作体会与同行分享。
1. 材料与方法1.1材料甲液:苏木色精4克无水乙醇40ml乙液:硫酸铝钾80克蒸馏水800ml黄色氧化汞2克1.2方法甲乙两液分别溶解后混合,加热煮沸后,徐徐加入氧化汞,(此时有大量气泡生成,故容器宜大,以防液体溢出),继续煮沸1~2分钟。
然后置冰块缸中使溶液迅速冷却,过夜后过滤就可。
使用时,每100ml加冰醋酸2~4ml。
2. 结果组织细胞中的细胞核经苏木素染成鲜明的蓝色。
当溶液呈暗红色,如遇水即变蓝时,说明失效,不可再用。
改良苏木素染液(Harris)B液与市场买来苏木素染液(Harris)A液对比。
2组染色液的切片使用量与使用时间及价格作比较使用切片量(张) 使用时间(天)价格(元)A组(市场) 1500 45 400B组(改良) 3000 60 120B组在切片使用量和时间及降低成本方面均优于A组3. 讨论HE染色是生物学和医学的细胞与组织学最为广泛应用的染色的方法。
病理细胞和组织学的诊断`教学和研究都是用HE染色方法观察和病变组织的形态结构。
三种苏木素染色液临床应用分析与探讨
色色精 ,细胞核 与这 种带 正电荷呈碱性 的色精 以离子键或氢
键 结合 而被染色。 日常工作中经常看到有 的组织切片胞核发
每次 使 用必 须 过 滤 , Ma y e r 苏木 素 液 染色 时 间长 。而 L i l l i s Ma y e r 氏苏木 素液染色好控制 , 染色时 间短 , 使用时 间长 且稳
而L i l l i s M a y e r ( 改 良) 苏木精 液特点有 : ①减少 硫酸铝 钾 用量 的配制 ( 用硫酸 铝钾 3 3 . 4 g / 7 0 0 m L ) 染液 中后期 不会 出
现 析 出 的 明矾 结 晶很 多 也 节 省 了媒 染 剂 ,更 主 要 的 是 不会 有
・
病理诊断 ・
三种苏木素染 色液临床应用分析与探讨
山西 省 运 城 市 中心 医 院( 0 4 4 0 0 0 ) 段 淑 云
Ha r r i s 苏木素液 有很 多优点 , 但 也有不尽如人 意的地方 ,
如使用期短 , 染片量 多时约一周就得更 换一次 , 氧化结 晶 , 多
正 电荷 的碱性染料结合 ,苏木红与媒染剂 中的铝结合形成蓝
0 . 2 g , 甘油 2 0 0 m L , 冰醋 酸 2 0 mL 。先将 A液 加热溶解 后待
用, 再将 B液 加热溶解至沸腾 , 去火 , 待溶液小沸腾 状态时再 将 A液 徐徐倾 入其 中 , 全 部混匀后 , 再使溶 液在短 时间 内加
热至沸腾 , 去火 , 放人冷水 中至 8 0℃ 时 , 加 入碘酸钠 0 . 2 g 搅
2 结 果
就是半 氧化状态 。在染色过程 中逐步氧化 的过程是一直有较 好染 色能力 的染 液。③ 加入 2 0 0 m L丙 三醇 :丙 三醇俗称甘
苏木素染液的配制
苏木素染液的配制1) Harry`s苏木素苏木素 1g无水酒精10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素,蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,然后两液混合并煮沸,加入氧化汞,继续加热和搅拌至溶液为深紫色,立即冷却,恢复至室温后过滤备用。
(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml分别用无水酒精溶解苏木素,蒸馏水溶解硫酸铝钾,然后两液混合后,依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛 5g用蒸馏水溶解苏木素后,依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛,过滤后备(4)Ehrlich氏苏木素(1886)苏木素1g无水酒精50ml甘油50ml硫酸铝钾 7.5g蒸馏水50ml冰醋酸5ml将苏木素溶于无水酒精里,硫酸铝钾溶于蒸馏水中,然后所有的试剂都加在一起,充分搅拌均匀后,放于窗台上阳光充足的地,让其慢慢氧化成熟,大约需四个星期,才可使用。
该液量种很好的细胞核染色液,用它染后,细胞核染色清晰,不易过染。
对于用酸脱钙组织细胞核的染色,该试剂优于其它各种苏木素。
这种自然氧化成熟的苏木素,可长期使用,不会变质。
但染色时间较长,需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时,该液可加入20-30mg的碘酸钠,以促使其迅速氧化成熟,但这试剂配成后,就不是原来的苏木素,不能长期使用,但起码可用半年左右。
(5)Weigert氏铁苏木素A液:苏木素 1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精,让其慢慢氧化成熟,约四周以后,便可以使用,或者用成熟的10%的苏木素酒精配制,即时可用。
B液:29%三氯化铁水溶液 4ml蒸馏水95ml盐酸1ml临用时,取A液和B液等份混合,即可使用,在4小时内使用完毕,如果超时,这种试剂便过分氧化而失效。
苏木素染色液产品技术要求
苏木素染色液产品技术要求苏木素染色液是一种常用的染色液产品,广泛应用于纺织、印刷、造纸等行业。
它具有良好的染色效果和稳定的性能,能够满足不同材料的染色需求。
本文将从技术要求的角度,介绍苏木素染色液的相关内容。
一、染色液的成分和配方苏木素染色液的主要成分是苏木素染料和溶剂。
苏木素是一种天然有机染料,具有良好的亲水性和亲纤维性,能够有效地与纤维结合,实现染色效果。
而溶剂则是用于稀释苏木素染料,调整染色液的浓度和粘度。
常用的溶剂包括水、醇类、酮类等。
二、染色液的技术要求1. 良好的染色效果:苏木素染色液应能够均匀地染色纤维,使染色后的颜色鲜艳、均匀且持久。
2. 良好的染色适应性:苏木素染色液应适用于不同类型的纤维材料,如棉、麻、丝、毛等,且能够实现不同色彩的染色效果。
3. 良好的耐久性:苏木素染色液在染色后应具有良好的耐久性,不易褪色或变色,能够经受常规的洗涤和干洗处理。
4. 低毒无害:苏木素染色液应符合环保要求,不含有害物质,对人体和环境无毒无害。
5. 易操作性:苏木素染色液的操作应方便简单,能够快速地染色,且不易滴漏或飞溅。
6. 稳定性:苏木素染色液在储存和使用过程中应具有良好的稳定性,不易分解、变质或沉淀。
三、苏木素染色液的应用范围苏木素染色液广泛应用于纺织、印刷和造纸等行业。
在纺织行业中,苏木素染色液可用于棉、麻、丝、毛等纤维的染色,实现不同颜色和花样的纺织品生产。
在印刷行业中,苏木素染色液可用于印刷油墨的配制,实现高质量的印刷效果。
在造纸行业中,苏木素染色液可用于纸张的染色,使纸张呈现出丰富的色彩和纹理。
四、苏木素染色液的优缺点苏木素染色液具有以下优点:1. 良好的染色效果,能够实现鲜艳、均匀的染色效果。
2. 良好的染色适应性,适用于不同类型的纤维材料和不同色彩的染色需求。
3. 耐久性高,能够经受常规的洗涤和干洗处理。
4. 低毒无害,符合环保要求,对人体和环境无毒无害。
5. 操作简便,便于快速染色。
苏木精染色液的配制
1,Harris氏苏木素苏木素 2.5g 五水酒精25ml 硫酸铝钾50g 蒸馏水500ml 黄色氧化汞 1.25g 冰醋酸20ml配制:先将苏木素溶于酒精,取一个2000ml的三角烧瓶,倾入硫酸铝钾,加入蒸馏水,在电炉上加热,熔解硫酸铝钾,完全熔解后,待温度到90℃左右时,加入预先溶解好的酒精苏木素,继续加热至分i额疼,延续3-5min,此时溶液逐渐加深,变为紫红色,拔离电源,加入黄色氧化汞,当充分氧化后,重新插上电源继续加热3-5min,此时溶液变为深紫色,拔去电源,直接将三角烧瓶插入预先备好的冰水中,放于暗处,第二天过滤后加入冰醋酸,即可使用三个月。
注意事项:(1)苏木素一定要预先溶解,否则较难彻底溶解(2)加入黄色氧化汞后,可产生大量的气泡,因此,配制500ml的溶液,一定要选择2000以上的容器,否则液体便会溢出。
(3)当溶液变为深紫色后,应终止氧化,烧瓶应直接插入冰水中,不要担心玻璃瓶会爆裂,因三角烧瓶经过特殊处理的,不会有爆裂的危险。
(4)溶液过滤后方可加入冰醋酸,不要颠倒过来。
如果加入冰醋酸后再过滤,过滤速度将非常慢,这是因为醋酸会使滤纸中的纤维膨胀,增加了密度,使溶液不易通过,导致过滤时间延长。
(5)该苏木素在使用一段时间后,可以在表面产生金属膜,当出现这种现象时,可用粗滤纸捞取,否则贴于切片上将较难除去。
(6)苏木素加入冰醋酸后,其PH值在2-2.8之间。
2,Mayer苏木素苏木素0.1g 蒸馏水100ml 硫酸铝钾5g 柠檬酸0.1g 水合氯醛5g 碘酸钠20mg 用其进行核染时间可在20min-30min,核染色质清晰可见,核呈灰黑色。
配制溶液时,先将蒸馏水稍加温,加入苏木素并不停搅拌直至完全溶解,继而加入硫酸铝钾,令其充分溶解后,加入柠檬酸和水合氯醛,继续搅拌均匀,全部溶解后再加入碘酸钠,搅拌均匀,此时溶液的颜色变为深棕色,过滤后即可使用。
3,伊红染液的配制用于细胞浆的染色。
苏木素染色液分类依据
苏木素染色液分类依据全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:苏木素(Safranin)是常用的生物染色液,在生物学、医学和组织学领域有着广泛的应用。
苏木素液是由苏木素、乙醇和蒸馏水等成分混合而成的染色剂。
苏木素染色液的分类依据主要包括其成分、pH值、染色效果等多个方面。
苏木素染色液的分类可以根据其成分的不同来划分。
一般来说,苏木素染色液可以分为普通苏木素染色液和改良苏木素染色液两种类型。
普通苏木素染色液是由苏木素、乙醇和蒸馏水等基本成分混合而成,适用于一般的生物染色实验。
而改良苏木素染色液则在普通苏木素染色液的基础上添加了一些增强染色效果的成分,如盐酸、醋酸等,使得染色效果更加明显、清晰。
苏木素染色液的分类也可以根据其pH值的不同来进行划分。
苏木素染色液的pH值对染色效果有着重要的影响,一般来说,苏木素染色液的pH值在2.5-3.0之间时,染色效果最佳。
如果pH值过高或过低,都会影响到染色的效果,甚至导致染色失败。
根据苏木素染色液的pH 值不同,可以将其分为酸性苏木素染色液和碱性苏木素染色液两种类型。
苏木素染色液的分类也可以根据其染色效果的不同来进行划分。
根据对细胞、组织或器官的染色效果,可以将苏木素染色液分为核内染色和细胞质染色两种类型。
核内染色是指苏木素染色液主要作用于核内的细胞器或细胞核,使得核内结构清晰可见,适用于观察细胞核形态和数量、核仁等。
而细胞质染色则是指苏木素染色液主要作用于细胞质内的细胞器或其他结构,使得细胞质结构清晰可见,适用于观察细胞质内的胞器结构、分布等。
苏木素染色液的分类依据主要包括其成分、pH值、染色效果等多个方面。
在实际应用中,根据具体的实验要求和研究对象的特点,选择合适的苏木素染色液对研究工作具有重要的意义。
希望通过以上介绍,能够帮助大家更好地理解苏木素染色液的分类依据,提高实验的效率和准确性。
第二篇示例:苏木素是一种用于生物组织染色的有机染料,常用于组织学切片的染色工作中。
苏木色素染液传统组方的比较分析
于6 0℃恒温培养箱 内 2 4 h后 , 均呈澄 明的大红 色溶液 。实
验结 果示 , 苏木 色素在稀 乙醇 中的溶解 度较大 且溶解 迅速 ,
矾5 g , 碘酸钠 0 . 0 2 g , 水 合氯醛 5 g , 2 3 ; C a r a z z i 组方 为苏木
色素 0 . 2 g , 无水乙醇少量 , 蒸馏 水 8 0 m l , 钾 明矾 5 g , 碘酸钠 0 . 0 4 g , 甘油 2 0 m l …; G i l l 改 良组方 为苏 木色 素 0 . 2 g , 无水 乙醇 2 5 m l , 蒸馏水 7 5 m l , 硫酸铝 1 . 7 6 / 钾 明矾 1 . 7 g , 碘酸钠 0 . 0 2 g _ 1 ’ ; E h r i l i c h组方为苏木色 素 0 . 7 g , 9 5 % 乙醇/ 无水 乙 醇3 3 m l , 蒸馏水 3 3 . 3 m l , 钾明矾 1 / 5 / 过量 g , 甘油 3 3 . 3 ml _ 1 0 : D e l a f i e l d组方为 苏木 色素 0 . 6 g , 9 5 % 乙醇/ 无 水 乙 醇 5+1 6 m l , 蒸馏水 6 3 m l , 铵 明矾 6 g , 甘油 1 6 m l ’ ; Ma y — e r I I 组方为苏木红色素 0 . 7 g , 9 5 % 乙醇 3 3 m l , 蒸馏水 6 7 m l , 钾 明矾 3 . 3 g 。本文使用美 国 S I G MA H 9 6 2 7 - 9 0 M1 8 8 2 V色 素为实验染料 , 比较分 析苏木色素传统组方成分 的优劣 。
1 色 素 与 溶 剂
呈 色随温度的升高 、 混溶时间的延长会转变为红色 。在 去离 子水 中的溶解度较大 , 常温 时溶解 缓慢 , 在热 去离 子水 中溶 解迅 速 , 呈色 随温度 的升 高 、 混 溶时 间的延长 也会转 变为 红
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
解剖学杂志
CHINESE JOURNAL OF ANATOMY
2000 Vol.23 No.4 P.393-394
常用苏木素几种配方与染色结果的比较
李文 张赛霞
苏木素是组织切片最常用的细胞核染料,H.E染色中配方甚多,染色效果也有差异,影响染色的因素颇多,未经氧化的苏木素无染色能力,氧化后的苏木素要使细胞核染色鲜蓝,还要借助媒染剂的作用,苏木素、氧化剂、媒染剂三者的搭配比例及染液的使用期限与染色效果都有着直接的关系。
如何优化三者的比例和判断染液的有效期,使苏木素染色达到最佳效果,为此我们进行了以下探讨。
1方法与结果
1.1Ehrlich苏木素染液这是一种自然氧化成熟的苏木素染液,比较合理的配方是:苏木素5g,无水乙醇200ml,硫酸铝钾20g,甘油200ml,蒸馏水100ml,冰醋酸20ml。
按此方配好的苏木素染液盛人玻璃瓶内,瓶口盖上数层纱布,放在有阳光照射的台面上,六周后成熟。
此种苏木素染液经久耐用,细胞核染成深蓝色,不易褪色,我室在1958年制作的组织切片至今仍在使用。
未见褪色。
Ehrlich苏木素溶液是我室常备染液,每年夏季配置一次,使用一年即换新液。
1.2Harris苏木素染液是一种添加氧化剂,使苏木素快速成熟的染液,比较合理的配方是:苏木素3g,无水乙醇20ml,硫酸铝钾20g,氧化汞1g,蒸馏水500ml,冰醋酸
20ml。
此染液配置好后一周至三个月内使用,染色效果最好,不能久存,细胞核染呈紫蓝色。
1.3Carazzi苏木素染液这是近年来,我室使用较多的一种苏木素染液,用碘酸钠代替氧化汞作为氧化剂,使苏木素快速成熟,安全可靠,节约染料,染色效果优于前二种染液,比较合理的配方是,苏木素1.5g,无水乙醇5ml,硫酸铝钾20g,碘酸钠0.2g,蒸馏水400ml,甘油100ml。
制备方法是;苏木素用5ml无水乙醇溶解,蒸馏水溶解钾明矾(加温至90度,勿煮沸),将溶解的苏木素和碘酸钠同时加人钾明矾水溶液内,流水冷却至室温,再加甘油,震荡1小时后即可使用,染液可保用6个月。
细胞核染呈鲜蓝色,与伊红对比鲜明亮丽,特别对于脱钙骨和长时间甲醛固定的组织染色效果同样满意。
2讨论
2.1经过我们多年的实践,不断探索认为,上述三种苏木素染液的配方比例较为合理,既不会使苏木素过度氧化,给染色过程增添麻烦,也不会浪费试剂,而使苏木素的染色达到最佳效果。
2.2配制苏木素染液所用的氧化剂、媒染剂最好用分析纯(AR),纯度高、杂质少,才能保证苏木素的染色效果。
2.3新配方与原配方比较,主要是苏木素和硫酸铝钾的份量稍有增减,这并不影响两者结合后所形成的色精。
是否改变染液的PH值,有待进一步探讨。
我们认为过量的硫酸铝钾不但造成试剂的浪费,且容易使染液产生沉淀物。
2.4苏木素从配制→成熟→失效,有一个过程,如何判断其是否成熟、何时失效?
现介绍一个简便的方法供参考:取一滴苏木素染液,滴入一杯自来水中,如果沉在水底不散开,且呈红色,是未成熟的;如果很快散开,且呈紫蓝色,为成熟,此时染色效果最好,如果呈蓝色,表示染液失效。
作者单位:李文(广州中医药大学组织学与胚胎学教研室,广州,510405)
张赛霞(广州中医药大学组织学与胚胎学教研室,广州,510405)
常用苏木素几种配方与染色结果的比较
作者:李文, 张赛霞
作者单位:广州中医药大学组织学与胚胎学教研室,广州,510405
刊名:
解剖学杂志
英文刊名:CHINESE JOURNAL OF ANATOMY
年,卷(期):2000,23(4)
被引用次数:5次
1.蔡骏.郭立杰.宣正荣大黄素对人结肠癌HT-29细胞的体外增殖抑制作用[会议论文]-2007
2.梁艳清三种常用苏木素染液的比较[期刊论文]-华夏医学2010,23(4)
3.熊正文.安赵栓.胡海霞.苏红苏木素染色液配制方法的改进[期刊论文]-解剖学杂志2003,26(3)
4.张志光.周素荣.陈作红真菌学实验教学中的原生质体细胞核染色技术[会议论文]-1999
5.杨青.宋杰.史功伟.王宝山.YANG Qing.SONG Jie.SHI Gong-Wei.WANG Bao-Shan NaCl胁迫下外源NO供体硝普钠(SNP)对小麦种子萌发的影响[期刊论文]-植物生理学通讯2008,44(5)
6.冷永梅.黄晓南.邓永江HE染色细胞核发灰的处理方法[期刊论文]-诊断病理学杂志2000,7(4)
7.栗娜.黄虎改良HE染液配制提高细胞核着色质量的观察[期刊论文]-重庆医学2008,37(21)
8.朱小兰.张威.骆新兰.蔡秀玲.姚军.刘雪峰.张明辉苏木精染液再利用的探讨[期刊论文]-诊断病理学杂志2007,14(5)
9.李彩香.惠伟.屠荫华.牛瑞雪.LI Cai-Xiang.HUI Wei.TU Yin-Hua.NIU Rui-Xue气体NO处理对蒜苗生长和抗氧化酶活性的影响[期刊论文]-植物生理学通讯2008,44(6)
1.陈红.张建华.李保应.张秀芹.高海青.许晓群.王郡甫应用苏木素法测定非单体中药提取物对细胞增殖的影响[期刊论文]-中国生化药物杂志 2010(3)
2.陈红.张建华.许晓群.张秀芹.王宝红.王郡甫苏木精染色法测定化疗药物对贴壁肿瘤细胞毒性作用的实验研究[期刊论文]-中华肿瘤防治杂志 2010(11)
3.于大志.江华Sihler's肌内神经染色法的研究进展[期刊论文]-中国临床解剖学杂志 2008(1)
4.朱小兰.张威.骆新兰.蔡秀玲.姚军.刘雪峰.张明辉苏木精染液再利用的探讨[期刊论文]-诊断病理学杂志 2007(5)
5.黄静.赵琦.李楠.赵玉锦.张世煌烟草原生质体活力检测和细胞核染色方法的研究[期刊论文]-首都师范大学学报(自然科学版) 2007(4)
6.狄宝安.杨举伦.李棠丽.李霞.李涛.蔡琳.戴芳.宋蜀伶HE切片中苏木素沉渣去除方法探讨[期刊论文]-西南国防医药 2005(5)
本文链接:/Periodical_jpxzz200004026.aspx。